Publicerad: 2023 | Senast granskad: maj 2026
Jurkat E6.1-cellinjen
Jurkat E6.1 är en klon av Jurkat-cellinjen, en odödliggjord cellinje av humana T-lymfocyter som härrör från perifert blod. Den etablerades först 1977 och används i forskning relaterad till T-cellreceptorsignalering, adoptiv terapi med T-celler och andra lymfocyter mot cancer, forskning om blodrelaterade protoonkogener, cellöverlevnad och celldifferentiering.
I den här artikeln kommer vi att ta upp all information och alla förutsättningar som du behöver känna till innan du påbörjar ditt arbete med klonade Jurkat E6.1-cellinjer, bland annat:
- Ursprung, historia och allmän information
- Cellodlingsegenskaper
- Användningsområden för Jurkat E6.1-cellinjer
- Forskningspublikationer
- Fördelar och begränsningar
- Resurser: protokoll, videor och mer
1. Ursprung, historia och allmän information
Här finns all nödvändig information om Jurkat E6.1-cellinjens historia, ursprung och allmänna egenskaper samt hantering i cellodling.
- Jurkat E6.1 är en odödliggjord human T-lymfocytcellinje. Denna klonade cellinje är en avledning av Jurkat-cellinjen, som 1976 erhölls från perifert blod hos en 14-årig pojke som led av akut lymfoblastisk leukemi. Efter isoleringen från blodet fick denna cellinje initialt namnet JM, eftersom JM och Jurkat indikerar att dessa cellinjer är isolerade från samma patient. Jurkat E6.1-cellinjen klonades från cellderivat kända som Jurkat-FHCRC.
- E6.1-cellinjer härstammar från leukemi; dessa cellinjer används för att öka uttrycket av IL-2 genom stimulering med monoklonala antikroppar eller lektin. De uttrycker T-cellantigenreceptorer; därför kan dessa cellinjer användas vid studier av immunsystemsjukdomar och inom immunonkologisk forskning.
- Cellmorfologi hos Jurkat E6.1-celler: Jurkat E6.1-celler isolerades från en leukemipatient och har en förändrad morfologi jämfört med T-lymfocyter, vilket gör dem till odödliga cellinjer. Lymfoblastceller bildas när naiva lymfocyter aktiveras genom antigenpresentation av antigenpresenterande celler. Detta resulterar i ökad tillväxt i cellkärnan, cytoplasman, mRNA och proteiner.
- Cellstorlek: Jurkat E6.1-cellinjer är klonade och odödliggjorda, och diametern ligger vanligtvis mellan 10–16 μm (diametern kan variera beroende på typen av suspension). Dessa cellinjer har en mycket sfärisk cellform.
- Genom och kromosomantal: Dessa cellinjer är pseudodiploida cellinjer av humana T-lymfocyter, med kromosom 46 som modellkromosom. Det framgår också att modellkromosomen förekommer i cirka 74 % av fallen och att polyploidifrekvensen uppgår till cirka 5,3 %. Karyotypstudierna visade en karyotyp med 46, X, Y, -2, -18, del (2) (p21p23), del (18) (p11.2). X- och Y-kromosomerna har vanligtvis en normal kopia i de flesta cellinjer.
- Jurkat-cellinjer jämfört med E6.1 Jurkat-cellinjer: Jurkat-cellinjer är de primära stamcellinjer som först isolerades från en patient med akut lymfoblastisk leukemi. E6.1 Jurkat-cellinjer är däremot klonade derivat av Jurkat-FHCRC-cellinjer.
Egenskaper hos cellkulturen
Viktiga punkter vid odling av B16-celler
Populationens fördubblingstid
Populationsfördubblingstiden för Jurkat-cellinjer är cirka 20,7 timmar, vilket möjliggör en relativt snabb cellutveckling.
Adherent eller icke-adherent
E6.1 Jurkat-cellinjer växer i icke-adhererande läge och förekommer i suspension antingen som ett enda skikt eller som fritt svävande klumpar.
Utsådningsdensitet
Den rekommenderade utsädesdensiteten för E6.1 Jurkat-cellinjer är 1,0–2,0 × 10⁵ livsdugliga celler/ml för att säkerställa god vidhäftning och optimal celltillväxt.
Odlingsmedium
Det tillväxtmedium som krävs för E6.1 Jurkat-cellinjer är ATCC-formulerat RPMI-1640-medium (ATCC 30-2001). Det färdiga mediet bereds genom tillsats av de angivna komponenterna, inklusive fetalt bovint serum (ATCC 30-2002), för att uppnå en slutkoncentration på 10 %.
Odlingsförhållanden
E6.1 Jurkat-cellinjer kan odlas i en lämplig inkubator med 5 % luft och CO₂-tillförsel med hjälp av RPMI-1640-medium och fetalt bovint serum.
Förvaringsförhållanden
Långtidsförvaring av Jurkat-cellinjer i fryst odlingsform ska ske vid -130 grader Celsius eller i flytande kväve i ångfas. Förvaring vid -70 grader Celsius kan leda till förlust av cellernas livskraft.
Frysning
En alikvot på cirka 0,5–1,0 ml av cellinjesuspensionen förvaras i kryorör för att bevara cellinjerna. Dessa rör placeras sedan i en kryoförvaringsbehållare vid -70 grader Celsius. Rören överförs till en behållare med flytande kväve och förvaras i ångfasen dagen därpå.
Upptining
För att tina Jurkat-cellinjerna ska ampullerna med cellsuspensionen placeras i ett vattenbad vid 37 grader Celsius. Suspensionen kan tinas i 2 minuter under försiktig omrörning. Det är viktigt att hålla ampullens lock utanför vattenbadet för att förhindra kontaminering av cellinjerna.
Biosäkerhetsnivå
Odling av Jurkat-cellinjer kräver biosäkerhetsnivå BSL-1 i laboratoriemiljö, vilket säkerställer att grundläggande säkerhetsåtgärder följs.
Publicerad: 2023 | Senast granskad: maj 2026
Användningsområden för Jurkat E6.1-cellinjer
Jurkat E6.1-cellinjen används främst inom forskning och studier av sjukdomar kopplade till immunsystemet och tillhörande cancerformer. Dessutom har den visat sig lämplig för studier av vissa komplexa aspekter relaterade till HIV-infektion, eftersom CD4-T-cellreceptorn är nödvändig för retroviralt inträde.
Nedan beskrivs några viktiga områden där dessa cellinjer används:
Modellsystem för T-cellsignalering och apoptotiska signalvägar: Denna cellinje, som härstammar från T-cellsleukemi, används i stor utsträckning i forskning som rör TCR-signalkaskaden. Jurkat E6.1 utsöndrar större mängder IL-2 och IL-8, vilket i sin tur bidrar till T-cellsaktivering och sätter igång de inflammatoriska signalvägarna. Denna cellinje är även känd för sitt hyperfosforylerade Pyk2 och sin förhöjda produktion av Vav1, vilket har avgörande inverkan på omorganiseringen av aktincytoskelettet i T-celler. TCR-segregationen i Jurkat-cellinjen E6-1 kan också förbättras genom kraftfull expression av LFA-1, vilket i sin tur förstärker TCR-signaleringen och IL-2-expressionen. Studier av cellproliferation och cellcykeln genomförs också i Jurkat E6.1-cellinjer. Dessa har föredragits vid studier av apoptosvägar och induktion av DNA-skador genom föreningar härrörande från marina och växtbaserade källor. I en studie från 2013 utvärderades effekten av epigonalt konditionerat medium från haj på mänskliga celler med hjälp av dessa cellinjer. På samma sätt studerades den hämmande effekten av det växtbaserade ämnet hirsutin på cellproliferation i Jurkat E6.1-cellinjer. Ofta används Jurkat E6.1 även i cancerstudier för att utvärdera utvalda målmolekyler. Effekten av marina neurotoxiner, såsom brevetoxiner (PbTx), har också studerats i dessa cellinjer.
HIV-studier: En av de viktigaste tillämpningarna för Jurkat E6.1-cellinjer är deras förmåga att fungera som en lämplig modell för HIV-studier tack vare deras egenskap att kunna selektera olika signalhändelser som inducerar TCA. Jurkat E6.1-cellinjer har inte bara använts för att förstå HIV-aktivering utan även för att analysera mekanismerna bakom HIV-latens. HIV-replikation och -infektion har studerats ingående i dessa cellinjer, där de kan utsättas för genredigering och genknockout, vilket gjordes i en studie från 2021. Effekten av läkemedelstillförsel på HIV-infektion, såsom långverkande efavirenz (Efa)–enfuvirtid (Enf)-samlad polymer–lipid-hybridnanopartiklar (PLN) på virusets inträde, undersöktes med hjälp av Jurkat E6.1-cellinjer. CRISPR/Cas9-modifierade Jurkat E6.1-celler har använts flera gånger för att studera mekanismerna bakom HIV:s inträde, replikation och infektion.
Forskningspublikationer
Här följer några anmärkningsvärda exempel från den omfattande samlingen av forskning, inklusive Jurkat E6.1-cellinjer.
Med hjälp av Jurkat E6.1, inkuberade i olika selenföreningar, studerades liganduttryck och ytuttryck av MICA/B.
Att förstå den karakasinsyrainducerade cytotoxiciteten i humana T-cellinjer såsom Jurkat E6.1 och HL-60.
Jurkat E6.1-celler som inkuberats under lång tid med läkemedlet AZT användes för att studera azidotymidinresistens (AZT-resistens) hos HIV-1-infekterade patienter.
Studier av Jurkat E6.1-cellinjen avseende effekterna av vissa bioindoler på membranfluiditeten
I denna forskning användes ett polariserat fluorescensanalyssystem för att undersöka hur bioindoler, däribland serotonin, tryptofan och melatonin, påverkar cellmembranets fluiditet i Jurkat E6.1-cellinjer.
Ett alkaloidextrakt från Tribulus terrestris inducerade apoptos i Jurkat E6.1-celler för att belysa den underliggande verkningsmekanismen.
T-cellreceptorsignaleringen i Jurkat E6.1-celler förstärktes genom en kraftig ökning av LFA-1-uttrycket.
Fördelar och begränsningar
Precis som andra cellinjer har Jurkat E6.1 sina fördelar och begränsningar.
Fördelar
Det finns många skäl till varför den föredras i dessa tillämpningar:
-
Tillväxtform
Jurkat E6.1 är en suspensions- och icke-adhererande cellinje, vilket innebär att den växer i suspension och inte fäster vid odlingsytan.
-
Genuttryck
Jurkat E6.1-cellinjen uttrycker gener som kodar för interleukin-2 (IL-2) och CD3. Vid stimulering med monoklonala antikroppar, lektiner eller forbolestrar mot det T3-antigenkomplexet har dessa celler visat sig producera förstärkt IL-2.
-
Antigenuttryck
Jurkat E6.1-cellinjen uttrycker CD3-antigenet, som är associerat med T-cellsaktivering och signalering.
-
Expressionsmarkörer
Cellinjen uttrycker markörer för T-cellantigenreceptorn (TCR), vilka är avgörande för T-cellernas igenkänning och immunrespons.
-
Lämplighet för transfektion
Jurkat-klonen E6.1 är lämplig för transfektionsförsök, vilket möjliggör införande av exogent genetiskt material i cellerna för olika forskningsändamål.
Begränsningar
Efter fördelarna ska vi gå igenom begränsningarna som är förknippade med användningen av Jurkat E6.1-cellinjer:
-
Celltransfektion med viral vektor
Transfektion av Jurkat E6.1-celler är utmanande på grund av deras T-cellsursprung. Vanligtvis krävs dyra och tidskrävande virala vektorer för genetisk modifiering. Icke-virala vektorer har visat sig ha låg transfektionseffektivitet och betydande toxicitet i Jurkat-celler.
-
Bakteriell kontaminering
Jurkat E6.1-cellkulturer bör övervakas med avseende på potentiell bakteriell kontaminering för att säkerställa experimentresultatens tillförlitlighet.
-
Virala kontamineringar
Jurkat E6.1-cellinjer uttrycker olika kemokinreceptorer och låga nivåer av CD4, vilket underlättar virusets inträde. Detta gör dem mottagliga för virus som infekterar T-celler, såsom HTLV och HIV.
6. Resurser: Protokoll, videor och mer
I detta avsnitt beskrivs metoder och protokoll för cellodling och transfektion, samt utbildningsvideor relaterade till denna cellinje:
Protokoll för cellodling
Här följer några grundläggande odlingsprocedurer för denna cellinje:
- Standardprocedur för cellodling, förökning av Jurkat: University of California har även tillhandahållit en metod på sin USCS Genome-webbläsare för odling av Jurkat-klon E6-1.
- Jurkat, klon E6-1 – odling och hantering: Elabscience har inkluderat ett protokoll för hantering av odlingen på sin produktinformationssida.
Transfektionsprotokoll
Här är en lista över olika tillgängliga transfektionsprotokoll:
- Transfektionsprotokoll för Jurkat-celler med Lipofectamine LTX-reagens: Ett transfektionsprotokoll för Jurkat-celler med Lipofectamine LTX-reagens från ThermoFisher.
- Amaxa™ 4D-Nucleofector™-protokoll för Jurkat-klon E6.1 [ATCC®]: Lonza Group AG har tillhandahållit transfektionsprotokollet för Jurkat-klon E6.1 från ATCC med användning av 4D-Nucleofector® X-enheten.
Videor om Jurkat E6.1
Det finns flera utmärkta videor som behandlar begrepp inom cellodling, procedurer, proliferation, utplåtering och andra ämnen.
- Passering av celler: Grunder i cellodling: Detta är en utmärkt video med en grundläggande guide till passering av humana cellinjer från ThermoFisher.
- Upptining av celler: Grunder i cellodling: Denna video innehåller grundläggande instruktioner om cellodling och upptining från ThermoFisher.
- Protokoll för transfektion av plasmid-DNA: Denna video fokuserar på protokollet för transfektion av plasmid-DNA med Lipofectamine® LTX och Plus™-reagens, från ThermoFisher.
- Mätning av apoptos med hjälp av Jurkat-celler i suspension behandlade med 3 mikromolär staurosporin: Denna video visar hur man utför en apoptosanalys på Celigo-bildcytometern med hjälp av Hoechst- och caspase 3/7-reagenser från Nexcelom Bioscience.
