Hep3B-celler: Forskning och upptäckt av hepatocellulärt carcinom

HEP3B är en odödlig hepatocytcarcinomcellinje som härstammar från människa. Det används ofta i forskning om hepatotoxicitet och läkemedelsmetabolism. HEP3B-transfektionseffektiviteten är betydande; därför används dessa celler ofta för att studera levercancerutveckling, progression och terapeutiska ingrepp. Den här artikeln innehåller all nödvändig information om HEP3B-cellinjen för att hjälpa dig att arbeta med den. Huvudsakligen kommer den att omfatta:

Allmänna egenskaper och ursprung för HEP3B-celler
Information om odling av HEP3B-cellinjen
HEP3B-cellinje: Fördelar och begränsningar
Tillämpningar av HEP3B-celler inom forskning
Publikationer om HEP3B-cellinje
Resurser för HEP3B-cellinje: Protokoll, videor och mer

1.allmänna egenskaper och ursprung för HEP3B-celler

Den primära information du behöver om en cellinje är dess ursprung och allmänna egenskaper. Det kan hjälpa dig att bestämma hur den ska användas i din forskning och hjälpa dig att hantera den. Detta artikelavsnitt täcker all väsentlig information om HEP3B:s ursprung och egenskaper. Här kommer du att lära dig: Vad är Hep 3B cellinjer? Vad är ursprunget till Hep3B-celler? Vad är morfologin hos HEP3B-celler?

HEP3B, en kontinuerlig human hepatomcellinje, härstammar från levervävnaden hos en 8-årig afrikansk pojke med hepatocellulärt karcinom (HCC). Den etablerades av Aden och hans medarbetare 1979 i Barbara B. Knowles laboratorium, Wistar Institute, Philadelphia, USA [1].
HEP3B-celler har en integration av hepatit B-virusets (HBV) genom i sin kromosom.
Dessa hepatocytcarcinomceller uppvisar en epitelial morfologi.
HEP3B-cellerna har ett modalt kromosomnummer på 60. Till skillnad från HepG2 har de inte en omarrangerad kromosom 1.

Vad är skillnaden mellan HepG2 och Hep3B?

HepG2 och HEP3B skiljer sig åt i antalet kromosomer per cell. HEP3B innehåller 60 kromosomer, medan HepG2-celler har i genomsnitt 55 kromosomer. HepG2 är dessutom icke-tumorframkallande och hepatit B-negativ, medan HEP3B är tumörframkallande och HBV-positiv.

Levercarcinom i hög förstoring under mikroskop.

2.information om odling av HEP3B-cellinjen

Kunskap om odlingsinformationen för en cellinje kan göra det lättare för dig att använda den. Detta avsnitt täcker alla viktiga punkter för odling av HEP3B HBV-cellinjen, inklusive: Vad är fördubblingstiden för Hep3B-celler? Vilka är odlingsförhållandena för HEP3B? Hur odlar man HEP3B HCC-celler?

Viktiga punkter för odling av HEP3B-celler

Fördubblingstid:	Fördubblingstiden för HEP3B-celler är cirka 36 timmar.
Adherent eller i suspension:	Denna hepatomcellinje är adherent.
Delningsförhållande:	HEP3B-celler subkultiveras i förhållandet 1:2 till 1:4. Adherenta HEP3B-celler sköljs med 1 x PBS och inkuberas sedan med dissociationslösningen Accutase. Efter 8 till 10 minuter tillsätts färskt media och cellerna centrifugeras. De skördade cellerna resuspenderas sedan försiktigt och hälls över i kolvar som innehåller odlingsmedium i rekommenderat delningsförhållande.
Tillväxtmedium:	EMEM-media innehållande 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamin och Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) används för att odla HEP3B-celler.
Tillväxtförhållanden:	HEP3B-celler odlas i en 37°C befuktad inkubator med kontinuerlig tillförsel av 5% CO2.
Förvaring:	Frysta HEP3B-celler förvaras vid en temperatur under -150°C i en elektrisk frys eller i ångfasen av flytande kväve.
Frysningsprocess och medium:	Det frysningsmedium som rekommenderas för HEP3B-celler är CM-1 eller CM-ACF. Cellerna fryses med hjälp av en långsam frysningsprocess som endast tillåter en temperatursänkning på 1°C per minut för att skydda cellernas livskraft.
Upptiningsprocess:	De frysta cellerna tinas i ett vattenbad som är förinställt på 37°C i 40 till 60 sekunder. Senare tillsätts dessa celler till det färska tillväxtmediet och centrifugeras för att avlägsna frysmedieelement. De uppsamlade cellerna resuspenderas och fördelas i nya kolvar för tillväxt.
Biosäkerhetsnivå:	Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 krävs för odling av HEP3B-celler.

Vidhäftande, halvflytande lager av Hep3B-celler i 10× och 20× förstoring.

3.hEP3B-cellinje: Fördelar och begränsningar

HEP3B är en cellinje för hepatocellulärt karcinom som används i stor utsträckning. Detta avsnitt fokuserar på några viktiga fördelar och begränsningar med dessa hepatomceller.

Fördelar med HEP3B

De främsta fördelarna med HEP3B-celler är

Lätt att odla	HEP3B-celler har inga krångliga krav på cellodling, vilket gör dem lätta att hantera och underhålla i ett forskningslaboratorium. Detta förenklar experimentella procedurer.
Hög transfektionseffektivitet	HEP3B-celler uppvisar en anmärkningsvärd transfektionseffektivitet, vilket gör att de används i stor utsträckning vid genetisk manipulation och genuttrycksrelaterade studier.
Tumörframkallande egenskaper	HEP3B är en tumörframkallande cellinje för hepatocellulärt karcinom som kan bilda tumörer när den injiceras i en immunkomprometterad mus. Detta underlättar studier av cancerprogression och -utveckling med hjälp av HEP3B xenograftmodeller.
HEP3B:s P53-status	HEP3B-celler har en P53-genmutation som liknar hepatocellulärt karcinom (HCC) och andra cancerformer, vilket gör dem relevanta för att studera effekterna av P53-mutation på cancers tillväxt, utveckling och förlopp.

Begränsningar

Den begränsning som är förknippad med HEP3B-cellinjen är:

In vitro-cellmodell

HEP3B-cellinjen fungerar som en in vitro -modell av hepatocellulärt karcinom (HCC)-celler. Det är dock inte säkert att den fullt ut representerar komplexiteten hos HCC som finns i levande organismer. Följaktligen kan experimentella resultat in vitro skilja sig från de som observeras in vivo.

4.tillämpningar av HEP3B-celler inom forskning

HEP3B-cellinjen erbjuder flera forskningstillämpningar inom biomedicinsk forskning. Några av de viktigaste forskningsapplikationerna för HEP3B-cellerna inkluderar:

Cancerbiologi: HEP3B är en cellinje för hepatocellulärt karcinom hos människa. Det är en ovärderlig cellmodell för att undersöka cell- och molekylära mekanismer som ligger till grund för utveckling och progression av HCC. Forskare använder dessa celler för att studera genetiska mutationer, cellulära processer och cellsignaleringsvägar som är förknippade med levercancer. I en studie där HEP3B-celler användes fann man till exempel att mikroRNA-223-3p reglerar NLRP3-inflammasomkomponenter, hämmar proliferation och ökar apoptosen hos HEP3B-hepatocarcinomceller [2].
Screening och utveckling av läkemedel: HEP3B-cellinjen används också för att testa, screena och utveckla nya läkemedel mot leverkarcinom. Dessutom används den för att utvärdera toxiciteten och effekten av olika cancerläkemedel och behandlingar. Forskarna använde också dessa hepatomaceller för att studera läkemedelsmetabolism. Forskare använde HEP3B-celler och utvärderade den cytotoxiska potentialen hos växtextrakt från Cotinus coggygria på HEP3B-hepatocytcarcinomceller [3].
Virala infektioner: HEP3B är en hepatit B-viruspositiv cellinje och används därför för att studera virusinfektioner som kan leda till utveckling av levercancer, dvs HBV och HCV. Detta kan bidra till att bättre förstå virusinfektioner och utveckla potentiella antivirala behandlingar. I en studie användes till exempel HEP3B-hepatocytcancerceller och man undersökte ubiquitineringens betydelse för hepatit c-virusets spridning. Resultaten tyder på att ubiquitinspecifikt proteas 15 (USP15) är involverat i spridningen av HCV genom att reglera hepatocytspecifika funktioner, inklusive bildning av lipiddroppar och översättning av HCV-RNA [4].

430,00 €*

Innehåll: 1.5 milliliter

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 305141

5.publikationer om HEP3B-cellinjen

Detta avsnitt av artikeln kommer att täcka några intressanta forskningspublikationer om HEP3B-celler.

Reglering av apoptos och autofagi av luteolin i human hepatocellulär cancer Hep3B-celler

Denna publikation i Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) föreslog att luteolinföreningsinducerad endoplasmatisk retikulumstress kan utöva antitumöreffekter i P53-null HEP3B-celler på ett P53-oberoende sätt.

Potentiell inriktning av Hep3B levercancerceller med lupeol isolerad från Avicennia marina

Denna studie i Archiv der Pharmazie (2021) föreslog en pentacyklisk triterpenoid, lupeol, som ett potentiellt anticancermedel mot HEP3B-celler.

Etanolextrakt från Cnidium monnieri (L.) Cusson inducerar cellcykelstopp och apoptos via reglering av den p53-oberoende vägen i HepG2- och Hep3B-hepatocellulära karcinomceller

Denna artikel är publicerad i Molecular Medicine Reports (2017). Studieresultaten säger att Cnidium monnieri (L.) Cusson etanolextrakt inducerar celldöd (apoptos) och cellcykelstopp i hepatocarcinomceller HepG2 och HEP3B genom reglering av p53 och Akt / GSK-3β signalväg.

Auranofin förstärker sulforafanmedierad apoptos i hepatocellulära karcinom Hep3B-celler genom inaktivering av PI3K/Akt-signalvägen

Denna forskning publicerad i Biomolecules and Therapeutics (2020) föreslog att auranofin uppvisar synergistisk aktivitet och främjar den sulforafanmedierade apoptosen av HEP3B-celler via PI3K / AKT-vägaktivering.

Cirkulärt RNA-0072309 har antitumörpåverkan i Hep3B-cellinjen genom att rikta in sig på mikroRNA-665

Denna forskningsartikel i BioFactors (2023) föreslog att cirkulärt RNA-0072309 utövar antitumöreffekter i hepatocellulära karcinomceller HEP3B genom att rikta in sig på miRNA-665.

6.resurser för HEP3B cellinje: Protokoll, videor och mer

Nedan följer några resurser som finns tillgängliga om HEP3B-celler:

HEP3B-transfektion: Den här videon förklarar transfektionsprotokollet för HEP3B-celler.
Effektivitet för HEP3B-transfektion: Den här länken hjälper dig att lära dig HEP3B DMEM-mediets sammansättning, cellpassage och transfektionsprotokoll för HEP3B-celler. Dessutom ger den information för att optimera HEP3B lipofectamine 3000-reagenset i ditt transfektionsprotokoll.

Följande länk innehåller protokollet för HEP3B-cellodling:

Villkor för HEP3B-odling: Den här länken hjälper dig att lära dig protokollet för hantering och underhåll av Huh7- och HEP3B-kulturer.
HEP3B-celler: Denna webbplats har gott om information om HEP3B-celler, inklusive HEP3B-media, protokollet för celldelning, upptining och hantering av proliferativa och kryokonserverade kulturer.

Referenser

Puttahanumantharayappa, L.D., et al, Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L., et al., miRNA-223-3p reglerar NLRP3 för att främja apoptos och hämma proliferation av hep3B-celler. Experimentell och terapeutisk medicin, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Danjolli-Hashani, D. och S. Selen-Isbilir , Cytotoxisk effekt av Cotinus coggygria-extrakt på Hep3B-cancercellinjen. Natural Product Research, 2022: s. 1-4.
Kusakabe, S., et al, USP15 deltar i spridningen av hepatit C-virus genom reglering av viral RNA-översättning och bildning av lipiddroppar. Journal of Virology, 2019. 93(6): s. 10.1128/jvi. 01708-18.