Hep3B-celler: Forskning och upptäckter inom hepatocellulärt karcinom
HEP3B är en odödliggjord cellinje av hepatocytkarcinom med ursprung i människa. Den används i stor utsträckning inom forskning om levertoxicitet och läkemedelsmetabolism. Transfektionseffektiviteten hos HEP3B är betydande, varför dessa celler ofta används för att studera utveckling och progression av levercancer samt terapeutiska ingrepp. Denna artikel täcker all nödvändig information om HEP3B-cellinjen för att underlätta ditt arbete med den. Den kommer huvudsakligen att innehålla:
- Odlingsmedium
- EMEM-medium innehållande 10 % FBS, 2,2 g/l NaHCO3, 2 mM L-glutamin och Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) används för att odla HEP3B-celler.
- Fördubblingstid
- Fördubblingstiden för HEP3B-celler är cirka 36 timmar.
- Tillväxt
- Denna hepatomcellinje är vidhäftande.
- Biosäkerhetsnivå
- BSL-1
- Finns hos
- Cytion — Beställ HEP3B
- Allmänna egenskaper och ursprung för HEP3B-celler
- Odlingsinformation om HEP3B-cellinjen
- HEP3B-cellinjen: Fördelar och begränsningar
- Användningsområden för HEP3B-celler inom forskning
- Publikationer om HEP3B-cellinjen
- Resurser för HEP3B-cellinjen: protokoll, videor och mer
Allmänna egenskaper och ursprung för HEP3B-celler
Den viktigaste informationen du behöver om en cellinje är dess ursprung och allmänna egenskaper. Det kan hjälpa dig att avgöra hur den ska användas i din forskning och hur du ska hantera den. Detta avsnitt i artikeln täcker all väsentlig information om HEP3B:s ursprung och egenskaper. Här får du lära dig: Vad är Hep 3B-cellinjer? Vad är ursprunget till Hep3B-celler? Vad är morfologin hos HEP3B-celler?
- HEP3B, en kontinuerlig human hepatomcellinje, har sitt ursprung i levervävnad från en 8-årig afrikansk pojke med hepatocellulärt karcinom (HCC). Den etablerades av Aden och kollegor 1979 vid Barbara B. Knowles laboratorium, Wistar Institute, Philadelphia, USA [1].
- HEP3B-celler har en integration av hepatit B-virusets (HBV) genom i sin kromosom.
- Dessa hepatocytkarcinomceller uppvisar en epitelial morfologi.
- HEP3B-cellerna har ett modalt kromosomantal på 60. Till skillnad från HepG2 har de inte en omorganiserad kromosom 1.
Vad är skillnaden mellan HepG2 och Hep3B?
HepG2 och HEP3B skiljer sig åt i antalet kromosomer per cell. HEP3B innehåller 60 kromosomer, medan HepG2-celler har i genomsnitt 55 kromosomer. Dessutom är HepG2 icke-tumörbildande och hepatit B-negativ, medan HEP3B är tumörbildande och HBV-positiv.
Information om odling av cellinjen HEP3B
Kunskap om odlingsinformation för en cellinje kan underlätta arbetet. Detta avsnitt täcker alla viktiga punkter för odling av HEP3B HBV-cellinjen, inklusive: Vad är fördubblingstiden för Hep3B-celler? Vilka är odlingsförhållandena för HEP3B? Hur odlar man HEP3B HCC-celler?
Viktiga punkter för odling av HEP3B-celler
Fördubblingstid:
Fördubblingstiden för HEP3B-celler är cirka 36 timmar.
Adhärenta eller i suspension:
Denna hepatomcellinje är vidhäftande.
Delningsförhållande:
HEP3B-celler subkultiveras i ett förhållande på 1:2 till 1:4. Adhärenta HEP3B-celler sköljs med 1 x PBS och inkuberas sedan med Accutase-dissociationslösningen. Efter 8 till 10 minuter tillsätts färskt medium och cellerna centrifugeras. De skördade cellerna resuspenderas sedan försiktigt och hälls i kolvar som innehåller odlingsmedium i ett rekommenderat delningsförhållande.
Odlingsmedium:
EMEM-medium innehållande 10 % FBS, 2,2 g/l NaHCO3, 2 mM L-glutamin och Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) används för att odla HEP3B-celler.
Odlingsförhållanden:
HEP3B-celler odlas i en fuktad inkubator vid 37 °C med kontinuerlig tillförsel av 5 % CO2.
Förvaring:
Frysta HEP3B-celler förvaras vid en temperatur under -150 °C i en elektrisk frys eller i flytande kväves ångfas.
Frysningsprocess och medium:
Det frysmedium som rekommenderas för HEP3B-celler är CM-1 eller CM-ACF. Cellerna fryses med en långsam frysprocess som endast tillåter en temperatursänkning på 1 °C per minut för att skydda cellernas livskraft.
Upptining:
Frysta celler tinas i ett vattenbad som är förinställt på 37 °C i 40 till 60 sekunder. Därefter tillsätts dessa celler till det färska odlingsmediet och centrifugeras för att avlägsna frysmediets beståndsdelar. De uppsamlade cellerna resuspenderas och fördelas i nya kolvar för odling.
Biosäkerhetsnivå:
Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 krävs för odling av HEP3B-celler.
HEP3B-cellinjen: Fördelar och begränsningar
HEP3B är en ofta använd cellinje för hepatocellulärt karcinom. Detta avsnitt fokuserar på några viktiga fördelar och begränsningar hos dessa hepatomceller.
Fördelar
De främsta fördelarna med HEP3B-celler är:
Lätt att odla
HEP3B-celler ställer inga krångliga krav på cellodling, vilket gör dem lätta att hantera och underhålla i ett forskningslaboratorium. Detta förenklar experimentella procedurer.
Hög transfektionseffektivitet
HEP3B-celler uppvisar en anmärkningsvärd transfektionseffektivitet, vilket gör att de används i stor utsträckning inom genetisk manipulation och studier relaterade till genuttryck.
Tumörbildande förmåga
HEP3B är en tumörbildande cellinje av hepatocellulärt karcinom som kan bilda tumörer när den injiceras i en immunförsvarssvag mus. Detta underlättar studier av cancerprogression och utveckling med hjälp av HEP3B-xenotransplantatmodeller.
HEP3B P53-status
HEP3B-celler har en P53-genmutation som liknar den hos hepatocellulärt karcinom (HCC) och andra cancerformer, vilket gör dem relevanta för att studera effekterna av P53-mutationen på cancertillväxt, utveckling och progression.
Begränsningar
Begränsningen i samband med HEP3B-cellinjen är:
In vitro-cellmodell
HEP3B-cellinjen fungerar som en in vitro-modell för hepatocellulära karcinomceller (HCC). Den kanske dock inte fullt ut återspeglar komplexiteten hos HCC som den förekommer i levande organismer. Följaktligen kan experimentella resultat in vitro skilja sig från de som observeras in vivo.
Användningsområden för HEP3B-celler inom forskning
HEP3B-cellinjen erbjuder flera tillämpningar inom biomedicinsk forskning. Några av de viktigaste tillämpningarna för HEP3B-celler är:
- Cancerbiologi: HEP3B är en human hepatocellulär karcinomcellinje. Den är en ovärderlig cellmodell för att undersöka cellulära och molekylära mekanismer som ligger till grund för utveckling och progression av HCC. Forskare använder dessa celler för att studera genetiska mutationer, cellulära processer och cellsignaleringsvägar associerade med levercancer. I en studie som använde HEP3B-celler fann man att mikroRNA-223-3p reglerar NLRP3-inflammasomkomponenter, hämmar proliferation och förstärker apoptosen hos HEP3B-hepatokarcinomceller [2].
- Läkemedelsscreening och utveckling: HEP3B-cellinjen används också för att testa, screena och utveckla nya terapier mot leverkarcinom. Dessutom används den för att utvärdera toxiciteten och effekten hos olika läkemedel och behandlingar mot cancer. Forskare använde också dessa hepatomceller för att studera läkemedelsmetabolism. Forskare använde HEP3B-celler och utvärderade den cytotoxiska potentialen hos växtextrakt från Cotinus coggygria på HEP3B-hepatocytkarcinomceller [3].
- Virusinfektioner: HEP3B är en hepatit B-viruspositiv cellinje; därför används den för att studera virusinfektioner som kan leda till utveckling av levercancer, dvs. HBV och HCV. Detta kan bidra till en bättre förståelse av virusinfektioner och utveckling av potentiella antivirala behandlingar. I en studie användes till exempel HEP3B-hepatocytcancerceller för att undersöka betydelsen av ubiquitinering för spridningen av hepatit C-virus. Resultaten tyder på att ubiquitin-specifikt proteas 15 (USP15) är involverat i spridningen av HCV genom att reglera hepatocyt-specifika funktioner, inklusive bildandet av lipiddroppar och HCV-RNA-translation [4].
5. Publikationer om cellinjen HEP3B
I detta avsnitt av artikeln behandlas några intressanta forskningspublikationer om HEP3B-celler.
Reglering av apoptos och autofagi genom luteolin i Hep3B-celler från humant levercancer
Denna publikation i Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) föreslog att luteolininducerad endoplasmatisk retikulumstress kan utöva antitumöreffekter i P53-noll HEP3B-celler på ett P53-oberoende sätt.
Potentiell inriktning på Hep3B-levercancerceller med lupeol isolerat från Avicennia marina
Denna studie i Archiv der Pharmazie (2021) föreslog en pentacyklisk triterpenoid, lupeol, som ett potentiellt läkemedel mot HEP3B-celler.
Denna artikel är publicerad i Molecular Medicine Reports (2017). Studieresultaten visar att etanolextrakt från Cnidium monnieri (L.) Cusson inducerar celldöd (apoptos) och cellcykelstopp i hepatocarcinomcellerna HepG2 och HEP3B genom reglering av p53- och Akt/GSK-3β-signalvägarna.
Denna forskning, publicerad i Biomolecules and Therapeutics (2020), föreslog att auranofin uppvisar synergistisk aktivitet och främjar sulforafan-medierad apoptos av HEP3B-celler via aktivering av PI3K/AKT-signalvägen.
Cirkulärt RNA-0072309 har antitumöraffekter i Hep3B-cellinjen genom att rikta in sig på mikroRNA-665
Denna forskningsartikel i BioFactors (2023) föreslår att cirkulärt RNA-0072309 utövar antitumöreffekter i hepatocellulära karcinomceller HEP3B genom att rikta in sig på miRNA-665.
Resurser för HEP3B-cellinjen: protokoll, videor och mer
Här följer några resurser som finns tillgängliga för HEP3B-celler:
- HEP3B-transfektion: Denna video förklarar transfektionsprotokollet för HEP3B-celler.
- HEP3B-transfektionseffektivitet: Denna länk hjälper dig att lära dig mer om sammansättningen av HEP3B DMEM-medium, cellpassering och transfektionsprotokoll för HEP3B-celler. Dessutom ger den information om hur du optimerar HEP3B-lipofectamin 3000-reagenset i ditt transfektionsprotokoll.
Följande länk innehåller protokollet för HEP3B-cellodling:
- HEP3B-odlingsförhållanden: Denna länk hjälper dig att lära dig protokollet för hantering och underhåll av Huh7- och HEP3B-odlingar.
- HEP3B-celler: Denna webbplats innehåller mycket information om HEP3B-celler, inklusive HEP3B-medier, protokollet för celldelning, upptining och hantering av proliferativa och kryokonserverade odlingar.
Referenser
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and properties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): s. 1040.
- Wan, L., et al., miRNA-223-3p reglerar NLRP3 för att främja apoptos och hämma proliferation av Hep3B-celler. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): s. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. och S. Selen-Isbilir, Cytotoxisk effekt av Cotinus coggygria-extrakt på Hep3B-cancercellinjen. Natural Product Research, 2022: s. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., USP15 deltar i spridningen av hepatit C-virus genom reglering av viral RNA-translation och bildning av lipiddroppar. Journal of Virology, 2019. 93(6): s. 10.1128/jvi. 01708-18.