Endotelceller från mänsklig navelsträngsven (HUVEC)
HUVEC är primära endotelceller som fungerar som ett viktigt verktyg inom biomedicinsk forskning. De hjälper forskare att studera angiogenes, vaskulär biologi och sjukdomar som åderförkalkning och cancer. HUVEC används för att undersöka endotelcellers beteende, cellulära signaleringsmekanismer och läkemedelsprövningar, vilket ger värdefull kunskap om potentiella terapier eller behandlingar för hjärt-kärlsjukdomar och cancer. De fungerar också som ett modellsystem för studier inom vaskulärbiologi.
Ursprung och allmänna egenskaper hos HUVEC-celler
Kunskap om en cellinjes ursprung och allmänna egenskaper är avgörande för att avgöra om den är lämplig för din studie. Detta avsnitt hjälper dig att lära dig denna viktiga information om HUVEC-endotelceller: Vad används HUVEC-celler till? Vad är den fullständiga formen av HUVEC-celler? Vilka är de utmärkande egenskaperna hos HUVEC? Vad är HUVEC-morfologi? Vad är diametern på HUVEC-celler? Vad är storleken på HUVEC-celler?
- HUVEC-celler extraheras från endotelet i den mänskliga navelsträngsvenen.
- HUVEC-morfologin är endotelial. De är vanligtvis polygonala till formen och har en rund kärna i mitten.
- HUVEC-cellernas storlek är 17 μm i diameter.
- Dessa endotelceller är diploida. De har ett modalt kromosomantal på 46.
HUVEC TERT2
HUVEC TERT2 är en odödliggjord cellinje som härstammar från primära endotelceller från mänsklig navelsträngsven (HUVEC). Den utvecklades genom att införa det humana telomeras-revers transkriptas-genet (TERT) i HUVEC-cellernas genom. Denna modifiering bidrog till att förlänga deras livslängd i odling, vilket möjliggör långsiktiga experiment utan de begränsningar som är förknippade med primära HUVEC.
Vad är skillnaden mellan HUVEC och HMEC-1?
Strukturen och komplexiteten hos endotelcellinjerna HUVEC och HMEC-1 är jämförbara. HMEC-1-celler uppvisar dock en mer homogen population än HUVEC-celler när det gäller cellstorlek och granularitet. Detta kan minska variationerna i experimentella data.
Information om odling av cellinjen HUVEC
Detta avsnitt av artikeln fokuserar på att förse dig med viktig kunskap om HUVEC-cellodling. Detta kommer att vara till stor hjälp i ditt arbete med dem. Här hittar du svar på följande vanliga frågor: Vad är fördubblingstiden för HUVEC? Vad är utsädesdensiteten för HUVEC? Hur många passager finns det i HUVEC? Vad är HUVEC-cellmedier? Hur odlar man HUVEC?
Viktiga punkter för odling av HUVEC-celler
Fördubblingstid:
HUVEC:s fördubblingstid är ungefär 23,5 timmar. Den kan dock variera beroende på odlingsförhållanden och antal passager.
Adherenta eller i suspension:
HUVEC är en vidhäftande cellinje. Cellerna växer och bildar monolager.
Delningsförhållande:
Subkultiveringsförhållandet för HUVEC är 1:2 till 1:4. För utsäde tvättas cellerna med 1x fosfatbuffrad saltlösning och tillsätts en dissociationslösning (Accutase) i 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Därefter tillsätts odlingsmedium och de lossnade cellerna centrifugeras. Supernatanten kastas bort och cellpelleten resuspenderas försiktigt. Cellerna överförs till en ny odlingskolv för tillväxt.
Odlingsmedium:
Endotelcellodlingsmedium används för att odla HUVEC-celler. Mediet byts ut var 2–3 dagar. HUVEC-celler kan användas i upp till 8–10 passager.
Odlingsförhållanden:
Den humana endotelcellinjen (HUVEC) hålls i en fuktad inkubator med 5 % CO2 vid 37 °C.
Förvaring:
HUVEC-celler förvaras vanligtvis vid en temperatur under -150 °C i en frys med extremt låg temperatur eller i flytande kväves ångfas. Detta skyddar cellernas livskraft under längre perioder.
Frysningsprocess och medium:
För att bevara HUVEC-celler rekommenderas frysmediet CM-1 eller CM-ACF. Generellt rekommenderas en långsam frysprocess, eftersom den endast medför en temperatursänkning på 1 °C per minut, vilket förhindrar att cellerna utsätts för chock och bibehåller livskraften.
Upptining:
För att tina frysta celler placeras de i ett förvärmt vattenbad vid 37 °C i 40 till 60 sekunder tills endast en liten isklump återstår. Tillsätt därefter färskt medium till cellerna och centrifugera. Detta steg är nödvändigt för att avlägsna eventuella rester av frysmediet från cellerna. Resuspendera cellpelleten och överför cellerna till en ny kolv med odlingsmedium.
Biosäkerhetsnivå:
Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 krävs för att hantera HUVEC-cellkulturer på rätt sätt.
Publicerad: 2023 | Senast granskad: maj 2026
Fördelar och begränsningar
Precis som andra humana cellinjer har HUVEC-celler sina egna fördelar och begränsningar. I detta avsnitt kommer vi att fördjupa oss i några viktiga sådana som har en betydande inverkan på deras användning inom forskning.
Fördelar
De viktigaste fördelarna med HUVEC-celler är:
-
Endotelcellmodell
Mycket relevanta modeller för att studera angiogenes, vaskulär biologi och sjukdomar relaterade till endotelfunktion.
-
Lätt att odla
Relativt enkla att isolera från mänskliga navelsträngar. Har inga krävande krav på cellodling och är lätta att underhålla i forskningslaboratorier.
Begränsningar
Begränsningarna förknippade med HUVEC-endotelcellinjen är:
-
Begränsad livslängd
HUVEC-celler har en begränsad livslängd, vanligtvis 8 till 10 passager, vilket är en begränsning för långsiktiga experiment. De kan genomgå senescens när antalet passager ökar.
Användningsområden för HUVEC-celler inom forskning
HUVEC-celler har en betydande potential för olika tillämpningar inom det biomedicinska området. Här kommer vi att belysa några viktiga forskningsanvändningar av HUVEC-celler.
- Studier av hjärt-kärlsjukdomar: HUVEC-cellinjen är en värdefull endotelcellmodell som ger insikter i mekanismerna bakom hjärt-kärlsjukdomar såsom åderförkalkning, trombos och högt blodtryck. Forskare använder dessa celler för att undersöka mekanismerna bakom endotelial dysfunktion, oxidativ stress och inflammation. I en studie som genomfördes 2020 användes HUVEC-celler för att undersöka att det långa icke-kodande RNA:t TTTY15 spelar en avgörande roll för att lindra hypoximedierad skada på vaskulära endotelceller genom att rikta in sig på miRNA-186-5p-axeln [1].
- Cancerforskning: HUVEC är idealiska för att studera vaskulär biologi. Därför används de för att undersöka tumörangiogenes och interaktioner mellan endotelceller. Detta hjälper forskare att förstå hur tumörer får överskott av blodtillförsel och sprider sig. Exempelvis fann Hui Wang och kollegor att exosomer som frigörs av celler från oralt skivepitelcancer (OSCC) ökar nivåerna av miRNA-210-3p och minskar uttrycket av ephrin A3 i HUVEC-celler samt främjar rörbildning genom att reglera PI3K/AKT-kaskaden, vilket bekräftats genom HUVEC-rörbildningstest [2].
- Läkemedelsprövning: HUVEC-endotelceller används i stor utsträckning för läkemedelsprövning. Forskare kan utvärdera läkemedelseffektivitet, toxicitet och potentiella biverkningar av naturliga föreningar, nanopartiklar och andra terapeutiska medel in vitro med hjälp av HUVEC. Till exempel utvärderade en studie toxiciteten hos silver-nanopartiklar syntetiserade från Rheum ribes-extrakt med hjälp av HUVEC-celler [3].
Publikationer om HUVEC-celler
I detta avsnitt av artikeln listas några ofta citerade och intressanta forskningspublikationer som behandlar HUVEC-celler.
Denna studie publicerades i Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology (2019). Den visade att gamma-aminosmörsyra (GABA), en neurotransmittor, hämmar H2O2-inducerad oxidativ stress i HUVEC-celler; därmed kan den vara ett effektivt farmakologiskt medel mot oxidativ skada-relaterade hjärt-kärlsjukdomar.
Denna studie i Biochemical and Biophysical Research Communications (2020) undersökte hur östrogen reglerar en signaltransduktor, glykoprotein130 (gp130), i HUVEC-celler.
Substratets styvhet reglerade migrations- och angiogenespotentialen hos A549-celler och HUVEC-celler
Denna forskningsartikel i Journal of Cellular Physiology (2017) undersökte effekterna av varierande substratstyvhet på migration och angiogenes hos endotelceller (A549 och HUVEC). De utförde HUVEC-migrations- och HUVEC-angiogenesanalyser för att utvärdera dessa effekter.
Lysosomal avsättning av kopparoxidnanopartiklar utlöser HUVEC-celldöd
Denna forskning i Biomaterials (2018) undersöker de potentiella mekanismerna som ligger bakom toxiciteten hos kopparoxidnanopartiklar i vaskulära endotelceller.
Denna studie i Medicine (2020) föreslog att en naturlig förening, quercetin, hämmar TNF-alfa-medierad HUVEC-apoptos och inflammation genom att reglera AP-1- och NF-kB-signalvägarna.
6. Resurser för HUVEC-cellinjen: protokoll, videor och mer
Här följer några online-resurser om HUVEC-celler.
- HUVEC-transfektion: Denna webbplatslänk ger omfattande kunskap om HUVEC-transfektion. Den innehåller till exempel information om transfektionsreagenser och ett protokoll för in vitro-transfektion av HUVEC.
Följande länk innehåller protokollet för HUVEC-cellodling.
- HUVEC-cellodling: Detta dokument hjälper dig att lära dig protokoll för HUVEC-cellodling för subodling och hantering av kryokonserverade odlingar.
Referenser
- Zheng, J., et al., LncRNA TTTY15 reglerar hypoxiinducerad skada på vaskulära endotelceller genom att rikta in sig på miR-186-5p vid hjärt-kärlsjukdomar. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
- Wang, H., et al., OSCC-exosomer reglerar miR-210-3p som riktar sig mot EFNA3 för att främja angiogenes vid muncancer genom PI3K/AKT-signalvägen. BioMed research international, 2020. 2020.
- Unal, İ. och S. Egri, Biosyntes av silver-nanopartiklar med hjälp av vattenextrakt av Rheum ribes, karakterisering och utvärdering av dess toxicitet på HUVEC och Artemia salina. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022: s. 1-14.