HT22-cellinjen
HT22 är en murin neuronal cellinje som ofta används inom neurovetenskaplig forskning. Den är värdefull för att studera neurodegenerativa sjukdomar och testa potentiella neuroprotektiva terapier eller behandlingar. Dessutom är HT22-cellerna glutamatkänsliga och används därför för att undersöka glutamatinducerad toxicitet eller neuronal skada.
- Odlingsmedium
- DMEM-medium används för odling av HT22-celler. Det kompletteras med 10 % FBS, 4,5 g/l glukos, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/l NaHCO3 och 1,0 mM natriumpyruvat för optimal celltillväxt.
- Fördubblingstid
- Fördubblingstiden för HT22-celler är cirka 15 timmar.
- Tillväxt
- HT22-celler är vidhäftande.
- Biosäkerhetsnivå
- BSL-1
- Finns hos
- Cytion — Beställ HT22
Denna artikel belyser de viktigaste aspekterna av HT22-celler som kan hjälpa dig i ditt forskningsarbete. Den kommer främst att behandla:
- Allmänna egenskaper och ursprung för HT22-celler
- Information om odling av HT22-cellinjen
- Fördelar och nackdelar med HT22-cellinjen
- Forskningsmässiga tillämpningar av HT22-cellinjen
- Forskningspublikationer om HT22-celler
- Resurser för HT22-celler: protokoll, videor och mer
Allmänna egenskaper och ursprung för HT22-celler
I detta avsnitt av artikeln belyser vi ursprunget och de allmänna egenskaperna hos HT22-celler. Det är nödvändigt att känna till denna information om en cellinje innan man påbörjar arbetet med den. Här kommer du att lära dig: Vad är HT22-celler? Hur ser morfologin hos HT22-hippocampus-celler ut? Hur stor är en HT22-cell?
HT22 är en kontinuerlig cellinje som härstammar från hippocampusområdet i mushjärnan. Det är en subklon av den ursprungliga HT-4-cellinjen som utvecklats genom immortalisering av murina nervvävnader via ett temperaturkänsligt polyomavirus, simianvirus 40 (SV40) T-antigen.
Dessa celler skiljer sig från mogna hippocampus-celler eftersom de saknar glutamat- och kolinerga receptorer som mogna neuroner med ursprung i hippocampus. De är därför inte lämpliga för minnesrelaterade forskningsstudier [1].
HT22-celler har ett epitelcellsliknande utseende.
Information om odling av HT22-cellinjen
HT22-celler används i forskningslaboratorier inom neurovetenskap. Innan dessa celler odlas söker forskarna efter viktig information om cellodling som gör deras arbete enkelt och effektivt. Detta avsnitt täcker alla viktiga punkter för odling av HT22-celler. Du kommer att få veta: Vad är fördubblingstiden för HT22-celler? Hur odlar man HT22-celler? Vad är odlingsprotokollet för HT22-celler? Vad är odlingsmediet för HT22-celler?
Viktiga punkter för odling av HT22-celler
Fördubblingstid:
Fördubblingstiden för HT22-celler är cirka 15 timmar.
Adhärenta eller i suspension:
HT22-celler är vidhäftande.
Subkultiveringsförhållande:
Subkultiveringsförhållandet för HT22-hippocampus-celler är 1:3 till 1:6. Kortfattat avlägsnas odlingsmediet och de vidhäftande cellerna sköljs med 1 x PBS. Accutase-dissocieringslösning tillsätts i kolven och cellerna inkuberas i 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Därefter tillsätts färskt odlingsmedium och cellerna samlas upp i en flaska för centrifugering. Den erhållna cellpelleten resuspenderas försiktigt och cellerna överförs till en odlingskolv för tillväxt.
Odlingsmedium:
DMEM-medium används för odling av HT22-celler. Det kompletteras med 10 % FBS, 4,5 g/l glukos, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/l NaHCO3 och 1,0 mM natriumpyruvat för optimal celltillväxt.
Odlingsförhållanden:
HT22-cellkulturer förvaras i en fuktad inkubator (37 °C) med 5 % CO2-tillförsel.
Förvaring:
Frysta HT22-celler kan förvaras vid temperaturer under -150 °C, antingen i ångfasen av flytande kväve eller i en elektrisk frys med extremt låg temperatur för långvarig förvaring.
Frysningsprocess och medium:
HT22-celler kan frysas i CM-1- eller CM-ACF-medier med hjälp av en långsam frysningsmetod. Denna process tillåter endast en sänkning av provets temperatur med 1 °C per minut, skyddar cellerna från chock och hjälper till att bibehålla deras livskraft.
Upptining:
Cellerna tinas i ett vattenbad vid 37 °C i 40 till 60 sekunder tills endast en liten isklump återstår. Därefter tillsätts odlingsmedium till cellerna, och de centrifugeras för att eliminera frysmediets beståndsdelar. Cellpelleten resuspenderas och cellerna hälls över i en ny kolv som innehåller odlingsmedium. Därefter inkuberas cellerna vid 37 °C i en inkubator i minst 24 timmar.
Biosäkerhetsnivå:
Laboratoriemiljöer med biosäkerhetsnivå 1 är obligatoriska för odling av HT22-celler.
Fördelar och nackdelar med cellinjen HT22
HT22-hippocampus-celler har vissa för- och nackdelar som skiljer dem från andra neuronala cellinjer. Här nämns några viktiga fördelar och nackdelar med cellinjen.
Fördelar
Fördelarna med den murina neuronala cellinjen HT22 är:
-
Snabb tillväxthastighet
HT22-celler har en fördubblingstid på 15 timmar, vilket möjliggör snabba och effektiva experiment och bidrar till snabba forskningsresultat.
-
Immortaliserad
HT22 är en odödliggjord cellinje, vilket garanterar kontinuerlig tillväxt under långa perioder. Detta ger en jämn tillgång på celler, minskar tidsåtgång och kostnader samt underlättar långsiktiga experiment med jämna resultat.
Nackdelar
Nackdelarna med HT22-celler är:
-
Musursprung
HT22-cellinjen härstammar från hippocampusvävnad från musens hjärna, vilket kanske inte fullt ut återspeglar komplexiteten i mänskliga nervcellers fysiologi och beteende, vilket begränsar deras relevans för tillämpning.
4. Forskningsmässiga tillämpningar av HT22-cellinjen
HT22-cellerna används i stor utsträckning inom neurobiologisk forskning. Några lovande tillämpningar av denna cellinje diskuteras i detta avsnitt av artikeln:
- Neurovetenskaplig forskning: HT22-celler används i stor utsträckning inom forskning om neurodegenerativa sjukdomar, t.ex. Alzheimers och Parkinsons sjukdom. De anses vara ett värdefullt forskningsverktyg för att studera neurotoxicitet och mekanismer för oxidativ stress relaterade till dessa sjukdomar. Forskning som genomfördes 2020 visade att PI3K/AKT/CREB-signalvägen är involverad i hyperglykemi-inducerad neural toxicitet i HT22-celler [2]. På samma sätt föreslog en ny studie att Nrf2/HO-1-signalvägen och NF-κB-signalaxeln spelar en viktig roll i HT22-amyloid-beta-toxicitet [3].
- Läkemedelsscreening: HT22-celler används i stor utsträckning för läkemedelsprovning och screening. De hjälper forskare att identifiera potentiella terapeutiska medel som uppvisar neuroprotektiva effekter för att bekämpa neurodegenerativa sjukdomar. En studie som genomfördes 2019 undersökte den neuroprotektiva potentialen hos tetrahydrocurcumin i glutamatbehandlade HT22-celler från hippocampus. Här inducerar glutamat oxidativ stress i HT22-celler och orsakar celldöd genom att aktivera mitogenaktiverade proteinkinaser [4].
5. Forskningspublikationer som behandlar HT22-celler
Här är några intressanta forskningsartiklar om HT22-cellinjen:
Denna studie i International Journal of Molecular Medicine (2019) föreslog den neuroprotektiva potentialen hos crocin, en förening isolerad från Crocus sativus L., i L-glutamat-skadade HT22-celler.
Nya oxindolderivat förhindrar oxidativ stressinducerad celldöd i HT22-celler i musens hippocampus
Denna publikation i Neuropharmacology (2018) rapporterade att oxindolderivat skyddar mot HT22-celldöd inducerad av oxidativ stress.
Ginsenosid Rb2 hämmar glutamatmedierad oxidativ stress och neuronal celldöd i HT22-celler
Denna forskningsartikel publicerades i Journal of Ginseng Research 2019. Studien undersökte de neuroprotektiva effekterna av ett naturligt ämne, ginsenosid Rb2, med hjälp av HT22-cellinjen. Studien fann att ginsenosid Rb2 effektivt minskade glutamatinducerad oxidativ stress och celldöd i murina hippocampus-celler HT22.
Denna studie i Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) utvärderade den cytotoxiska potentialen hos silver-nanopartiklar i cellinjen HT22.
Ferrostatin-1 skyddar HT-22-celler från oxidativ toxicitet
Denna forskningsartikel publicerades 2020 i Neural regeneration research. Den föreslog att ferrostatin-1, en hämmare av ferroptos, förhindrar oxidativ toxicitet i HT22-hippocampus-celler.
Resurser för HT22-celler: protokoll, videor och mer
Vissa online-resurser om HT22-celler förklarar deras transfektions-, differentierings- och cellodlingsprotokoll:
- HT22-transfektion: Detta dokument innehåller ett optimerat protokoll för HT22-transfektion i 24- och 96-håls cellodlingsplattor.
- HT22-celldifferentiering: Denna artikel ger dig en omfattande guide till protokollet för differentiering av HT22-celler.
Följande länk innehåller protokollet för HT22-cellodling:
- Subkultivering av HT22-celler: Denna länk hjälper dig att lära dig subkultiveringsprotokollet för HT22-cellinjen. Dessutom hjälper den dig att lära dig protokollet för att inducera neurotoxicitet i celler.
- HT22-hippocampus-celler: Denna webbplats innehåller mycket användbar information om HT22-cellers fördubblingstid, odlingsmedier och cellodlingsprotokoll.
Referenser
- He, M., et al., Differentiation renders susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons. Neural Regen Res, 2013. 8(14): s. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetin förhindrar HT22-celler från hög glukosinducerad neurotoxicitet via PI3K/Akt/CREB-signalvägen. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: s. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Berberins skyddande effekter mot β-amyloid-inducerad neurotoxicitet i HT22-celler via Nrf2/HO-1-vägen. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: s. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Neuroprotektiva effekter av tetrahydrocurcumin mot glutamatinducerad oxidativ stress i HT22-celler i hippocampus. Molecules, 2019. 25(1): s. 144.