HT22 Cellinje
HT22 är en murin neuronal cellinje som ofta används inom neurovetenskaplig forskning. Den är värdefull för att studera neurogenerativa störningar och testa potentiella neuroprotektiva terapier eller behandlingar. Dessutom är HT22-cellerna glutamatkänsliga och används därför för att undersöka glutamatinducerad toxicitet eller neuronal skada.
Den här artikeln belyser de nödvändiga aspekterna av HT22-celler som kan hjälpa dig i ditt forskningsarbete. Den kommer huvudsakligen att diskutera:
- Allmänna attribut och ursprung för HT22-celler
- Information om odling av HT22-cellinje
- Fördelar och nackdelar med HT22-cellinjen
- Forskningsapplikationer av HT22-cellinjen
- Forskningspublikationer som innehåller HT22-celler
- Resurser för HT22-celler: Protokoll, videor och mer
1. Allmänna egenskaper och ursprung för HT22-celler
Detta avsnitt av artikeln kommer att belysa ursprunget och de allmänna egenskaperna hos HT22-celler. Det är nödvändigt att känna till denna information om en cellinje innan man påbörjar arbetet med den. Här kommer du att lära dig: Vad är HT22-celler? Vad är morfologin hos HT22 hippocampusceller? Vad är HT22-cellens storlek?
HT22 är en kontinuerlig cellinje som härrör från hippocampusregionen i mushjärnan. Det är en subklon av föräldracellinjen HT-4 som utvecklats genom immortalisering av neuronala vävnader från möss via ett temperaturkänsligt polyomavirus simian virus 40 (SV40) T-antigen.
Dessa celler skiljer sig från mogna hippocampusceller eftersom de saknar glutamat- och kolinerga receptorer som mogna neuroner av hippocampusursprung. De är därför inte lämpliga för minnesrelaterade forskningsstudier [1].
HT22-cellerna har ett epitelcellsliknande utseende.
2. Information om odling av HT22-cellinjen
HT22-celler används i neurovetenskapliga forskningslaboratorier. Innan dessa celler odlas söker forskarna efter viktig cellodlingsinformation som gör deras arbete enkelt och effektivt. Detta avsnitt täcker alla viktiga punkter för odling av HT22-celler. Du kommer att få veta följande: Vad är HT22-cellernas fördubblingstid? Hur odlar man HT22-celler? Vad är protokollet för HT22-cellodling? Vad är HT22-cellmediet?
Viktiga punkter för odling av HT22-celler
|
Fördubblingstid: |
HT22-cellens fördubblingstid är cirka 15 timmar. |
|
Adherent eller i suspension: |
HT22-celler är vidhäftande. |
|
Förhållande mellan subkultivering: |
Subkultiveringsförhållandet för HT22 hippocampalceller är 1:3 till 1:6. Kortfattat avlägsnas media och vidhäftande celler sköljs med 1 x PBS. Accutase dissociating solution tillsätts i kolven och cellerna inkuberas i 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Därefter tillsätts färskt odlingsmedium och cellerna samlas upp i en vial för centrifugering. Den erhållna cellpelleten resuspenderas försiktigt och cellerna fördelas i en odlingskolv för tillväxt. |
|
Tillväxtmedium: |
DMEM-media används för odling av HT22-celler. Det kompletteras med 10% FBS, 4,5 g/L glukos, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 och 1,0 mM natriumpyruvat för optimal celltillväxt. |
|
Tillväxtförhållanden: |
HT22-cellkulturer förvaras i en luftfuktad inkubator (37 °C temperatur) med 5%CO2-tillförsel . |
|
Förvaring: |
Frysta HT22-celler kan långtidsförvaras vid en temperatur under -150 °C, antingen i ångfasen av flytande kväve eller i en elektrisk frys med ultralåg temperatur. |
|
Frysningsprocess och medium: |
HT22-celler kan frysas i CM-1- eller CM-ACF-medium med hjälp av en långsam frysmetod. Denna process tillåter endast en sänkning av provets temperatur med 1 °C per minut, skyddar cellerna från chock och bidrar till att bibehålla deras livskraft. |
|
Upptiningsprocess: |
Cellerna tinas i ett 37 °C vattenbad i 40 till 60 sekunder tills en liten isklump återstår. Därefter tillsätts odlingsmedium i cellerna och de centrifugeras för att eliminera komponenter i frysmediet. Cellpelleten resuspenderas och cellerna hälls i den nya kolven som innehåller odlingsmedium. Därefter inkuberas cellerna vid 37 °C i en inkubator i minst 24 timmar. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
Laboratorieinställningar på biosäkerhetsnivå 1 är obligatoriska för odling av HT22-celler. |
3. Fördelar och nackdelar med HT22-cellinjen
HT22 hippocampusceller är förknippade med vissa för- och nackdelar som skiljer dem från andra neuronala cellinjer. Några anmärkningsvärda fördelar och nackdelar med cellinjen nämns här.
Fördelar och nackdelar
Fördelarna med HT22 murin neuronal cellinje är:
-
Snabb tillväxthastighet
HT22-celler har en fördubblingstid på 15 timmar, vilket möjliggör snabba och effektiva experiment och bidrar till snabba forskningsresultat.
-
Odödliggörande
HT22 är en odödlig cellinje, vilket säkerställer kontinuerlig tillväxt under längre perioder. Detta ger konsekvent tillgång till celler, minskar tidsåtgången och kostnaderna och underlättar långsiktiga experiment med konsekventa resultat.
Nackdelar med HT22
Nackdelarna med HT22-celler är:
-
Ursprung från murin
HT22-cellinjen härrörde från hippocampusvävnad från mushjärnan, som kanske inte helt representerar komplexiteten i mänskliga neuroncellers fysiologi och beteende, vilket begränsar deras översättningsrelevans.
4. Forskningsapplikationer för HT22-cellinjen
HT22-cellerna används i stor utsträckning inom neurobiologisk forskning. Några lovande tillämpningar av denna cellinje diskuteras i detta avsnitt av artikeln:
- Neurovetenskaplig forskning: HT22-celler används ofta inom forskning om neurodegenerativa sjukdomar, t.ex. Alzheimers och Parkinsons sjukdom. De anses vara ett värdefullt forskningsverktyg för att studera neurotoxicitet och mekanismer för oxidativ stress i samband med dessa sjukdomar. Forskning som genomfördes 2020 visade att PI3K/AKT/CREB-vägen är involverad i hyperglykemi-inducerad neuraltoxicitet i HT22-celler [2]. På liknande sätt föreslog en nyligen genomförd studie att Nrf2/HO-1-vägen och NF- κB-signalaxeln spelar viktiga roller i HT22-amyloidbetatoxicitet [3].
- Screening av läkemedel: HT22-celler används i stor utsträckning för läkemedelstestning och screening. De hjälper forskare att identifiera potentiella terapeutiska medel som uppvisar neuroskyddande effekter för att bekämpa neurodegenerativa sjukdomar. I en studie som genomfördes 2019 undersöktes den neuroskyddande potentialen hos tetrahydro curcuminförening i glutamatbehandlade HT22 hippocampalceller. Härvid inducerar glutamat oxidativ stress i HT22-celler och orsakar celldöd genom att aktivera mitogenaktiverade proteinkinaser [4].
5. Forskningspublikationer med HT22-celler
Här är några intressanta forskningsartiklar som behandlar HT22-cellinjen:
Denna studie i International Journal of Molecular Medicine (2019) föreslog den neuroskyddande potentialen hos crocin, en förening som isolerats från Crocus sativus L. i deL-glutamatskadadeHT22-cellerna.
Nya oxindolderivat förhindrar oxidativ stressinducerad celldöd i mushippocampala HT22-celler
Denna publikation i Neuropharmacology (2018) rapporterade att oxindolderivat skyddar mot HT22-celldöd inducerad av oxidativ stress.
Detta forskningsdokument publicerades i Journal of Ginseng Research 2019. Denna studie undersökte de neuroskyddande effekterna av en naturlig produkt, ginsenosid Rb2, med hjälp av HT22-cellinjen. Studien visade att ginsenoside rb2 effektivt minskade glutamatinducerad oxidativ stress och celldöd i murina hippocampalceller HT22.
I denna studie i Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) utvärderades den cytotoxiska potentialen hos silvernanopartiklar i HT22-cellinjen.
Ferrostatin-1 skyddar HT-22-celler från oxidativ toxicitet
Denna forskningsartikel publicerades 2020 i Neural regeneration research. Den föreslog att ferrostatin-1, en hämmare av ferroptos, förhindrar oxidativ toxicitet i HT22 hippocampalceller.
6. Resurser för HT22-celler: Protokoll, videor och mer
Några online-resurser om HT22-cellerna förklarar deras transfektions-, differentierings- och cellodlingsprotokoll:
- HT22-transfektion: Detta dokument innehåller ett optimerat protokoll för HT22-transfektion i 24 och 96-brunnars cellodlingsplattor.
- HT22-celldifferentiering: Den här artikeln kommer att ge dig omfattande vägledning om HT22-differentieringsprotokollet.
Följande länk innehåller HT22-cellodlingsprotokollet:
- Subkultivering av HT22-celler: Den här länken hjälper dig att lära dig subkultiveringsprotokollet för HT22-cellinjen. Dessutom kommer det att hjälpa dig att lära dig protokollet för att inducera neurotoxicitet i celler.
- HT22 hippocampala celler: Denna webbplats innehåller mycket användbar information om HT22-cellens fördubblingstid, media och cellodlingsprotokoll.
Referenser
- He, M., et al., Differentiering gör känslighet för excitotoxicitet i HT22-neuroner. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetin förhindrar HT22-celler från hög glukosinducerad neurotoxicitet via PI3K / Akt / CREB-signalväg. Gränser inom neurovetenskap, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Skyddande effekter av berberin mot β-amyloidinducerad neurotoxicitet i HT22-celler via Nrf2 / HO-1-vägen. Bioorganisk kemi, 2023. 133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Neuroprotektiva effekter av tetrahydrocurcumin mot glutamatinducerad oxidativ stress i hippocampala HT22-celler. Molekyler, 2019. 25(1): p. 144.