Gå till startsidan

HT-29-cellinjen

HT-29 är en human kolorektal cancercellinje med ett brett spektrum av tillämpningar inom cancer- och toxikologisk forskning. Dessa celler är till exempel känsliga för standardbehandlingar med kemoterapi mot kolorektal cancer. Dessutom är cellinjen HT-29 en välkarakteriserad in vitro-modell för att undersöka tarmepitelets respons på bakteriell infektion. HT-29-cellerna efterliknar egenskaperna hos mogna tarmceller, dvs. enterocyter, och är därför lämpliga för vidhäftnings- och mekanistiska studier.

📋 HT-29-cellinjen — Kortfattad information
Odlingsmedium
Se produktsidan
Fördubblingstid
Se produktsidan
Tillväxt
Adherent
Biosäkerhetsnivå
BSL-1
Tillgänglig från
Cytion — Beställ HT-29

HT-29-celler: Ursprung och allmän information

Innan du använder en cellinje bör du känna till dess allmänna egenskaper och ursprung. I detta avsnitt får du veta: Vad är HT-29-celler? Är HT-29 en cellinje för kolorektal cancer? Hur ser morfologin hos HT-29-celler ut?

Vad är cellinjen HT-29? HT-29 är en cellinje för kolorektalt adenokarcinom som etablerades 1964 av Trempe och Fogh. Cellerna härstammar ursprungligen från en primärtumör hos en kaukasisk kvinna (44 år) med kolorektalt adenokarcinom [1]. Sedan etableringen har denna cellinje använts för att studera cancerbiologi.

Morfologi hos HT-29-celler: HT-29-cellinjen har i allmänhet en epitelial morfologi. Differentierade celler växer i monolager, bildar täta cell-cell-förbindelser och har en apikal borstkant. Om dessa celler odlas i glukosfattigt medium eller ges inducerare som butyrat eller syra, uppvisar de enterocytliknande egenskaper.

Cellstorlek: Diametern på HT-29-cellinjen för kolorektal cancer är 11 μm.

Genom och ploidi: Det modala antalet kromosomer för HT-29-cellinjen är 71. Det kan variera mellan 68 och 72. Dessutom är det standardiserade kromosomantalet för HT-29-celler hypertriploidt, med en 2S-komponent som förekommer i en andel på 2,4 %.

Vad är HT29 MTX? HT29 MTX är en metotrexatresistent cellinje som isolerats från den ursprungliga HT-29-cellinjen för koloncancer hos människa genom anpassning till 10 µM metotrexat. Dessa celler uppvisar egenskaper hos mogna bägarceller som utsöndrar slem.

Delning och rörelse hos kolorektala cancerceller under mikroskop.

Information om cellodling av cellinjen HT-29

Att känna till de grundläggande odlingskraven för en cellinje kan underlätta ditt arbete med den. Du bör veta: vad är fördubblingstiden för cellinjen HT-29? Vad är utsädesdensiteten för HT-29-celler? Vilka odlingsmedier används för HT-29-celler?

Fördubblingstid

Den genomsnittliga fördubblingstiden för cellinjen HT-29 är 24 timmar.

Adherent/suspension

HT-29 är en adherent cellinje. 

Utsädestäthet

Den rekommenderade utsädesdensiteten för HT-29-celler är 3 x 104 celler/cm2. Odlade celler tvättas med 1 X PBS och lossas efter inkubation med Accutase i 8–10 minuter. Färskt medium tillsätts och cellerna centrifugeras. Cellpelleten resuspenderas och cellerna dispenseras i nya kolvar vid rekommenderad celltäthet.

Odlingsmedium

Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) kompletterat med 2,5 mM L-glutamin och 10 % FBS används för optimal odling av HT-29-celler. Mediet bör bytas 2 till 3 gånger i veckan.

Odlingsförhållanden

HT-29-celler kräver en fuktad inkubator med en temperatur på 37 °C och 5 % CO2-tillförsel för tillväxt.

Förvaring

Dessa celler förvaras i gasfas av flytande kväve vid en temperatur under -195 °C.  

 

Frysmedel och frysprocess

Det frysmedium som används för HT-29-cellinjen är CM-1 eller CM-ACF. Cellerna fryses genom en långsam frysprocess som medför en temperatursänkning på 1 °C och effektivt skyddar cellernas livskraft.

Upptining

Frysta HT-29-celler tinas i ett vattenbad inställt på 37 °C. Dessa celler kan resuspenderas och direkt överföras till en kolv med färskt odlingsmedium. Alternativt kan de upptinade cellerna centrifugeras för att avlägsna frysmediet, resuspenderas i nytt medium och odlas i flaskor.

Biosäkerhetsnivå

Biosäkerhetsnivå 1 används för hantering och underhåll av HT-29-cellinjen.

Ht 29 cells

HT-29-celler i 10x och 20x förstoring.

HT-29-celler: Fördelar och begränsningar

Varje cellinje har unika för- och nackdelar som skiljer den från andra cellinjer. I detta avsnitt behandlas de viktigaste fördelarna och begränsningarna med HT-29-celler.

Fördelar

De viktigaste fördelarna med HT-29-celler är:

  • Lätt att odla

    HT-29-cellinjen är lätt att hantera och underhålla, utan komplexa krav på odling. Den odlas i stor utsträckning i forskningslaboratorier.

  • In vitro-modell av tarmceller

    HT-29-celler kan differentieras till mogna tarmceller (enterocyter och slemproducerande celler) under specifika odlingsförhållanden. De används som en cellmodell för att studera matsmältning och biotillgänglighet.

  • Hög transfektionseffektivitet

    HT-29-koloncancerceller erbjuder hög transfektionseffektivitet, vilket gör dem lämpliga för studier av genuttryck och genreglering. Både transienta och stabila transfektionsexperiment kan utföras med hjälp av olika metoder.

  • Läkemedelskänslighet

    HT-29-celler är känsliga för kemoterapeutiska läkemedel såsom fluorouracil och oxaliplatin, som vanligtvis används vid behandling av koloncancer. De används för att studera läkemedelsresistens och screena potentiella terapeutiska läkemedel för kolorektal cancer.

Begränsningar

  • Heterogenitet

    HT-29-celler uppvisar, liksom andra cancercellinjer, heterogenitet och bildar inte nödvändigtvis en enhetlig cellpopulation. Detta kan påverka reproducerbarheten av resultaten i vissa analyser och leda till mindre variationer i experimentresultaten.

  • Begränsad differentiering

    HT-29-celler har begränsad differentieringspotential. De differentieras inte fullständigt till tarm- eller kolonceller utan uppvisar endast några få karakteristiska drag. Denna begränsning kan begränsa deras användning vid studier av mer komplexa biologiska processer.

HT-29-celler: Användningsområden

HT-29-cellinjen odlas i stor utsträckning i forskningslaboratorier på grund av dess breda användningsområde. Detta avsnitt behandlar endast några viktiga tillämpningar av HT-29-celler.

Cancerforskning: HT-29 är en cellinje för kolorektalt adenokarcinom, så den används för att studera cancerprogression, utveckling och underliggande molekylära mekanismer. En studie som genomfördes 2018 använde HT-29-cellinjen för att undersöka de cellmolekyler som ansvarar för metastasering. I denna studie observerades att vimentin- och CXCR4-generna reglerar cellmetastasering. Transfektion av mikroRNA-193a-5p-mimik kan däremot minska mRNA-nivåerna för dessa gener och framgångsrikt minska cancercellernas metastasering [2].

Toxikologisk forskning: HT-29-cellinjen används i stor utsträckning inom toxikologisk forskning. Dessa kolorektala karcinomceller används för att bedöma toxiciteten hos olika läkemedelskandidater med hjälp av olika analyser. I en studie undersöktes exempelvis den potentiella toxiciteten hos ett etanolextrakt från växten Syzygium cumini på HT-29-cellinjen. Resultaten visade en signifikant hämning av HT-29-cellernas tillväxt, vilket indikerar att extraktet har lovande anti-canceregenskaper [3].

Mikrobiologi: HT-29 kan användas som ett värdcellssystem för att undersöka patogenesen hos potentiella mikrober, dvs. bakterier och virus. Forskare kan infektera HT-29-celler med mikrober för att undersöka deras virulens och värdrespons. I en sådan studie användes HT-29-celler för att undersöka mjölksyrabakteriers probiotiska egenskaper [4]. I en annan studie användes HT-29-celler för att utvärdera effekten och säkerheten hos bakteriofagbehandlingar [5].

5. Forskningspublikationer om HT-29-celler

I detta avsnitt presenteras några viktiga publikationer om HT-29-celler som kan hjälpa dig att utforma din forskningsstudie.

Utvärdering av den cancerhämmande effekten av etanolextrakt av Syzygium cumini på kolorektalcellinjen HT-29

Denna studie föreslog etanolextrakt av Syzygium cumini som ett potentiellt läkemedel mot kolorektal cancercellinjen HT-29. Extraktet hämmade cancercellernas tillväxt avsevärt.

Tetrandrin hämmar tillväxten av HT-29-celler i koloncancer via Bcl-2/Caspase 3/PARP-signalvägen och G1/S-fasen

Denna publikation i Bioscience Reports testade den anti-canceraktiva effekten av en förening, tetrandrin, på HT-29-celler. Resultaten visade att tetrandrin hämmar cancercellernas proliferation och tillväxt genom att reglera cellsignaleringsvägarna.

microRNA-193a-5p hämmar migrationen av humana HT-29-koloncancerceller genom att undertrycka metastasvägen

Denna studie föreslog att miRNA-193a-5p potentiellt kan reglera metastasering av HT-29-celler genom att reglera metastasrelaterade gener.

Bakteriofager är mer virulenta mot bakterier med mänskliga celler än i bakteriekultur; insikter från HT-29-celler

Denna artikel publicerades i Nature Scientific Reports 2018. I denna studie användes den tumörbildande cellinjen HT-29 som en tarmcellsmodell för att utvärdera effekten av den föreslagna bakteriofagbehandlingen.

Probiotiska egenskaper hos laktobaciller och deras förmåga att hämma vidhäftningen av enteropatogena bakterier till Caco-2- och HT-29-celler

I denna studie använde forskarna HT-29-celler för att undersöka de probiotiska aktiviteterna hos mjölksyrabakterier. Intressant nog visade studien att laktobaciller förhindrar att patogena bakterier fäster vid koloncellerna.

HT-29-celler Resurser: Protokoll, videor och mer

I detta avsnitt behandlas några online-resurser om HT-29-celler som kan vara till hjälp för att lära sig om underhåll, odling och transfektionsprotokoll.

Protokoll för cellodling

Följande resurser ger vägledning om subkultivering av HT-29-celler.

Transfektionsprotokoll

HT-29-cellinjen har hög transfektionseffektivitet och används ofta i studier av genuttryck. Följande resurser beskriver möjliga transfektionsprotokoll för dessa celler.

Videor relaterade till HT-29-cellinjen

Här är några videor om odling och underhåll av denna tumörbildande cellinje.

Vi hoppas att informationen i denna artikel är värdefull och tillräcklig för att du ska kunna hantera och underhålla HT-29-cellinjen. Om du planerar att använda HT-29-celler i din studie, beställ från oss.

Referenser

  1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles och I. Recio, HT29-cellinje. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: s. 113–124.
  2. Shirafkan, N., et al., microRNA‐193a‐5p hämmar migrationen av humana HT‐29-koloncancerceller genom att undertrycka metastasvägen. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): s. 8775-8783.
  3. Khodavirdipour, A., R. Zarean och R. Safaralizadeh, Utvärdering av den cancerhämmande effekten av etanolextrakt av Syzygium cumini på kolorektalcellinjen HT-29. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: s. 575–581.
  4. Fonseca, H.C., et al., Probiotiska egenskaper hos laktobaciller och deras förmåga att hämma vidhäftningen av enteropatogena bakterier till Caco-2- och HT-29-celler. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: s. 102–112.
  5. Shan, J., et al., Bakteriofager är mer virulenta mot bakterier med mänskliga celler än i bakteriekultur; insikter från HT-29-celler. Scientific reports, 2018. 8(1): s. 5091.

 

Vi har upptäckt att du befinner dig i ett annat land eller använder ett annat webbläsarspråk än det som för närvarande är valt. Vill du acceptera de föreslagna inställningarna?

Nära