HT-29 Cellinje

HT-29 är en cellinje för kolorektal cancer hos människa med ett brett spektrum av tillämpningar inom cancer- och toxikologiforskning. Till exempel är dessa celler känsliga för standardkemoterapeutiska behandlingar mot kolorektal cancer. Dessutom är HT-29-cellinjen en väl karakteriserad in vitro-modell för att undersöka hur tarmepitelet reagerar på bakterieinfektion. HT-29-cellerna efterliknar egenskaperna hos mogna tarmceller, d.v.s. enterocyter, och är därför lämpliga för fastsättning och mekanistiska studier.

Denna artikel kommer att täcka alla aspekter av HT-29-cellinjen som du behöver känna till innan du arbetar med den. Huvudsakligen kommer den att omfatta:

HT-29-celler: Ursprung och allmän information
Cellkulturinformation för HT-29-cellinjen
HT-29-celler: Fördelar och begränsningar
HT-29 celler: Tillämpningar
Forskningspublikationer om HT-29-celler
HT-29 celler Resurser: Protokoll, videor och mer

1. HT-29 celler: Ursprung och allmän information

Innan du använder en cellinje bör du känna till cellinjens allmänna egenskaper och ursprung. Detta avsnitt kommer att hjälpa dig att lära dig: Vad är HT-29-cellerna för något? Är HT-29 en cellinje för kolorektal cancer? Vad är morfologin hos HT-29-celler?

Vad är HT-29-cellinjen? HT-29 är en cellinje för kolorektalt adenokarcinom som etablerades 1964 av Trempe och Fogh. Cellerna härrörde ursprungligen från primärtumören hos en kaukasisk kvinna (44 år gammal) med kolorektalt adenokarcinom [1]. Sedan den etablerades har denna cellinje använts för att studera cancerns biologi.

Morfologi hos HT-29-celler: HT-29-cellinjen har i allmänhet en epitelliknande morfologi. Differentierade celler växer i monolager, bildar täta cell-cell-övergångar och har en apikal borstgräns. Om dessa celler odlas i glukosfattigt medium eller ges inducerare som butyrat eller syra, uppvisar de enterocytliknande egenskaper.

Cellstorlek: Diametern hos HT-29-cellinjen för kolorektal cancer är 11 μm.

Genom och ploidi: Det modala antalet kromosomer för HT-29-cellinjen är 71. Det kan variera från 68-72. Dessutom är det strömlinjeformade kromosomantalet för HT-29-celler hypertriploid, med 2S-komponenten som förekommer med en hastighet av 2,4 %.

Vad är HT29 MTX? HT29 MTX är en metotrexatresistent cellinje som isolerats från den ursprungliga humana koloncancercellinjen HT-29 genom anpassning till 10 µM metotrexat. Dessa celler uppvisar egenskaper hos slemutsöndrande mogna bägarceller.

Delning och förflyttning av kolorektala cancerceller under mikroskop.

2. Information om cellodling av HT-29 cellinje

Att känna till de grundläggande odlingskraven för en cellinje kan göra ditt arbete enkelt med den. Du bör veta: vad är fördubblingstiden för HT-29-cellinjen? Vad är sådddensiteten för HT-29-celler? Vilka medier för HT-29-celler?

Fördubblingstid	Den genomsnittliga fördubblingstiden för HT-29-cellinjen är 24 timmar.
Adherent/suspension	HT-29 är en adherent cellinje.
Sådddensitet	Den rekommenderade sådddensiteten för HT-29-celler är 3 x¹⁰⁴ ^celler/cm2. Odlade celler tvättas med 1 X PBS och avskiljs efter inkubation med Accutase under 8-10 minuter. Färskt media tillsätts och cellerna centrifugeras. Cellpelleten resuspenderas och cellerna fördelas i nya kolvar med rekommenderad celldensitet.
Tillväxtmedium	Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) kompletterat med 2,5 mM L-glutamin och 10 % FBS används för optimal odling av HT-29-celler. Mediet bör bytas ut 2 till 3 gånger i veckan.
Tillväxtförhållanden	HT-29-celler kräver en humifierad inkubator med 37°C temperatur och 5%_{CO2-tillförsel} för tillväxt.
Förvaring	Dessa celler förvaras i ångfasen av flytande kväve vid en temperatur under -195°C.
Frysmedium och process	Det frysmedium som används för HT-29-cellinjen är CM-1 eller CM-ACF. Cellerna fryses genom en långsam frysningsprocess som orsakar en temperatursänkning på 1 °C och effektivt skyddar cellernas livskraft.
Upptiningsprocess	Frysta HT-29-celler tinas i ett vattenbad vid 37°C temperatur. Dessa celler kan resuspenderas och direkt överföras till en ny kolv med tillväxtmedium. I motsats till detta kan de upptinade cellerna centrifugeras för att avlägsna frysmediumelement, resuspenderas i färskt medium och odlas i kolvar.
Biosäkerhetsnivå	Biosäkerhetsnivå 1 används för att hantera och underhålla HT-29-cellinjen.

HT-29-celler under 10x och 20x förstoring.

3. HT-29-celler: Fördelar och begränsningar

Varje cellinje har unika för- och nackdelar som skiljer den från andra cellinjer. I detta avsnitt beskrivs de viktigaste fördelarna och begränsningarna med HT-29-celler.

Fördelar med HT-29-celler

De viktigaste fördelarna med HT-29-celler är:

Lätt att odla
HT-29-cellinjen är lätt att hantera och underhålla, utan några komplexa krav för odling. Den odlas i stor utsträckning i forskningslaboratorier.
In vitro-modell av tarmceller
HT-29-celler kan differentieras till mogna tarmceller (enterocyter och slemproducerande celler) under specifika odlingsförhållanden. De används som en cellulär modell för att studera matsmältning och biotillgänglighet.
Hög transfektionseffektivitet
HT-29 koloncancerceller har hög transfektionseffektivitet, vilket gör dem lämpliga för studier av genuttryck och genreglering. Både transienta och stabila transfektionsexperiment kan utföras med hjälp av olika metoder.
Känslighet för läkemedel
HT-29-celler är känsliga för kemoterapeutiska läkemedel som fluorouracil och oxaliplatin, som ofta används vid behandling av tjocktarmscancer. De används för att studera läkemedelsresistens och screena potentiella terapeutiska läkemedel för kolorektalt karcinom.

Begränsningar

Heterogenitet
HT-29-celler, liksom andra cancercellinjer, uppvisar heterogenitet och bildar kanske inte en enhetlig cellpopulation. Detta kan påverka reproducerbarheten av resultaten i vissa analyser och leda till mindre variationer i experimentresultaten.
Begränsad differentiering
HT-29-celler har begränsad differentieringspotential. De differentieras inte fullt ut till tarm- eller tjocktarmsceller utan uppvisar endast ett fåtal karakteristiska egenskaper. Denna begränsning kan inskränka deras användning vid studier av mer komplexa biologiska processer.

4. hT-29-celler: Tillämpningar

HT-29-cellinjen odlas i stor utsträckning i forskningslaboratorier på grund av dess breda utbud av applikationer. I detta avsnitt behandlas endast ett fåtal viktiga tillämpningar av HT-29-celler.

Cancerforskning: HT-29 är en cellinje för kolorektalt adenokarcinom, så den används för att studera cancerprogression, utveckling och underliggande molekylära mekanismer. I en studie som genomfördes 2018 användes HT-29-cellinjen för att undersöka de cellmolekyler som är ansvariga för metastasering. I denna studie observerades att generna vimentin och CXCR4 reglerar cellmetastasering. Genom att transfektera mikroRNA-193a-5p mimic kan man minska mRNA-nivåerna för dessa gener och framgångsrikt minska metastaseringen av cancerceller [2].

Toxikologisk forskning: HT-29-cellinjen används i stor utsträckning inom toxikologisk forskning. Dessa kolorektala karcinomceller används för att bedöma toxiciteten hos olika läkemedelskandidater med hjälp av olika analyser. I en studie undersöktes t.ex. toxicitetspotentialen hos ett etanoliskt extrakt av växten Syzygium cumini på HT-29-cellinjen. Resultaten visade signifikant undertryckande av HT-29-celltillväxt, vilket indikerar de lovande anti-canceregenskaperna hos extraktet [3].

Mikrobiologi: HT-29 kan användas som ett värdcellsystem för att undersöka patogenesen hos potentiella mikrober, dvs. bakterier och virus. Forskare kan infektera HT-29-celler med mikrober för att undersöka deras virulens och värdrespons. I en sådan studie användes HT-29-celler för att utforska mjölksyrabakteriers probiotiska egenskaper [4]. I en annan studie användes HT-29-celler för att utvärdera effekten av och säkerheten vid behandling med bakteriofager [5].

430,00 €*

Innehåll: 1.5 milliliter

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300215

5. Forskningspublikationer om HT-29-celler

Detta avsnitt kommer att belysa några anmärkningsvärda publikationer om HT-29-celler som hjälper dig att utforma din forskningsstudie.

Utvärdering av anti-cancereffekten av Syzygium cumini etanoliskt extrakt på HT-29 kolorektal cellinje

Denna studie föreslog Syzygium cumini etanoliskt extrakt som ett potentiellt anti-cancermedel mot kolorektal cancercellinje HT-29. Extraktet undertryckte signifikant tillväxten av cancerceller.

Tetrandrin hämmar koloncancer HT-29-cellernas tillväxt via Bcl-2/Caspase 3/PARP-vägen och G1/S-fasen

I denna publikation i Bioscience Reports testades anticanceraktiviteten hos en förening, Tetradrine, på HT-29-celler. Resultaten visade att tetrandrin hämmar cancercellers proliferation och tillväxt genom att reglera cellens signalvägar.

mikroRNA-193a-5p hämmar migrationen av humana HT-29 koloncancerceller via undertryckande av metastaseringsvägen

Denna studie föreslog att miRNA-193a-5p potentiellt kan reglera metastasering av HT-29-celler genom att reglera metastasrelaterade gener.

Bakteriofager är mer virulenta mot bakterier med mänskliga celler än de är i bakteriekultur; insikter från HT-29-celler

Denna artikel publicerades i Nature Scientific Reports 2018. I denna studie användes HT-29 tumörframkallande cellinje som en cellulär modell för tarmen för att utvärdera effekten av den föreslagna bakteriofagbehandlingen.

Probiotiska egenskaper hos laktobaciller och deras förmåga att hämma vidhäftningen av enteropatogena bakterier till Caco-2- och HT-29-celler

I denna studie använde forskarna HT-29-celler för att undersöka mjölksyrabakteriernas probiotiska aktiviteter. Intressant nog visade studien att laktobacilli-bakterier förhindrar patogena bakteriers vidhäftning till tjocktarmsceller.

6. HT-29-celler Resurser: Protokoll, videor och mer

Detta avsnitt kommer att täcka några tillgängliga online-resurser om HT-29-celler som hjälper till att lära sig deras underhålls-, odlings- och transfektionsprotokoll.

Protokoll för cellodling

Följande resurser ger dig vägledning om subkulturering av HT-29-celler.

Odling av HT-29-celler: Den här länken ger grundläggande kunskaper om tillväxtmedium, upptining och subkultur av HT-29-celler.
Upprätthållande av HT-29-kulturer: Den här artikeln innehåller all användbar information om odling och underhåll av HT-29-celler.

Protokoll för transfektion

HT-29-cellinjen har hög transfektionseffektivitet och används ofta i genuttrycksstudier. Följande resurser beskriver de möjliga transfektionsprotokollen för dessa celler.

Transfektion av HT-29: Denna webbplatslänk innehåller det detaljerade protokollet för transfektion av HT-29-celler.
Transfektion av HT-29 cellinje: Detta dokument beskriver transfektionsprotokollet för HT-29-cellinjen med plasmid-DNA.

Videor relaterade till HT-29 cellinje

Här är några videor om odling och underhåll av denna tumörframkallande cellinje.

Passage av celler: Den här videon visar protokoll för cellpassage för adherenta cellinjer.
Transfektering av HT-29-celler: Den här videon ger dig vägledning om transfektionsmetoden som används för HT-29-celler.

Vi förväntar oss att informationen i den här artikeln är värdefull och tillräcklig för att du ska kunna hantera hantering och underhåll av HT-29-cellinjer. Om du planerar att använda HT-29-celler i din studie, beställ från oss.

Referenser

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles och I. Recio, HT29-cellinje. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: s. 113-124.
Shirafkan, N., et al, microRNA-193a-5p hämmar migration av mänskliga HT-29 koloncancerceller via undertryckande av metastasvägen. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean och R. Safaralizadeh, Evaluation of the anti-cancer effect of Syzygium cumini ethanolic extract on HT-29 colorectal cell line. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
Fonseca, H.C., et al, Probiotiska egenskaper hos laktobaciller och deras förmåga att hämma vidhäftningen av enteropatogena bakterier till Caco-2 och HT-29 celler. Probiotika och antimikrobiella proteiner, 2021. 13: p. 102-112.
Shan, J., et al, Bakteriofager är mer virulenta mot bakterier med mänskliga celler än de är i bakteriekultur; insikter från HT-29-celler. Vetenskapliga rapporter, 2018. 8(1): p. 5091.