DU-145-celler - en omfattande guide för forskare

DU-145 är en human prostatacancercellinje som används brett inom biomedicinsk forskning. Dessa celler fungerar som en ovärderlig modell för att studera prostatacancerbiologi, läkemedelstestning och utveckling. Dessutom använder forskare också DU-145-celler för att undersöka molekylära mekanismer som ligger till grund för utveckling, tillväxt och progression av prostatacancer.

Denna artikel kommer att ge dig värdefulla insikter i DU-145 prostatacancerceller. I synnerhet kommer den att täcka:

Allmän information och ursprung för DU-145-cellinjen
Odling av DU-145-celler
DU-145 cellinje: Fördelar och begränsningar
Forskningsapplikationer av DU-145-celler
Forskningspublikationer med DU-145-celler
Resurser för DU-145 cellinje: Protokoll, videor och mer

1. Allmän information och ursprung för DU-145-cellinjen

Det är viktigt att förstå en cellinjes grundläggande egenskaper och ursprung innan man börjar arbeta med den. Detta avsnitt ger en omfattande förståelse för DU-145-cellinjens egenskaper och ursprung. Du kommer att få veta: Vad är DU145 cancerceller? Vad är morfologin hos DU145-celler? Vad är skillnaden mellan PC-3 och DU145?

DU-145, en human prostatacancercellinje, härrörde från hjärnan hos en kaukasisk man (69 år gammal) med metastaserande prostatacancer. Dessa celler deponerades för första gången av K.R. Stone och hans kollegor 1978.
Liksom PC-3 prostatacancerceller uttrycker även DU-145 androgenreceptorer. När dessa celler utsätts för androgenligandbehandling uppvisar de emellertid ingen aktivitet hos androgenreceptorresponsiva gener och betraktas därför som androgenoberoende celler.
DU-145-cellerna har en epitelial morfologi.
DU-145-celler är hypotriploida och har ett modalt kromosomnummer på 64. De uppvisar flera markörkromosomer, såsom del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) och del (9) (p11).

PC-3 mot DU145

Båda cellinjerna för prostatacancer är androgenreceptoroberoende. De skiljer sig åt när det gäller tumörframkallande och metastaserande potential. När PC-3-cellinjen injiceras i en immunkomprometterad mus bildas ett mycket metastaserande adenokarcinom av grad IV. Däremot utvecklar cellinjen DU-145 prostatacancer med måttlig metastatisk potential [1].

Störning av mikrofilament i mänskliga prostatacancerceller PC-3.

2.odling av DU-145-celler

DU-145-cellinjen används ofta i forskningslaboratorier för prostatacancer. Du bör lära dig följande viktiga punkter för att underlätta en enkel och effektiv odling. Detta avsnitt kommer att innehålla information om DU145-mediet, fördubblingstid, cellodlingsförhållanden och protokoll.

Viktiga punkter för odling av DU-145-celler

Populationens fördubblingstid:	DU-145:s fördubblingstid varierar mellan 30 och 40 timmar.
Adherent eller i suspension:	DU-145 är en adherent cellinje.
Utsådd densitet:	DU-145-cellerna utplanteras med en rekommenderad celldensitet på 2 x¹⁰⁴^celler/cm2. Vid denna densitet bildar cellerna ett sammanflytande monolager på nästan 4 dagar. Vid sådd tvättas cellerna med 1 x fosfatbuffertlösning och inkuberas med passagelösningen Accutase. Efter 8 till 10 minuters inkubation i rumstemperatur tillsätts cellerna med färskt odlingsmedium och centrifugeras. Den uppsamlade cellpelleten resuspenderas försiktigt och cellerna hälls över i nya odlingsflaskor för tillväxt.
Tillväxtmedium:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) med medietillskott, t.ex. 10% fetalt bovint serum (FBS), 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 och EBSS. Mediet förnyas 2 till 3 gånger per vecka.
Tillväxtförhållanden:	DU-145-kulturer förvaras i en 37°C befuktad inkubator med en 5% CO2-källa.
Förvaring:	DU-145-celler förvaras i ångfasen av flytande kväve eller vid en temperatur under -150°C i en elektrisk frys för att bibehålla cellernas livskraft under en längre tid.
Frysningsprocess och medium:	CM-1 eller CM-ACF frysmedium rekommenderas för DU-145 prostatacancerceller. För att frysa cellerna används en metod med långsam frysning där temperaturen gradvis sänks med 1 °C. Detta förhindrar att cellerna utsätts för chock och bidrar till att bibehålla deras livskraft.
Upptiningsprocess:	Frysta DU-145-cellflaskor tinas snabbt i ett 37°C vattenbad i 40 till 60 sekunder. Därefter tillsätts cellerna med odlingsmedium och centrifugeras för att avlägsna komponenterna i frysmediet. De skördade cellerna resuspenderas i ett tillväxtmedium och hälls i kolven för tillväxt. Återhämtning från frysning tar nästan 24 timmar.
Biosäkerhetsnivå:	Biosäkerhetsnivå 1-inställningar krävs för att odla den androgenreceptoroberoende cellinjen DU145.

DU-145 prostatacancerceller vid 10x och 20x förstoring.

3. dU-145 cellinje: Fördelar och begränsningar

Liksom andra cellinjer är prostatacancercellinjen DU-145 förknippad med vissa för- och nackdelar. Dessa egenskaper kan hjälpa dig att bestämma hur den ska användas i din forskning. De viktigaste fördelarna och nackdelarna med DU-145-cellerna nämns nedan.

Fördelarna med DU-145

Fördelarna med DU-145-celler är:

Tumörframkallande egenskaper	DU-145 är en aggressiv tumörframkallande cellinje för prostatacancer med måttlig metastatisk potential. Används för att utveckla xenograftmodellen DU145 i immunkomprometterade möss för att studera prostatacancers biologi, utveckling och tillväxt in vitro och in vivo.
Oberoende av androgenreceptor	DU-145 prostatacancerceller är androgenreceptoroberoende. De förlitar sig inte på androgener för tillväxt och visar ingen respons på cell- och molekylnivå när de behandlas med androgener. Idealisk för forskning om hormonoberoende mekanismer för prostatacancer.

Begränsningar

Begränsningarna för cellinjen DU-145 är följande:

In vitro-modell

DU-145 är en in vitro-cellmodell av metastaserande prostatacancer, vilket innebär att den kanske inte helt representerar komplexiteten hos primära prostatatumörer. Dessutom kanske den inte representerar alla typer och subtyper av prostatacancer på grund av specifika egenskaper, t.ex. androgenreceptoroberoende.

4. forskningsapplikationer för DU-145-celler

Cellinjen DU-145 för prostatacancer har ett brett spektrum av forskningsapplikationer. Några lovande tillämpningar listas här.

Biologi för prostatacancer: DU-145 är en relevant modell för att studera prostatacancerbiologi. Forskare använder dessa celler för att undersöka molekylära mekanismer som driver cancerutveckling, progression och metastasering. Dessutom undersöks genetiska förändringar som vanligen förknippas med prostatacancer. Forskning som genomfördes 2021 undersökte DU-145-cellerna för att identifiera potentiella biomarkörer för effektiva diagnostiska och terapeutiska konsekvenser. Studien föreslog aktin gamma 1 (ACTG1) som en potentiell biomarkör för prostatacancer eftersom den främjar proliferation av cancerceller och reglerar metastasering via aktivering av MAPK/ERK-vägen [2].
Screening och utveckling av läkemedel: DU-145 prostatacancerceller används ofta för att testa cytotoxicitet och effekt hos potentiella cancerläkemedel. Detta hjälper forskare att identifiera nya läkemedel, förstå läkemedelsresistens och underliggande molekylära mekanismer. I en studie som genomfördes 2022 undersöktes den cytotoxiska effekten av en hartsblandning, propolis eller bilim, i prostatacancercellinjerna PC-3 och DU-145. Studien visade tillväxthämmande effekter av denna naturliga substans i båda cellinjerna och föreslog dess anticancerpotential [3]. En annan studie genomfördes 2019 där man undersökte de antiproliferativa effekterna av en naturlig förening, betain, i DU-145 prostatacancerceller. Forskningen visade att betain utövar antiproliferativa aktiviteter genom att öka oxidativ stressmedierad celldöd och inflammation i DU-145-celler [4].

430,00 €*

Innehåll: 1.5 milliliter

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300168

5.forskningspublikationer med DU-145-celler

Nedan följer några forskningspublikationer om cellinjen DU-145.

Koncentrationsberoende effekter av zinksulfat på DU-145 human prostatacancercellinje: oxidativa, apoptotiska, inflammatoriska och morfologiska analyser

I denna studie i Biological Trace Element Research, 2020, föreslogs att zinksulfat (_ZnSo4) utövar antiproliferativa effekter i DU-145-celler genom att inducera apoptos, morfologiska förändringar, oxidativ skada och inflammation.

Selektiv cytotoxisk och anti-metastatisk aktivitet i DU-145 prostatacancerceller inducerad av Annona muricata L. barkextrakt och fytokemikalie, annonacin

Denna forskningsartikel publicerades i BMC Complementary Medicine and Therapies 2020. I denna studie undersöktes den cytotoxiska och anti-metastatiska potentialen hos en växt, Annona muricata L. barkextrakt, och dess bioaktiva annonacin i DU-145-cellinjen.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFR-relateradväg reglerar doxorubicinresistensen hos prostatacancer DU-145-celler

Denna publikation i IUBMB Life (2019) föreslog att långt icke-kodande RNA LOXL1-AS1 interaktion med miR-let-7a-5p och EGFR-vägen reglerar doxorubicinresistensen i DU-145 prostatacancerceller.

Nedreglering av DDR1 inducerar apoptos och hämmar EMT genom fosforylering av Pyk2 / MKK7 i DU-145 och Lncap-FGC prostatacancercellinjer

Denna artikel i Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) uppgav att nedreglering av Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) -genen orsakar DU-145-celldöd och hämmar epitelial till mesenkymal övergång (EMT) via aktivering av Pyk2 / MKK7-vägen.

Casticin hämmar migration och invasion av DU 145-celler i prostatacancer hos människa via Ras/Akt/NF-κB-signalvägar

I denna studie i Journal of Food Biochemistry (2019) föreslås att Casticin, en polymetoxiflavon, hämmar migration och invasion av DU-145-celler genom att reglera Ras/Akt/NF-κB-signalering.

6. resurser för DU-145 Cell line: Protokoll, videor och mycket mer

Det finns många online-resurser om DU-145-cellinjen för prostatacancer. Här i detta avsnitt kommer några resurser att nämnas som förklarar hantering, underhåll och transfektionsprotokoll för dessa celler:

DU-145 transfektion: Denna videohandledning är en stegvis guide för att lära sig protokollet för transfektion av DU-145-celler.

Protokollet för DU-145-cellkultur nämns här.

DU-145 subkulturering: Den här länken hjälper dig att lära dig protokollet för subkulturering eller subkultivering av DU-145-celler.
DU-145-celler: Denna webbplats innehåller massor av användbar information om DU-145-cellinjen, inklusive DU145-medium, protokoll för subodling och hantering av proliferativa och kryokonserverade kulturer.

Referenser

Lima, A.R., et al, Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Vetenskapliga rapporter, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., Tystnad av ACTG1-uttryck inducerar epitelial mesenkymal övergång av prostatacancer genom MAPK / ERK-signalväg. DNA och cellbiologi, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Anticancereffekter av propolis-extrakt erhållna med kallseparationsmetoden på PC-3 och DU-145 prostatacancercellinjer. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betain undertrycker cellproliferation genom att öka oxidativ stressmedierad apoptos och inflammation i DU-145 mänsklig prostatacancercellinje. Cellstress och chaperoner, 2019. 24: p. 871-881.