DU-145-celler – En omfattande guide för forskare

DU-145 är en cellinje från humant prostatacancer som används i stor utsträckning inom biomedicinsk forskning. Dessa celler fungerar som en ovärderlig modell för att studera prostatacancerns biologi, läkemedelsprövning och utveckling. Dessutom använder forskare DU-145-celler för att undersöka de molekylära mekanismer som ligger till grund för prostatacancerns utveckling, tillväxt och progression.

📋 DU-145-cellinjen – kortfattad information

Odlingsmedium: EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) med medeltillskott, dvs. 10 % fetalt bovint serum (FBS), 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 och EBSS. Mediet byts ut 2 till 3 gånger per vecka.
Fördubblingstid: Fördubblingstiden för DU-145 ligger mellan 30 och 40 timmar.
Tillväxt: DU-145 är en vidhäftande cellinje.
Biosäkerhetsnivå: BSL-1
Finns hos: Cytion — Beställ DU-145

📋 Innehåll

Allmän information och ursprung för cellinjen DU-145
Odling av DU-145-celler
DU-145-cellinjen: Fördelar och begränsningar
Forskningsanvändningar av DU-145-celler
5. Forskningspublikationer om DU-145-celler
Resurser för cellinjen DU-145: protokoll, videor och mer
Vanliga frågor

Allmän information och ursprung för cellinjen DU-145

Det är viktigt att förstå en cellinjes grundläggande egenskaper och ursprung innan man börjar arbeta med den. Detta avsnitt ger en omfattande förståelse för DU-145-cellinjens egenskaper och ursprung. Du kommer att lära dig: Vad är DU145-cancerceller? Hur ser DU145-cellernas morfologi ut? Vad är skillnaden mellan PC-3 och DU145?

DU-145, en human prostatacancercellinje, härstammar från hjärnan hos en kaukasisk man (69 år) med metastaserande prostatacancer. Dessa celler deponerades först av K.R. Stone och kollegor 1978.
Precis som PC-3-prostatacancerceller uttrycker även DU-145 androgenreceptorer. När dessa celler utsätts för behandling med androgenligander visar de dock ingen aktivitet hos androgenreceptorresponsiva gener och betraktas därför som androgenoberoende celler.
DU-145-celler har en epitelial morfologi.
DU-145-celler är hypotriploida och har ett modalt kromosomantal på 64. De uppvisar flera markörkromosomer, såsom del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) och del (9) (p11).

PC-3 jämfört med DU145

Båda prostatacancercellinjerna är androgenreceptoroberoende. De skiljer sig åt vad gäller tumörbildande och metastaserande potential. När den injiceras i en immunförsvarssvag mus bildar PC-3-cellinjen ett mycket metastaserande adenokarcinom av grad IV. Däremot utvecklar cellinjen DU-145 prostatacancer med måttlig metastaseringspotential [1].

Störning av mikrofilamenten i humana prostatacancerceller av typen PC-3.

Odling av DU-145-celler

DU-145-cellinjen används ofta i forskningslaboratorier som arbetar med prostatacancer. Du bör lära dig följande viktiga punkter för att underlätta en enkel och effektiv odling. Detta avsnitt innehåller information om DU145-mediet, fördubblingstid, cellodlingsförhållanden och protokoll.

Viktiga punkter för odling av DU-145-celler

Populationsfördubblingstid:: Fördubblingstiden för DU-145 ligger mellan 30 och 40 timmar.
Adhärenta eller i suspension:: DU-145 är en vidhäftande cellinje.
Utsädestäthet:: DU-145-celler utsätts vid en rekommenderad celltäthet på 2 x 10⁴celler/cm². Vid denna täthet bildar cellerna ett konfluent monolager på nästan 4 dagar. För utsädet tvättas cellerna med 1 x fosfatbuffrad saltlösning och inkuberas med passageringslösningen Accutase. Efter 8 till 10 minuters inkubation vid rumstemperatur tillsätts färskt odlingsmedium till cellerna och de centrifugeras. Den uppsamlade cellpelleten resuspenderas försiktigt och cellerna hälls över i nya odlingsflaskor för tillväxt.
Odlingsmedium:: EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) med medietillskott, dvs. 10 % fetalt bovint serum (FBS), 2 mM L-glutamin, 2,2 g/l NaHCO3 och EBSS. Mediet byts 2 till 3 gånger per vecka.
Odlingsförhållanden:: DU-145-odlingar förvaras i en fuktad inkubator vid 37 °C med en 5 % CO2-källa.
Förvaring:: DU-145-celler förvaras i flytande kväves ångfas eller vid en temperatur under -150 °C i en elektrisk frys för att bibehålla cellernas livskraft under en längre tid.
Frysningsprocess och medium:: CM-1- eller CM-ACF-frysmedier rekommenderas för DU-145-prostatacancerceller. En långsam frysmetod som låter temperaturen sjunka gradvis med 1 °C väljs för att frysa cellerna. Detta förhindrar att cellerna utsätts för chock och hjälper till att bibehålla deras livskraft.
Upptining:: Frysta DU-145-cellampuller tinas snabbt i ett 37 °C varmt vattenbad i 40 till 60 sekunder. Därefter tillsätts odlingsmedium till cellerna och de centrifugeras för att avlägsna frysmediets beståndsdelar. De skördade cellerna resuspenderas i ett tillväxtmedium och hälls i kolven för tillväxt. Återhämtningen efter frysning tar nästan 24 timmar.
Biosäkerhetsnivå:: Biosäkerhetsnivå 1 krävs för odling av den androgenreceptoroberoende cellinjen DU145.

Du145 cells

DU-145-prostatacancerceller i 10x och 20x förstoring.

Cellinjen DU-145: Fördelar och begränsningar

Precis som andra cellinjer har prostatacancercellinjen DU-145 både för- och nackdelar. Dessa egenskaper kan hjälpa dig att avgöra om den är lämplig för din forskning. De viktigaste fördelarna och nackdelarna med DU-145-celler beskrivs nedan.

Fördelar

Fördelarna med DU-145-celler är:

Tumörbildande förmåga: DU-145 är en aggressiv tumörbildande prostatacancercellinje med måttlig metastaseringspotential. Används för att utveckla DU145-xenotransplantatmodellen i immunförsvarssvaga möss för att studera prostatacancerns biologi, utveckling och tillväxt in vitro och in vivo.
Androgenreceptoroberoende: DU-145-prostatacancerceller är androgenreceptoroberoende. De är inte beroende av androgener för tillväxt och visar ingen respons på cell- och molekylnivå när de behandlas med androgener. Idealiska för forskning om hormonoberoende mekanismer vid prostatacancer.

Begränsningar

Begränsningarna för cellinjen DU-145 är:

In vitro-modell: DU-145 är en in vitro-cellmodell av metastaserande prostatacancer, så den kanske inte helt återspeglar komplexiteten hos primära prostatatumörer. Dessutom kanske den inte representerar alla typer och subtyper av prostatacancer på grund av specifika egenskaper såsom androgenreceptoroberoende.

Forskningsanvändningar av DU-145-celler

Cellinjen DU-145 för prostatacancer har ett brett spektrum av forskningsapplikationer. Här listas några lovande tillämpningar.

Prostatacancerns biologi: DU-145 är en relevant modell för att studera prostatacancerns biologi. Forskare använder dessa celler för att undersöka molekylära mekanismer som driver cancerutveckling, progression och metastasering. Dessutom undersöks genetiska förändringar som vanligtvis förknippas med prostatacancer. Forskning som genomfördes 2021 undersökte DU-145-cellerna för att identifiera potentiella biomarkörer för effektiva diagnostiska och terapeutiska tillämpningar. Studien föreslog aktin gamma 1 (ACTG1) som en potentiell biomarkör för prostatacancer, eftersom det främjar cancercellernas proliferation och reglerar metastasering via aktivering av MAPK/ERK-signalvägen [2].
Läkemedelsscreening och utveckling: DU-145-prostatacancerceller används i stor utsträckning för att testa cytotoxicitet och effekt hos potentiella läkemedel mot cancer. Detta hjälper forskare att identifiera nya läkemedel, förstå läkemedelsresistens och underliggande molekylära mekanismer. En studie som genomfördes 2022 undersökte den cytotoxiska effekten av en hartsartad blandning, propolis eller bi-lim, i prostatacancercellinjerna PC-3 och DU-145. Studien visade tillväxthämmande effekter av denna naturliga substans i båda cellinjerna och föreslog dess potential som cancerläkemedel [3]. En annan studie genomfördes 2019 som undersökte de antiproliferativa effekterna av en naturlig förening, betain, i DU-145-prostatacancerceller. Forskningen visade att betain utövar anti-proliferativa aktiviteter genom att öka oxidativ stress-medierad celldöd och inflammation i DU-145-celler [4].

430,00 €*

Innehåll: 1.5 milliliter

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300168

5. Forskningspublikationer om DU-145-celler

Nedan följer några forskningspublikationer om cellinjen DU-145.

Koncentrationsberoende effekter av zinksulfat på den humana prostatacancercellinjen DU-145: oxidativa, apoptotiska, inflammatoriska och morfologiska analyser

Denna studie i Biological Trace Element Research, 2020, föreslog att zinksulfat (ZnSo₄) utövar antiproliferativa effekter i DU-145-celler genom att inducera apoptos, morfologiska förändringar, oxidativ skada och inflammation.

Selektiv cytotoxisk och antimetastatisk aktivitet i DU-145-prostatacancerceller inducerad av barkextrakt från Annona muricata L. och fytokemikalien annonacin

Denna forskningsartikel publicerades i BMC Complementary Medicine and Therapies 2020. Studien undersökte den cytotoxiska och antimetastatiska potentialen hos en växt, barkextrakt från Annona muricata L., och dess bioaktiva annonacin i cellinjen DU-145.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFR-relaterad signalväg reglerar doxorubicinresistensen hos prostatacancerceller av typen DU-145

Denna publikation i IUBMB Life (2019) föreslog att interaktionen mellan det långa icke-kodande RNA:t LOXL1-AS1 och miR-let-7a-5p samt EGFR-signalvägen reglerar doxorubicinresistensen i DU-145-prostatacancerceller.

Nedreglering av DDR1 inducerar apoptos och hämmar EMT genom fosforylering av Pyk2/MKK7 i prostatacancercellinjerna DU-145 och Lncap-FGC

Denna artikel i Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) konstaterade att nedreglering av Discoidin Domain Receptor1 (DDR1)-genen orsakar celldöd i DU-145-celler och hämmar epitel-till-mesenkym-övergång (EMT) genom aktivering av Pyk2/MKK7-signalvägen.

Casticin hämmar migration och invasion av humana prostatacancerceller av typen DU 145 via Ras/Akt/NF-κB-signalvägar

Denna studie i Journal of Food Biochemistry (2019) föreslog att Casticin, en polymetoxiflavon, hämmar migration och invasion av DU-145-celler genom att reglera Ras/Akt/NF-κB-signalering.

Resurser för DU-145-cellinjen: protokoll, videor och mer

Det finns många online-resurser tillgängliga om DU-145-prostatacancercellinjen. I detta avsnitt nämns några resurser som förklarar hantering, underhåll och transfektionsprotokoll för dessa celler:

DU-145-transfektion: Denna videohandledning är en steg-för-steg-guide för att lära sig protokollet för transfektion av DU-145-celler.

Protokollet för DU-145-cellodling nämns här.

Subkultivering av DU-145: Denna länk hjälper dig att lära dig protokollet för subkultivering av DU-145-celler.
DU-145-celler: Denna webbplats innehåller mycket användbar information om cellinjen DU-145, inklusive DU145-medium, protokoll för subkultivering samt hantering av proliferativa och kryokonserverade odlingar.

Referenser

Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Scientific reports, 2018. 8(1): s. 5539.
Xiao, L., et al., Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signaling pathway. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): s. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Anticancer-effekter av propolis-extrakt erhållna med kallseparationsmetoden på PC-3- och DU-145-prostatacancercellinjer. Molecules, 2022. 27(23): s. 8245.
Kar, F., et al., Betain hämmar cellproliferation genom att öka oxidativ stress-medierad apoptos och inflammation i den humana prostatacancercellinjen DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: s. 871-881.