DLD-1-celler: Tillämpningar och insikter om DLD-1-celler inom kolorektal cancerforskning
DLD-1 är en human kolorektal karcinomcellinje som ofta används inom cancerforskning. Det är ett värdefullt verktyg för att undersöka olika aspekter av koloncancer, inklusive tumörutveckling, progression, underliggande molekylära mekanismer och svar på terapeutiska medel. DLD-1 är således enastående när det gäller att förstå sjukdomen och utveckla potentiella behandlingsstrategier.
I den här artikeln ges viktig information om DLD-1-cellinjen som du bör känna till innan du arbetar med den. Den kommer att omfatta följande:
- Allmänna egenskaper och ursprung för DLD-1-celler
- Information om odling av DLD-1-cellinjen
- DLD-1-cellinje: Fördelar och begränsningar
- Forskningsapplikationer av DLD-1-cellinje
- Forskningspublikationer om DLD-1-celler
- Resurser för DLD-1-cellinje: Protokoll, videor och mer
1. Allmänna egenskaper och ursprung för DLD-1-celler
Innan en forskare börjar arbeta med en cellinje måste han eller hon först ta hänsyn till dess ursprung och allmänna egenskaper. Detta artikelavsnitt är en detaljerad introduktion till DLD-1-cellinjen. Det kommer att täcka följande vanliga frågor: Vad är DLD-1-celler? Vad är en DLD-1-cellinje för cancer? Vilka är mutationerna i DLD-1-cellinjen? Vad är storleken på en DLD-1-cell? Vad är morfologin hos DLD-1-celler?
- DLD-1, en cellinje för koloncancer, härstammar från tjocktarmen hos en 67-årig manlig patient med kolorektalt adenokarcinom. Den isolerades av D.L. Dexter och medarbetare under 1977-1979. Denna cellinje har samma ursprung som cellinjerna HCT-8, HCT-15 och HRT-18.
- Liksom kolorektal cancer har DLD-1-celler en fenotyp med mikrosatellitinstabilitet [1].
- DLD-1-mutationerna omfattar KRAS, P53, BRAF, BRCA1 och BRCA2. På grund av DLD-1 P53-status, DLD-1 BRCA-, DLD-1 BRCA2- och DLD-1 KRAS-mutation anses dessa celler vara idealiska för cancerstudier.
- Dessa celler har en epitelliknande morfologi.
- Storleken på DLD-1-cellinjen är cirka 15 µm.
- Den mänskliga kolorektala cancercellinjen DLD-1 har en pseudodiploid karyotyp. Cirka 86% av cellerna har ett modalt kromosomnummer på 46. Polyploidi kan dock också förekomma i 17,1% av cellpopulationen.
2.information om odling av DLD-1-cellinjen
Innan du odlar en cellinje måste du känna till dess grundläggande cellodlingskrav. Detta avsnitt belyser de viktiga punkter som du måste lära dig innan du påbörjar arbetet med DLD-1-cellinjen. Detta inkluderar: Vad är DLD-1:s fördubblingstid? Vad är DLD-1:s odlingsmedium? Vad är sådddensiteten för DLD-1-celler? Hur odlar man DLD-1-celler?
Viktiga punkter för odling av DLD-1-celler
|
Fördubblingstid: |
Fördubblingstiden för DLD-1 är cirka 15 timmar. |
|
Adherent eller i suspension: |
DLD-1 är en adherent human koloncancercellinje. Cellerna växer till monolager. |
|
Utsädesdensitet: |
DLD-1-celler utsädes i en densitet av 1 till 2 x104 celler/cm2. Adherenta celler tvättas med 1x PBS (phosphate buffer saline) och inkuberas med passagelösning (Accutase) vid rumstemperatur. Efter en inkubationstid på 8-10 minuter tillsätts de avskilda cellerna till odlingsmediet och centrifugeras. Cellpelleten resuspenderas sedan försiktigt och cellerna hälls över i nya odlingskärl som innehåller tillväxtmedium. |
|
Tillväxtmedium: |
RPMI 1640 med medietillskott, inklusive 10% fetalt bovint serum FBS, 2,1 mM stabilt glutamin och 2,0 g/L NaHCO3 används för att odla DLD-1-celler. Mediet bör bytas ut 2-3 gånger per vecka. |
|
Tillväxtförhållanden: |
DLD-1-kulturer förvaras i en 37°C fuktig inkubator med 5% CO2-tillförsel. |
|
Förvaring: |
DLD-1-celler förvaras i ångfasen av flytande kväve eller i en elektrisk frys med ultralåg temperatur (vid en temperatur under -150°C). |
|
Frysningsprocess och medium: |
CM-1- eller CM-ACF-frysmedium kan användas för att frysa DLD-1-cellerna. En långsam frysningsprocess rekommenderas alltid, vilket möjliggör en gradvis sänkning av temperaturen med 1°C. På så sätt förhindras att cellerna chockas och deras livskraft skyddas. |
|
Upptiningsprocess: |
Frysta celler tinas i ett vattenbad som är förinställt på 37 °C i 40 till 60 sekunder tills en liten isklump återstår. Därefter tillsätts cellerna till ett nytt medium och centrifugeras. Detta steg är nödvändigt för att avlägsna frysmediets komponenter från cellerna. De uppsamlade cellerna resuspenderas i ett tillväxtmedium och fördelas i kolven för tillväxt. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
DLD-1-cellinjen underhålls i laboratorier med biosäkerhetsnivå 1. |
3.dLD-1 cellinje: Fördelar och begränsningar
I detta avsnitt av artikeln går vi igenom fördelarna och begränsningarna med DLD-1-cellinjen för koloncancer.
Fördelar med DLD-1-cellinjen
De viktigaste fördelarna med DLD-1-cellinjen är:
|
Modell för kolorektal cancer |
DLD-1-celler har mutationer som är vanliga hos patienter med kolorektal cancer, t.ex. DLD-1 KRAS-mutation, DLD-1 BRCA och DLD-1 BRCA2. Denna relevans gör dem till en kliniskt lämplig cellmodell för studier av denna sjukdom. |
|
Tumörframkallande cellinje |
DLD-1-celler är tumörframkallande. De kan orsaka tumörer när de injiceras i nakna möss. Därför använder forskare dessa celler för att utveckla xenograft-tumörmodeller som hjälper till att undersöka tumörbildning, utveckling och progression in vivo. |
Begränsningar
De begränsningar som är förknippade med DLD-1-cellerna är följande:
|
Heterogenitet |
DLD-1-cellpopulationerna för koloncancer uppvisar genetisk och fenotypisk heterogenitet. Detta kan påverka generaliserbarheten av forskningsresultat. |
4.forskningsapplikationer för DLD-1-cellinjen
DLD-1-cellinjen erbjuder en rad olika tillämpningar inom cancerforskningen. Några framträdande tillämpningar diskuteras i detta avsnitt.
- Studie av cancer: DLD-1-celler fungerar som en värdefull in vitro-modell för att förstå de molekylära mekanismer som ligger bakom tillväxt, utveckling och progression av kolorektal cancer. Dessutom används de för att studera genuttryck, signalvägar och hur specifika genetiska mutationer påverkar cancercellernas beteende. I forskning som genomfördes 2022 observerades att PI3K/Akt/YAP-signalkaskaden reglerar migration och invasion av DLD-1-cellinjen för kolorektal cancer [2].
- Läkemedelsutveckling: Forskare använder DLD-1-cellinjen för att testa effektiviteten hos cancerläkemedel och utvärdera deras potential för behandling av koloncancer. Detta bidrar till läkemedelsutveckling och effektiv sjukdomsbekämpning. I en studie som genomfördes 2022 användes DLD-1-cellinjen för cancer och man undersökte kiselftalocyaninernas anticanceraktivitet, kemiskt syntetiserade föreningar. Studieresultaten antydde att dessa föreningar var potenta anticancermedel [3]. Intressant nog visade en annan undersökning att ett P8-protein som härrör från probiotika hade en anticancerpotential genom att använda DLD-1-celler [4].
5.forskningspublikationer om DLD-1-celler
I detta avsnitt presenteras några intressanta och ofta citerade publikationer om DLD-1-cellinjen för tjocktarmscancer.
Denna publikation är publicerad i Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). Studien visade att diosmin, en flavonoid, inducerade celldöd i DLD-1-celler och också orsakade cellcykelstopp; det kan således vara ett potentiellt anti-cancermedel.
Bromelain undertrycker effektivt Kras-mutant kolorektal cancer genom att stimulera ferroptos
Denna studie i Animal Cells and Systems (2018) föreslog att bromelain, ett enzym, undertrycker DLD-1 KRAS-mutationen och utövar potenta cytotoxiska effekter.
Denna forskningsartikel publicerades 2019 i tidskriften "Environmental Toxicology". I studien undersöktes antitumöreffekterna av en naturlig förening, Bergapten, med hjälp av en DLD-1-cellinje från tjock- och ändtarmscancer.
Denna studie i Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) visade att nanokompositer av curcumin/järnoxid är mycket effektiva mot DLD-1 kolorektala cancerceller.
Denna forskningsartikel publicerades 2020 i Turkish Journal of Biology. Studien föreslog att en naturlig produkt, epibrassinolid-medierad aktivering av AKT i DLD-1-celler, stimulerar autofagi relaterad till polyaminer.
6.resurser för DLD-1 cellinje: Protokoll, videor och mer
Nedan följer några resurser om DLD-1-celler:
- DLD-1 transfektion: Denna videohandledning är en omfattande guide om DLD-1 in vitro transfektionsprotokoll.
- DLD-1-celler: Detta forskningsdokument beskriver kortfattat DLD-1-cellkulturkrav, inklusive media och odlingsförhållanden. Dessutom kan det hjälpa dig att lära dig det transfektionsprotokoll som används för DLD-1-celler.
Följande länkar innehåller protokollet för odling av DLD-1, mänskliga härledda koloncancerceller.
- DLD-1 cellinje: På denna webbplats finns grundläggande information om DLD-1-cellinjen. Den hjälper dig att lära dig olika DLD-1-cellodlingsprotokoll, inklusive subodling och hantering av kryokonserverade och prolifererande kulturer.
Referenser
- Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptotiska gener som nya mål för enskilda och kombinatoriska behandlingar med resveratrol och curcumin i kolorektal cancer. Mat & funktion, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
- Takeda, T., et al, PI3K/Akt/YAP-signalering främjar migration och invasion avDLD-1kolorektala cancerceller. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Anticanceraktivitet av nya kiselftalocyaniner mot kolorektal adenokarcinomcellinje (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
- An, B.C., et al, Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.