U87MG-celler - Glioblastomforskning med hjälp av U87MG och dess inverkan på hjärncancerstudier
U-87 MG, den primära glioblastomcellinjen från människa, används ofta inom biologisk forskning. Dessa celler används framför allt inom neurovetenskap och immunonkologi.
Allmänna egenskaper och ursprung för U-87 MG-cellinjen
Detta avsnitt kommer att gå igenom ursprunget och de allmänna egenskaperna hos U87-cellinjen. Du kommer att lära dig Vad är U-87 MG-celler? Var kommer U87-cellen ifrån? Vad är den fullständiga formen av U-87 MG? Hur stora är U87-cellerna? Vad är morfologin för U87-cellinjen?
- U87-cellinjen är en glioblastom, astrocytomcellinje. Den etablerades 1966 vid Uppsala universitet. Cellerna erhölls från en 44-årig kaukasisk man som led av glioblastomsjukdom. Denna cellinje kallas formellt U 87 MG, vilket står för Uppsala 87 Malignant Glioma.
- U 87 MG-cellerna har en epitelcellsliknande morfologi.
- Storleken på U 87 MG-cellerna varierar mellan 12 och 14 µm i diameter.
- Denna mänskliga glioblastomcellinje är hypodiploid och har ett modalt kromosomnummer på 44 i cirka 48% av cellpopulationen. Högre ploidier förekommer dock också i 5,9% av cellpopulationen.
Information om odling av U-87 MG-celler
Innan du arbetar med U 87 MG-celler bör du lära dig följande viktiga punkter för odling av dessa glioblastomceller. I synnerhet bör du veta följande: Vad är populationsfördubblingstiden för U 87 MG-celler? Vilka medier används för odling av U87-celler? Vilken är sådddensiteten för U 87 MG-cellinjen?
Viktiga punkter för odling av U-87 MG-celler
|
Tid för populationsfördubbling: |
U 87 MG-celler har en populationsfördubblingstid som sträcker sig från 18-38 timmar. |
|
Adherent eller i suspension: |
U 87 MG är en adherent cellinje. Cellerna har en långsträckt form och växer som monolager. |
|
Sådddensitet: |
Glioblastomcellinjen U 87 MG rekommenderas för utsådd med en celldensitet på 1 x104 celler/cm2. Adherenta U87-celler tvättas med 1 x PBS och inkuberas med Accutase-lösning. Därefter centrifugeras de dissocierade cellerna och återvinns. Cellerna resuspenderas försiktigt och tillsätts i nya kolvar som innehåller tillväxtmedium. |
|
Tillväxtmedium: |
U 87 MG-cellinjen odlas i EMEM (Eagle's minimal essential medium) med 1,0 g/L L-glukos, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM natriumpyruvat och 10% FBS-lösning. Medierna bör förnyas var 2:a till 3:e dag. |
|
Tillväxtförhållanden: |
U-87 MG-celler kräver en befuktad inkubator med 5% CO2 och en temperatur på 37°C för optimal tillväxt. |
|
Förvaring: |
U87-cellerna förvaras antingen i ångfasen av flytande kväve eller vid en temperatur under -150°C för att bibehålla maximal livskraft hos glioblastomcellerna. |
|
Frysningsprocess och medium: |
Frysmedierna CM-1 eller CM-ACF är lämpliga för frysning av U 87 MG-celler. En långsam frysningsprocess rekommenderas eftersom den förhindrar att cellerna utsätts för chock och skyddar cellernas livskraft. |
|
Upptiningsprocess: |
Frysta vialer med U-87 MG-cellinjer tinas i ett 37°C vattenbad. Cellerna tillsätts med tillväxtmedia, resuspenderas och fördelas för odling i nya kolvar. I motsats till detta kan U87-celler centrifugeras för att avlägsna frysmedia och sedan odlas. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
Biosäkerhetsnivå 1 krävs för hantering av U 87 MG-cellkulturer. |
För- och nackdelar med U-87 MG-celler
När vi tänker på en cellinje är det första som slår oss: Vilka är fördelarna med att använda U-87 MG-celler? Vilka är nackdelarna med U87-celler?
Fördelar med U-87 MG
U 87 MG-cellinjer används i stor utsträckning inom forskning. Några fördelar som är förknippade med denna cellinje är:
Fördelar
- Lätt att odla: U 87 MG-celler är lätta att hålla i kultur. De kräver inte krångliga eller komplicerade krav på cellodling
- Homogenitet: U-87 MG är en homogen cellinje. De flesta celler i en population har samma genetiska sammansättning och därmed liknande egenskaper. Dessa celler används för att studera cellprocesser, läkemedelsscreening och testning
- Väl karakteriserad: Denna glioblastomcellinje är väl karakteriserad med avseende på tillväxtegenskaper, morfologi och genuttryck, vilket gör den till ett värdefullt forskningsverktyg
Nackdelar: Begränsad
- Begränsad användbarhet: U 87 MG är en glioblastomcellinje, vilket innebär att dess användningsområden i första hand är begränsade till studier av glioblastom och underliggande molekylära mekanismer. Den kanske inte är lämplig för att undersöka andra cancertyper.
Forskningsapplikationer som innehåller U-87 MG-celler
Glioblastomcellinjen U87MG används i stor utsträckning i cancerstudier, särskilt i glioblastomforskning. Några av forskningsapplikationerna för U 87 MG-celler är
- Forskning inom cancerbiologi: U87-cellinjen används för att studera cancers tillväxt och utveckling, underliggande molekylära mekanismer, signalvägar och tumörens mikromiljö. I en studie som publicerades 2020 användes en in vitro-modell för glioblastom, U-87 MG-cellinjen, för att undersöka BMAL1-genen (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) som ett terapeutiskt mål. Resultaten visade att BMAL1-genen hämmar glioblastomcellers proliferation, migration och invasion genom att undertrycka genuttrycket av cyklin B1, metalloproteinas-9 och fosfo-AKT [1]. En annan forskning som genomfördes 2019 använde U87-cellinjen och undersökte att nedreglerat lipopolysackaridinducerat tumörnekrosfaktor-alfa-faktor (LITAF) transkriptionsfaktoruttryck kan förbättra gliomcellernas strålningskänslighet genom uppreglering av FOXO-1-vägen. LITAF är också känd som p53-inducerad gen 7 (PIG7) [2].
- Upptäckt och utveckling av läkemedel: U-87 MG-celler kan användas för screening och testning av läkemedel, vilket gör det möjligt för forskare att identifiera nya potentiella cancerläkemedel och bedöma deras effekt och toxicitet. I en undersökning användes glioblastomcellinjen U-87 MG för att utvärdera antioxidant- och anticancerpotentialen hos antioxidant- och anticanceraktiviteterna hos extrakt från Inula helenium (L.) [3]. På liknande sätt nämndes i en annan publikation att man använde U87-cellinjen för att testa den cytotoxiska och apoptotiska effekten av växtextrakt [4]. I forskning som publicerades 2018 studerades dessutom den cytotoxiska effekten av sesquiterpenalkaloider som extraherats från Nuphar-växter på känsliga och läkemedelsresistenta U 87 MG-cellinjer [5].
Beställ din U87 MG Glioma-cellinje idag
U-87 MG cellinje: Forskningspublikationer
Här är några framstående forskningspublikationer som innehåller U 87 MG cellinje.
Denna artikel publicerad i Neuroreport 2018 föreslog att hypoxi kunde öka migrationen och invasionen av mänskliga glioblastomceller genom att reglera PI3K / Akt / MTOR / HIF-1α-signalvägen.
Denna studie publicerades i Frontiers in Pharmacology 2020. Forskningsresultaten säger att en flavonoid, Eriodictyol, utövar anticancereffekter på U87-cellinjen och undertrycker cellproliferation och metastasering. Föreningen förmedlar sina antitumöregenskaper genom att modulera PI3K/Akt/NF-κB-vägen.
Denna forskning i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) tyder på att en kinesisk örtformel som heter Xihuang pill kan inducera apoptos i U87-celler genom att rikta in sig på ROS-aktiverad Akt/mTOR/FOXO1-kaskad.
LITAF förbättrar strålningskänsligheten hos humana gliomceller via FoxO1-vägen
Denna forskningsartikel publicerades i tidskriften Cellular and Molecular Neurobiology 2019. I studien föreslogs att en transkriptionsfaktor, LITAF, nedreglerar och förbättrar gliomcellernas strålningskänslighet genom att reglera FOXO-1-signalvägen.
Framställning avcurcuminladdade PLGA-nanopartiklar och undersökning av dess cytotoxicitetseffekter på humana glioblastom U87MG-celler
Denna artikel publicerades i Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Forskarna använde U 87 MG-celler för att undersöka den cytotoxiska effekten av curcuminladdade PLGA-nanopartiklar.
Resurser för U-87 MG-celler: Protokoll, videor och mer
U87MG glioblastomcellinjen används i många cancerforskningslaboratorier. Några resurser med denna cellinje är:
- Transfektion av U87-cellinjen: I detta dokument beskrivs ett transfektionsprotokoll för U 87 MG-celler.
- Transfektion av U 87 MG-cellinjen: Den här videon är en handledning som förklarar steg för steg transfektionsprotokoll för U87-celler.
Resursen för cellkulturprotokollet för U87-celler listas nedan:
- U87 MG-celler: Den här länken innehåller grundläggande information om U 87 MG-cellinjen. Den innehåller kortfattade protokoll för celldelning, frysning och upptining av celler.
Insikter i U87 MG Glioma-forskning: Ofta ställda frågor
Referenser
- Gwon, D.H., et al, BMAL1 undertrycker proliferation, migration och invasion av U87MG-celler genom att nedreglera cyklin B1, fosfo-AKT och metalloproteinas-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al, LITAF förbättrar strålningskänsligheten hos humana gliomceller via FoxO1-vägen. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., antioxidant- och anticanceraktiviteter av extrakt av Inula helenium (L.) i mänsklig U-87 MG glioblastomcellinje. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoxicitet av sesquiterpenalkaloider från Nuphar-växter mot känsliga och läkemedelsresistenta cellinjer. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.