RBL-2H3-celler - Betydelsen av RBL-2H3 i allergiska reaktioner och immunologiska studier
RBL-2H3-cellinjen är en basofil leukemicellinje som härstammar från råtta och används inom immunologisk forskning. Den fungerar som ett modellsystem för att studera mastcellens fysiologi, beteende och funktioner. Dessa celler används också för att studera allergiska reaktioner, immunologiska processer samt testning och utveckling av läkemedel.
Artikeln kommer att ge insikter i RBL-2H3 ursprung, allmänna attribut, odlingskrav och forskningsapplikationer.
RBL-2H3-celler: Ursprung och allmänna egenskaper
Innan du använder en basofil cellinje i din forskning bör du känna till dess ursprung och allmänna attribut. Detta avsnitt av artikeln kommer att informera dig om grunderna för RBL-2H3-celler. Såsom, Vad är RBL-2H3 mastceller? Varför använda RBL-2H3-celler? Vad är RBL-2H3-celler i basofil leukemi hos råtta? Vad är RBL-2H3 morfologi? Är RBL-2H3-celler odödliga?
- RBL-2H3 är basofila leukemiceller som härrör från basofila celler från Wistar-råttor 1978 vid National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
- RBL-2H3-celler har c-kit-receptortyrosinkinas- och mastcellsproteas II (RMCP-II)-receptorer, vilket gör dem till en potentiell mastmodell. Därför kallas de vanligen mastceller trots att de härstammar från råttbasofiler [1].
- De frisätter histamin och andra mediatorer vid aktivering och uttrycker IgE-receptorer med hög affinitet.
- RBL-2H3-celler uppvisar en fibroblastliknande morfologi.
RBL-2H3-celler: Information om odling
Detta avsnitt hjälper dig att lära dig några viktiga aspekter för odling av RBL-2H3-cellinjen. Du kommer att veta: Vad är RBL-2H3-cellernas fördubblingstid? Vad är RBL-2H3-cellens seedningsdensitet? Vad är RBL-2H3 cellodlingsprotokoll? Vad är RBL-2H3 cellinje frysnings media?
Viktiga punkter för odling av RBL-2H3-celler
|
Tid för populationsfördubbling: |
RBL-2H3-mastcellens fördubblingstid är cirka 50-60 timmar. |
|
Vidhäftande eller i suspension: |
RBL-2H3 är en adherent cellinje. |
|
Subkultiveringsförhållande: |
För RBL-2H3-celler hålls delningsförhållandet mellan 1:2 och 1:4. Adherenta celler tvättas med magnesium- och kalciumfri 1 x PBS-lösning. Passagelösningen Accutase tillsätts och cellerna hålls i rumstemperatur i 10 minuter för att lossna från botten av odlingskärlet. Färskt medium tillsätts och cellerna centrifugeras. Skördade celler resuspenderas försiktigt i färskt medium och hälls över i nya kolvar som innehåller tillväxtmedium. |
|
Tillväxtmedium: |
EMEM-medium innehållande 10% FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 och EBSS-salt används för att odla RBL-2H3-cellerna. Mediet bör bytas ut 2 till 3 gånger per vecka. |
|
Tillväxtförhållanden: |
RBL-2H3-celler odlas i en luftfuktad inkubator vid 37 °C och ansluten till enCO2-källa på 5%. |
|
Förvaring: |
Cellerna förvaras i ångfasen av flytande kväve eller vid en temperatur under -150 °C i en elektrisk frys för att skydda cellernas livskraft på lång sikt. |
|
Frysningsprocess och medium: |
CM-1 eller CM-ACF frysmedium används för att frysa RBL-2H3-celler med hjälp av en långsam frysningsprocess. Kortfattat innebär denna metod att temperaturen sänks med 1 °C per minut och att cellerna skyddas från chock. |
|
Upptiningsprocess: |
RBL-2H3-cellerna tinas i ett förinställt vattenbad (37 °C) under cirka 60 sekunder. Därefter tillsätts cellerna till färskt odlingsmedium och centrifugeras. Detta steg är viktigt för att avlägsna komponenter från frysmediet. Därefter resuspenderas cellpelleten i ett tillväxtmedium och cellerna fördelas i en kolv för odling. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
RBL-2H3-cellerna ska förvaras i laboratorier med biosäkerhetsnivå 1. |
Fördelar och begränsningar med RBL-2H3 Basofil cellinje
RBL-2H3-celler används ofta inom immunologisk forskning. I detta avsnitt beskrivs deras främsta fördelar och begränsningar.
Fördelar
- Lätt att odla: RBL-2H3-celler kan lätt odlas och underhållas i laboratoriemiljö. Detta underlättar kostnadseffektiva och reproducerbara experiment, vilket gör dem till ett populärt val för inledande studier inom immunologi.
Begränsningar
- Icke-mänskligt ursprung: RBL-2H3-celler, som härstammar från råttbasofiler, efterliknar kanske inte exakt mänskliga biologiska processer, vilket kan begränsa deras tillämplighet i humanspecifika forskningsstudier. Detta kräver en försiktig tolkning av data vid extrapolering av resultat till mänskliga system.
- Förenklad mastcellsmodell: Även om dessa celler utgör en grundläggande modell för att studera mastcellsfunktioner, representerar de inte fullt ut den komplexa karaktären hos mastcellsinteraktioner inom det mänskliga immunsystemet. Följaktligen är det inte säkert att de på ett adekvat sätt modellerar mastcellernas mångfacetterade roller i immunsvar eller sjukdomstillstånd in vivo.
Cellinjen RBL-2H3: En hörnsten i immunologisk forskning
Forskning om basofiler och mastceller med hjälp av RBL-2H3-cellinjen
RBL-2H3-cellinjen, som härrör från Rattus norvegicus, fungerar som en nyckelmodell för att studera basofilers och mastcellers biologi. Dessa mastceller från råttor ger viktiga insikter om frisättning av mastcellsmedier, vilket är avgörande för att förstå allergiska tillstånd som allergisk rinit. Genom dessa celler kan forskare utforska cellreceptordynamiken och etableringen av immunologiska synapser, som är centrala för immunsystemets reaktion på allergener. I en intressant studie som publicerades 2019 användes RBL-2H3-cellinjen för att undersöka mekanismerna bakom pseudoallergiska reaktioner som orsakas av Qingkailing-injektioner. Studien visade att PI3K-RAC1-signaleringskaskaden delvis framkallar denna allergiska reaktion i cellerna [2]
Immunologisk synapsdynamik i allergiforskning
RBL-2H3-celler används ofta inom immunologisk forskning och är särskilt effektiva för att undersöka immunologisk synapsdynamik. Detta bidrar till att belysa immunsystemets kommunikationsprocesser, med tillämpningar inom studier av mastceller i både perifert blod och peritonealblod. Sådan forskning är avgörande för en heltäckande förståelse av immunförsvaret i både systemiska och lokala sammanhang
Drogscreening och toxicitetstestning
Vid screening och testning av läkemedel utnyttjas RBL-cellernas känslighet för olika stimuli, bland annat genom att studera hur H2O2 hämmar IgE-medierade svar. Dessa celler spelar en viktig roll i utvecklingen av behandlingar för sjukdomar som streptokockinfektioner, där mitisgruppen av streptokocker hämmar mastcellsaktivering. Dessutom utvärderar forskare de toxiska effekterna av olika ämnen, inklusive kemikalier, läkemedel och nanopartiklar, med hjälp av denna RBL 2H3 mc-modell. I en nyligen genomförd studie (2022) utvärderades t.ex. cytotoxiciteten hos polystyrenmikroplaster på RBL-2H3-celler. De fann att mikroplaster skadar RBL-2H3-cellorganeller och främjar celldöd [3]. En annan studie från 2021 utvärderade den antiallergiska och antiinflammatoriska potentialen hos en naturlig produkt, neferin, med hjälp av RBL 2H3 mc-modellen. Studien visade att föreningen har goda antiallergiska och antiinflammatoriska egenskaper [4]
Avancerade metoder för immunologisk mätning
Den konsekventa och mätbara frisättningen av mediatorer från RBL-2H3-celler gör dem idealiska för praktisk fluorimetri, vilket underlättar exakta och noggranna mätningar som är avgörande för sjukdomsstudier och bedömning av terapeutiska medel.
RBL-2H3-cellinjen, som har sitt ursprung i Rattus norvegicus, är en ovärderlig tillgång i både grundläggande och tillämpad forskning inom immunologi. Den erbjuder stora möjligheter att utveckla vår kunskap om och behandling av immunologiska sjukdomar
RBL-2H3 cellinje för avancerad immunologisk forskning
RBL-2H3-celler: Forskningspublikationer
Här följer några spännande forskningspublikationer som handlar om RBL-2H3-mastceller:
Hämmande aktivitet av narirutin på degranulering av RBL-2H3-celler
Detta forskningsdokument publicerades i Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Studien föreslog att narirutin, en naturlig förening, utövar hämmande effekter på RBL 2H3-degranulering via reglering av NF-KB, MAPK och tyrosinkinas-signalvägen.
Denna forskning i International Journal of Molecular Sciences (2020) föreslog att apigeninföreningen signifikant undertrycker allergiska och inflammatoriska reaktioner hos RBL-2H3- och RAW264.7-celler. Därför kan det fungera som ett potentiellt medel för att bekämpa immunrelaterade sjukdomar.
Denna forskningsartikel i International Journal of Molecular Sciences (2021) utvärderade de antiallergiska och antiinflammatoriska effekterna av en naturlig produkt, saponarin, med hjälp av olika cellinjer, inklusive RBL-2H3.
Denna studie från Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014) visade att extrakt från Benchalokawichian och vissa aktiva beståndsdelar har potentiellt hämmande effekter på frisättningen av ß-hexosaminidas från RBL 2H3.
Denna artikel publicerades 2018 i International Journal of Biological Macromolecules. I studien konstaterades att spirulina maxima, en naturlig produkt, hämmar RBL 2H3-degranulering genom att förhindra MAPK- och AKT-fosforylering.
Resurser för RBL-2H3 cellinje: Protokoll, videor och mer
RBL-2H3 är en mastcellinje som används i stor utsträckning. De tillgängliga resurserna som täcker RBL-2H3 odlings- och transfektionsprotokoll nämns här:
- RBL 2H3 MC-modell: Denna forskningsartikel omfattar protokoll för att upprätthålla RBL-2H3-kulturer och för RBL-2H3-transfektion.
Här är några resurser som förklarar RBL-2H3-cellkulturprotokollet:
- RBL-2H3-celler: Denna webbplats är till nytta för dig som vill lära dig cellodlingsprotokoll för RBL-2H3-cellinjen. Dessutom innehåller den information om RBL 2H3-cellmedier och odlingsförhållanden.
RBL-2H3 cellinje: Viktiga frågor och svar för forskare
Referenser
- Passante, E. och N. Frankish, The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al, Pseudoallergisk reaktion orsakad av Qingkailing-injektion delvis via PI3K-Rac1-signalvägen i RBL-2H3-celler. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al, Polystyren mikro (nano) plast skadar organellerna i RBL-2H3-celler och främjar MOAP-1 för att inducera apoptos. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al, Antiallergiska och antiinflammatoriska effekter av neferin på RBL-2H3-celler. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.
