B16-F10-celler – En undersökning av melanomcellinjen B16-F10 inom metastasforskningen
B16-F10-celler utgör en melanomcellinje som härstammar från C57BL/6J-musen. De används i stor utsträckning inom hudcancerforskningen. Forskare använder dessa celler för att studera tumörutveckling och -progression samt terapeutiska ingrepp. Denna artikel behandlar de grundläggande aspekterna av B16-F10-melanomceller. Den kommer bland annat att omfatta:
- Odlingsmedium
- B16-F10-celler odlas i DMEM-medium. Mediet kompletteras med 10 % FBS, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L glukos och 1,0 mM natriumpyruvat för optimal celltillväxt. Mediet bör bytas 2 till 3 gånger per vecka.
- Fördubblingstid
- Fördubblingstiden för B16-F10-celler är cirka 20,1 timmar. Den kan variera mellan 17 och 21 timmar, beroende på odlingsförhållandena.
- Tillväxt
- B16-F10 är en vidhäftande cellinje. Cellerna växer snabbt och bildar monoskikt.
- Biosäkerhetsnivå
- BSL-1
- Tillgänglig från
- Cytion — Beställ B16-F10
- Ursprung och allmänna egenskaper hos cellinjen B16-F10
- Odlingsinformation för B16-F10-celler
- B16-F10-celler: Fördelar och nackdelar
- Forskningsanvändningar av B16-F10-celler
- Publikationer om cellinjen B16-F10
- Resurser för cellinjen B16-F10: protokoll, videor och mer
Ursprung och allmänna egenskaper hos cellinjen B16-F10
I detta avsnitt får du inblick i ursprunget och de utmärkande egenskaperna hos B16-F10-melanomtumörceller. Det hjälper dig att använda cellinjen effektivt i ditt forskningsarbete. Du kommer främst att lära dig: Vad är B16-F10-celler? Vad härstammar B16F10 från? Vad är morfologin hos cellinjen B16F12? Hur stor är B16F10-cellen?
- B16-F10 är en subklon av tumörcellinjen B16 som härstammar från hudvävnad från C57BL/6J-möss. Här utvecklades B16F10-melanomceller efter intravenös injektion av B16-linjen i immunförsvarssvaga eller syngena möss. Dessa celler valdes ut för sin förmåga att bilda metastaserade lungkolonier in vivo och etablerades sedan efter tio cykler av lungkolonibildning in vitro [1]. Den utvecklades av Fidler och kollegor 1976.
- B16-F10-cellinjer har ett epitel-liknande och spindelformat utseende.
- Den ungefärliga storleken på B16-F10-celler är 15,4 ± 1,4 μm [2].
B16-F1- och B16-F10-celler
B16-F1- och B16-F10-celler härstammar från modercellinjen B16. Båda har samma ursprung och uppvisar nästan identiska egenskaper. Den huvudsakliga skillnaden är dock deras metastaseringsförmåga. B16-F10-celler har hög, medan B16-F1 har låg metastaseringspotential [3].
Information om odling av B16-F10-celler
Innan du hanterar och odlar en cellinje måste du känna till dess fördubblingstid, odlingsmedier, odlingsförhållanden och odlingsprotokoll. I detta avsnitt behandlas följande: Vad är fördubblingstiden för B16-F10-celler? Hur odlar man B16-F10-celler? Vilka odlingsmedier används för B16-F10-celler? Vilka odlingsförhållanden rekommenderas för B16-F10-celler?
Viktiga punkter för odling av B16-F10-celler
Fördubblingstid:
Fördubblingstiden för B16-F10-celler är cirka 20,1 timmar. Den kan variera mellan 17 och 21 timmar, beroende på odlingsförhållandena.
Adhärenta eller i suspension:
B16-F10 är en vidhäftande cellinje. Cellerna växer snabbt och bildar monoskikt.
Delningsförhållande:
B16-F10-celler subkultiveras med ett delningsförhållande på 1:2 till 1:4. Cellerna tvättas med fosfatbuffrad saltlösning (1x) och inkuberas sedan med Accutase-passageringslösning i 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Cellerna tillsätts färskt medium och centrifugeras. Den skördade cellpelleten resuspenderas igen och cellerna fördelas i den nya kolven som innehåller färskt odlingsmedium enligt delningsförhållandet.
Odlingsmedium:
B16-F10-celler odlas i DMEM-medium. Mediet kompletteras med 10 % FBS, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/l NaHCO3, 4,5 g/l glukos och 1,0 mM natriumpyruvat för optimal celltillväxt. Mediet bör bytas 2 till 3 gånger per vecka.
Odlingsförhållanden:
B16-F10-celler odlas i en fuktad inkubator vid 37 °C med 5 % CO2-tillförsel.
Förvaring:
Frysta celler förvaras vid under -150 °C i en elektrisk frys med extremt låg temperatur eller i ångfasen av flytande kväve för att bibehålla cellernas livskraft.
Frysningsprocess och medium:
B16-F10-celler fryses ned i CM-1- eller CM-ACF-medium för förvaring. För detta rekommenderas en långsam frysningsprocess som endast tillåter en temperaturminskning på 1 °C per minut för att förhindra att cellerna utsätts för chock.
Upptining:
Frysta B16-F10-celler tinas i ett förinställt vattenbad vid 37 °C i 40 till 60 sekunder. Därefter tillsätts cellerna till färskt medium och centrifugeras för att avlägsna frysmediets beståndsdelar. De uppsamlade cellerna resuspenderas i ett tillväxtmedium och hälls i kolvar för odling.
Biosäkerhetsnivå:
Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 krävs för hantering och underhåll av cellinjen B16-F10.
B16-F10-celler: Fördelar och nackdelar
Precis som andra cellinjer har även B16-F10 vissa fördelar och nackdelar. I detta avsnitt diskuteras några viktiga för- och nackdelar med denna cellinje för hudmelanom.
Fördelar
Cellinjen B16-F10 används i stor utsträckning inom cancerforskningen. Fördelarna med B16-F10-celler är:
Metastaseringspotential
B16F10-celler från hudmelanom uppvisar hög metastaseringspotential, vilket gör dem värdefulla för studier av cancermetastaser och underliggande mekanismer.
In vitro-tumörmodell
B16-F10-celler fungerar som en in vitro-modell för att studera cancerprogression och tillväxt, vilket hjälper forskare att förstå de cellulära och molekylära mekanismer som driver cancer.
Nackdelar
Nackdelarna med cellinjen B16-F10 är:
Musbaserad cellinje
B16-F10 är en cellinje härrörande från mus, vilket begränsar dess tillämplighet för studier specifika för människor. Forskningsresultat från dessa celler kan inte alltid överföras till mänsklig biologi.
Forskningsanvändningar av B16-F10-celler
Cellinjen B16-F10 används i stor utsträckning inom cancerforskningen. Här diskuteras några lovande tillämpningar av denna cellinje.
- Cancerforskning: Cellinjen B16-F10 är en värdefull modell för att studera cancercellprocesser, inklusive proliferation, invasion, migration och celldöd eller apoptos. Dessutom hjälper den forskare att få insikt i de molekylära mekanismer och signalvägar som driver dessa cellulära processer. En studie som genomfördes 2018 undersökte rollen av CCR5 (C-C-kemokinreceptor typ fem) i melanomcellers epitel-till-mesenkymala cellövergång och metastasering. Resultaten visade att CCR5-brist begränsar tumörtillväxt och metastasering, medan hög expression leder till ökad tillväxt och metastasering av B16-F10-celler. Ytterligare forskning har visat att CCR5 reglerar TGFβ1-uttrycket, vilket i sin tur reglerar PI3K/AKT/GSK3β-signalvägen för att främja övergången från epitelial till mesenkymalt tillstånd samt cellmigrationen [4].
- Läkemedelsprövning och utveckling: B16F10-melanomtumörceller är mycket aggressiva och därför lämpliga för att testa potentiella antitumörläkemedel och behandlingar. Forskare använder dessa celler och utvärderar effekten av olika föreningar på celltillväxt, proliferation och metastasering, vilket underlättar läkemedelsutvecklingen. En studie som genomfördes 2018 av Valentina Nanni och kollegor undersökte de terapeutiska effekterna av hydroalkoholiskt extrakt från Spartiumjunceum-blommor. Studien föreslog att blommeextraktet var effektivt för att inducera senescens i B16-F10-celler, vilket leder till hämning av celltillväxt och melanogenes och därmed kan utöva potentiella anti-canceraktiviteter [5].
5. Publikationer som behandlar cellinjen B16-F10
Här är några viktiga forskningspublikationer som behandlar melanomcellinjen B16-F10:
Denna studie publicerades i Nutrients (2020). Den föreslog att etanolextrakt av Sorghum bicolor har en anti-melanogen effekt i hudmelanomceller av typen B16F10.
Kalcitriol hämmar proliferation och inducerar potentiellt apoptos i B16–F10-celler
Forskningen, som publicerades i Medical Science Monitor Basic Research (2022), föreslog att läkemedlet kalcitriol har antitumöreffekter i B16-F10-melanomceller genom att hämma proliferation och inducera apoptos.
Denna artikel är publicerad i Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Resultaten visade att kardoler, resorcinolipider, har en stark cytotoxisk effekt på B16-F10-cellinjen.
Studien, som publicerades i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), undersökte den antimetastatiska potentialen hos Ginkgo biloba-exokarp-extrakt med hjälp av B16-F10-celler.
Denna forskning i World Neurosurgery (2018) föreslog att tymokinon kan vara en effektiv behandling mot intracerebrala metastatiska lesioner eftersom det hämmar B16-F10-cellernas tillväxt och inducerar apoptos.
Resurser för B16-F10-cellinjen: protokoll, videor och mer
B16F10-endotelceller används ofta i hudcancerforskning. Här är några online-resurser som förklarar odlings- och transfektionsprotokoll:
- Transfektion av B16F10-melanomceller: Denna videohandledning kan hjälpa dig att lära dig transfektionsprotokollet för B16-F10-celler.
- Transfektion av B16-F10: Detta dokument förklarar protokollet för in vitro-DNA-transfektion för hudmelanomceller av typen B16F10.
Följande länk innehåller cellodlingsprotokollet för B16-F10-celler:
- Subodling av B16-F10: Denna webbplats innehåller användbar information om B16F10-melanomtumörceller. Den omfattar odlingsmedier, fördubblingstid, odlingsförhållanden och protokoll för subodling av celler samt hantering av kryokonserverade och proliferativa odlingar.
Referenser
- Poste, G., et al., Jämförelse av metastaserande egenskaper hos B16-melanomkloner isolerade från odlade cellinjer, subkutana tumörer och enskilda lungmetastaser. Cancer Research, 1982. 42(7): s. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono och S. Sugita, Mekanofenotypning av B16-melanomcellvarianter för bedömning av effekten av behandling med (-)-epigallokatekingallat med hjälp av en avsmalnande mikrofluidisk anordning. Micromachines, 2019. 10(3): s. 207.
- Danciu, C., et al., Beteende hos fyra olika sublinjer av B16-melanomceller från möss: C57BL/6J-hud. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): s. 73–80.
- Liu, J., et al., Hög uttryck av CCR5 i melanom förstärker epitel-mesenkymövergång och metastasering via TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): s. 481-493.
- Nanni, V., et al., Hydroalkoholiskt extrakt av Spartium junceum L.-blommor hämmar tillväxt och melanogenes i B16-F10-celler genom att inducera senescens. Phytomedicine, 2018. 46: s. 1-10.