B16-F10-celler - Utforska melanomcellinjen B16-F10 i metastasforskning
B16-F10-celler utgör en melanomcellinje som drivs från C57BL/6J-mus. De används ofta inom hudcancerforskning. Forskare använder dessa celler för att studera tumörutveckling och progression samt terapeutiska ingrepp. Denna artikel kommer att behandla de grundläggande aspekterna av B16-F10 melanomceller. I synnerhet kommer den att inkludera:
- Ursprung och allmänna egenskaper hos cellinjen B16-F10
- Information om odling av B16-F10-celler
- B16-F10-celler: Fördelar och nackdelar
- Forskningsapplikationer av B16-F10-celler
- Publikationer med B16-F10 cellinje
- Resurser för B16-F10 Cell line: Protokoll, videor och mer
1. Ursprung och allmänna egenskaper hos cellinjen B16-F10
Detta avsnitt ger dig insikter om ursprunget och de utmärkande egenskaperna hos B16F10 melanom tumörceller. Det hjälper dig att använda cellinjen på ett effektivt sätt i ditt forskningsarbete. Huvudsakligen kommer du att lära dig: Vad är B16-F10-celler? Vad härrör B16F10 från? Vad är morfologin B16F12 cellinje? Vad är storleken på B16F10-cellen?
- B16-F10 är en subklon av B16-tumörcellinjen som härrör från hudvävnad från C57BL/6J-möss. B16F10-melanomcellerna utvecklades efter intravenös injektion av B16-linjen i immunkomprometterade eller syngeneiska möss. Dessa celler valdes ut för sin potential att bilda metastaserande lungkolonier in vivo och etablerades sedan efter tio cykler av lungkolonibildning in vitro [1]. Den utvecklades av Fidler och hans medarbetare 1976.
- B16-F10-cellinjerna har ett epitelliknande och spindelformat utseende.
- Den ungefärliga storleken på B16-F10-cellerna är 15,4 ± 1,4 μm [2].
B16-F1- och B16-F10-celler
B16-F1- och B16-F10-cellerna härrör från B16-föräldracellinjen. Båda har samma ursprung och har nästan liknande egenskaper. Den största skillnaden är dock deras metastatiska förmåga. B16-F10-celler har hög, medan B16-F1 har låg metastatisk potential [3].
2.information om odling av B16-F10-celler
Innan du hanterar och odlar en cellinje måste du känna till dess fördubblingstid, tillväxtmedier, förhållanden och cellodlingsprotokoll. Detta avsnitt kommer att diskutera: Vad är fördubblingstiden för b16-f10-celler? Hur odlar man B16F10-celler? Vad är B16-F10-cellmediet? Vilka odlingsförhållanden rekommenderas för B16-F10-celler?
Viktiga punkter för odling av B16-F10-celler
|
Fördubblingstid: |
Fördubblingstiden för B16-F10-celler är cirka 20,1 timmar. Den kan variera från 17 till 21 timmar, beroende på odlingsförhållandena. |
|
Vidhäftande eller i suspension: |
B16-F10 är en adherent cellinje. Cellerna växer snabbt och bildar monolager. |
|
Delat förhållande: |
B16-F10-celler subkultiveras i ett delningsförhållande på 1:2 till 1:4. Cellerna tvättas med fosfatbuffertlösning (1x) och inkuberas sedan med Accutase passaging solution under 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Cellerna tillsätts med färskt medium och centrifugeras. Den skördade cellpelleten resuspenderas igen och cellerna fördelas i den nya kolven som innehåller färskt odlingsmedium enligt delningsförhållandet. |
|
Tillväxtmedium: |
B16-F10-celler odlas i DMEM-medium. Mediet kompletteras med 10% FBS, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L Glukos och 1,0 mM Natriumpyruvat för idealisk celltillväxt. Media bör bytas ut 2 till 3 gånger per vecka. |
|
Tillväxtförhållanden: |
B16-F10-celler odlas i en luftfuktad inkubator vid 37 °C med 5% CO2-tillförsel. |
|
Förvaring: |
Frysta celler förvaras under -150 °C i en elektrisk frys för extremt låg temperatur eller i ångfasen av flytande kväve för att bibehålla cellernas livskraft. |
|
Frysningsprocess och medium: |
B16-F10-celler fryses i CM-1- eller CM-ACF-medier för förvaring. För detta rekommenderas en långsam frysningsprocess som endast tillåter en temperatursänkning på 1 °C per minut för att förhindra att cellerna utsätts för chock. |
|
Upptiningsprocess: |
Frysta B16-F10-celler tinas i ett förinställt 37°C vattenbad under 40 till 60 sekunder. Därefter tillsätts cellerna till färskt medium och centrifugeras för att avlägsna frysmediets komponenter. De uppsamlade cellerna resuspenderas i ett tillväxtmedium och hälls i kolvar för odling. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
Biosäkerhetsnivå 1-laboratorium krävs för att hantera och underhålla B16-F10-cellinjen. |
3.b16-F10-celler: Fördelar och nackdelar
Liksom andra cellinjer uppvisar B16-F10 också vissa fördelar och nackdelar. Några viktiga för- och nackdelar med denna hudmelanomcellinje diskuteras i detta avsnitt.
Fördelar och nackdelar
Cellinjen B16-F10 används ofta inom cancerforskning. Fördelarna med B16-F10-celler är:
|
Metastatisk potential |
Hudmelanom B16F10-celler uppvisar hög metastatisk potential, vilket gör dem värdefulla för studier av cancermetastasering och underliggande mekanismer. |
|
Tumörmodell in vitro |
B16-F10-celler fungerar som en in vitro-modell för att studera cancerprogression och tillväxt, vilket hjälper forskare att förstå de cellulära och molekylära mekanismer som driver cancer. |
Nackdelar med B16-F10
De nackdelar som är förknippade med B16-F10-cellinjen är:
|
Cellinje som härrör från mus |
B16-F10 är en cellinje som härrör från mus, vilket begränsar dess tillämplighet till humanspecifika studier. Forskningsresultat från dessa celler kanske inte alltid kan överföras till humanbiologi. |
4.tillämpningar av B16-F10-celler för forskning
Cellinjen B16-F10 används flitigt inom cancerforskningen. Några lovande tillämpningar av denna cellinje diskuteras här.
- Cancerforskning: B16-F10-cellinjen är en värdefull modell för att studera cancercellprocesser, inklusive proliferation, invasion, migration och celldöd eller apoptos. Dessutom hjälper den forskare att få insikter i molekylära mekanismer och vägar som driver dessa cellulära processer. I en studie som genomfördes 2018 undersöktes CCR5:s (C-C kemokinreceptor typ fem) roll i melanomcellers övergång från epiteliala till mesenkymala celler och metastasering. Resultaten visade att brist på CCR5 begränsar tumörtillväxt och metastasering, medan högt uttryck leder till ökad tillväxt och metastasering av B16-F10-celler. Ytterligare forskning rapporterade att CCR5 reglerar TGFβ1-uttryck, vilket reglerar PI3K/AKT/GSK3β-signalering för att främja övergången från epitel till mesenkymal vävnad och cellmigration [4].
- Testning och utveckling av läkemedel: B16F10 melanomtumörceller är mycket aggressiva och därför lämpliga för testning av potentiella läkemedel och behandlingar mot tumörer. Forskare använder dessa celler för att bedöma olika substansers effekt på celltillväxt, proliferation och metastasering, vilket underlättar läkemedelsutvecklingen. I en studie som Valentina Nanni och hennes kollegor genomförde 2018 undersöktes de terapeutiska effekterna av hydroalkoholiskt extrakt av blommor från Spartium junceum . Studien föreslog att blomsterextrakt var effektivt för att inducera senescens i B16-F10-celler, vilket leder till celltillväxt och melanogenesundertryckning, vilket kan utöva potentiella anti-canceraktiviteter [5].
5.publikationer med cellinjen B16-F10
Här är några viktiga forskningspublikationer som innehåller melanomcellinjen B16-F10:
Denna studie publicerades i Nutrients (2020). Det föreslog att Sorghum bicolor etanoliskt extrakt har en anti melanogen effekt i hudmelanom B16F10-celler.
Calcitriol hämmar proliferation och inducerar potentiellt apoptos i B16-F10-celler
Forskningen som publicerades i Medical Science Monitor Basic Research (2022) föreslog att kalcitriolläkemedel utövar antitumöreffekter i B16-F10 melanomceller genom att hämma proliferation och inducera apoptos.
Denna artikel publiceras i Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Resultaten avslöjade att Cardols, resorcinoliska lipider, utövar intensiv cytotoxicitet på B16-F10-cellinjen.
I studien som publicerades i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) undersöktes den antimetastatiska potentialen hos Ginkgo bilobas exokarp-extrakt med hjälp av B16-F10-celler.
Denna forskning i World Neurosurgery (2018) föreslog att tymokinon kan vara en effektiv terapi mot intracerebrala metastaserande lesioner eftersom den undertrycker B16-F10-celltillväxt och inducerar apoptos.
6.resurser för B16-F10 Cell line: Protokoll, videor och mer
B16F10 endotelceller används ofta i hudcancerforskning. Här är några online-resurser som förklarar dess odlings- och transfektionsprotokoll:
- Transfektion av B16F10 melanomceller: Denna videohandledning kan hjälpa dig att lära dig transfektionsprotokollet för B16-F10-celler.
- B16-F10 transfektion: Detta dokument kommer att förklara in vitro DNA-transfektionsprotokollet för hudmelanom B16F10-celler.
Följande länk innehåller cellodlingsprotokollet för B16-F10-celler:
- B16-F10 subkulturering: Denna webbplats innehåller användbar information om B16F10 melanom tumörceller. Den omfattar tillväxtmedier, fördubblingstid, odlingsförhållanden och protokoll för subodling av celler samt hantering av kryokonserverade och proliferativa kulturer.
Referenser
- Poste, G., et al, Comparison of the metastatic properties of B16 melanoma clones isolated from cultived cell lines, subcutaneous tumors, and individual lung metastases. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono och S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants for the Assessment of the Efficacy of (-)-Epigallocatechin Gallate Treatment Using a Tapered Microfluidic Device. Mikromaskiner, 2019. 10(3): p. 207.
- Danciu, C., et al, Behaviour of four different B16 murine melanoma cell sublines: C57BL/6J-hud. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Liu, J., et al., Högt uttryck av CCR5 i melanom förbättrar epitelial-mesenkymal övergång och metastasering via TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
- Nanni, V., et al., Hydroalkoholiskt extrakt av blommor från Spartium junceum L. hämmar tillväxt och melanogenes i B16-F10-celler genom att inducera senescens. Fytomedicin, 2018. 46: p. 1-10.