B16-celler - Grundläggande guide till B16-melanomceller i onkologisk forskning

B16 är en hudcancercellinje (melanom) av murint ursprung. Denna cellinje är en effektiv in vitro-modell för att studera hudcancer hos människor. Den används ofta för att undersöka fast tumörbildning och metastasering av cancerceller.

Den här artikeln hjälper dig att förstå grunderna i B16-melanomcellinjen. Specifikt kommer den att gå igenom följande:

1.allmänna egenskaper och ursprung för B16-cellinjen

Detta avsnitt av artikeln kommer att täcka de karakteristiska egenskaperna hos B16-melanomcellinjen. Du kommer att lära dig svaren på följande vanliga frågor. Såsom Vad är B16-cancercellinjen? Var kommer B16-cellerna ifrån? Vad är storleken på B16-celler?

B16-cellinjen etablerades 1954. Dessa celler härstammar från C57BL/6J-möss som spontant fick en tumör i huden vid Jackson Laboratories i Maine.
Det är melaninproducerande epitelceller som har förmåga att metastasera i mjälte, lever och lungor.
Melanom B16-cellerna växer som monolager och uppvisar en epitelliknande och spindelformad cellmorfologi.
Storleken på B16-cellinjen är cirka 15,4 μm.
Det finns olika subkloner av B16-celler, bland annat B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 och B16F10. Dessa sublinjer skiljer sig från de ursprungliga B16-cellerna och har vissa specifika egenskaper. De har t.ex. olika morfologi, cellstorlek och andra egenskaper. B16F10 har hög lungmetastaserande förmåga och B164A5 är den mest aggressiva hudcancercellinjen jämfört med B16F10, B16-GMCSF och B16FLT3 [1].

3D-animation av en närbild av en växande hudcancer, t.ex. malignt melanom, som inflammerar den omgivande vävnaden.

2.information om odling av B16-cellinjen

Innan du underhåller eller odlar en cellinje kan du leta efter viktig information om fördubblingstid, celltyp, tillväxtmedier, odlingsförhållanden etc. Här i detta avsnitt finns all nödvändig information för odling av B16-celler.

Viktiga punkter för odling av B16-celler

Populationens fördubblingstid:	Den genomsnittliga populationsfördubblingstiden för B16-celler beräknas vara 24 timmar.
Adherenta eller i suspension:	B16-celler är adherenta och växer i monolager.
Utsådd densitet:	B16-celler rekommenderas för utsäde med en celldensitet på 1 till 2 x¹⁰⁴ ^celler/cm2. Fästade B16-celler sköljs med 1 x PBS och dissocieras från ytan med hjälp av Accutase-lösning. Cellerna centrifugeras och cellpelleten resuspenderas i tillväxtmediet. Senare fördelas dessa celler i en ny kolv för tillväxt.
Tillväxtmedium:	B16-celler odlas i EMEM-medium (Eagle's Minimum Essential Medium) som innehåller 10 % fetalt bovint serum (FBS). Tillväxtmediet bör förnyas 2-3 gånger i veckan.
Tillväxtförhållanden:	För odling av B16-cellinjen används en fuktad inkubator med 5 %_CO2 och 37 °C temperatur.
Förvaring:	Dessa celler förvaras vid en temperatur under -150 °C eller i ångfasen av flytande kväve för att skydda cellernas livskraft.
Frysningsprocess och medium:	CM-1 eller CM-ACF frysmedium används för att frysa B16-celler med hjälp av en långsam frysningsprocess.
Upptiningsprocess:	Frysta B16-celler tinas upp vid 37 °C i ett vattenbad som innehåller ett antimikrobiellt medel. Upptinade celler kan odlas direkt genom att de fördelas i kolvar som innehåller tillväxtmedium. Dessutom kan dessa celler centrifugeras för att avlägsna frysmediekomponenter och sedan odlas i nya medier.
Biosäkerhetsnivå:	B16-cellinjen ska hanteras eller underhållas i ett laboratorium med biosäkerhetsnivå ett.

Semiflödande lager av B16-melanomceller i 10x och 20x förstoring.

3. b16 cellinje: Fördelar och nackdelar

Precis som andra cellinjer har B16 en unik blandning av fördelar och nackdelar. Några viktiga för- och nackdelar med denna melanomcellinje listas i detta avsnitt.

Fördelar och nackdelar

B16 är det första effektiva murina verktyget som används i stor utsträckning inom metastasforskning på grund av de fördelar det erbjuder. Några fördelar med denna cellinje för hudcancer är

Lätt att odla	Cellinjen B16 är lätt att odla i forskningslaboratorier. Den används ofta för att studera cancercellers biologi, signalvägar med mera.
Snabbväxande	Melanomcellinjen B16 uppvisar en hög proliferationshastighet, vilket gör den lämplig för studier av celldelning och tillväxtprocesser.
Tumörframkallande egenskaper	B16 är en tumörframkallande cellinje med tumörliknande egenskaper som invasion, migration och proliferation. Den är värdefull för studier av tumörbildning, progression och metastasering.

Nackdelar med B16

De nackdelar som är förknippade med B16-cellinjen är

Brist på mänsklig relevans	Eftersom B16 är en melanomcellinje från en mus kanske den inte på ett korrekt sätt representerar mänsklig hudcancerbiologi, vilket begränsar forskningsresultatens överförbarhet.
Heterogenitet	B16-celler är heterogena och uppvisar varierande genetiska och fenotypiska egenskaper inom samma kultur. Detta kan påverka resultatens tillförlitlighet och reproducerbarhet.

4. tillämpningar av B16-celler

B16-cellinjen används i stor utsträckning i forskningsstudier. Några lovande tillämpningar av denna cellinje är

Tumörbiologi: Denna murina hudcancercellinje är tumörframkallande och används ofta för att förstå tumörbiologi. Flera studier har genomförts för att utforska de cellulära mekanismerna bakom tumörcellstillväxt, proliferation och metastasering med hjälp av B16-celler. I en forskningsstudie som genomfördes 2020 användes B16-celler för att undersöka vilken roll det långa icke-kodande RNA:t, LncRNA MEG3, har för bildning, tillväxt och metastasering av melanom. Denna forskning visade att det icke-kodande RNA:t modulerar miRNA-21/E-Cadherin-axeln för att stimulera dessa cellulära händelser [2]. På samma sätt genomfördes forskning för att undersöka den potentiella rollen för Notch1-signalering i tumörinducerad immunosuppression med hjälp av B16-celler [3].
Upptäckt av läkemedel: B16-celler används för att validera och testa de potentiella terapeutiska effekterna av läkemedelskandidater. I en studie utvärderades antitumöreffekten av neogamboginsyra, en naturlig förening, med hjälp av en B16-cellinje. Resultaten av studien visade att denna förening modulerar PI3K/Akt/mTOR-signalvägen för att orsaka cancercelldöd [4]. I en annan studie undersöktes anti-melanomeffekten av Ginsenoside Rg3, en saponin, med hjälp av B16-cellinjen. Forskningen föreslog att denna naturliga förening orsakade antitumöraktivitet genom att nedreglera ERK- och Akt-signalvägarna [5].

430,00 €*

Innehåll: 1.5 milliliter

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 305154

5.forskningspublikationer med B16-celler

Här är några viktiga forskningspublikationer som innehåller B16 melanomcellinjen.

LncRNA MEG3 främjar melanomtillväxt, metastasering och bildning genom att modulera miR-21/E-cadherin-axeln

I denna publikation i tidskriften Cancer Cell International (2020) föreslås att det långa icke-kodande RNA:t MEG3 förbättrar bildandet, tillväxten och metastaseringen av B16-melanomceller genom att modulera miRNA-21/E-Cadherin-axeln.

Ett nytt psoralenderivat - MPFC - förstärker melanogenesen via aktivering av p38 MAPK och PKA-signalvägar i B16-celler

Denna artikel publicerades i International Journal of Molecular Medicine 2018. I denna studie undersöktes den melanogena effekten och mekanismerna hos ett psoralenderivat - 4-metyl-6-fenyl-2H-furo[3,2-g] kromen-2-on (MPFC) i B16-celler. Studien föreslog att detta derivat främjar melanogenes genom att stimulera PKA- och p38 MAPK-cellsignalering.

Notch1-signalering i melanomceller främjade tumörinducerad immunosuppression via uppreglering av TGF-β1

Denna forskning publicerades 2018 i Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Studiens resultat tyder på att aktivering av Notch1-signalering i B16-celler kan förhindra antitumörimmunitet genom att öka uttrycket av TGF-β1-genen.

Neogamboginsyra inducerar apoptos av melanom B16-celler via PI3K/Akt/mTOR-signalvägen

Denna studie genomfördes av Chunlan Wu och hans kollegor 2020 och publicerades i tidskriften Acta Biochimica Polonica. I denna forskning anges att neogamboginsyra, en naturlig förening, kan orsaka B16-melanomcelldöd genom att modulera PI3K/Akt/mTOR-signaleringskaskaden.

Ett iridium (III)-komplex som potent anticancermedel inducerar apoptos och autofagi i B16-celler genom hämning av AKT/mTOR-vägen

Denna forskningsartikel publicerades i European Journal of Medicinal Chemistry 2018. I denna studie undersökte forskare anti-canceraktiviteten hos en förening, iridium (III) -komplex, med hjälp av B16-melanomceller.

Ailanthone inducerar cellcykelstopp och apoptos i melanomcellerna B16 och A375

Denna studie föreslog att en växtbioaktiv, Ailanthone, har anticancerpotential eftersom den kan inducera apoptos och cellcykelstopp i B16- och A375-melanomceller. Denna artikel publicerades i Biomolecules 2019.

6. resurser för B16 Cell line: Protokoll, videor och mer

Det finns begränsade resurser för B16-cellinjen som förklarar dess odlings- och transfektionsprotokoll.

Odling av melanomceller: Den här videon ger värdefulla tips för odling av melanomcellinjer.
Subkultivering av en cellinje: I den här videon förklaras ett allmänt subodlingsprotokoll för en cellinje.
Transfektion av B16F10-cellinjen: I den här videon förklaras transfektionsprotokollet för en sublinje av B16-melanomceller. Den kan hjälpa dig att optimera transfektionsprotokollet för B16-celler.

Följande är några cellodlingsprotokoll för B16-celler.

Odling av B16-celler: Denna webbplats innehåller all nödvändig information för odling av B16-celler, inklusive tillväxtmedier, subkulturer, upptining och frysning av celler.

Referenser

Danciu, C., et al, Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines: C57 BL/6J hud. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 främjar melanomtillväxt, metastasering och bildning genom att modulera miR-21/E-cadherin-axeln. Cancercell internationell, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al, Notch1-signalering i melanomceller främjade tumörinducerad immunosuppression via uppreglering av TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Neogamboginsyra inducerar apoptos av melanom B16-celler via PI3K/Akt/mTOR-signalvägen. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., Antitumoraktivitet av ginsenosid Rg3 i melanom genom nedreglering av ERK- och Akt-vägarna. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.