A375 Cellinje - En guide för melanomforskning

A375 är en human melanomcellinje som ofta används inom toxikologisk och immunonkologisk forskning. Forskare använder denna cellinje för att studera cancerbiologi och signalvägar, testa eller screena potentiella anticancermedel och utveckla nya och effektiva terapier.

Ursprung och allmänna egenskaper hos A375-celler

Att känna till en cellinjes ursprung och allmänna egenskaper kan hjälpa dig att planera dess användning i forskning. I detta avsnitt av artikeln beskrivs ursprunget och egenskaperna hos cellinjen A375. Till exempel, vad är A375-cellinjen? Vilka är A375-cellinjens egenskaper? Var kommer A375-cellerna ifrån? Vilken morfologi har A375-melanomcellerna? Vad är A375-cellstorleken?

Hudcancercellinjen A375 har sitt ursprung i en explantatkultur från en solid tumör från en 54-årig kvinna med malignt melanom [1].
A375-cellerna har en epitelliknande morfologi.
A375-cellerna är relativt små jämfört med andra cellinjer. De har en diameter på ungefär 12 µm.
A375-melanomcellerna är hypotriploida. Det modala kromosomnumret för denna cellinje är 62. Vanligtvis har varje cell nio markörkromosomer och en kopia av de normala N2-, N6- och N22-kromosomerna.

En läkare undersöker tumörer på en vuxen persons hud för att se om det rör sig om hudcancer.

A375-celler: Information om cellodling

A375-cellkulturer är lätta att underhålla. De har inte några krångliga cellodlingskrav. Detta avsnitt hjälper dig att lära dig den nödvändiga cellodlingsinformationen. Såsom vad är A375 fördubblingstid. Vad är A375 cellinjemedia? Vad är sådddensiteten för A375? Är A375 melanomceller vidhäftande?

Viktiga punkter för odling av A375-celler

Populationens fördubblingstid:	A375:s fördubblingstid är 20 timmar.
Adherent eller i suspension:	A375 är en adherent human melanomcellinje.
Utsådd densitet:	en^celldensitetpå 1 x¹⁰⁴ celler/cm2 är idealisk för A375-cellkulturer. Adherenta celler sköljs med 1 x fosfatbuffertlösning (PBS) och inkuberas med passagelösning (Accutase). Därefter tillsattes cellerna med odlingsmedia och centrifugerades. De skördade cellerna resuspenderades i ett odlingsmedium och fördelades i nya kolvar för tillväxt.
Tillväxtmedium:	DMEM rekommenderas som idealiskt A375-medium när det kompletteras med 10% fetalt bovint serum (FBS), 4,5 g/L glukos, 1,5 g/L NaHCO3, 4 mM L-glutamin och 1,0 mM natriumpyruvat. A375-media bör förnyas 2-3 dagar per vecka.
Tillväxtförhållanden:	A375 melanomceller odlas i en luftfuktad inkubator (37°C) med 5% CO2-tillförsel.
Förvaring:	Frysta A375-celler ska förvaras vid temperaturer under -150°C i ångfasen av flytande kväve eller i en elektrisk frys.
Frysningsprocess och medium:	CM-1- eller CM-ACF-medier används för att frysa A375-cellinjen. En långsam frysningsprocess som tillåter en gradvis sänkning av temperaturen med 1°C har valts för att skydda cellernas livskraft.
Upptiningsprocess:	Den frysta flaskan med A375 melanomceller omrörs snabbt i vattenbadet i 40 till 60 sekunder tills endast en liten isklump återstår. Cellerna tillsätts med färsk media och centrifugeras för att avlägsna frysmediaelement. Den erhållna cellpelleten resuspenderas igen och hälls över i nya kolvar.
Biosäkerhetsnivå:	A375-kulturer hanteras och underhålls i laboratoriemiljöer med biosäkerhetsnivå 1.

Konfluerande lager av vidhäftande A375-celler i 20x förstoring.

Fördelar och begränsningar med A375-cellinjen

Liksom andra cellinjer är melanomcellinjen A375 förknippad med en unik kombination av fördelar och begränsningar, vilket gör den till ett värdefullt verktyg för forskning om melanomcancer. I detta avsnitt har endast några viktiga för- och nackdelar med cellinjen A375 listats.

Fördelar och nackdelar

De viktigaste fördelarna med A375-cellerna nämns nedan:

Modell för melanomtumör: A375-cellinjen härstammar från en malign melanomtumör och fungerar därför som en ovärderlig tumörmodell för att undersöka melanomets biologi och terapeutiska ingrepp. Dessa celler uppvisar melanomliknande egenskaper, t.ex. hög proliferationshastighet och invasivitet.
Tumörframkallande förmåga: A375-celler är mycket tumörframkallande, vilket innebär att de kan bilda tumörer. A375-celler har rapporterats ge upphov till aggressiva amelanotiska melanom hos NIH Swiss-möss som behandlats med anti-thymocytserum (ett immunhämmande medel).
Väl karakteriserad: A375 är en genetiskt välkarakteriserad cellinje. Den har specifika genetiska mutationer som melanom. A375-mutationerna inkluderar A375 BRAF-genförändring, vilket gör den känslig för BRAF-specifika hämmare. Denna genetiska profil gör A375-cellerna till ett utmärkt cancerforskningsverktyg för att studera underliggande molekylära vägar och riktade terapier.

Begränsningar

De begränsningar som är förknippade med A375-celler är följande:

In vitro-begränsningar: A375 är en in vitro-tumörmodell. Även om den efterliknar egenskaperna hos melanom kan den inte fullt ut representera komplexiteten hos melanomtumörer. Därför bör försiktighet iakttas när resultat in vitro generaliseras till kliniska studier.

Köp dina A375-celler nu

430,00 €*

Innehåll: 1.5 milliliter

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300110

Forskningstillämpningar för A375-cellinjen

A375-cellinjen har omfattande forskningstillämpningar inom cancerforskning. Här är några av de vanligaste områdena där A375-celler används.

Cancerforskning: A375-celler har utbredda tillämpningar inom melanomforskning. Forskare använde dessa celler för att undersöka hudcancerbiologi, processer och underliggande cellsignaleringsmekanismer, inklusive cellproliferation, migration och invasion. Detta kan också hjälpa forskarna att identifiera nya molekylära terapeutiska mål. I en studie som genomfördes av Lin Zhu och medarbetare 2019 användes mycket aggressiva melanomceller A375 och man fann mikroRNA-3662:s roll för tillväxt och invasion av A375-melanomceller. Studiens resultat visar att mikroRNA-3662 riktar in sig på ZEB1-genen och reglerar melanomcellernas tillväxt in vitro och in vivo i A375-tumörmodellen [2]. På liknande sätt visade forskning som genomfördes 2018 att PI3K/AKT- och MAPK/ERK-vägarna är involverade i proliferation och metastasering av A375-cellinjen [3].
Upptäckt och testning av läkemedel: A375-cellinjen är en användbar in vitro-tumörmodell för att testa och screena potentiella cancerläkemedel. Forskare utvärderar toxiciteten och effekten av nya kemoterapeutiska läkemedel, föreningar och andra terapier med hjälp av dessa A375-melanomceller. I en studie undersöktes t.ex. de cancerhämmande egenskaperna hos mikro- och nanovesiklar som härrör från grapefrukt på A375 mänskliga melanomcancerceller. Resultaten visade att mikro- och nanovesiklar inducerar cellcykelstopp och apoptos och hämmar genuttryck i cellproliferation, migration och invasion [4].

A375-celler: Publikationer

Här följer några viktiga forskningspublikationer som rör A375-celler.

D-vitamin och dess lågkalcemiska analoger modulerar de anticanceregenskaper som cisplatin och dakarbazin har i den humana melanomcellinjen A375

Denna studie publicerades i Journal of Oncology 2019. I studien föreslogs att samtidig behandling med D-vitamin och analoger förbättrar den cancerhämmande aktiviteten hos cisplatin och dakarbazin i A375-melanomceller.

In vitro-utvärdering av anti-melanomeffekterna (A375-cellinje) av gel- och helbladsextrakt från utvalda aloe-arter

Denna forskning publicerades i Journal of Herbal Medicine 2022. I denna studie undersöktes anti-melanomeffekterna av aloe vera gel i A375 melanomceller.

Fermitin-familjemedlem 2 främjar melanomprogression genom att förstärka bindningen av p-α-Pix till Rac1 för att aktivera MAPK-vägen

I denna studie i Oncogene (2021) föreslås att fermitin-familjemedlem 2 (FERMT2 eller kindlin-2) främjar melanomutveckling genom att aktivera MAPK genom bindning till p-α-Pix och Rac1.

FARP1 underlättar cellproliferation genom att modulera MAPK-signalvägen i kutana melanom

I denna studie i The American Journal of Dermatopathology (2019) föreslås att FARP1 kan underlätta utveckling och progression av kutant melanom. Det kan därför vara ett användbart terapeutiskt mål.

Cytotoxisk och apoptotisk potential hos Phyllodium elegans-extrakt på mänskliga cancercellinjer

Denna forskningsartikel publicerades i Bioengineered (2019). Denna studie undersökte den cytotoxiska och apoptotiska aktiviteten hos ett växtextrakt från Phyllodium elegans på humana karcinomcellinjer, inklusive A375.

Resurser för A375 cellinje: Protokoll, videor och mer

Nedan följer några online-resurser som handlar om A375-celler.

Transfektion av A375-celler: Denna videohandledning hjälper dig att lära dig A375-celltransfektion steg för steg.
Cellodling: Den här videon innehåller mycket användbar information om cellinjeodling.

Cellodlingsprotokollen för A375-celler listas här.

A375 cellinje: Den här länken innehåller användbar information om odling och underhåll av A375-cellinjen, inklusive A375-medier och hantering av frysta och prolifererande A375-kulturer.

Vanliga frågor (FAQ) för A375-celler

Referenser

Avram, S., et al., Standardisering av modeller för A375 humant melanom på kycklingembryo chorioallantoic membran och Balb/c nakenmöss. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al, MicroRNA-3662 riktar in sig på ZEB1 och dämpar invasionen av den mycket aggressiva melanomcellinjen A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C hämmar melanom A375-cellproliferation och metastasering genom att undertrycka PI3K/Akt och MAPK/ERK-vägar. Biovetenskap, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al, Grapefrukt-härledda mikro- och nanovesiklar visar distinkta metabolomprofiler och anticanceraktiviteter i den mänskliga melanomcellinjen A375. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.