4T1-celler – Viktiga insikter om forskning och tillämpningar inom bröstcancerceller

Information om odling av cellinjen 4T1

Bröstcancercellinjen 4T1 erbjuder omfattande forskningsmöjligheter inom det biomedicinska området. För odling av dessa celler bör du ta del av följande viktiga punkter som beskriver: Vad är fördubblingstiden för 4T1? Hur odlas 4T1-celler? Vad är cellutsädestätheten för 4T1?

Viktiga punkter för odling av 4T1-celler

Fördubblingstid:

Den genomsnittliga fördubblingstiden som rapporterats för 4T1-bröstcancerceller är 14 timmar.

Adherenta eller i suspension:

4T1 är en vidhäftande cellinje.

Subkultiveringsförhållande:

Ett delningsförhållande på 1:6 och 1:8 rekommenderas för den trippelnegativa bröstcancercellinjen 4T1. För delning sköljs cellerna med PBS och inkuberas med Accutase-enzym i 8 till 10 minuter. Dissocierade celler samlas upp genom centrifugering och resuspenderas i ett nytt medium. De resuspenderade cellerna överförs till en ny kolv för tillväxt.

Odlingsmedium:

RPMI 1640-medium används för odling av 4T1-celler. 10 % fetalt bovint serum (FBS), 2,0 g/l NaHCO3 och 2,1 mM stabilt glutamin tillsätts i odlingsmediet för optimal celltillväxt.

Odlingsförhållanden:

4T1-tumörceller förvaras i en fuktad inkubator vid 37 °C med 5 % CO₂-tillförsel.

Förvaring: 

4T1-celler bör förvaras vid en temperatur under -150 °C, t.ex. i en elektrisk frys eller i flytande kväve i gasfas, för att bibehålla cellernas livskraft.

Frysningsprocess och medium:

CM-1 eller CM-ACF rekommenderas för 4T1-cellinjen. En långsam frysningsmetod är att föredra eftersom den skyddar cellernas livskraft genom att tillåta en gradvis temperatursänkning med 1 °C.

Upptining:

Flaskan med frysta celler hålls i ett vattenbad vid 37 °C i några sekunder tills cellerna tinat och endast en liten isklump återstår. Dessa celler resuspenderas i färskt medium och hälls i kolven för odling. Efter 24 timmars inkubation byts mediet ut för att avlägsna frysmediets komponenter.

Biosäkerhetsnivå:

Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 rekommenderas för odling av 4T1-bröstcancerceller.

T1-cellinjen: Fördelar och nackdelar

I detta avsnitt av artikeln behandlas fördelarna och nackdelarna med den metastatiska modellen 4T1.

Fördelar

De viktigaste fördelarna med cellinjen 4T1 är:

• Tumörbildande förmåga:

  4T1 är en mycket tumörbildande cellinje. Dessa celler har förmågan att bilda en syngen 4T1-musmodell för bröstcancerstudier när de injiceras i en mus. Därför är 4T1-modellen idealisk för att studera tumörutveckling, tillväxt och metastasering. Dessutom är den användbar för screening och utvärdering av läkemedel.

• In vitro-metastasmodell:

  4T1-modellen har en naturlig tendens till metastasering, vilket gör det möjligt för forskare att effektivt undersöka de underliggande mekanismerna och signalvägarna som är involverade i metastasprocessen. Dessutom är 4T1-celler resistenta mot 6-tioguanin. Detta bidrar till en effektiv detektering av mikrometastatiska celler med förbättrad noggrannhet jämfört med andra modeller, eftersom det eliminerar behovet av att väga målorgan och räkna knölar.

Nackdelar

Nackdelen med 4T1-cellinjen är:

• Aggressivitet/snabb tillväxthastighet:

  4T1-cellinjen är en mycket aggressiv trippelnegativ bröstcancercellinje. På grund av den snabba tillväxttakten blir det svårt att använda denna cellinje i långsiktiga experiment och kontrollera experimentella variabler.

Köp cellinjen 4T1: en högkvalitativ bröstcancermodell

Cellinjen 4T1: Användningsområden inom cancerforskning

Musmodellcellinjen 4T1 är ett värdefullt forskningsverktyg för att studera cancerbiologi och utvärdera nya behandlingar. De viktigaste tillämpningarna för 4T1-celler listas här:

Cancerbiologi

Cellinjen 4T1 används i stor utsträckning för att studera cancerutveckling och -tillväxt. Den är en idealisk in vitro-modell för att undersöka och utforska olika cellulära och molekylära mekanismer som är involverade i tumörprogression och metastasering. Dessutom kan den avslöja vilken roll cellsignaleringsvägar, mikromiljön och genuttryck spelar i dessa processer. I forskning som genomfördes 2019 användes 4T1-celler för att upptäcka de drivande mekanismerna bakom cancercellers invasion och migration. Resultaten visade att generna STAT3, MMP2 och MMP9 är inblandade, och att hämning av dessa gener markant kan begränsa migration och invasion hos cancerceller [4]. Liknande studier har också pekat på flera andra signalvägar som är involverade i tumörutveckling och metastasering.

Dessutom är 4T1-modellen avgörande för att förstå mikromiljön vid bröstcancer, inklusive infiltration av immunceller och tillväxt av primärtumören. Studier som fokuserar på 4T1-tumörens mikromiljö har gett viktiga insikter om immuncellernas och cytokinernas roll, såsom CXCL13-uttryck, i tumörprogression. Modellen underlättar också undersökningen av metastatiska nischer och tumörmetastasering, särskilt vid bröstcancer i sent stadium, där kolonisering av bröstkarcinom är vanligt förekommande.

Forskning om cancerbehandling

4T1-cellinjen används i stor utsträckning inom cancerterapiforskning för screening och utvärdering av nya behandlingar. En studie undersökte den cytotoxiska potentialen hos grönt syntetiserade järnnanopartiklar från rosmarinextrakt (Rosemary-FeNPs) och rent rosmarinextrakt på 4T1-cellinjen. Forskningsresultaten tyder på att Rosemary-FeNPs är mer lovande än det rena extraktet [5]. På samma sätt undersökte en studie som genomfördes 2021 den antitumörpotentialen hos ingefäraextrakt i 4T1-bröstcancerceller och en 4T1-musmodell [6].

Förutom naturliga extrakt används cellinjen 4T1 för att utvärdera effekten av traditionella kemoterapeutiska medel. Forskning som involverar kombinationen av cisplatin med andra terapier har till exempel visat på ökad tumörcellsdöd och minskad tumörprogression i 4T1-modellen. Införandet av eldfluga-luciferas i 4T1-celler har möjliggjort realtidsavbildning av tumörtillväxt och metastatisk fenotyp, vilket gör det lättare att bedöma effekten av olika behandlingar.

Dessutom har cellinjen 4T1:s resistens mot 6-tioguanin underlättat studier av mikrometastatiska celler, vilket förbättrat detekteringen och analysen av metastaser. Denna cellinje spelar också en avgörande roll i studiet av antitumörimmunitet och effekterna av immunterapi, särskilt i samband med ortotopiska musmodeller, där forskare kan efterlikna mänskliga cancerformer på ett mycket nära sätt.

Sammantaget förblir 4T1-cellinjen ett oumbärligt verktyg inom onkologisk forskning, från förståelsen av de grundläggande mekanismerna i cancerbiologin till utveckling och testning av nya behandlingsstrategier.

4T1-celler: Forskningspublikationer

I detta avsnitt av artikeln behandlas några intressanta och ofta citerade publikationer om 4T1-celler.

Potentiell antiproliferativ aktivitet hos AgNP syntetiserade med hjälp av M. longifolia i 4T1-cellinjen genom generering av ROS och skador på cellmembranet

Denna artikel publicerades 2018 i Journal of Photochemistry and Photobiology. Forskningen föreslog att silver-nanopartiklar syntetiserade från Madhuca longifolia utövar en anti-proliferativ effekt i 4T1-tumörceller via nedbrytning av cellväggar och generering av ROS.

Cytotoxicitet och apoptotiska effekter av verbascosid på bröstcancercellinjen 4T1

Denna studie i tidskriften BMC Pharmacology and Toxicology (2021) föreslog att verbascosid, en naturlig förening, inducerade apoptotiska effekter i 4T1-bröstcancerceller via TLR4-signalering.

Eupatorin hämmade tumörprogression och förstärkte immunförsvaret i en 4T1-musmodell för bröstcancer

Denna forskning publicerades i Integrative Cancer Therapies 2020. I studien användes 4T1-celler för att utveckla en syngen 4T1-musmodell och undersöka eupatorins potential som cancerläkemedel. Eupatorin fördröjde tumörutvecklingen i 4T1-musmodellen.

Hämmande effekt av Viola odorata-extrakt på tumörtillväxt och metastasering i 4T1-bröstcancermodellen

Denna forskning, publicerad i Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018), föreslog att en medicinsk ört, Viola odorata, har potentiella cytotoxiska effekter på 4T1-celler.

Docetaxel-laddade fasta lipidnanopartiklar förhindrar tumörtillväxt och lungmetastasering av 4T1-musceller från bröstcancer

Denna studie föreslog att docetaxel-laddade fasta lipidnanopartiklar (DTX-laddade SLN) kan vara ett lovande medel för att behandla bröstcancer och förhindra metastasering, eftersom de begränsar cancertillväxt och lungmetastasering av 4T1-celler.

Resurser för 4T1-cellinjen: protokoll, videor och mer

Här följer några resurser om 4T1-celler:

• Handledning för transfektion av 4T1: Denna video är en steg-för-steg-guide för att utföra transfektion av 4T1-cellinjen.
• Subkultivering av en cellinje: Denna video förklarar subkultiveringsprotokollet för adherenta cellinjer.

Följande länk innehåller cellodlingsprotokollet för 4T1-celler:

• 4T1-cellinjen: Denna webbplatslänk innehåller all användbar information om hantering av 4T1-odlingar. Den innehåller information om odlingsmedier samt hanteringsprotokoll för kryokonserverade odlingar och prolifererande odlingar.

Vanliga frågor om 4T1-cellinjen

Referenser

1. Pulaski, B.A. och S. Ostrand-Rosenberg, Musmodell för brösttumör 4T1. Curr Protoc Immunol, 2001. Kapitel 20: s. Enhet 20.2.
2. Maxwell, K.G., Immunmodulering av bröstcancerceller för vaccination mot hela tumören. 2016.
3. Walker, I., et al., Brösttumörer inducerar central proinflammatorisk cytokinuttryck, men inte beteendestörningar hos Balb/C-möss. Scientific Reports, 2017. 7(1): s. 1-13.
4. Li, Y., et al., Hämning av Stat3-signalvägen genom naturprodukten pektolinarigenin dämpar metastasering av bröstcancer. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: s. 1195.
5. Farshchi, H.K., et al., Grön syntes av järnnanopartiklar med rosmarinextrakt och utvärdering av cytotoxisk effekt på cancercellinjer. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16: s. 54-62.
6. Gholizadeh, A.P., et al., Effekten av ingefäraextrakt på bröstcancercellinjen 4T1 i Balb/c-möss. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): s. 43-49.