KG-1-cellinjen
Allmänna egenskaper och ursprung för KG-1-cellinjen
En cellinjes ursprung och allmänna egenskaper hjälper forskare att avgöra hur den ska användas i deras arbete. Du kan undersöka denna information innan du börjar arbeta med den. Detta avsnitt handlar om KG-1-makrofagernas ursprung och egenskaper. Här får du lära dig: Vad är KG-1-celler? Vad är KG-1a-cellinjen? Vad är ursprunget till KG-1-cellinjen? Hur ser KG-1-cellernas morfologi ut?
- KG-1 är en lymfoblastliknande cellinje som härrör från benmärgsaspirat från en kaukasisk man (59 år) med akut myelogen leukemi. Den etablerades av Koeffler och Golde 1978. Dessa celler befinner sig huvudsakligen i mognadsstadiet promyelocyt eller myeloblast [1].
- KG-1-cellerna har en lymfoblastliknande morfologi.
- Karyotypen för KG-1-cellinjen uppvisar ett pseudodiploidt modalt antal kromosomer.
KG-1 och KG-1a
KG-1a är en sublinje av de ursprungliga KG-1-cellerna. Den utvecklades efter 35 passager av KG-1-cellinjen. Den är mindre differentierad jämfört med KG-1-cellinjen. Dessutom är denna sublinje cytokemiskt, morfologiskt och funktionellt mindre mogen jämfört med den ursprungliga cellinjen (KG-1).
Information om odling av cellinjen KG-1
I detta avsnitt av artikeln behandlas all viktig information om odling av KG-1-celler som kan underlätta ditt arbete. Här får du lära dig: Vad är fördubblingstiden för KG-1-cellinjen? Vilka är odlingsförhållandena för KG-1-makrofager? Hur odlar man KG-1-celler?
Viktiga punkter för odling av KG-1-celler
Fördubblingstid:
Fördubblingstiden för KG-1 är cirka 45 timmar. Den kan dock variera beroende på odlingsförhållandena.
Adherenta eller i suspension:
KG-1-cellerna växer i suspension.
Celltäthet:
Den optimala celltätheten för KG-1-cellinjen är 1 till 3 × 10⁵ celler/ml. För subkultivering överförs cellsuspensionen till ett sterilt rör och centrifugeras. De skördade cellerna tillsätts sedan färskt odlingsmedium och resuspenderas försiktigt. Därefter fördelas cellerna i nya kolvar och odlas vid en optimal celltäthet. Cellerna kan delas när de når en maximal celltäthet på 1–2 × 10⁶ celler/ml.
Odlingsmedium:
IMDM (Iscove’s Modified Dulbecco’s Medium) innehållande 10 % FBS, 4,5 g/l glukos, 4 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat och 3,0 g/l NaHCO₃ används för odling av KG-1-celler. Odlingsmediet bör bytas ut efter tre dagar.
Odlingsförhållanden:
KG1-AML-cellinjen odlas i en fuktad inkubator vid 37 °C och med en CO₂-tillförsel på 5 %.
Förvaring:
Frysta celler förvaras i ångfasen av flytande kväve eller vid en temperatur under -150 °C i en elektrisk ultralågtemperaturfrys för att skydda cellernas livskraft.
Frysningsprocess och odlingsmedium:
CM-1 eller CM-ACF är lämpligt för frysning av KG-1-celler. Cellerna fryses med hjälp av en långsam frysningsprocess för att skydda cellerna från chock. Denna metod möjliggör en gradvis temperatursänkning på 1 °C per minut.
Upptining:
Cellerna tinas i ett förvärmt vattenbad vid 37 °C tills endast en liten isklump återstår. De upptinade cellerna tillsätts färskt medium och centrifugeras för att avlägsna komponenter från frysmediet. Cellpelleten resuspenderas försiktigt och hälls över i nya kolvar som innehåller odlingsmedium.
Biosäkerhetsnivå:
Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 är nödvändigt för att upprätthålla KG-1-cellkulturer.
Publicerad: 2023 | Senast granskad: maj 2026
KG-1-cellinjen: Fördelar och begränsningar
Precis som andra cellinjer har även den myeloida leukemicellinjen KG-1 många fördelar och begränsningar. I detta avsnitt kommer vi att gå igenom några av de viktigaste, som kan vara avgörande när du ska besluta om du ska använda den i din forskning.
Fördelar
De främsta fördelarna med KG-1-celler är:
-
Enkel odling
KG-1-celler odlas enkelt i forskningslaboratorier och har okomplicerade krav på cellodling. De enkla skötsel- och odlingsförhållandena gör dem tillgängliga för ett brett spektrum av forskare med grundläggande cellodlingsutrustning.
-
Modell för akut myeloid leukemi (AML)
KG-1 AML-cellinjen, som härstammar från en manlig patient med akut myeloid leukemi (AML), fungerar som ett värdefullt verktyg för att undersöka AML:s biologi och bedriva forskning om potentiella behandlingar, vilket ger insikter i sjukdomens underliggande mekanismer och behandlingsstrategier.
Begränsningar
Begränsningarna förknippade med KG1-cellinjen är:
-
In vitro-modell
KG-1-celler är en värdefull in vitro-modell för AML-forskning; det är dock viktigt att notera att de kanske inte fullt ut återspeglar sjukdomens komplexitet in vivo, utan fungerar som en förenklad cellmodell som kanske inte omfattar alla aspekter av AML-biologin.
Användningsområden för KG-1-celler inom forskning
KG-1 erbjuder flera lovande tillämpningar inom biomedicinsk forskning. Några av de viktiga forskningsområden där KG1-makrofagerna används är:
- Cancerforskning: KG-1-celler härstammar från en patient med akut myeloid leukemi och anses därför vara ett värdefullt forskningsverktyg för att undersöka AML-biologin. Forskare använder dessa celler för att studera de cellulära och molekylära mekanismerna som driver utvecklingen, tillväxten och läkemedelsresistensen vid AML. Detta innefattar även identifiering och upptäckt av nya biomarkörer, genetiska mutationer och signalvägar associerade med AML. I en studie som genomfördes 2019 undersöktes exempelvis att det långa icke-kodande RNA:t linc00239 underlättar doxorubicinresistens och malignt beteende i celler från akut myeloid leukemi, KG-1. Ytterligare studier visade att lncRNA aktiverar PI3K/Akt/mTOR-signalvägen för att utöva dessa effekter i AML-celler [2].
- Toxikologi: KG1-cellinjen används i stor utsträckning inom toxikologisk forskning. Forskare testar toxiciteten och effekten hos potentiella terapeutiska medel, däribland kemoterapeutiska läkemedel och riktade terapier, på KG1-celler för myeloid leukemi för att identifiera lovande läkemedelskandidater för framtida prekliniska och kliniska utvärderingar. I en studie från 2018 analyserades toxiciteten hos doxorubicin-innehållande nano-niosomer på KG1-AML-cellinjen. Studien föreslog att nano-niosomer är en lämplig bärare för läkemedelstillförsel eftersom de förbättrar behandlingens effektivitet [3]. I en annan undersökning utforskade forskarna de terapeutiska effekterna av nässelte framställt av blad från växten Urtica dioica. Studien visade att detta vattenbaserade bladextrakt från växten har antitumöreffekter på celler från akut myeloid leukemi, KG-1 och U937 [4].
Publikationer om KG-1-celler
I detta avsnitt av artikeln listas några intressanta forskningspublikationer om KG-1-celler.
Quercetin sensibiliserar humana myeloida leukemiceller av typen KG-1 mot TRAIL-inducerad apoptos
Denna artikel publicerades i Journal of Cellular Physiology (2019). Studien föreslog att föreningen quercetin sensibiliserar KG1-AML-cellinjen mot den TNF-relaterade apoptosinducerande liganden (TRAIL) och kan förstärka effekten av TRAIL-inducerad cytotoxicitet i cellerna.
Denna artikel i Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) föreslog att nedreglering av krüppel-liknande transkriptionsfaktor 8 hämmar AML-cellernas proliferation och glykolys, vilket främjar apoptos genom att reglera AKT/mTOR-signalvägen.
Effekter av sorafenib och arseniktrioxid på cellinjerna U937 och KG-1: apoptos eller autofagi?
Denna studie i Cell Journal (Yakhteh) (2020) undersökte de potentiella effekterna av arseniktrioxid och sorafenib på U937- och KG-1-celler.
Denna studie, publicerad i Medical Oncology (2020), utvärderade OXPHOS och glykolys som terapeutiska mål i AML-cellinjen KG-1.
I denna artikel i tidskriften Drug Design, Development, and Therapy från 2020 föreslogs att kurkumin och talidomid i kombination synergistiskt utövar apoptotiska effekter i KG-1-celler genom att minska uttrycket av STAT3 och Bcl-xL.
6. Resurser för cellinjen KG-1: protokoll, videor och mer
Här följer några online-resurser om KG-1-celler.
- Subkultivering av suspensionsceller: Denna video beskriver protokollet för subkultivering av suspensionscellkulturer som KG-1.
Följande länk innehåller protokollet för KG-1-cellodling:
- KG-1-cellinjen: Denna webbplats innehåller omfattande grundläggande information om cellodling av KG-1-cellinjen. Den innehåller information om odlingsmedier för cellinjen samt protokoll för subkultivering och hantering av kryokonserverade och proliferativa odlingar.
Referenser
- Pelliccia, F., V. Ubertini och N. Bosco, Vikten av molekylärcytogenetisk analys före användning av cellinjer i forskning: Fallet med leukemicellinjen KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): s. 237–240.
- Yang, Y., et al., Det långa icke-kodande RNA:t linc00239 främjar maligna beteenden och kemoresistens mot doxorubicin delvis genom aktivering av PI3K/Akt/mTOR-signalvägen i celler från akut myeloid leukemi. Oncology Reports, 2019. 41(4): s. 2311–2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Framställning och undersökning av nano-niosomer innehållande doxorubicin samt utvärdering av dess toxicitet på cellinjen KG-1 för akut myeloblastisk leukemi. Payavard Salamat, 2018. 12(4): s. 309–323.
- Hodroj, M.H., et al., Nässelte hämmar tillväxten av celler från akut myeloid leukemi in vitro genom att främja apoptos. Nutrients, 2020. 12(9): s. 2629.