Cellinjen RAW 264.7 inom makrofag- och immunologiforskning

Cellinjen RAW 264.7 fungerar som en robust in vitro-modell för murina makrofager och är av grundläggande betydelse inom immunologisk forskning. Dessa celler härstammar från en hanmus av typen BALB/c och har transformerats av Abelson-leukemiviruset, vilket har resulterat i en makrofagliknande cellinje. Tack vare sin funktionella stabilitet och inneboende förmåga att utföra både fagocytos och pinocytos är RAW 264.7-celler oumbärliga för studier av interaktioner mellan värd och patogen, vilket gör dem till en hörnsten i immunologisk forskning [1,2].

Morfologiska egenskaper och tillväxtbeteende

Vid undersökning uppvisar RAW 264.7-celler en halvvidhäftande tillväxt med en benägenhet att bilda både spindelformade vidhäftande celler och sfäriska, flytande livsdugliga celler, med en celldiameter som varierar mellan 10 och 20 µm. Denna polymorfa karaktär och anpassningsförmåga under odlingsförhållanden gör RAW 264.7-celler till ett mångsidigt verktyg för experimentell manipulation och observation.

Immunologisk funktion och antigenpresentation

Som antigenpresenterande celler spelar RAW 264.7-celler en avgörande roll i immunsystemet. Deras funktion sträcker sig bortom enkel patogenigenkänning till bearbetning och presentation av antigener för T-celler, vilket därmed koordinerar ett omfattande immunsvar. Denna dynamik underlättar en djupare förståelse av hur immunsystemet identifierar och neutraliserar främmande ämnen.

Makrofagpolarisering: M0-, M1- och M2-paradigmet

RAW 264.7-celler har, i sitt basala tillstånd som M0-makrofager, den anmärkningsvärda förmågan att polarisera sig till antingen den proinflammatoriska M1-fenotypen eller den antiinflammatoriska M2-fenotypen. Denna polariseringsförmåga ger forskare en modell för att studera hur olika cytokiner och miljöfaktorer påverkar makrofagernas funktion och immunreaktioner [3,4].

Osteoklastogenes och benombyggnad

Även om RAW 264.7-celler inte själva är osteoklaster har de spelat en avgörande roll i studierna av osteoklastogenes – processen för bildandet av osteoklaster. Dessa celler underlättar undersökningen av osteoklastisk genuttryck och deras respons på receptoraktivering. Denna forskning har stora implikationer för förståelsen av patofysiologin hos tillstånd som osteoporos, där en dysreglerad benombyggnad är ett kännetecken.

Fördelar och nackdelar med RAW 264.7-celler

Fördelar

• Enkel odling: Cellinjen RAW 264.7 är lätt att odla och underhålla i laboratoriet utan några komplicerade krav.
• Välkarakteriserad: RAW 264.7 är en välkarakteriserad cellinje, vilket innebär att den har stabila fenotypiska och funktionella egenskaper.
• In vitro-modell för makrofager: Eftersom RAW 264.7-celler är makrofager uppvisar de viktiga makrofagliknande funktioner såsom fagocytos och pinocytos. Därför används de ofta som en in vitro-modell för makrofager.
• Differentiering till osteoklaster: RAW 264.7-celler kan differentieras till osteoklaster med hjälp av specifika molekylära faktorer. Dessa differentierade celler kan utföra benomvandling, på samma sätt som osteoklaster.

Nackdelar

• Dålig representation av primära makrofager: Eftersom RAW 264.7 är en transformerad cellinje representerar den kanske inte egenskaperna hos primära makrofager exakt och kan uppvisa vissa skillnader i genuttryck, fenotyp och funktion.
• Begränsningar vid läkemedelsscreening: RAW 264.7-celler är kanske inte lämpliga för alla typer av läkemedelsscreening, och deras respons på vissa läkemedel kan skilja sig från primära makrofager.
• Stark celladhesion: RAW 264.7-celler fäster starkt vid odlingsflaskans yta och kan ibland vara svåra att lossa.

Användningsområden för RAW 264.7-celler vid makrofagmimik och immunologiska studier

Modellering av cellulära immunologiska reaktioner

Cellinjen RAW 264.7, som återspeglar de funktioner som äkta makrofager har, är en viktig modell för undersökning av cellers reaktioner på patogener och immunologiska stimuli. En studie som belyser denna aspekt utvärderade de immunmodulerande och antioxidativa effekterna av värmedödade mjölksyrabakterier på dessa celler, vilket gav viktiga rön om regleringen av immunsystemet [5 ].

Som komplement till detta belyser forskning som genomfördes 2019 den immunologiska effekten av att RAW 264.7-celler utsätts för polysackarider från växten Polygonatum sibiricum. Studien drog slutsatsen att dessa föreningar utlöser ett immunsvar genom aktivering av NF-κB/MAPK-signalvägarna, vilket ger en djup molekylär förståelse [6].

Undersökning av osteoklastogenes

RAW 264.7-celler fungerar som en surrogatmodell för studier av osteoklastdifferentiering och bidrar till att belysa osteoklasternas beteende och differentieringsvägar. Sådan forskning utvidgar vår kunskap om mekanismerna bakom benresorption och osteoporosens patogenes. Avancerade avbildningstekniker används ofta för att övervaka intracellulära förändringar och analysera hemmetabolismen i dessa celler.

Att få molekylära insikter i osteoklastogenes

Trots sin primära roll som makrofagmodell används RAW 264.7-celler även för in vitro-forskning om osteoklastogenes. Genom att framkalla osteoklastliknande egenskaper i dessa celler får forskarna insikt i differentieringsprocessen och pre-osteoklasternas beteende, även om det är avgörande att beakta cellinjenas inneboende egenskaper och ursprung i dessa studier.

Screening av naturprodukters bioaktivitet

Screening av bioaktivitet i naturprodukter är ett annat tillämpningsområde där RAW 264.7-celler utmärker sig. Till exempel visade deras användning i en koreansk studie som undersökte de immunstimulerande egenskaperna hos en örtblandning cellinjen effektivitet när det gäller att identifiera bioaktiva föreningar i naturliga ämnen [7 ].

Bli en pionjär inom din forskning med våra RAW 264.7-celler

Forskningspublikationer som använder RAW 264.7-celler

Det finns många forskningspublikationer om musmakrofagcellinjen RAW 264.7:

• Polysackarider från Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute inducerar ett immunsvar i cellinjen RAW 264.7 via en NF-κB/MAPK-signalväg: Denna studie föreslog att polysackarider utvunna ur växten Polygonatum sibiricum kan utlösa en immunrespons i musmakrofagcellinjen RAW 264.7 genom att reglera NF-κB/MAPK-signalkaskaden.
• Immunmodulerande effekter av extrakt från Tinospora crispa och dess huvudsakliga beståndsdelar på immunfunktionerna hos RAW 264.7-makrofager: Denna artikel, publicerad i tidskriften International Immunopharmacology, beskriver att växtextrakt från Tinospora crispa och dess huvudsakliga beståndsdelar har en immunmodulerande och immunstimulerande effekt på makrofagcellinjen RAW 264.7.
• Värmedödade mjölksyrabakterier hämmar produktionen av kväveoxid via inducerbar kväveoxidsyntas och cyklooxygenas-2 i RAW 264.7-celler: I denna studie föreslogs att värmedödade mjölksyrabakterier potentiellt kan användas vid framställning av probiotiska produkter eftersom de har immunmodulerande och antioxidativa egenskaper. Forskarna använde RAW 264.7-celler för att studera dessa biologiska aktiviteter.
• Effekt av en örtberedning på förstärkning av immunresponsen i RAW 264.7-makrofager: I denna studie användes RAW 264.7-celler för att undersöka den immunstimulerande effekten av en örtberedning med namnet KM1608. Studien pekade på KM1608 som ett potentiellt medel för att förstärka immunresponsen.
• En undersökning av växter som används i traditionell colombiansk medicin avslöjade den antiinflammatoriska potentialen hos Physalis angulata-kalkar: Denna artikel, publicerad i Saudi Journal of Biological Sciences, undersökte den antiinflammatoriska potentialen hos 10 vanligt förekommande traditionella colombianska växter med hjälp av LPS-stimulerade RAW 264.7-celler.

RAW 264.7-celler: Resurser, protokoll, videor och mer

RAW 264.7-celler används ofta i transfektionsstudier. Följande resurser beskriver olika transfektionsmetoder som används för cellinjen RAW 264.7.

• Transfektion av RAW 264.7-celler: Denna webbplats tillhandahåller ett protokoll för transfektion av RAW 264.7-makrofager med hjälp av ett lipofectamin-reagens.
• Transfektionsprotokoll: Denna publicerade artikel beskriver ett detaljerat protokoll för transfektion av RAW 264.7-celler.
• Effektiv transfektionsmetod för RAW 264.7-celler: Detta dokument beskriver en annan praktisk transfektionsmetod med RAW 264.7-celler.

Videor relaterade till cellinjen RAW 264.7

• Odling av RAW 264.7-celler: Denna video förklarar protokollet för passagering av RAW 264.7-celler.
• Transfektionsmetod: Denna video handlar om transfektion av RAW 264.7-celler med ett reportergen.

Viktiga vanliga frågor om cellinjen RAW 264.7: Insikter i forskning om makrofagmimik och osteoklastogenes

Referenser

1. Taciak, B., et al., Utvärdering av fenotypisk och funktionell stabilitet hos cellinjen RAW 264.7 genom seriella passager. PloS one, 2018. 13(6): s. e0198943.
2. Wang, S., et al., Inflammatoriska makrofager avbryter osteocyternas mognad och mineralisering genom att reglera Notch-signalvägen. Molecular Medicine, 2022. 28(1): s. 102.
3. Orekhov, A.N., et al., Monocytdifferentiering och makrofagpolarisering. Vessel Plus, 2019. 3: s. 10.
4. Khabipov, A., m.fl., Polarisering av RAW 264.7-makrofager av bukspottkörtelcancerceller – en modell för att studera tumörfrämjande makrofager. Anticancer Research, 2019. 39(6): s. 2871–2882.
5. Kang, C.-H., et al., Värmedödade mjölksyrabakterier hämmar produktionen av kväveoxid via inducerbar kväveoxidsyntas och cyklooxygenas-2 i RAW 264.7-celler. Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021. 13(6): s. 1530–1538.
6. Zhang, J., et al., Polysackarider från Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute inducerar ett immunsvar i cellinjen RAW264.7 via en NF-κB/MAPK-signalväg. RSC Advances, 2019. 9(31): s. 17988–17994.
7. Trinh, T.A., et al., Effekten av en örtbaserad formulering på förstärkningen av immunresponsen i RAW 264.7-makrofager. Biomolecules, 2020. 10(3): s. 424.