P19-celler – Forskning om embryonalt karcinom med hjälp av P19-celler
P19 är en cellinje från embryonalt karcinom hos möss. Den används i stor utsträckning inom biomedicinsk forskning, främst för att studera utvecklingsbiologi, stamcellsbiologi, celldifferentiering och läkemedelsscreening. Eftersom P19-celler har differentieringsförmåga kan de vara användbara vid undersökning av komplexa biologiska processer såsom vävnadsbildning och tidig embryonal utveckling. I denna artikel kommer vi att diskutera grunderna för P19-celler från mus.
- Odlingsmedium
- DMEM/Ham's F12-medium innehållande 5 % fetalt bovint serum, 3,1 g/l glukos, 1,6 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat, 15 mM HEPES och 1,2 g/l NaHCO₃ används för odling av P19-celler.
- Fördubblingstid
- Den rapporterade fördubblingstiden för cellinjen P19 är cirka 2 till 3 dagar.
- Tillväxtform
- Den embryonala karcinomcellinjen P19 är vidhäftande.
- Biosäkerhetsnivå
- BSL-1
- Finns att beställa från
- Cytion — Beställ P19
- Allmänna egenskaper och ursprung för P19-celler
- Odlingsinformation om P19-celler
- P19-cellinjen: Fördelar och nackdelar
- Forskningsanvändningar av P19-celler
- Köp din P19-cellinje idag
- P19-celler: Forskningspublikationer
- Resurser för P19-cellinjen: protokoll, videor och mer
- Utforska P19-cellinjen: Vanliga frågor
- Referenser
- Vanliga frågor
Allmänna egenskaper och ursprung för P19-celler
Det är viktigt att känna till en cellinjes allmänna egenskaper och ursprung innan man börjar arbeta med den. I detta avsnitt behandlas följande: Vad är P19-cellinjen? Hur stor är en P19-cell? Vad är P19-cellernas ursprung?
- P19 är en typ av pluripotenta embryonala karcinomceller som ursprungligen erhölls från ett teratokarcinom som utvecklats hos en C3H/He-mus. Cellinjen etablerades först 1982 av McBurney och Rogers.
- P19-celler kan växa kontinuerligt i ett odlingsmedium som är berikat med serum. De kan differentieras till andra celltyper när de utsätts för icke-toxiska läkemedel såsom retinsyra och dimetylsulfoxid (DMSO) [1].
- Dessa muskarcinomceller har en epitelial liknande morfologi.
- P19-cellinjen har en euploid manlig karyotyp (n=40; XY).
Information om odling av P19-celler
P19-cellinjen odlas i stor utsträckning i forskningslaboratorier tack vare sina unika egenskaper. Odlingen är enkel och hanterbar. I detta avsnitt har vi samlat all viktig information du behöver för att underhålla och odla P19-cellkulturer. Vi kommer att ta reda på: Vad är fördubblingstiden för P19-celler? Hur odlar man P19-cellinjen? Är P19 en vidhäftande cellinje?
Viktiga punkter för odling av P19-celler
Fördubblingstid:
Den rapporterade fördubblingstiden för P19-cellinjen är cirka 2 till 3 dagar.
Adhererande eller i suspension:
Den embryonala karcinomcellinjen P19 är vidhäftande.
Subkultureringsförhållande:
P19-celler bör subkultiveras var 48:e timme, och en delningsförhållande på 1:10 bör upprätthållas för dessa celler. Adhärenta celler tvättas med 1 X fosfatbuffrad saltlösning och inkuberas med Accutase tills cellerna dissocierar. Cellerna tillsätts odlingsmedium och skördas genom centrifugering. De uppsamlade cellerna resuspenderas försiktigt och fördelas i nya kolvar.
Tillväxtmedium:
DMEM/Ham's F12-medium innehållande 5 % fetalt bovint serum, 3,1 g/l glukos, 1,6 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat, 15 mM HEPES och 1,2 g/l NaHCO₃ används för odling av P19-celler.
Odlingsförhållanden:
En befuktad inkubator inställd på 37 °C med en CO₂-tillförsel på 5 % är nödvändig för odling av den embryonala karcinomcellinjen P19.
Förvaring:
Frysta P19-cellampuller bör förvaras vid en temperatur under -150 °C i en frys eller i flytande kväves ångfas för att bibehålla cellernas livskraft på längre sikt.
Frysningsprocess och medium:
CM-1- eller CM-ACF-medier kan användas för att frysa P19-celler med hjälp av en långsam frysningsmetod som skyddar cellerna från chock och bevarar deras livskraft.
Upptining:
Frysta P19-celler kan tinas i ett vattenbad vid 37 °C genom att flaskan skakas kraftigt i 40 till 60 sekunder. Cellerna tillsätts färskt medium och centrifugeras för att avlägsna frysmediets beståndsdelar. Cellpaletten resuspenderas på nytt och cellerna hälls över i en ny kolv för odling.
Biosäkerhetsnivå:
Laboratoriemiljöer med biosäkerhetsnivå 1 krävs för P19-cellinjen.
P19-cellinjen: Fördelar och nackdelar
I detta avsnitt kommer vi att diskutera fördelarna och nackdelarna med P19-cellinjen.
Fördelar
- Differentieringspotential: P19-celler kan differentieras till olika celltyper, däribland kardiomyocyter, neuroner och mikroglia. För differentieringen krävs icke-toxiska läkemedel, såsom retinsyra och dimetylsulfoxid (DMSO). Retinsyra inducerar utvecklingen av neuroner, mikroglia och astroglia, medan DMSO initierar utvecklingen av pulserande kardiomyocyter och glatta muskelceller. P19-celler är därför användbara för att studera celldifferentiering och utvecklingsprocesser.
- Modellsystem: Den pluripotenta embryonala karcinomcellinjen P19 är en värdefull modell för att studera tidig embryonal utveckling. Forskare använder P19-celler för att belysa cellsignaleringsvägar samt de cellulära och molekylära mekanismer som är involverade i dessa processer.
Nackdelar
- Musursprung: P19 är en embryonal karcinomcellinje från mus. Följaktligen kan resultaten från studier som använder dessa celler kanske inte helt överföras till mänsklig biologi och mänskliga processer.
Forskningsmässiga tillämpningar av P19-celler
P19-celler har flera forskningsmässiga tillämpningar tack vare sin differentieringsförmåga och relevans för utvecklingsbiologi och stamcellsforskning. Några av de viktiga forskningsmässiga tillämpningarna av P19-embryonala karcinomceller är:
- Studier av celldifferentiering: Som vi vet kan P19-celler differentieras till neuroner, mikroglia, glatta muskelceller och kardiomyocyter; de används därför i stor utsträckning för att studera celldifferentieringsprocesser. Dessutom underlättar de forskning om nerv- och hjärtutveckling samt de underliggande mekanismerna. En studie som genomfördes 2018 visade att reaktiva syreföreningar (ROS) styr differentieringen av P19-celler till specifika celltyper och förhindrar induktionen av andra [3]. En annan studie undersökte den retinsyramedierade nervdifferentieringsprocessen och fann att signalvägen PI3K/Akt/GSK3β var inblandad [4].
- Utvecklingsbiologi: P19-celler är en ovärderlig modell för att studera tidig embryonal utveckling. De hjälper forskare att förstå komplexa biologiska processer, såsom vävnadsbildning under embryoutvecklingen. I forskningen användes P19-celler för att studera molekylära faktorer som bidrar till bildandet av ventrikelseptumdefekt (VSD). Resultaten visade att ett långt icke-kodande RNA, SNHG6, bidrar till VSD genom att negativt reglera miRNA-101 och aktivera Wnt/β-katenin-signalvägen [5].
- Läkemedelsprövning: Den embryonala karcinomcellinjen P19 från mus används även för att screena potentiella läkemedelskandidater. I en studie användes differentierade P19-cellneuroner för att undersöka de neuroprotektiva, acetylkolinesterashämmande effekterna av syntetisk L-Dopa och vattenextrakt från Mucuna pruriens-frön. Resultaten visade att växtextraktet uppvisade lovande resultat jämfört med L-Dopa [6].
Köp din P19-cellinje redan idag
P19-celler: Forskningspublikationer
I detta avsnitt av artikeln kommer vi att ta upp några intressanta forskningspublikationer som handlar om P19-celler.
Denna artikel publicerades i Oncology Reports 2017. Studien föreslog att könshormoner från hypofysen driver vidhäftning, proliferation och migration hos teratokarcinomcellinjer, inklusive P19-celler.
Det långa icke-kodande RNA:t uc.4 påverkar celldifferentieringen via TGF-beta-signalvägen
I denna publikation i tidskriften Experimental & Molecular Medicine (2018) användes P19-celler för att studera funktionen hos det långa icke-kodande RNA:t uc.4. Resultaten visade att uc.4 påverkar celldifferentieringen genom att modulera TGF-beta-signalvägen.
Denna forskningsartikel publicerades 2018 i tidskriften Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. Studien visade att naturligt hjärnvävnadsextrakt och 3D-cellodling kan påskynda differentieringen av P19-embryonala karcinomceller till nervceller.
Denna studie publicerades i Journal of Ethnopharmacology år 2020. Studien föreslog att bladsextrakt från Cichorium intybus L. kan inducera differentiering av P19-embryonala karcinomceller till insulinproducerande β-celler i bukspottkörteln.
Denna forskning publicerades i Molecules (2022). Studien undersökte de neuroprotektiva och acetylkolinesterashämmande effekterna av Mucuna pruriens-fröextrakt på P19-cellneuroner.
Resurser för P19-cellinjen: protokoll, videor och mer
Här följer några resurser om P19-celler.
- Protokoll för neuronal differentiering av P19-celler: Denna artikel innehåller ett protokoll för neuronal differentiering av P19-celler samt annan användbar information om differentiering av P19-celler.
- Transfektion av P19-celler: Denna länk hjälper dig att lära dig protokollet för transfektion av P19-celler.
Följande länk innehåller odlingsprotokollet för P19-celler.
- P19-celler: Denna webbplats innehåller all användbar information om P19-cellinjen, inklusive odlingsförhållanden, odlingsmedier för P19-celler, celldelning och mycket mer.
Utforska P19-cellinjen: Ofta ställda frågor
Referenser
- McBurney, M.W., P19-embryonala karcinomceller. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): s. 135–40.
- Bressler, J., et al., P19-embryonala karcinomcellinjen: en modell för att studera interaktioner mellan gener och miljö. Cell Culture Techniques, 2011: s. 223–240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey och G. Rödel, Mitokondriella ROS styr differentieringen av pluripotenta P19-celler från möss. Stem Cell Research, 2018. 30: s. 180–191.
- Fu, F., m.fl., All-trans-retinsyra inducerar differentieringen av P19-celler till nervceller som är involverade i PI3K/Akt/GSK3β-signalvägen. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): s. 4386–4396.
- Jiang, Y., et al., Långt icke-kodande RNA SNHG6 bidrar till bildandet av ventrikelseptumdefekt genom negativ reglering av miR-101 och aktivering av Wnt/β-katenin-signalvägen. Die Pharmazie – An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2019. 74(1): s. 23–28.
- Kamkaen, N., et al., Vattenextrakt från Mucuna pruriens-frön förbättrade de neuroprotektiva och acetylkolinesterashämmande effekterna jämfört med syntetisk L-dopa. Molecules, 2022. 27(10): s. 3131.