U87MG-celler – Forskning om glioblastom med hjälp av U87MG och dess betydelse för studier av hjärncancer
U-87 MG, den humana primära glioblastomcellinjen, används i stor utsträckning inom biologisk forskning. Dessa celler används särskilt inom neurovetenskap och immunonkologi.
- Odlingsmedium
- U-87 MG-cellinjen odlas i EMEM (Eagle's minimal essential medium) berikat med 1,0 g/L L-glukos, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natriumpyruvat och 10 % FBS-lösning. Mediet bör bytas ut var 2–3 dagar.
- Fördubblingstid
- U 87 MG-celler har en fördubblingstid på mellan 18 och 38 timmar.
- Tillväxtform
- U 87 MG är en vidhäftande cellinje. Cellerna har en avlång form och växer som monoskikt.
- Biosäkerhetsnivå
- BSL-1
- Finns att beställa från
- Cytion — Beställ U-87 MG
- Allmänna egenskaper och ursprung för cellinjen U-87 MG
- Information om odling av U-87 MG-celler
- Fördelar och nackdelar med U-87 MG-celler
- Forskningsapplikationer med U-87 MG-celler
- Beställ din U-87 MG-gliomcellinje idag
- U-87 MG-cellinjen: Forskningspublikationer
- Resurser för U-87 MG-celler: protokoll, videor och mer
- Insikter i U-87 MG-gliomforskning: Vanliga frågor
- Referenser
- Vanliga frågor
Allmänna egenskaper och ursprung för cellinjen U-87 MG
I detta avsnitt går vi igenom ursprunget och de allmänna egenskaperna hos cellinjen U87. Du kommer att lära dig: Vad är U-87 MG-celler? Varifrån kommer U87-cellen? Vad står U-87 MG för? Hur stora är U87-cellerna? Hur ser cellinjen U87 ut morfologiskt?
- U87-cellinjen är en glioblastom- och astrocytomcellinje. Den etablerades 1966 vid Uppsala universitet. Cellerna erhölls från en 44-årig kaukasisk man som led av glioblastom. Denna cellinje kallas formellt U 87 MG, vilket står för Uppsala 87 Malignant Glioma.
- U 87 MG-cellerna uppvisar en epitelcellsliknande morfologi.
- Storleken på U 87 MG-cellerna varierar mellan 12 och 14 µm i diameter.
- Denna humana glioblastomcellinje är hypodiploid och har ett modalt kromosomantal på 44 hos cirka 48 % av cellpopulationen. Högre ploidier förekommer dock också hos 5,9 % av cellpopulationen.
Information om odling av U-87 MG-celler
Innan du arbetar med U 87 MG-celler bör du sätta dig in i följande viktiga punkter för odling av dessa glioblastomceller. Framför allt bör du veta: Vad är populationens fördubblingstid för U 87 MG-celler? Vilka odlingsmedier används för odling av U87-celler? Vad är utsädesdensiteten för cellinjen U-87 MG?
Viktiga punkter för odling av U-87 MG-celler
Populationsfördubblingstid:
U 87 MG-celler har en fördubblingstid på mellan 18 och 38 timmar.
Adhärenta eller i suspension:
U 87 MG är en vidhäftande cellinje. Cellerna har en avlång form och växer som monoskikt.
Utsåddstäthet:
För glioblastomcellinjen U 87 MG rekommenderas en utsädesdensitet på 1 × 10⁴ celler/cm². Adhärenta U87-celler tvättas med 1× PBS och inkuberas med Accutase-lösning. Därefter centrifugeras de dissocierade cellerna och återvinns. Cellerna resuspenderas försiktigt och tillsätts i nya kolvar som innehåller odlingsmedium.
Odlingsmedium:
Cellinjen U 87 MG odlas i EMEM (Eagle's minimal essential medium) berikat med 1,0 g/L L-glukos, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natriumpyruvat och 10 % FBS-lösning. Mediet bör bytas ut var 2:a till 3:e dag.
Odlingsförhållanden:
U-87 MG-celler kräver en fuktad inkubator med 5 % CO₂-tillförsel och en temperatur på 37 °C för optimal tillväxt.
Förvaring:
U87-cellerna förvaras antingen i ångfasen av flytande kväve eller vid en temperatur under -150 °C för att upprätthålla maximal livskraft hos glioblastomcellerna.
Frysningsprocess och medium:
Frysmedierna CM-1 eller CM-ACF är lämpliga för frysning av U87 MG-celler. En långsam frysningsprocess rekommenderas eftersom den förhindrar att cellerna utsätts för chock och skyddar cellernas livskraft.
Upptining:
Frysta ampuller med U-87 MG-cellinjen tinas i ett vattenbad vid 37 °C. Cellerna tillsätts till odlingsmedium, resuspenderas och överförs till nya kolvar för odling. Alternativt kan U87-cellerna centrifugeras för att avlägsna frysmediet och därefter odlas.
Biosäkerhetsnivå:
Biosäkerhetsnivå 1 krävs för hantering av U 87 MG-cellkulturer.
Fördelar och nackdelar med U-87 MG-celler
När vi tänker på en cellinje är det första som slår oss: Vilka är fördelarna med att använda U-87 MG-celler? Vilka är nackdelarna med U-87-celler?
Fördelar
U-87 MG-cellinjer används i stor utsträckning inom forskningen. Några fördelar med denna cellinje är:
Fördelar
- Lätta att odla: U-87 MG-celler är lätta att hålla i odling. De ställer inga krångliga eller komplicerade krav på cellodling.
- Homogenitet: U-87 MG är en homogen cellinje. De flesta cellerna i en population har samma genetiska sammansättning och delar därför liknande egenskaper. Dessa celler används för att studera cellprocesser, läkemedelsscreening och testning.
- Välkarakteriserad: Denna glioblastomcellinje är välkarakteriserad vad gäller tillväxtegenskaper, morfologi och genuttryck, vilket gör den till ett värdefullt forskningsverktyg.
Nackdelar
- Begränsad tillämpbarhet: U-87 MG är en glioblastomcellinje, vilket innebär att dess tillämpningar i första hand är begränsade till studier av glioblastom och underliggande molekylära mekanismer. Den är kanske inte lämplig för att undersöka andra cancerformer.
Forskningsapplikationer med U-87 MG-celler
Glioblastomcellinjen U87MG används i stor utsträckning i cancerstudier, särskilt inom glioblastomforskning. Några av forskningsanvändningarna av U 87 MG-celler är:
- Forskning inom cancerbiologi: U87-cellinjen används för att studera cancertillväxt och -utveckling, underliggande molekylära mekanismer, signalvägar och tumörens mikromiljö. I en studie som publicerades 2020 användes en in vitro-modell för glioblastom, cellinjen U-87 MG, för att undersöka BMAL1-genen (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) som ett terapeutiskt mål. Resultaten visade att BMAL1-genen hämmar glioblastomcellernas proliferation, migration och invasion genom att undertrycka genuttrycket av cyklin B1, metalloproteinas-9 och fosfo-AKT [1]. I en annan studie som genomfördes 2019 användes cellinjen U87 för att undersöka hur en nedreglerad expression av transkriptionsfaktorn LITAF (Lipopolysaccharide-induced tumour necrosis factor-alpha factor) kan öka gliomcellernas strålkänslighet genom uppreglering av FOXO-1-signalvägen. LITAF är även känt som p53-inducerat gen 7 (PIG7) [2].
- Läkemedelsupptäckt och -utveckling: U-87 MG-celler kan användas för läkemedelsscreening och testning, vilket gör det möjligt för forskare att identifiera nya potentiella läkemedel mot cancer och bedöma deras effekt och toxicitet. I en studie användes U87MG-glioblastomcellinjen för att utvärdera den cancerhämmande och antioxidativa potentialen hos Inula helenium (L.)-extrakt [3]. På samma sätt nämndes i en annan publikation användningen av U87-cellinjen för att testa den cytotoxiska och apoptotiska effekten av växtextrakt [4]. Dessutom studerade en studie publicerad 2018 den cytotoxiska effekten av sesquiterpenalkaloider extraherade från Nuphar-växter på känsliga och läkemedelsresistenta U-87-MG-cellinjer [5].
Beställ din U87 MG-gliomcellinje redan idag
U-87 MG-cellinjen: Forskningspublikationer
Här följer några framstående forskningspublikationer som behandlar cellinjen U 87 MG.
Denna artikel, publicerad i Neuroreport 2018, föreslog att hypoxi skulle kunna öka migrationen och invasionen hos humana glioblastomceller genom att reglera PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signalvägen.
Denna studie publicerades i tidskriften Frontiers in Pharmacology 2020. Forskningsresultaten visar att flavonoiden Eriodictyol har anticancereffekter på cellinjen U87 och hämmar cellproliferation och metastasering. Föreningen utövar sina antitumöregenskaper genom att modulera PI3K/Akt/NF-κB-signalvägen.
Denna studie, publicerad i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), tyder på att en kinesisk örtblandning kallad Xihuang-piller kan framkalla apoptos i U87-celler genom att rikta in sig på den ROS-aktiverade Akt/mTOR/FOXO1-signalkaskaden.
LITAF ökar strålkänsligheten hos humana gliomceller via FoxO1-signalvägen
Denna forskningsartikel publicerades i tidskriften *Cellular and Molecular Neurobiology* år 2019. Studien föreslog att en transkriptionsfaktor, LITAF, nedreglerar och ökar strålkänsligheten hos gliomceller genom att reglera FOXO-1-signalvägen.
Denna artikel publicerades i tidskriften *Biointerface Research in Applied Chemistry* (2019). Forskarna använde U87MG-celler för att undersöka den cytotoxiska effekten av kurkuminladdade PLGA-nanopartiklar.
Resurser för U-87 MG-celler: protokoll, videor och mer
Glioblastomcellinjen U87MG används i många laboratorier för cancerforskning. Några resurser som behandlar denna cellinje är:
- Transfektion av U87-cellinjen: Detta dokument beskriver ett transfektionsprotokoll för U87MG-celler.
- Transfektion av cellinjen U 87 MG: Denna video är en handledning som steg för steg förklarar transfektionsprotokollet för U87-celler.
Resursen för cellodlingsprotokollet för U87-celler finns listad nedan:
- U87MG-celler: Denna länk innehåller grundläggande information om cellinjen U87MG. Den innehåller kortfattade protokoll för celldelning, frysning och upptining av celler.
Insikter i U87 MG Glioma-forskning: Ofta ställda frågor
Gliomcellinjer, t.ex. U87 glioblastomceller, är odlade celler från mänskliga gliom som används flitigt inom cancerforskning för att studera tumörbiologi, genetik och läkemedelsrespons. De fungerar som modeller för att förstå tumörbeteende och testa terapeutiska strategier.
En isogen cellinje är celler som härrör från en enda cell, vilket säkerställer genetisk enhetlighet. Inom gliomforskningen ger isogena linjer en konsekvent modell för att studera genetiska förändringar och deras inverkan på tumörtillväxt och svar på behandlingar.
DNA-profilen för gliomcellinjer är avgörande för att identifiera genetiska förändringar, förstå tumörutvecklingen och utveckla riktade behandlingar. Den underlättar klassificeringen av tumörer baserat på genetiska markörer som IDH1-mutationer.
Serum i cellodlingsmedier ger gliomcellerna viktiga tillväxtfaktorer, hormoner och näringsämnen. Dess sammansättning kan dock påverka experimentens reproducerbarhet, vilket är anledningen till att serumfria eller definierade serumbetingelser används i allt större utsträckning.
Cellcytotoxicitet i gliomcellinjer bedöms med hjälp av analyser som flödescytometri, som mäter cellernas hälsa, livskraft och död efter behandling med läkemedel eller immunceller som NK-celler (natural killer).
NK-cellscytotoxicitet spelar en avgörande roll i forskningen om gliombehandling eftersom NK-celler kan känna igen och döda tumörceller utan föregående sensibilisering. Genom att studera NK-cellers interaktioner med gliomceller kan man utveckla strategier för att förbättra NK-cellsmedierad tumörborttagning.
Ursprungstumören ger information om den ursprungliga biologiska miljön och tumörens egenskaper. Förståelse för detta hjälper till att korrelera resultat från cellinjestudier med faktiskt tumörbeteende och patientprognos.
Elektronmikroskopi ger detaljerad visualisering av cellulära och subcellulära strukturer i gliomcellinjer, vilket är avgörande för att undersöka cellmorfologi, organellers hälsa och förändringar efter behandlingar.
NKG2D-liganden uttrycks på tumörceller och binder till NKG2D-receptorn på NK-celler, vilket utlöser ett cytotoxiskt svar. Att studera denna interaktion bidrar till att förstå och potentiellt förbättra immunsvaret mot gliom.
3D-cellodlingsmodeller efterliknar tumörens mikromiljö på ett mer exakt sätt, vilket ger bättre insikter i gliomens tillväxt, migration och läkemedelsresistens. Denna teknik är avgörande för mer relevanta translationella onkologistudier.
Referenser
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 hämmar proliferation, migration och invasion av U87MG-celler genom att nedreglera cyklin B1, fosfo-AKT och metalloproteinas-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF ökar strålkänsligheten hos humana gliomceller via FoxO1-signalvägen. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): s. 871–882.
- Koc, K., et al., Antioxidant- och anticanceraktiviteter hos extrakt av Inula helenium (L.) i den humana glioblastomcellinjen U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): s. 658–661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh och A. Ghasempour, Cytotoxicitet och induktion av apoptos i bröstcancer-, hudcancer- och glioblastomceller genom växtextrakt. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): s. 5131–5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoxicitet hos sesquiterpenalkaloider från Nuphar-växter mot känsliga och läkemedelsresistenta cellinjer. Food Funct, 2018. 9(12): s. 6279–6286.