BEWO-cellinjen
BeWo är en cellinje som härstammar från humant koriokarcinom och som används flitigt inom biomedicinsk forskning. Den fungerar som en värdefull in vitro-modell för att utforska den komplexa processen för placentautveckling och syncytialisering av humana trofoblaster. Forskare använder också dessa celler för att studera trofoblastcellers beteende, hormonproduktion och substanstransport över moderkakan. Dessutom har BeWo-celler även tillämpningar inom toxikologi, infektioner och studier av sjukdomsöverföring.
Denna artikel omfattar grundläggande kunskap om BeWo-cellerna som kan hjälpa dig att hantera dem i din forskning. Den kommer att innehålla:
- Allmänna egenskaper och ursprung för BeWo-celler
- BeWo-cellinjen: Information om odling
- Fördelar och nackdelar med BeWo-cellinjen
- Forskningsmässiga tillämpningar av BeWo-celler
- Forskningspublikationer om BeWo-celler
- Resurser för BeWo-cellinjen: protokoll, videor och mer
Allmänna egenskaper och ursprung för BeWo-celler
Förkunskaper om en cellinjes ursprung och allmänna egenskaper är avgörande för dess användning i din forskning. Denna del av artikeln utforskar BeWo-cellinjen ursprung, karakteristiska egenskaper och mycket mer. Här kommer du att lära dig: Vad är BeWo-koriocarcinomcellinjen? Vad är BeWo-syncytialisering? Varifrån kommer BeWo-celler? Vad är BeWo-cellernas morfologi? Vad är BeWo-cellernas ploidi?
- Placentacellinjen BeWo har sitt ursprung i ett malignt gestationskoriocarcinom från en manlig fosterplacenta år 1968 [1]. Den fungerar därför som en ovärderlig modell för placentaforskning.
- BeWo-celler uppvisar en epitelial liknande morfologi.
- BeWo-celler är relativt små och varierar mellan 20 och 30 µm [2].
- BeWo-celler uppvisar en stabil karyotyp. Deras stamlinjeantal är hypotetraploid. Det modala kromosomantalet för BeWo-celler är 86. Det kan variera mellan 71 och 178.
- BeWo-celler producerar flera hormoner, t.ex. humant korioniskt somatomammotropin, humant korioniskt gonadotropin (hCG) och steroidhormoner.
- BeWo-celler uttrycker molekylära markörer, inklusive CK 7, E-kadherin och VE-kadherin.
B30-sublinjen
B30 är en sublinje av BeWo-celler. Den används för att undersöka upptag och transport av näringsämnen. Detta beror på deras kraftiga tillväxt på porösa membran.
BeWo och JEG-3
BeWo- och JEG-3-cellinjer härstammar från koriokarcinom och används i placentaforskning. BeWo-celler producerar hormoner i lägre nivåer än JEG-3, såsom humant koriongonadotropin (hCG) och östradiol.
BeWo-cellinjen: Information om odling
Det kan vara svårt att underhålla en cellodling om man inte känner till viktiga detaljer. Till exempel: Vad är fördubblingstiden för BeWo? Vad är BeWo-cellmedium? Hur odlar man BeWo-cellinjen? Och hur fryser man in BeWo-celler?
Viktiga punkter för odling av BeWo-celler
Fördubblingstid:
Fördubblingstiden för BeWo-cellerna är cirka 30 timmar.
Adherenta eller i suspension:
BeWo är en vidhäftande cellinje.
Cellutsåddstäthet:
Den rekommenderade utsädesdensiteten för BeWo-celler är 1 x 10⁴ celler/cm². Vid utsäde avlägsnas gammalt odlingsmedium från cellerna, och cellerna sköljs med 1x PBS. Därefter tillsätts Accutase (passageringslösning) och cellerna inkuberas i 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Därefter tillsätts odlingsmedium till de lossnade cellerna och centrifugeras. De skördade cellerna resuspenderas sedan och hälls över i en ny kolv.
Odlingsmedium:
Ham's F12K-medium innehållande 10 % FBS, 2,0 mM L-glutamin, 2,0 mM natriumpyruvat och 2,5 g/L NaHCO₃ används för odling av BeWo-celler. BeWo-cellmediet bör bytas ut 2 till 3 gånger per vecka.
Odlingsförhållanden:
BeWo-celler odlas i en befuktad inkubator inställd på 37 grader Celsius och med en CO₂-tillförsel på 5 %.
Förvaring:
Frysta BeWo-celler förvaras vid temperaturer under -150 °C i en elektrisk ultralågtemperaturfrys eller i ångfasen av flytande kväve.
Frysningsprocess och medium:
Det rekommenderas att BeWo-celler fryses i frysmediet CM-1 eller CM-ACF. Cellerna fryses med en metod för långsam frysning. Denna metod tillåter endast en temperatursänkning på 1 grad per minut, vilket förhindrar att cellerna utsätts för chock och skyddar cellernas livskraft.
Upptining:
Frysta celler tinas genom att de sänks ned i ett förinställt vattenbad vid 37 °C i 40 till 60 sekunder tills endast en liten isklump återstår. Därefter tillsätts färskt odlingsmedium och cellerna centrifugeras för att avlägsna komponenterna i frysmediet. Den uppsamlade cellpelleten resuspenderas och överförs till en odlingskolv för odling.
Biosäkerhetsnivå:
Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 krävs för hantering och underhåll av BeWo-cellkulturer.
Publicerad: 2023 | Senast granskad: maj 2026
Fördelar och nackdelar med BeWo-cellinjen
BeWo-celler uppvisar unika egenskaper och har specifika för- och nackdelar. I detta avsnitt kommer vi att undersöka några av de mest anmärkningsvärda.
Fördelar
De främsta fördelarna med BeWo-cellinjen för koriokarcinom är:
-
In vitro-modell för placentaceller
BeWo-celler utgör en in vitro-modell för att studera trofoblastcellers beteende och syncytiation i placentan, vilket gör det möjligt att replikera processer som är svåra att observera in vivo.
-
Hormonproduktion
BeWo-celler utsöndrar hormoner, såsom hCG och placentalaktogen, vilket gör dem värdefulla för studier av hormonreglering och forskning inom reproduktionsbiologi.
Nackdelar
Nackdelarna med BeWo-trofoblastceller är:
-
Cancercellinje
BeWo-celler härstammar från koriokarcinom, vilket är en placentatumör. Detta ursprung representerar kanske inte helt den normala placentacellfunktionen.
Forskningsanvändningar av BeWo-celler
BeWo-cellinjen används i stor utsträckning inom placentaforskning. Här nämns några specifika tillämpningar av denna cellinje:
- Forskning om moderkakan och graviditet: BeWo-celler är avgörande för forskning om moderkakan och graviditet. Forskare använder till exempel dessa celler för att studera transporten av ämnen, inklusive läkemedel, näringsämnen och toxiner, över moderkaksbarriären. Dessutom undersöker de även produktionen och regleringen av hormoner, inklusive humant koriongonadotropin (hCG), placentalaktogen och steroidhormoner. Detta är viktigt för att förstå hormonella förändringar under graviditeten. Forskning som genomfördes 2018 undersökte effekten av bromerade flamskyddsmedel (BFR) på aktiviteten hos sulfotransferas i den humana trofoblastcellinjen (BeWo). Detta enzym är involverat i regleringen av de intracellulära nivåerna av sköldkörtelhormonet [3].
- Forskning om infektioner och sjukdomar: BeWo-celler används också för att undersöka interaktionen mellan patogener och placentaceller. Denna forskning är värdefull för att förstå sjukdomar som kan överföras från modern till fostret och för att utveckla strategier för att skydda fostrets hälsa. Dessutom hjälper denna cellinje forskare att undersöka komplikationer som uppstår under graviditeten, såsom preeklampsi. Till exempel använde en studie genomförd av Michalina Bralewska år 2023 BeWo-trofoblastcellmodellen och fann att både kromogranin A (CgA) och den peptid som härrör från det, katestatin (CST), kan spela en roll i den komplicerade processen vid preeklampsi (PE) [4]. I en annan studie undersöktes trichosanthins potential som cancerläkemedel med hjälp av BeWo-cellinjen för koriokarcinom. Forskningen gjorde också en extra insats för att upptäcka biomarkörer genom att utföra jämförande proteomisk analys före och efter experimentet [5].
5. Forskningspublikationer om BeWo-celler
Här följer några viktiga forskningspublikationer om BeWo-trofoblastceller.
Denna studie i Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) föreslog att AMPK-signalering aktiverar mitofagi i BeWo-trofoblastceller via FUNDC1- och PRKN-faciliterade mitofagivägar. Som ett resultat hjälper mitofagi till att upprätthålla ATP-produktionen och mitokondriell membranpotential.
Etylparaben inducerar apoptotisk celldöd i humana BeWo-celler från moderkakan via Caspase-3-vägen
Denna artikel publicerades i Animal Cells and Systems (2020). Studien föreslog att etylparaben medierar BeWo-cellernas apoptos via reglering av caspase 3-vägen.
Denna studie i tidskriften Drug Metabolism and Disposition (2023) använde placentacellinjer, inklusive BeWo, JAR, JEG-3 och HTR-8/SVneo, för att undersöka deponeringen av xenobiotika och steroider i celler.
Denna forskningsartikel i International Journal of Molecular Medicine (2020) föreslog att apelin, liganden till APJ-receptorn, främjar BeWo-cellernas proliferation genom APJ- och ERK1/2-, stat3- och AMPK-signalering. Det kan alltså vara ett viktigt adipokin som reglerar moderkakans utveckling.
Antiepileptika och foster näringsämnen: effekter på kolintransportörer i en human placentacellinje
Denna studie i Epilepsia (2021) undersökte effekterna av foster näringsämnen och läkemedel mot epilepsi på kolintransportörer i den mänskliga trofoblastcellinjen BeWo.
Resurser för BeWo-cellinjen: protokoll, videor och mer
Här är några online-resurser om BeWo-celler:
- In vitro-transfektion: Denna video hjälper dig att lära dig protokollet för in vitro-transfektion av plasmid-DNA för adherenta celler.
Följande länk innehåller information om cellodling för BeWo-celler:
- BeWo-celler: Denna webbplats innehåller viktig information om cellodling av BeWo-cellinjen. Detta inkluderar information om cellmedier och odlingsförhållanden. Den innehåller även protokoll för subodling och hantering av kryokonserverade och proliferativa odlingar.
Referenser
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: s. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Characteristics of trophoblasts in long-term culture. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: s. 259–265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt och H.M. Stapleton, Störning av aktiviteten hos sköldkörtelhormonsulfotransferas genom bromerade flamskyddsmedel i den humana koriokarcinom-placentacellinjen BeWo. Chemosphere, 2018. 197: s. 81–88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha och A. Sakowicz, Minskning av CgA-härledda CST-proteinnivåer i trofoblastcellinjerna HTR-8/SVneo och BeWo orsakad av preeklampsi-miljön. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): s. 7124.
- Hu, Y., et al., Jämförande proteomisk analys av tillsats av läkemedlet trichosanthin till BeWo-cellinjen. Molecules, 2022. 27(5): s. 1603.