Cellinjen BxPC-3
BxPC-3 är en cellinje från mänsklig bukspottkörtelcancer. Den används i stor utsträckning i cancerstudier. Forskare använder främst dessa celler för att studera biologin bakom bukspottkörtelcancer, identifiera terapeutiska mål och utveckla läkemedel mot cancer.
- Odlingsmedium
- RPMI 1640-medium används för odling av cellinjen BxPC-3. Det kompletteras med 10 % fetalt bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin och 2,0 g/l NaHCO3 för att uppnå optimal celltillväxt. Mediet bör bytas 2 till 3 gånger per vecka.
- Fördubblingstid
- Fördubblingstiden för BxPC-3-celler varierar mellan 48 och 60 timmar.
- Tillväxt
- BxPC-3 är en vidhäftande cellinje.
- Biosäkerhetsnivå
- BSL-3
- Tillgänglig från
- Cytion — Beställ BxPC-3
Denna artikel innehåller viktig information om cellinjen BxPC-3 som kan vara till stor hjälp i ditt arbete med den. Artikeln behandlar främst:
- Allmän information och ursprung för cellinjen BxPC-3
- Odling av BxPC-3-celler
- BxPC-3-cellinjen: Fördelar och begränsningar
- Användningsområden för BxPC-3-celler inom forskning
- Forskningspublikationer om BxPC-3-celler
- Resurser för cellinjen BxPC-3: protokoll, videor och mer
Allmän information och ursprung för cellinjen BxPC-3
Att känna till en cellinjes ursprung är avgörande för dess tillämplighet inom forskning. Kännedom om dess egenskaper, inklusive morfologi, cellstorlek och ploidi, gör dess användning enklare och bekvämare. Här får du lära dig om ursprunget och de allmänna egenskaperna hos BxPC-3-celler: Vad är BxPC-3-celler? Vad är cellinjen BxPC-3? Vad är ursprunget till cellinjen BxPC-3? Vad är morfologin hos BxPC-3?
- BxPC-3, humana celler från bukspottkörtelcancer, härstammar från en 61-årig europeisk kvinna med adenokarcinom i bukspottkörteln år 1986. Dessa celler bekräftades vara tumörbildande även efter att patienten genomgått flera omgångar av strål- och cellgiftsbehandling. Därför är den etablerade cellinjen en ovärderlig modell för att studera cancerutveckling och -progression.
- BxPC-3-celler har en epitelcellsliknande morfologi.
- Det modala kromosomantalet för BxPC-3 är 59. Dessa celler har en homozygot deletion på kromosom 18q, som kodar för SMAD4/DPC4-proteinet. Dessutom saknar cellinjen den BxPC-3-kras-mutation som är vanlig bland tumörer i bukspottkörteln. En BxPC-3-braf-deletion förekommer också i dessa bukspottkörtelcancerceller.
Vad är skillnaden mellan BxPC3 och PANC-1?
BxPC-3 PADC (duktal adenokarcinom i bukspottkörteln) och PANC-1-celler är primära cellinjer för bukspottkörtelcancer med epitelial morfologi. Här har de förstnämnda cellerna mer epitelial-liknande egenskaper, medan de senare uppvisar mer mesenkymala egenskaper [1].
Odling av BxPC-3-celler
BxPC-3-cellinjen används ofta i cancerforskningslaboratorier. Du behöver känna till följande viktiga punkter för att effektivt odla denna cellinje för bukspottkörtelcancer. Du kommer att lära dig: Vad är fördubblingstiden för BxPC-3? Hur odlar man BxPC-3-cellinjen?
Viktiga punkter för odling av BxPC-3-celler
Populationens fördubblingstid:
Fördubblingstiden för BxPC-3-celler ligger mellan 48 och 60 timmar.
Adherent eller i suspension:
BxPC-3 är en vidhäftande cellinje.
Delningsförhållande:
BxPC-3-celler subkultiveras i ett förhållande på 1:2 till 1:4. Cellerna tvättas med 1 x PBS och inkuberas med en passageringslösning som kallas accutase. Efter 8–10 minuter tillsätts färskt medium till cellerna, och cellerna centrifugeras. Pelleten resuspenderas återigen i medium och cellerna hälls över i ett nytt odlingskärl för tillväxt.
Odlingsmedium:
RPMI 1640-medium används för odling av cellinjen BxPC-3. Det kompletteras med 10 % fetalt bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin och 2,0 g/l NaHCO3 för att uppnå optimal celltillväxt. Mediet bör bytas 2 till 3 gånger per vecka.
Odlingsförhållanden:
BxPC-3-cellkulturer hålls i en fuktad inkubator vid 37 °C ansluten till en 5 % CO2-tillförsel.
Förvaring:
Frysta celler förvaras vanligtvis vid en temperatur under -150 °C eller i ångfasen av flytande kväve för att skydda cellernas livskraft.
Frysningsprocess och medium:
CM-1 eller CM-ACF kan användas för att frysa BxPC-3-cellkulturer. En långsam frysningsprocess som endast tillåter en temperatursänkning på 1 °C följs för att förhindra att cellerna utsätts för chock.
Upptining:
Frysta BxPC-3-celler tinas i ett förinställt vattenbad vid 37 °C i 40 till 60 sekunder. När endast en liten isklump återstår tillsätts färskt odlingsmedium till cellerna och centrifugeras för att avlägsna frysmediet. Därefter resuspenderas cellpelleten och cellerna överförs till kolven för odling.
Biosäkerhetsnivå:
BxPC-3-cellkulturer hålls i laboratorier med biosäkerhetsnivå 1.
Cellinjen BxPC-3: Fördelar och begränsningar
BxPC-3 är en välkänd cellinje för adenokarcinom i bukspottkörteln som har flera fördelar och begränsningar. De viktigaste fördelarna och nackdelarna med cellinjen listas här.
Fördelar
De viktigaste fördelarna med BxPC-3-celler är:
-
In vitro-modell för bukspottkörtelcancer
BxPC-3-celler, som härrör från patienter med adenokarcinom i bukspottkörteln, uppvisar relevanta egenskaper, vilket gör dem till en lämplig modell för att studera beteendet hos bukspottkörtelcancer in vitro.
-
Tumörbildande cellinje
BxPC-3-celler har tumörbildande egenskaper och kan bilda tumörer när de injiceras i nakna eller immunförsvarssvaga möss. Dessa tumörer liknar i hög grad primära tumörer vid adenokarcinom i bukspottkörteln, vilket gör BxPC-3-xenotransplantatmodellen idealisk för att studera cancerutveckling och -progression.
Begränsningar
Begränsningarna förknippade med BxPC-3-cellinjen är:
-
Korskontaminering
Cellinjen BxPC-3 medför, precis som alla andra, en risk för korskontaminering. Forskare bör iaktta försiktighet och följa strikta protokoll för att förebygga kontaminering vid hantering av dessa celler.
-
Långsam tillväxthastighet
BxPC-3-celler uppvisar en relativt långsam tillväxthastighet, med en fördubblingstid på mellan 48 och 60 timmar. Denna egenskap kan kräva längre inkubationsperioder för vissa experiment, vilket potentiellt kan orsaka förseningar i forskningsarbetet.
Användningsområden för BxPC-3-celler inom forskning
BxPC-3-celler har många tillämpningar inom cancerforskningen. De vanligaste tillämpningarna är:
- Forskning om bukspottkörtelcancer: BxPC-3-celler imiterar adenokarcinom i bukspottkörteln och används därför för att undersöka de genetiska och molekylära mekanismer som ligger till grund för tumörutveckling och -tillväxt. Dessutom upptäcker forskare nya biomarkörer och terapeutiska mål med hjälp av dessa celler. Dessutom uttrycker BxPC-3-celler i betydande utsträckning angiogena faktorer, dvs. interleukin-8 (IL-8), prostaglandin E2 (PGE2) och vaskulär endotelial tillväxtfaktor (VEGF), vilket gör dem lämpliga för studier av angiogenes. Här är angiogenes en avgörande process som är förknippad med cancertillväxt och metastasering. En studie publicerad 2022 visade att överuttryck av laminin-5 gamma-2 (LAMC2) i BxPC3 PDAC (duktal adenokarcinom i bukspottkörteln) förstärker dess tumörbildning genom att reglera BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR-signalvägen [2].
- Läkemedelsupptäckt och utveckling: BxPC-3-cellinjen fungerar som en ovärderlig testmodell för läkemedel mot cancer. Forskare undersöker potentiella läkemedels cytotoxiska, antimetastatiska och apoptotiska effekter på BxPC3 PDAC. En studie genomförd av Alexandria Turner och kollegor år 2020 undersökte de apoptotiska egenskaperna hos fruktextrakt från Elaeocarpus reticulatus i BxPC-3-celler från bukspottkörtelcancer [3]. På samma sätt genomfördes forskning 2020 som fastställde den cancerbekämpande potentialen hos ett metanolextrakt av en växt kallad Oxialis obtriangulata i BxPC-3-celler. Dessutom studerade forskarna också den cellulära mekanismen genom vilken växtextraktet utövade terapeutiska effekter [4].
5. Forskningspublikationer om BxPC-3-celler
I detta avsnitt listas några av de mest citerade och intressanta publikationerna om cellinjen BxPC-3.
Denna publikation i Chemico-Biological Interactions (2020) undersökte de apoptotiska effekterna av ett naturligt ämne, licokumaron, på BxPC-3-celler från bukspottkörtelcancer.
Denna forskningsartikel publicerades i Anticancer Research (2022). Studien föreslog att hydroxiklorokin orsakar BxPC3-celldöd genom att hämma BCL-XL-genen.
Denna forskning publicerades 2020 i Journal of Cellular Biochemistry. Studien visar att en naturlig förening, salidrosid, uppvisar anti-canceraktivitet i BxPC-3-celler genom att reglera HIF-1α (hypoxiinducerbar faktor) och LOXL2-signalkaskaden.
Denna artikel i Biomedicine & Pharmacotherapy tyder på att ibrutinib kan användas som en effektiv strålkänslighetsförstärkare hos patienter med bukspottkörtelcancer. In vitro-studier på BxPC-3-celler indikerar att det minskar BxPC3 EGFR-fosforylering och uttrycket av pAKT och nedströmsgener som uppregleras av strålbehandling.
Chelidonin inducerar apoptos via GADD45a-p53-reglering i humana bukspottkörtelcancerceller
Denna studie i Integrative Cancer Therapies föreslår att ett naturligt ämne, chelidonin, utövar apoptotisk aktivitet i humana bukspottkörtelceller BxPC-3 genom att reglera BxPC3 p53- och GADD45a-signalering.
Resurser för BxPC-3-cellinjen: protokoll, videor och mer
BxPC-3-cellinjen har många intressanta fördelar som gör den lämplig för forskningsändamål. Många online-resurser om BxPC-3-cellinjen nämner dess hantering, underhåll och transfektionsprotokoll.
- BxPC3-transfektion: Denna video är en steg-för-steg-guide för att lära sig transfektionsprotokollet för BxPC-3-celler.
Detta avsnitt av artikeln innehåller några länkar som förklarar protokoll för BxPC3-cellodling.
- BxPC3-cellodling: Denna webbplats hjälper dig att lära dig protokoll för subodling och hantering av kryokonserverade och proliferativa BxPC-3-odlingar.
Referenser
- Kim, Y., et al., Jämförande proteomisk profilering av cellinjer för duktal adenokarcinom i bukspottkörteln. Mol Cells, 2014. 37(12): s. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Överuttryck av laminin-5 gamma-2 främjar tumörbildning av duktal adenokarcinom i bukspottkörteln genom EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-kaskaden. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): s. 362.
- Turner, A., et al., Fruktextrakt från Elaeocarpus reticulatus minskar livskraften och inducerar apoptos i bukspottkörtelcancerceller in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: s. 2073–2084.
- An, E.-J., et al., Anti-cancer potential hos Oxialis obtriangulata i bukspottkörtelcancerceller genom reglering av den ERK/Src/STAT3-medierade signalvägen. Molecules, 2020. 25(10): s. 2301.