Publicerad: 17 oktober 2023 | Senast granskad: maj 2026
A431-celler: Ursprung, odlingsförhållanden och forskningsanvändning
A431 är en cellinje av humant epidermoid karcinom som härrör från huden hos en 85-årig kvinnlig patient. Det är en av de mest använda cellinjerna inom biomedicinsk forskning, särskilt inom cancerbiologi, immunonkologi, dermatologi och läkemedelsutveckling. A431-celler överuttrycker massivt epidermal tillväxtfaktorreceptorn (EGFR) – med cirka 2–3 miljoner receptorer per cell, ungefär 20–50 gånger mer än normala epitelceller – vilket gör dem till den gyllene standarden bland in vitro-modeller för studier av EGFR-signalering och testning av EGFR-riktade terapier såsom cetuximab och erlotinib. A431-celler finns exklusivt hos Cytion, din oberoende europeiska cellbank.
- Art / Ursprung
Människa (kvinna, 85 år) - Vävnad
Hudens epidermis (epidermoid karcinom) - Morfologi
Epiteliell, vidhäftande - Fördubblingstid
80–100 timmar - Odlingsmedium
DMEM + 10 % FBS - Biosäkerhetsnivå
BSL-1 - Nyckelfunktion
Överuttryck av EGFR (~2–3 miljoner receptorer/cell) - Viktiga biomarkörer
EGFR (amplifierad), TP53 (mutant), KRAS (vildtyp), PTEN (uttryckt) - Produktnummer
300112 — Beställ A431-celler från Cytion
A431-celler: Allmänna egenskaper och ursprung
Detta avsnitt behandlar de viktigaste biologiska egenskaperna hos cellinjen A431 – inklusive dess ursprung, morfologi, karyotyp och den överuttryckta EGFR som gör den unikt värdefull för forskning.
A431-cellinjen: Ursprung och historia
- A431, en cellinje från mänsklig hudcancer, erhölls från epidermis hos en 85-årig kvinnlig patient med epidermoid karcinom [1]. Den etablerades av D.J. Giard et al., som utvecklade flera andra cellinjer från solida tumörer.
- Cellinjen har distribuerats i stor utsträckning och validerats av oberoende cellbanker över hela världen, däribland Cytion, som en tillförlitlig och reproducerbar forskningsmodell.
A431 Morfologi och karyotyp
- A-431-celler har epitelial morfologi. De aggregerar och bildar cellkluster under standardodlingsförhållanden.
- Hudcancercellinjen A431 är hypertriploid. Det modala kromosomantalet är 74, vilket förekommer i cirka 36 % av cellerna. Högre ploidier förekommer också i cirka 1 % av cellpopulationen.
EGFR-uttryck i A431-celler
Överuttryck av EGFR är det utmärkande kännetecknet för A431-celler och den främsta anledningen till deras utbredda användning. A431-celler bär på en genomisk amplifiering av EGFR-genlokuset, vilket resulterar i cirka 2–3 miljoner EGFR-receptorer per cell – 20 till 50 gånger högre än normala epitelceller. Detta gör A431 till den gyllene standarden för positiv kontroll för:
- Validering av EGFR-antikroppar med Western blot, flödescytometri och immunofluorescens
- Testning av EGFR-riktade monoklonala antikroppar såsom cetuximab och panitumumab
- Utvärdering av EGFR-tyrosinkinasinhibitorer (TKI) såsom erlotinib, gefitinib och afatinib
- Studier av nedströms signalvägar, inklusive PI3K/AKT/mTOR och RAS/MAPK/ERK
Cellinjen A431: Odlingsinformation
Att känna till en cellinjes odlingskrav gör hanteringen problemfri. Detta avsnitt behandlar fördubblingstid, odlingsmedium, passering, kryokonservering och biosäkerhetskrav för cellinjen A431.
Viktiga punkter för odling av A431-celler
Fördubblingstid:
Fördubblingstiden för A431-celler varierar mellan 80 och 100 timmar.
Adherent eller i suspension:
A431 är en vidhäftande cellinje.
Utsädestäthet:
1 x 104 celler/cm2 är idealiskt för cellinjen A431. Cellerna når konfluens på cirka 4 dagar vid denna densitet. Adhärenta celler tvättas med PBS (1×) och inkuberas med Accutase-passageringslösning, resuspenderas sedan i odlingsmedium, centrifugeras och dispenseras i nya kolvar.
Odlingsmedium:
DMEM-medium kompletterat med 10 % fetalt bovint serum (FBS), 4,5 g/l glukos, 1,0 mM natriumpyruvat, 1,5 g/l NaHCO3 och 4 mM L-glutamin. Mediet bör bytas ut var 2–3 dagar.
Odlingsförhållanden:
A431-cancerceller odlas i en fuktad inkubator med 5 % CO2 vid 37 °C.
Förvaring:
Förvara i en elektrisk frys eller i flytande kväve vid en temperatur under −150 °C för att skydda cellernas livskraft.
Frysningsprocess och medium:
CM-1 eller CM-ACF är de rekommenderade frysmedierna för A431-celler. Använd en metod för långsam frysning med kontrollerad hastighet (−1 °C/min).
Upptining:
Tina frysta A431-celler snabbt i ett 37 °C varmt vattenbad (40–60 sekunder). När en liten isklump återstår, tillsätt odlingsmedium och centrifugera. Resuspendera de skördade cellerna och överför dem till odlingsflaskor.
Biosäkerhetsnivå:
Biosäkerhetsnivå 1 (BSL-1) rekommenderas för hantering av A431-odlingar.
Fördelar och nackdelar med cellinjen A431
Cellinjen A431 har särskilda egenskaper som gör den både mycket användbar och samtidigt begränsad i vissa sammanhang. Här följer en sammanfattning av för- och nackdelarna.
Fördelar
De främsta fördelarna med cancercellinjen A431 är:
Överuttryck av EGFR
A431-celler överuttrycker EGFR med 2–3 miljoner receptorer per cell, vilket gör dem till den gyllene standarden för positiva kontroller i studier av EGFR-signalering och validering av anti-EGFR-läkemedel (cetuximab, erlotinib, gefitinib).
Tumörbildande förmåga
A431-celler är tumörbildande och bildar lätt tumörer i immunförsvarssvaga möss, vilket gör dem till ett pålitligt verktyg för xenotransplantationsmodeller för att studera tumörtillväxtdynamik och utvärdera nya cancerbehandlingar in vivo.
Väl karakteriserade
Tack vare årtionden av publicerad forskning är A431-celler omfattande karakteriserade på genomisk, proteomisk och fenotypisk nivå, vilket ger en robust vetenskaplig grund för experimentell design.
3D-sfäroidbildning
A431-celler bildar lätt kompakta 3D-sfäroider under förhållanden med extremt låg vidhäftning, vilket gör dem kompatibla med moderna organoid- och sfäroid-screeningplattformar för studier av läkemedelspenetration och effekt.
Nackdelar
Nackdelarna med A431-celler är:
Genetiska avvikelser
A431 är en cancercellinje med ackumulerade genetiska mutationer och kromosomförändringar (hypertriploid, modalt antal 74) som kanske inte helt återspeglar de ursprungliga tumörkaraktäristika.
Risk för mikrobiell kontaminering
A431 är känslig för bakteriell kontaminering. För att få tillförlitliga resultat är det viktigt att upprätthålla strikt aseptisk teknik och rutinmässiga mykoplasmatester.
Inte representativt för alla EGFR-tumörer
Eftersom EGFR-uttrycket i A431 drivs av genamplifiering snarare än mutation (som vid lungcancer) kan resultaten kanske inte direkt överföras till tumörsammanhang med EGFR-mutationer, såsom icke-småcellig lungcancer (NSCLC).
Forskningsmässiga tillämpningar av A431-celler
A431-cellinjen används i stor utsträckning inom flera forskningsdiscipliner. Dess unika EGFR-biologi, tumörbildande förmåga och välkarakteriserade genom gör den till en av de mest mångsidiga humana cancercellinjerna som finns tillgängliga.
- Cancerbiologi: A431 är ett kraftfullt verktyg för att undersöka cellulära och molekylära mekanismer som driver cancertillväxt, metastasering och invasion. Studier har kartlagt PI3K/AKT/mTOR- och RAS/MAPK/ERK-signalering i denna cellinje, och hämning har visat sig inducera apoptos i A431-hudtumörceller [2, 3].
- Testning av EGFR-riktad terapi: A431-celler är referensstandarden för utvärdering av anti-EGFR-läkemedel – monoklonala antikroppar (cetuximab, panitumumab) och småmolekylära TKI (erlotinib, gefitinib, afatinib, osimertinib).
- Läkemedelstestning och utvärdering: A431-celler används för att utvärdera nya kandidater till läkemedel mot cancer. En studie från 2022 av Rahim et al. visade på kraftfulla antiproliferativa effekter av biogent syntetiserade silvernanopartiklar från Alstonia angustiloba på A431-celler [4].
- Tumörxenotransplantatmodeller: A431-celler är tumörbildande i immunbristmöss, vilket möjliggör subkutana och ortotopiska xenotransplantatmodeller för in vivo-effektstudier. Lim et al. använde A431-härledda xenotransplantat för att utvärdera de strålkänsliggörande effekterna av exogent EGF in vivo [5].
- Hudtoxicitet och dermatologisk forskning: A431-celler används i stor utsträckning av läkemedels- och kosmetikföretag för att bedöma dermal toxicitet, hudpenetration och säkerhetsprofiler för topiskt applicerade föreningar.
- 3D-sfäroid- och organoidmodeller: A431-celler bildar kompakta 3D-sfäroider under förhållanden med extremt låg vidhäftning eller hängande droppar, vilket möjliggör mer fysiologiskt relevanta studier av läkemedelspenetration och resistens.
- Validering av EGFR-antikroppar: På grund av sin extrema EGFR-täthet är A431-celler den standardmässiga positiva kontrollen för validering av anti-EGFR-antikroppar i Western blot, immunofluorescens, IHC och flödescytometri.
A431 jämfört med andra hudcancercellinjer
Att välja rätt cellinje är avgörande för experimentets validitet. Här är en jämförelse mellan A431 och andra vanligt förekommande hud- och skivepitelcancercellinjer:
| Egenskap | A431 | A375 (melanom) | SCC-25 (oral skivepitelcancer) | HaCaT (keratinocyt) |
|---|---|---|---|---|
| Cancer typ | Epidermoid karcinom | Malignt melanom | Oral skivepitelcancer | Immortaliserad keratinocyt |
| EGFR-uttryck | +++ (~2–3M/cell) | + (låg) | ++ (måttlig) | ++ (måttlig) |
| Tumörbildande förmåga | Ja | Ja | Ja | Nej |
| Morfologi | Epithelial, vidhäftande | Spindelformad, vidhäftande | Epithelial, vidhäftande | Epithelial, vidhäftande |
| BSL | 1 | 1 | 1 | 1 |
| Primär användning | EGFR-forskning, testning av läkemedel mot cancer | Melanombiologi, BRAF-hämmare | Huvud- och halscancer, strålningsstudier | Hudbiologi, barriärfunktion |
Forskningspublikationer om A431-celler
Här är några viktiga peer-review-granskade publikationer om hudcancercellinjen A431.
Publicerad i Materials Today Communications (2020). Utvärderade anticancerpotentialen hos poly-ε-kaprolakton-curcumin-laddade nanofibrer och polyvinylalkohol-AuNPs mot A431-cancerceller.
miRNA-221 främjar utvecklingen av skivepitelcancer i huden genom att rikta in sig på PTEN
Publicerad i Cellular & Molecular Biology Letters (2019). Förslag om att mikroRNA-221 spelar en onkogen roll i skivepitelcancer i huden genom att rikta in sig på tumörsuppressorgenen PTEN.
Publicerad i BMC Complementary Medicine and Therapies (2016). Visade att vinkristin från svampen Eutypella spp–CrP14 inducerar apoptos i A431-celler.
Överuttryck av CDC42SE1 i A431-celler minskade cellproliferationen genom att hämma Akt-signalvägen
Publicerad i Cells (2019). Identifierade CDC42SE1 som en potentiell biomarkör för hudcancerprogression, där dess nedreglering underlättar tumörbildning i A431-celler.
Metformin hämmar proliferation av A431-celler genom att modulera PI3K/Akt-signalvägen
Publicerat i Experimental and Therapeutic Medicine (2015). Visade att metformin hämmar A431-proliferation genom att reglera PI3K/Akt-signalvägen.
Resurser för A431-cellinjen: protokoll, videor och mer
Följande resurser ger praktisk vägledning för arbete med A431-celler i laboratoriet.
- Transfektion av A-431-celler — En steg-för-steg-videoguide till transfektion av A431-cancerceller.
- A431-cancercellinje — Cytions produktsida — Fullständig information om cellodling: odlingsmedium, utsädesdensitet, passering, kryokonservering och kvalitetscertifikat.
- A431-cellodlingsprotokoll — Ett kortfattat externt protokoll för odling av A431-cellinjen från Bio-Protocol.
- Bläddra bland alla hudcancercellinjer från Cytion — Utforska hela utbudet av hudcancercellinjer som finns tillgängliga från Cytion.