Publicat: 2023 | Ultima revizuire: mai 2026

Înțelegerea „numărului de pasaje”

Conceptul de „număr de pasaje” este esențial în cultura celulară și se referă la numărul de ori în care o linie celulară a fost subcultivată sau transferată într-un mediu de creștere proaspăt după reactivarea inițială din crioconservare sau primirea de la o bancă de celule de referință. Acest indicator este esențial pentru urmărirea liniei genealogice și a istoricului unei culturi celulare.

Prezentare generală a procesului

• În practica de rutină a culturii celulare, atunci când celulele ating o anumită densitate, acestea sunt transferate într-un mediu nou pentru a susține creșterea și a preveni supraaglomerarea. Fiecare astfel de transfer este înregistrat ca o pasare.
• În mod tradițional, atunci când primeam o linie celulară, de exemplu, la pasajul 60 de la deponent, continuam de la acest număr de pasaj, incrementând cu fiecare subcultivare. Această practică, deși menținea un fir istoric, ducea adesea la numere mari de pasaje încă de la început. Având în vedere utilizarea extinsă și adesea de zeci de ani a anumitor linii celulare, cum ar fi linia HeLa înființată în 1951, nu este fezabil să se determine numărul total de pasaje de la înființarea liniei celulare.
• Pentru a spori claritatea și calitatea proceselor noastre de cultură celulară, am revizuit această abordare la începutul anului 2023. Acum, atunci când inițiem o cultură dintr-o fiolă nouă, indiferent de numărul de pasaje de la deponent, resetăm și începem să numărăm din nou de la pasajul unu pentru fiecare lot fabricat.

Justificare

Pasarea este o procedură vitală pentru a asigura sănătatea și utilitatea culturilor celulare pentru cercetare. Când celulele devin prea numeroase, ele suferă de inhibiție de contact, ceea ce le reduce rata de proliferare, ceea ce poate afecta negativ rezultatele experimentale. Pentru a atenua aceste probleme, Cytion implementează controale stricte asupra densităților celulare la care are loc subcultivarea, menținând astfel un număr redus de pasaje în timpul fabricării liniilor lor celulare. Această precauție ajută la prevenirea efectelor adverse ale pasajelor excesive, cum ar fi anomaliile morfologice, modificările ratei de creștere și deriva genetică, care pot determina ca celulele să difere semnificativ de starea lor inițială. Perioadele prelungite de subcultivare pot, de asemenea, spori riscul de contaminare microbiană.

Promisiunea noastră

Ne asigurăm că celulele furnizate cercetătorilor sunt cât mai apropiate de compoziția genetică și caracteristicile fenotipice originale, sporind fiabilitatea datelor experimentale. În plus, prin documentarea meticuloasă a fiecărui pasaj, Cytion contribuie la trasabilitatea și reproductibilitatea cercetării, un angajament care reflectă standardele înalte de practică în cultura celulară. Cercetătorii sunt încurajați să păstreze înregistrări precise ale numerelor de pasaje, atât pe vasele de cultură, cât și în caietele de laborator, ca referință pentru starea de sănătate și istoricul culturilor lor celulare.

Sfaturi și greșeli frecvente

Respectarea protocolului corect este esențială, dar înțelegerea capcanelor frecvente poate fi la fel de importantă. Procedurile de cultură celulară sunt sensibile la mici abateri în ceea ce privește tehnica, sincronizarea și calitatea reactivilor. Următoarele sfaturi reflectă cele mai bune practici recomandate de echipa științifică a Cytion, pe baza unei vaste experiențe în cultura celulară.

• Încălziți întotdeauna reactivi la 37 °C înainte de utilizare pentru a minimiza șocul termic asupra celulelor.
• Lucrați rapid, dar cu atenție — reduceți la minimum timpul petrecut de celule în afara incubatorului.
• Utilizați reactivi certificați, testați pentru micoplasmă, pentru a evita contaminarea care poate compromite rezultatele experimentale.
• Documentați fiecare etapă, inclusiv numărul de pasaje, data și observațiile privind morfologia celulară.
• Validați protocolul cu un mic experiment pilot înainte de a trece la scară mai mare, pentru a evita risipa de reactivi scumpi.

Reactivi Cytion recomandați

Cytion oferă o gamă de reactivi validați pentru culturi celulare, special concepuți pentru a susține acest protocol. Toți reactivi sunt testați din punct de vedere al performanței cu linii celulare utilizate frecvent și sunt disponibili cu documentație completă. Vizitați cytion.com/Media-Reagents pentru a răsfoi portofoliul complet.