Celulele 4T1 – Informații esențiale privind cercetarea și aplicațiile celulelor canceroase mamare

Informații privind cultivarea liniei celulare 4T1

Linia celulară 4T1 de cancer mamar oferă aplicații de cercetare extinse în domeniul biomedical. Pentru cultivarea acestor celule, ar trebui să parcurgeți următoarele puncte cheie care descriu: ce este timpul de dublare 4T1? Cum se cultivă celulele 4T1? Care este densitatea de însămânțare celulară pentru 4T1?

Puncte cheie pentru cultivarea celulelor 4T1

Timpul de dublare:

Timpul mediu de dublare a populației raportat pentru celulele canceroase mamare 4T1 este de 14 ore.

Aderente sau în suspensie:

4T1 este o linie celulară aderentă.

Raportul de subcultivare:

Pentru linia celulară 4T1 de cancer mamar triplu negativ se recomandă un raport de divizare de 1:6 și 1:8. Pentru divizare, celulele sunt clătite cu PBS și incubate cu enzima Accutase timp de 8 până la 10 minute. Celulele disociate sunt colectate prin centrifugare și resuspendate într-un mediu proaspăt. Celulele resuspendate sunt distribuite în noul flacon pentru creștere.

Mediu de creștere:

Mediul RPMI 1640 este utilizat pentru cultivarea celulelor 4T1. 10% ser fetal bovin (FBS), 2,0 g/L NaHCO3 și 2,1 mM glutamină stabilă sunt adăugate în mediul de cultură pentru o creștere celulară ideală.

Condiții de creștere:

Celulele tumorale 4T1 sunt păstrate într-un incubator umidificat la 37 °C, cu un aport de 5% CO₂.

Depozitare: 

Celulele 4T1 trebuie depozitate la o temperatură sub -150 °C, adică într-un congelator electric sau în faza de vapori a azotului lichid, pentru a menține viabilitatea celulară.

Procesul de congelare și mediul:

CM-1 sau CM-ACF sunt recomandate pentru linia celulară 4T1. Se preferă o metodă de congelare lentă, deoarece protejează viabilitatea celulară, permițând o scădere treptată a temperaturii cu 1 °C.

Procesul de decongelare:

Flaconul cu celule congelate se păstrează într-o baie de apă la 37 °C timp de câteva secunde, până când celulele se decongelează și rămâne doar un mic bulgăre de gheață. Aceste celule sunt resuspendate în mediu proaspăt și turnate în balon pentru cultivare. După 24 de ore de incubare, mediul este înlocuit pentru a îndepărta componentele mediului de congelare.

Nivel de biosecuritate:

Pentru cultivarea celulelor canceroase mamare 4T1 se recomandă un laborator de nivel 1 de biosecuritate.

Linia celulară T1: Avantaje și dezavantaje

Această secțiune a articolului va prezenta avantajele și dezavantajele asociate modelului metastatic 4T1.

Avantaje

Principalele avantaje ale liniei celulare 4T1 sunt:

• Tumorigeneitate:

  4T1 este o linie celulară cu grad ridicat de tumorigenitate. Aceste celule au capacitatea de a forma un model de șoarece singenic 4T1 pentru studiul cancerului de sân atunci când sunt injectate într-un șoarece. Prin urmare, modelul 4T1 este ideal pentru studierea dezvoltării, creșterii și metastazării tumorilor. În plus, este util pentru screeningul și evaluarea medicamentelor terapeutice.

• Model metastatic in vitro:

  Modelul 4T1 are o tendință naturală de metastazare care permite cercetătorilor să investigheze în mod eficient mecanismele și căile implicate în procesul de metastazare. Mai mult, celulele 4T1 sunt rezistente la 6-tioguanină. Acest lucru ajută la detectarea eficientă a celulelor micro-metastatice cu o precizie îmbunătățită în comparație cu alte modele, deoarece elimină necesitatea de a cântări organele țintă și de a număra nodulii.

Dezavantaje

Dezavantajul asociat liniei celulare 4T1 este:

• Agresivitate/rată de creștere rapidă:

  Linia celulară 4T1 este o linie celulară de cancer mamar triplu negativ extrem de agresivă. Datorită ratei de creștere rapide, utilizarea acestei linii celulare în experimente pe termen lung și controlul variabilelor experimentale devin dificile.

Achiziționați linia celulară 4T1: un model de înaltă calitate pentru cancerul de sân

Linia celulară 4T1: Aplicații în cercetarea cancerului

Linia celulară model de șoarece 4T1 este un instrument de cercetare valoros pentru studierea biologiei cancerului și evaluarea noilor tratamente. Principalele aplicații ale celulelor 4T1 sunt enumerate aici:

Biologia cancerului

Linia celulară 4T1 este utilizată pe scară largă pentru studierea dezvoltării și creșterii cancerului. Este un model in vitro ideal pentru investigarea și explorarea diferitelor mecanisme celulare și moleculare implicate în progresia tumorii și metastazare. În plus, poate dezvălui rolul căilor de semnalizare celulară, al micromediului și al expresiei genice în aceste procese. Cercetările efectuate în 2019 au utilizat celule 4T1 pentru a descoperi mecanismele care stau la baza invaziei și migrației celulelor canceroase. Rezultatele au arătat că genele STAT3, MMP2 și MMP9 sunt implicate, iar inhibarea acestor gene poate restricționa semnificativ migrația și invazia celulelor canceroase [4]. Studii similare au indicat, de asemenea, mai multe alte căi de semnalizare implicate în dezvoltarea tumorii și metastazare.

Mai mult, modelul 4T1 este esențial pentru înțelegerea micromediului cancerului de sân, inclusiv a infiltrării celulelor imune și a creșterii tumorii primare. Studiile care se concentrează pe micromediul tumoral 4T1 au oferit informații semnificative cu privire la rolul celulelor imune și al citokinelor, cum ar fi expresia CXCL13, în progresia tumorală. Modelul ajută, de asemenea, la investigarea nișelor metastatice și a metastazelor tumorale, în special în cazul cancerului de sân în stadiu avansat, unde colonizarea carcinomului mamar este prevalentă.

Cercetarea în terapia cancerului

Linia celulară 4T1 este utilizată pe scară largă în cercetarea terapiei cancerului pentru screeningul și evaluarea noilor tratamente. Un studiu a explorat potențialul citotoxic al nanoparticulelor de fier sintetizate ecologic din extract de rozmarin (Rosemary-FeNPs) și al extractului pur de rozmarin asupra liniei celulare 4T1. Rezultatele cercetării au indicat că Rosemary-FeNPs sunt mai promițătoare decât extractul pur [5]. În mod similar, un studiu realizat în 2021 a examinat potențialul antitumoral al extractului de ghimbir în celulele canceroase mamare 4T1 și într-un model de șoarece 4T1 [6].

Pe lângă extractele naturale, linia celulară 4T1 este utilizată pentru a evalua eficacitatea agenților chimioterapeutici tradiționali. De exemplu, cercetările care au implicat combinarea cisplatinei cu alte terapii au demonstrat o creștere a morții celulelor tumorale și o reducere a progresiei tumorale în modelul 4T1. Introducerea luciferazei de licurici în celulele 4T1 a permis imagistica în timp real a creșterii tumorii și a fenotipului metastatic, facilitând evaluarea impactului diverselor tratamente.

Mai mult, rezistența liniei celulare 4T1 la 6-tioguanină a facilitat studiile asupra celulelor micro-metastatice, îmbunătățind detectarea și analiza metastazelor. Această linie celulară joacă, de asemenea, un rol crucial în studierea imunității antitumorale și a efectelor imunoterapiei, în special în contextul modelelor ortotopice la șoareci, unde cercetătorii pot imita îndeaproape cancerele umane.

În ansamblu, linia celulară 4T1 rămâne un instrument indispensabil în cercetarea oncologică, de la înțelegerea mecanismelor fundamentale ale biologiei cancerului până la dezvoltarea și testarea de noi strategii terapeutice.

Celulele 4T1: Publicații de cercetare

Această secțiune a articolului va prezenta câteva publicații interesante și cele mai citate despre celulele 4T1.

Activitate antiproliferativă potențială a AgNP sintetizate folosind M. longifolia în linia celulară 4T1 prin generarea de ROS și deteriorarea membranei celulare

Acest articol a fost publicat în 2018 în Journal of Photochemistry and Photobiology. Cercetarea a sugerat că nanoparticulele de argint sintetizate din Madhuca longifolia exercită un efect antiproliferativ asupra celulelor tumorale 4T1 prin degradarea peretelui celular și generarea de ROS.

Efectele citotoxice și apoptotice ale verbascosidei asupra liniei celulare 4T1 de cancer mamar

Acest studiu publicat în revista BMC Pharmacology and Toxicology (2021) a sugerat că verbascosidul, un compus natural, a indus efecte apoptotice în celulele canceroase mamare 4T1 prin intermediul semnalizării TLR4.

Eupatorina a suprimat progresia tumorii și a îmbunătățit imunitatea într-un model murin de cancer mamar 4T1

Această cercetare a fost publicată în Integrative Cancer Therapies în 2020. Acest studiu a utilizat celule 4T1 pentru a dezvolta un model de șoarece singenic 4T1 și a explorat potențialul anticancerigen al eupatorinei folosind acest model. Eupatorina a întârziat dezvoltarea tumorii în modelul de șoarece 4T1.

Efectul inhibitor al extractului de Viola odorata asupra creșterii tumorale și metastazelor în modelul de cancer mamar 4T1

Această cercetare publicată în Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018) a sugerat că o plantă medicinală, Viola odorata, are potențiale efecte citotoxice asupra celulelor 4T1.

Nanoparticulele lipidice solide încărcate cu docetaxel previn creșterea tumorii și metastazele pulmonare ale celulelor de carcinom mamar murin 4T1

Acest studiu a sugerat că nanoparticulele lipidice solide încărcate cu docetaxel (SLN încărcate cu DTX) pot fi un agent promițător pentru tratarea cancerului de sân și prevenirea metastazelor, deoarece limitează creșterea cancerului și metastazele pulmonare ale celulelor 4T1.

Resurse pentru linia celulară 4T1: protocoale, videoclipuri și multe altele

Iată câteva resurse despre celulele 4T1:

• Tutorial de transfecție 4T1: Acest videoclip este un ghid pas cu pas pentru efectuarea transfecției liniei celulare 4T1.
• Subcultivarea unei linii celulare: Acest videoclip explică protocolul de subcultivare pentru liniile celulare aderente.

Următorul link conține protocolul de cultură celulară pentru celulele 4T1:

• Linia celulară 4T1: Acest link către site-ul web conține toate informațiile utile privind manipularea culturilor 4T1. Acesta conține informații despre mediile de cultură, protocoale de manipulare pentru culturi crioconservate și culturi în proliferare.

Întrebări frecvente despre linia celulară 4T1

Referințe

1. Pulaski, B.A. și S. Ostrand-Rosenberg, Modelul tumoral mamar 4T1 la șoarece. Curr Protoc Immunol, 2001. Capitolul 20: p. Unitatea 20.2.
2. Maxwell, K.G., Imunomodularea celulelor canceroase mamare pentru vaccinarea cu întreaga tumoare. 2016.
3. Walker, I., et al., Tumorile mamare induc expresia citokinelor proinflamatorii centrale, dar nu și deficite comportamentale la șoarecii Balb/C. Scientific Reports, 2017. 7(1): p. 1-13.
4. Li, Y., et al., Inhibarea căii de semnalizare Stat3 de către produsul natural pectolinarigenină atenuează metastazarea cancerului de sân. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: p. 1195.
5. Farshchi, H.K., et al., Sinteza ecologică a nanoparticulelor de fier prin extract de rozmarin și evaluarea efectului de citotoxicitate asupra liniilor celulare canceroase. Biocataliză și biotehnologie agricolă, 2018. 16: p. 54-62.
6. Gholizadeh, A.P., et al., Efectul extractului de ghimbir asupra liniei celulare de cancer mamar 4T1 la șoarecele Balb/c. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): p. 43-49.