Celule U87MG - Cercetarea glioblastomului utilizând U87MG și impactul acesteia asupra studiilor privind cancerul cerebral
U-87 MG, linia celulară primară umană de glioblastom, este utilizată pe scară largă în cercetarea biologică. În special, aceste celule sunt utilizate în domeniile neuroștiințelor și imuno-oncologiei.
Caracteristici generale și originea liniei celulare U-87 MG
Această secțiune va trece în revistă originea și caracteristicile generale ale liniei celulare U87. Veți afla Ce sunt celulele U-87 MG? De unde provine celula U87? Care este forma completă a U-87 MG? Cât de mari sunt celulele U87? Care este morfologia liniei celulare U87?
- Linia celulară U87 este o linie celulară de glioblastom, astrocitom. Aceasta a fost stabilită în 1966 la Universitatea Uppsala. Celulele au fost obținute de la un bărbat caucazian în vârstă de 44 de ani care suferea de glioblastom. Această linie celulară este denumită oficial U 87 MG, care înseamnă Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Celulele U 87 MG prezintă o morfologie asemănătoare celulelor epiteliale.
- Dimensiunea celulelor U 87 MG variază între 12 și 14 µm în diametru.
- Această linie celulară de glioblastom uman este hipodiploidă și posedă un număr modal de cromozomi de 44 în aproximativ 48% din populația celulară. Cu toate acestea, ploidii mai mari există, de asemenea, în 5,9% din populația celulară.
Informații privind cultivarea celulelor U-87 MG
Înainte de a lucra cu celulele U 87 MG, trebuie să cunoașteți următoarele puncte cheie pentru cultivarea acestor celule de glioblastom. În special, trebuie să știți: Care este timpul de dublare a populației de celule U 87 MG? Ce mediu este utilizat pentru cultivarea celulelor U87? Care este densitatea de însămânțare a liniei de celule U 87 MG?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor U-87 MG
|
Timpul de dublare a populației: |
Celulele U 87 MG au un timp de dublare a populației cuprins între 18 și 38 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
U 87 MG este o linie celulară aderentă. Celulele au o formă alungită și cresc sub formă de monocameră. |
|
Densitatea de însămânțare: |
Linia celulară de glioblastom U 87 MG este recomandată pentru însămânțare la o densitate celulară de 1 x104 celule/cm2. Celulele U87 aderente sunt spălate cu 1 x PBS și incubate cu soluție de Accutase. Ulterior, celulele disociate sunt centrifugate și recuperate. Celulele sunt resuspendate cu atenție și adăugate în flacoane noi care conțin mediu de creștere. |
|
Mediu de creștere: |
Linia celulară U 87 MG este cultivată în EMEM (Eagle's minimal essential medium) suplimentat cu 1,0 g/L L-glucoză, 2,0 mM L-glutamină, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM piruvat de sodiu și 10% soluție FBS. Mediul trebuie reînnoit la fiecare 2 sau 3 zile. |
|
Condiții de creștere: |
Celulele U-87 MG necesită un incubator umidificat cu un aport de 5% CO2 și la o temperatură de 37°C pentru o creștere optimă. |
|
Depozitare: |
Celulele U87 sunt păstrate fie în faza de vapori a azotului lichid, fie la o temperatură sub -150°C pentru a menține viabilitatea maximă a celulelor de glioblastom. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
Mediile de congelare CM-1 sau CM-ACF sunt adecvate pentru congelarea celulelor U 87 MG. Se recomandă un proces lent de congelare, deoarece acesta previne orice șoc al celulelor și protejează viabilitatea celulelor. |
|
Procesul de decongelare: |
Fiolele de linie celulară U-87 MG congelate sunt decongelate într-o baie de apă la 37°C. Celulele sunt adăugate cu mediu de creștere, resuspendate și distribuite pentru cultivare în flacoane noi. Spre deosebire de aceasta, celulele U87 pot fi centrifugate pentru a elimina mediul de congelare și apoi cultivate. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Nivelul de biosecuritate 1 este necesar pentru manipularea culturilor de celule U 87 MG. |
Avantaje și dezavantaje ale celulelor U-87 MG
Când ne gândim la o linie celulară, primul lucru care ne vine în minte este: Care sunt avantajele utilizării celulelor U-87 MG? Care sunt dezavantajele utilizării celulelor U87?
Avantaje
Liniile celulare U 87 MG sunt utilizate pe scară largă în cercetare. Câteva avantaje asociate cu această linie celulară sunt:
Avantaje
- Ușor de cultivat: Celulele U 87 MG sunt ușor de menținut în cultură. Ele nu necesită cerințe pretențioase sau complicate de cultivare a celulelor
- Omogenitate: U-87 MG este o linie celulară omogenă. Majoritatea celulelor dintr-o populație posedă aceeași structură genetică și, prin urmare, prezintă caracteristici similare. Aceste celule sunt utilizate pentru studierea proceselor celulare, depistarea și testarea medicamentelor
- Bine caracterizate: Această linie celulară de glioblastom este bine caracterizată prin caracteristici de creștere, morfologie și expresie genică, ceea ce o face un instrument de cercetare valoros
Dezavantaje
- Aplicabilitate limitată: U 87 MG este o linie celulară de glioblastom, astfel încât aplicațiile sale sunt limitate în principal la studiul glioblastomelor și al mecanismelor moleculare subiacente. Este posibil să nu fie adecvată pentru investigarea altor tipuri de cancer.
Aplicații de cercetare cu celule U-87 MG
Linia celulară de glioblastom U87MG este utilizată pe scară largă în studiile privind cancerul, în special în cercetarea glioblastomului. Unele dintre aplicațiile de cercetare ale celulelor U 87 MG sunt:
- Cercetarea biologiei cancerului: Linia celulară U87 este utilizată pentru a studia creșterea și dezvoltarea cancerului, mecanismele moleculare subiacente, căile de semnalizare și micro-mediul tumoral. Un studiu publicat în 2020 a utilizat un model in vitro de glioblastom, linia celulară U-87 MG, pentru a investiga gena BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) ca țintă terapeutică. Rezultatele au arătat că gena BMAL1 inhibă proliferarea, migrația și invazia celulelor glioblastomului prin suprimarea ciclinei B1, a metaloproteinazei-9 și a expresiei genei fosfo-AKT [1]. O altă cercetare efectuată în 2019 a utilizat linia celulară U87 și a investigat faptul că expresia factorului de transcripție LITAF (Lipopolysaccharide-induced tumour necrosis factor-alpha factor) downregulată poate spori radiosensibilitatea celulelor gliomatice prin suprareglarea căii FOXO-1. LITAF este cunoscut și sub numele de gena 7 indusă de p53 (PIG7) [2].
- Descoperirea și dezvoltarea medicamentelor: Celulele U 87 MG pot fi utilizate pentru depistarea și testarea medicamentelor, permițând cercetătorilor să identifice noi medicamente anticanceroase potențiale și să evalueze eficacitatea și toxicitatea acestora. Deoarece cercetarea a utilizat linia celulară de glioblastom U 87 MG pentru a evalua potențialul anticancerigen și antioxidant al activităților antioxidante și anticancerigene ale extractului de Inula helenium (L.) [3]. În mod similar, o altă publicație a menționat utilizarea liniei celulare U87 pentru a testa efectul citotoxic și apoptotic al extractelor de plante [4]. În plus, cercetarea publicată în 2018, a studiat efectul citotoxic al alcaloizilor sesquiterpenici extrași din plantele Nuphar asupra liniilor celulare U 87 MG sensibile și rezistente la medicamente [5].
Comandați astăzi linia celulară de gliom U87 MG
Linia celulară U-87 MG: Publicații de cercetare
Aici sunt câteva publicații de cercetare proeminente care prezintă linia celulară U 87 MG.
Acest articol publicat în Neuroreport 2018 a propus că hipoxia ar putea crește migrația și invazia celulelor de glioblastom uman prin reglarea căii de semnalizare PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Acest studiu este publicat în Frontiers in Pharmacology în 2020. Rezultatele cercetării afirmă că un flavonoid, Eriodictyol, exercită efecte anticancerigene asupra liniei celulare U87 și suprimă proliferarea celulară și metastaza. Compusul își mediază proprietățile antitumorale prin modularea căii PI3K/Akt/NF-κB.
Această cercetare din Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) sugerează că o formulă chineză pe bază de plante numită Xihuang pill poate induce apoptoza celulelor U87 prin direcționarea cascadei Akt/mTOR/FOXO1 activată de ROS.
LITAF sporește radiosensibilitatea celulelor gliomului uman prin intermediul căii FoxO1
Această lucrare de cercetare a fost publicată în revista Cellular and Molecular Neurobiology în 2019. Studiul a propus că un factor de transcripție, LITAF, reglează în jos și sporește radiosensibilitatea celulelor gliomatice prin reglarea căii de semnalizare FOXO-1.
Acest articol a fost publicat în Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Cercetătorii au utilizat celule U 87 MG pentru a investiga efectul citotoxic al nanoparticulelor PLGA încărcate cu curcumină.
Resurse pentru celulele U 87 MG: Protocoale, videoclipuri și multe altele
Linia celulară de glioblastom U87MG este utilizată în multe laboratoare de cercetare a cancerului. Câteva resurse care prezintă această linie celulară sunt:
- Transfecția liniei celulare U87: Acest document vă va descrie un protocol de transfecție pentru celulele U 87 MG.
- Transfecția liniei celulare U 87 MG: Acest videoclip este un tutorial care explică pas cu pas protocolul de transfecție a celulelor U87.
Resursa pentru protocolul de cultură celulară a celulelor U87 este enumerată mai jos:
- Celule U87 MG: Acest link conține informații de bază despre linia celulară U 87 MG. Acesta include scurte protocoale de divizare, congelare și decongelare a celulelor.
Perspective în cercetarea gliomului U87 MG: Întrebări frecvente
Referințe
- Gwon, D.H., și colab., BMAL1 suprimă proliferarea, migrația și invazia celulelor U87MG prin reglarea în jos a ciclinei B1, fosfo-AKT și metaloproteinazei-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C. și colab, LITAF îmbunătățește radiosensibilitatea celulelor gliomului uman prin calea FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., și colab. activități antioxidante și anticancerigene ale extractului de Inula helenium (L.) în linia celulară de glioblastom uman U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh și A. Ghasempour, Inducerea citotoxicității și apoptozei în celulele de cancer de sân, cancer de piele și glioblastom prin extracte de plante. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., și colab., Citotoxicitatea alcaloizilor sesquiterpenici din plantele Nuphar față de liniile celulare sensibile și rezistente la medicamente. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.