Celulele U87MG – Cercetarea glioblastomului cu ajutorul liniei celulare U87MG și impactul acesteia asupra studiilor privind cancerul cerebral
U-87 MG, linia celulară primară de glioblastom uman, este utilizată pe scară largă în cercetarea biologică. În special, aceste celule sunt folosite în domeniile neuroștiințelor și imuno-oncologiei.
- Mediu de creștere
- Linia celulară U-87 MG este cultivată în EMEM (mediu esențial minim al lui Eagle) îmbogățit cu 1,0 g/L L-glucoză, 2,0 mM L-glutamină, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM piruvat de sodiu și 10% soluție de FBS. Mediul trebuie înlocuit la fiecare 2–3 zile.
- Timpul de dublare
- Celulele U 87 MG au un timp de dublare a populației cuprins între 18 și 38 de ore.
- Tipul de creștere
- U 87 MG este o linie celulară aderentă. Celulele au o formă alungită și cresc sub formă de monostraturi.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-1
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați U-87 MG
- Caracteristici generale și originea liniei celulare U-87 MG
- Informații privind cultivarea celulelor U-87 MG
- Avantajele și dezavantajele celulelor U-87 MG
- Aplicații de cercetare cu celule U-87 MG
- Comandați astăzi linia celulară de gliom U-87 MG
- Linia celulară U-87 MG: Publicații de cercetare
- Resurse pentru celulele U-87 MG: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Informații despre cercetarea privind gliomul U-87 MG: Întrebări frecvente
- Referințe
- Întrebări frecvente
Caracteristici generale și originea liniei celulare U-87 MG
Această secțiune va prezenta originea și caracteristicile generale ale liniei celulare U87. Veți afla: Ce sunt celulele U-87 MG? De unde provine celula U87? Care este forma completă a U-87 MG? Cât de mari sunt celulele U87? Care este morfologia liniei celulare U87?
- Linia celulară U87 este o linie celulară de glioblastom, astrocitom. A fost creată în 1966 la Universitatea din Uppsala. Celulele au fost obținute de la un bărbat caucazian în vârstă de 44 de ani care suferea de glioblastom. Această linie celulară se numește oficial U 87 MG, care reprezintă Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Celulele U 87 MG prezintă o morfologie asemănătoare celulelor epiteliale.
- Dimensiunea celulelor U 87 MG variază între 12 și 14 µm în diametru.
- Această linie celulară de glioblastom uman este hipodiploidă și prezintă un număr modal de cromozomi de 44 la aproximativ 48% din populația celulară. Cu toate acestea, există și ploidii mai mari la 5,9% din populația celulară.
Informații privind cultivarea celulelor U-87 MG
Înainte de a lucra cu celulele U 87 MG, ar trebui să aflați următoarele aspecte cheie privind cultivarea acestor celule de glioblastom. În special, ar trebui să știți: Care este timpul de dublare a populației celulelor U 87 MG? Ce mediu se utilizează pentru cultivarea celulelor U87? Care este densitatea de însămânțare a liniei celulare U-87 MG?
Aspecte cheie privind cultivarea celulelor U-87 MG
Timpul de dublare a populației:
Celulele U 87 MG au un timp de dublare a populației cuprins între 18 și 38 de ore.
Aderente sau în suspensie:
U 87 MG este o linie celulară aderentă. Celulele au o formă alungită și cresc sub formă de monostraturi.
Densitatea de însămânțare:
Se recomandă însămânțarea liniei celulare de glioblastom U 87 MG la o densitate celulară de 1 x 10⁴ celule/cm². Celulele U87 aderente sunt spălate cu 1x PBS și incubate cu soluție de Accutase. Ulterior, celulele disociate sunt centrifugate și recuperate. Celulele sunt resuspendate cu grijă și adăugate în flacoane noi care conțin mediu de creștere.
Mediu de creștere:
Linia celulară U 87 MG este cultivată în EMEM (mediu esențial minim al lui Eagle) suplimentat cu 1,0 g/L L-glucoză, 2,0 mM L-glutamină, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM piruvat de sodiu și o soluție de 10% FBS. Mediul trebuie înlocuit la fiecare 2–3 zile.
Condiții de creștere:
Celulele U-87 MG necesită un incubator umidificat, cu un flux de 5% CO₂ și o temperatură de 37 °C pentru o creștere optimă.
Depozitare:
Celulele U87 sunt păstrate fie în faza de vapori a azotului lichid, fie la o temperatură sub -150 °C, pentru a menține viabilitatea maximă a celulelor de glioblastom.
Procesul de congelare și mediul:
Mediile de congelare CM-1 sau CM-ACF sunt adecvate pentru congelarea celulelor U 87 MG. Se recomandă un proces de congelare lentă, deoarece acesta previne șocul celular și protejează viabilitatea celulelor.
Procesul de decongelare:
Flacoanele cu linia celulară U-87 MG congelată sunt decongelate într-o baie de apă la 37 °C. Celulele sunt adăugate în mediu de creștere, resuspendate și transferate pentru cultivare în flacoane noi. Alternativ, celulele U87 pot fi centrifugate pentru a îndepărta mediul de congelare și apoi cultivate.
Nivel de biosecuritate:
Pentru manipularea culturilor celulare U 87 MG este necesar nivelul de biosecuritate 1.
Avantajele și dezavantajele celulelor U-87 MG
Când ne gândim la o linie celulară, primul lucru care ne vine în minte este: Care sunt avantajele utilizării celulelor U-87 MG? Care sunt dezavantajele celulelor U-87?
Avantaje
Liniile celulare U-87 MG sunt utilizate pe scară largă în cercetare. Iată câteva avantaje asociate acestei linii celulare:
Avantaje
- Ușor de cultivat: Celulele U-87 MG sunt ușor de întreținut în cultură. Nu necesită condiții de cultivare pretențioase sau complicate.
- Omogenitate: U-87 MG este o linie celulară omogenă. Majoritatea celulelor dintr-o populație au aceeași compoziție genetică și, prin urmare, prezintă caracteristici similare. Aceste celule sunt utilizate pentru studierea proceselor celulare, screeningul medicamentelor și testare.
- Bine caracterizată: această linie celulară de glioblastom este bine caracterizată prin caracteristicile de creștere, morfologie și expresia genică, ceea ce o face un instrument valoros de cercetare.
Dezavantaje
- Aplicabilitate limitată: U-87 MG este o linie celulară de glioblastom, astfel încât aplicațiile sale se limitează în principal la studierea glioblastomelor și a mecanismelor moleculare subiacente. Este posibil să nu fie potrivită pentru investigarea altor tipuri de cancer.
Aplicații de cercetare cu celule U-87 MG
Linia celulară de glioblastom U87MG este utilizată pe scară largă în studiile privind cancerul, în special în cercetarea glioblastomului. Unele dintre aplicațiile de cercetare ale celulelor U 87 MG sunt:
- Cercetarea în domeniul biologiei cancerului: Linia celulară U87 este utilizată pentru a studia creșterea și dezvoltarea cancerului, mecanismele moleculare subiacente, căile de semnalizare și micromediul tumoral. Un studiu publicat în 2020 a utilizat un model in vitro de glioblastom, linia celulară U-87 MG, pentru a investiga gena BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) ca țintă terapeutică. Rezultatele au arătat că gena BMAL1 inhibă proliferarea, migrația și invazia celulelor de glioblastom prin suprimarea expresiei genice a ciclina B1, metaloproteinazei-9 și a fosfo-AKT [1]. O altă cercetare efectuată în 2019 a utilizat linia celulară U87 și a arătat că reducerea expresiei factorului de transcripție LITAF (factorul de necroză tumorală alfa indus de lipopolizaharidă) poate spori radiosensibilitatea celulelor de gliom prin reglarea în sus a căii FOXO-1. LITAF este cunoscut și sub denumirea de gena 7 indusă de p53 (PIG7) [2].
- Descoperirea și dezvoltarea medicamentelor: Celulele U-87 MG pot fi utilizate în scopul screeningului și testării medicamentelor, permițând cercetătorilor să identifice noi medicamente potențiale împotriva cancerului și să le evalueze eficacitatea și toxicitatea. De exemplu, într-un studiu s-a utilizat linia celulară de glioblastom U-87 MG pentru a evalua potențialul anticancerigen și antioxidant al extractului de Inula helenium (L.) [3]. În mod similar, o altă publicație a menționat utilizarea liniei celulare U-87 MG pentru a testa efectul citotoxic și apoptotic al unor extracte din plante [4]. În plus, o cercetare publicată în 2018 a studiat efectul citotoxic al alcaloizilor sesquiterpenici extrași din plantele Nuphar asupra liniilor celulare U-87 MG sensibile și rezistente la medicamente [5].
Comandați astăzi linia celulară U87 MG de gliom
Linia celulară U-87 MG: Publicații de cercetare
Iată câteva publicații de cercetare importante care au ca subiect linia celulară U87 MG.
Acest articol, publicat în revista „Neuroreport” în 2018, a sugerat că hipoxia ar putea spori migrația și invazia celulelor de glioblastom uman prin reglarea căii de semnalizare PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Acest studiu a fost publicat în revista „Frontiers in Pharmacology” în 2020. Rezultatele cercetării arată că un flavonoid, Eriodictiolul, exercită efecte anticanceroase asupra liniei celulare U87 și suprimă proliferarea celulară și metastazarea. Compusul își exercită proprietățile antitumorale prin modularea căii PI3K/Akt/NF-κB.
Această cercetare publicată în revista „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine” (2018) sugerează că o formulă pe bază de plante medicinale chinezești, denumită pilula Xihuang, poate induce apoptoza în celulele U87 prin acțiunea asupra cascadei Akt/mTOR/FOXO1 activate de ROS.
LITAF sporește radiosensibilitatea celulelor de gliom uman prin intermediul căii FoxO1
Acest articol de cercetare a fost publicat în revista „Cellular and Molecular Neurobiology” în 2019. Studiul a propus că un factor de transcripție, LITAF, reglează în jos expresia și sporește radiosensibilitatea celulelor de gliom prin reglarea căii de semnalizare FOXO-1.
Acest articol a fost publicat în revista „Biointerface Research in Applied Chemistry” (2019). Cercetătorii au utilizat celule U87MG pentru a investiga efectul citotoxic al nanoparticulelor PLGA încărcate cu curcumină.
Resurse pentru celulele U-87 MG: protocoale, videoclipuri și multe altele
Linia celulară de glioblastom U87MG este utilizată în multe laboratoare de cercetare în domeniul cancerului. Iată câteva resurse care prezintă această linie celulară:
- Transfecția liniei celulare U87: Acest document vă va prezenta un protocol de transfecție pentru celulele U87MG.
- Transfecția liniei celulare U 87 MG: Acest videoclip este un tutorial care explică pas cu pas protocolul de transfecție al celulelor U87.
Resursa pentru protocolul de cultură celulară a celulelor U87 este prezentată mai jos:
- Celulele U87 MG: Acest link conține informații de bază despre linia celulară U87 MG. Acesta include protocoale succinte privind divizarea, congelarea și decongelarea celulelor.
Perspective în cercetarea gliomului U87 MG: Întrebări frecvente
Liniile celulare de gliom, cum ar fi celulele de glioblastom U87, sunt celule cultivate derivate din gliomul uman, utilizate pe scară largă în cercetarea cancerului pentru a studia biologia tumorii, genetica și răspunsul la medicamente. Ele servesc drept modele pentru înțelegerea comportamentului tumoral și testarea strategiilor terapeutice.
O linie celulară izogenă se referă la celulele derivate dintr-o singură celulă, asigurând uniformitatea genetică. În cercetarea gliomului, liniile izogenice oferă un model consecvent pentru studierea modificărilor genetice și a impactului acestora asupra creșterii tumorii și a răspunsului la tratamente.
Profilul ADN al liniilor celulare de gliom este esențial pentru identificarea alterărilor genetice, înțelegerea evoluției tumorilor și dezvoltarea terapiilor țintite. Acesta ajută la clasificarea tumorilor pe baza markerilor genetici, cum ar fi mutațiile IDH1.
Serul din mediile de cultură celulară furnizează factori de creștere, hormoni și nutrienți esențiali pentru celulele gliomatice. Cu toate acestea, compoziția sa poate afecta reproductibilitatea experimentală, motiv pentru care condițiile fără ser sau cu ser definit sunt din ce în ce mai utilizate.
Citotoxicitatea celulară în liniile celulare de gliom este evaluată utilizând teste precum citometria în flux, care măsoară sănătatea, viabilitatea și moartea celulelor după tratamentul cu medicamente sau celule imunitare precum celulele natural killer (NK).
Citotoxicitatea celulelor NK joacă un rol esențial în cercetarea tratamentului gliomului, deoarece celulele NK pot recunoaște și ucide celulele tumorale fără sensibilizare prealabilă. Studierea interacțiunilor celulelor NK cu celulele gliomului ajută la dezvoltarea de strategii pentru a spori eliminarea tumorală mediată de celulele NK.
Tumoarea de origine oferă un context cu privire la mediul biologic inițial și la caracteristicile tumorii. Înțelegerea acestui aspect ajută la corelarea rezultatelor studiilor pe linii celulare cu comportamentul tumoral real și prognosticul pacientului.
Microscopia electronică oferă o vizualizare detaliată a structurilor celulare și subcelulare în liniile celulare de gliom, ceea ce este esențial pentru examinarea morfologiei celulare, a sănătății organitelor și a modificărilor care urmează tratamentelor.
Ligandul NKG2D este exprimat pe celulele tumorale și se leagă de receptorul NKG2D de pe celulele NK, declanșând un răspuns citotoxic. Studierea acestei interacțiuni ajută la înțelegerea și, eventual, la îmbunătățirea răspunsurilor imune împotriva gliomului.
modelele de cultură celulară 3D imită mai exact micro-mediul tumoral, oferind o perspectivă mai bună asupra creșterii gliomului, migrației și rezistenței la medicamente. Această tehnică este esențială pentru studii oncologice translaționale mai relevante.
Referințe
- Gwon, D.H. și colab., BMAL1 suprimă proliferarea, migrația și invazia celulelor U87MG prin reglarea negativă a ciclina B1, a fosfo-AKT și a metaloproteinazei-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C. și colab., LITAF sporește radiosensibilitatea celulelor de gliom uman prin intermediul căii FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K. și colab., activități antioxidante și anticanceroase ale extractului de Inula helenium (L.) în linia celulară umană de glioblastom U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh și A. Ghasempour, Citotoxicitate și inducerea apoptozei în celulele de cancer mamar, cancer de piele și glioblastom prin extracte din plante. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M. și colab., Citotoxicitatea alcaloizilor sesquiterpenici din plantele din genul Nuphar asupra liniilor celulare sensibile și rezistente la medicamente. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.