Celulele P19 – Cercetarea în domeniul carcinomului embrionar cu ajutorul celulelor P19
P19 este o linie celulară de carcinom embrionar murin. Aceasta este utilizată pe scară largă în cercetarea biomedicală, în principal pentru studierea biologiei dezvoltării, a biologiei celulelor stem, a diferențierii celulare și a screeningului medicamentelor. Deoarece celulele P19 au capacitate de diferențiere, ele pot fi utile în investigarea proceselor biologice complexe, precum formarea țesuturilor și dezvoltarea embrionară timpurie. În acest articol, vom discuta aspectele fundamentale ale celulelor P19 derivate de la șoarece.
- Mediu de creștere
- Mediu DMEM/Ham's F12 conținând 5% ser fetal bovin, 3,1 g/L glucoză, 1,6 mM L-glutamină, 1,0 mM piruvat de sodiu, 15 mM HEPES și 1,2 g/L NaHCO₃ este utilizat pentru cultivarea celulelor P19.
- Timp de dublare
- Timpul de dublare raportat pentru linia celulară P19 este de aproximativ 2 până la 3 zile.
- Tipul de creștere
- Linia celulară de carcinom embrionar P19 este aderentă.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-1
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați P19
- Caracteristici generale și originea celulelor P19
- Informații privind cultivarea celulelor P19
- Linia celulară P19: avantaje și dezavantaje
- Aplicații de cercetare ale celulelor P19
- Achiziționați astăzi linia celulară P19
- Celulele P19: publicații de cercetare
- Resurse pentru linia celulară P19: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Explorarea liniei celulare P19: Întrebări frecvente
- Referințe
- Întrebări frecvente
Caracteristicile generale și originea celulelor P19
Este esențial să cunoașteți caracteristicile generale și originea unei linii celulare înainte de a începe să lucrați cu aceasta. Această secțiune va aborda următoarele aspecte: Ce este linia celulară P19? Care este dimensiunea celulei P19? Care este originea celulelor P19?
- P19 este un tip de celule de carcinom embrionar pluripotente obținute inițial dintr-un teratocarcinom dezvoltat la un șoarece din rasa C3H/He. Linia celulară a fost creată pentru prima dată în 1982 de către McBurney și Rogers.
- Celulele P19 pot crește continuu într-un mediu de cultură suplimentat cu ser. Ele pot fi diferențiate în alte tipuri de celule atunci când sunt expuse la medicamente netoxice, cum ar fi acidul retinoic și dimetilsulfoxidul (DMSO) [1].
- Aceste celule de carcinom de șoarece prezintă o morfologie de tip epitelial.
- Linia celulară P19 are un cariotip euploid masculin (n=40; XY).
Informații privind cultivarea celulelor P19
Linia celulară P19 este cultivată pe scară largă în laboratoarele de cercetare datorită caracteristicilor sale unice. Cultivarea acesteia este ușoară și simplă. Această secțiune prezintă toate informațiile esențiale de care aveți nevoie pentru întreținerea și dezvoltarea culturii celulare P19. Vom afla: Care este timpul de dublare al celulelor P19? Cum se cultivă linia celulară P19? Este P19 o linie celulară aderentă?
Puncte cheie pentru cultivarea celulelor P19
Timpul de dublare:
Timpul de dublare raportat pentru linia celulară P19 este de aproximativ 2-3 zile.
Aderentă sau în suspensie:
Linia celulară de carcinom embrionar P19 este aderentă.
Raportul de subcultivare:
Celulele P19 trebuie subcultivate la fiecare 48 de ore, iar pentru aceste celule trebuie menținut un raport de divizare de 1:10. Celulele aderente sunt spălate cu soluție salină tamponată cu fosfat 1X și incubate cu Accutase până când celulele se disociază. Celulele sunt adăugate în mediu de cultură și recoltate prin centrifugare. Celulele recoltate sunt resuspendate cu grijă și distribuite în flacoane noi.
Mediu de creștere:
Mediu DMEM/Ham's F12 conținând 5% ser fetal bovin, 3,1 g/L glucoză, 1,6 mM L-glutamină, 1,0 mM piruvat de sodiu, 15 mM HEPES și 1,2 g/L NaHCO₃ este utilizat pentru cultivarea celulelor P19.
Condiții de creștere:
Un incubator umidificat, setat la 37 °C, cu un flux de 5% CO₂, este esențial pentru creșterea și cultivarea liniei celulare de carcinom embrionar P19.
Depozitare:
Flacoanele cu celule P19 congelate trebuie depozitate la o temperatură sub -150 °C într-un congelator sau în faza de vapori a azotului lichid, pentru a menține viabilitatea celulelor pe termen lung.
Procesul de congelare și mediul:
Mediile CM-1 sau CM-ACF pot fi utilizate pentru congelarea celulelor P19 folosind o metodă de congelare lentă care protejează celulele de orice șoc și le păstrează viabilitatea.
Procesul de decongelare:
Celulele P19 congelate pot fi decongelate într-o baie de apă la 37 °C prin agitarea rapidă a flaconului timp de 40 până la 60 de secunde. Celulele sunt adăugate într-un mediu proaspăt și centrifugate pentru a îndepărta elementele mediului de congelare. Paleta de celule este resuspendată din nou, iar celulele sunt turnate într-un nou flacon pentru creștere.
Nivel de biosecuritate:
Pentru linia celulară P19 sunt necesare condiții de laborator de nivel 1 de biosecuritate.
Linia celulară P19: Avantaje și dezavantaje
În această secțiune vom discuta avantajele și dezavantajele liniei celulare P19.
Avantaje
- Potențial de diferențiere: Celulele P19 se pot diferenția în diverse tipuri de celule, inclusiv cardiomiocite, neuroni și celule microgliale. Pentru diferențiere, acestea necesită substanțe medicamentoase netoxice, precum acidul retinoic și dimetilsulfoxidul (DMSO). Acidul retinoic induce dezvoltarea neuronilor, microgliei și astrogliei, în timp ce DMSO inițiază dezvoltarea cardiomiocitelor care bat și a celulelor musculare netede. Astfel, celulele P19 sunt utile în studierea diferențierii celulare și a proceselor de dezvoltare.
- Sistem model: Linia celulară pluripotentă de carcinom embrionar P19 reprezintă un model valoros pentru studierea dezvoltării embrionare timpurii. Cercetătorii utilizează celulele P19 pentru a elucida căile de semnalizare celulară și mecanismele celulare și moleculare implicate în aceste procese.
Dezavantaje
- Origine murină: P19 este o linie celulară de carcinom embrionar murin. În consecință, rezultatele studiilor care utilizează aceste celule s-ar putea să nu se aplice în totalitate biologiei și proceselor umane.
Aplicații de cercetare ale celulelor P19
Celulele P19 au numeroase aplicații de cercetare datorită capacității lor de diferențiere și relevanței pentru biologia dezvoltării și cercetarea celulelor stem. Printre aplicațiile importante de cercetare ale celulelor de carcinom embrionar P19 se numără:
- Studii privind diferențierea celulară: După cum se știe, celulele P19 se pot diferenția în neuroni, celule microgliale, celule musculare netede și cardiomiocite; prin urmare, sunt utilizate pe scară largă pentru studierea proceselor de diferențiere celulară. În plus, acestea contribuie la cercetarea dezvoltării neuronale și cardiace, precum și a mecanismelor care stau la baza acestora. Un studiu realizat în 2018 a constatat că speciile reactive de oxigen (ROS) dirijează diferențierea celulelor P19 în tipuri specifice de celule și împiedică inducerea altora [3]. Un alt studiu a explorat procesul de diferențiere neurală mediat de acidul retinoic și a constatat implicarea căii de semnalizare PI3K/Akt/GSK3β [4].
- Biologia dezvoltării: Celulele P19 reprezintă un model de neprețuit pentru studierea dezvoltării embrionare timpurii. Acestea ajută cercetătorii să înțeleagă procese biologice complexe, precum formarea țesuturilor în timpul dezvoltării embrionare. Cercetarea a utilizat celule P19 și a studiat factorii moleculari care contribuie la formarea defectului septal ventricular (VSD). Rezultatele au arătat că un ARN lung necodificator, SNHG6, contribuie la VSD prin reglarea negativă a miRNA-101 și activarea căii Wnt/β-catenină [5].
- Testarea medicamentelor: Linia celulară de carcinom embrionar de șoarece P19 este utilizată, de asemenea, pentru a selecta potențiali candidați pentru medicamente. Un studiu a utilizat neuroni diferențiați din celule P19 și a investigat efectele neuroprotectoare de inhibare a acetilcolinesterazei ale L-Dopa sintetică și ale extractului apos din semințe de Mucuna pruriens. Rezultatele au arătat că extractul din plante a prezentat rezultate promițătoare în comparație cu L-Dopa [6].
Achiziționați astăzi linia celulară P19
Celulele P19: Publicații științifice
Această secțiune a articolului va prezenta câteva publicații de cercetare interesante care au ca subiect celulele P19.
Acest articol a fost publicat în revista Oncology Reports în 2017. Studiul a sugerat că hormonii sexuali hipofizari determină aderența, proliferarea și migrația liniilor celulare de teratocarcinom, inclusiv a celulelor P19.
Această publicație din revista Experimental & Molecular Medicine (2018) a utilizat celule P19 și a studiat funcția ARN-ului lung necodant uc.4. Rezultatele au arătat că uc.4 afectează diferențierea celulară prin modularea căii de semnalizare TGF-beta.
Acest articol de cercetare a fost publicat în 2018 în revista „Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine”. Studiul a constatat că extractul natural de țesut cerebral și cultura celulară 3D pot accelera diferențierea celulelor de carcinom embrionar P19 în celule neuronale.
Acest studiu a fost publicat în 2020 în revista „Journal of Ethnopharmacology”. Studiul a sugerat că extractul din frunze de Cichorium intybus L. poate induce diferențierea celulelor de carcinom embrionar P19 în celule β pancreatice producătoare de insulină.
Această cercetare a fost publicată în revista „Molecules” (2022). Studiul a explorat efectele neuroprotectoare și de inhibare a acetilcolinesterazei ale extractului din semințe de Mucuna pruriens asupra neuronilor din linia celulară P19.
Resurse pentru linia celulară P19: protocoale, videoclipuri și multe altele
În continuare sunt prezentate câteva resurse privind celulele P19.
- Protocolul de diferențiere neuronală a celulelor P19: Acest articol conține protocolul de diferențiere neuronală a celulelor P19 și alte informații utile despre diferențierea celulelor P19.
- Transfecția celulelor P19: Acest link vă va ajuta să aflați protocolul de transfecție a celulelor P19.
Linkul următor conține protocolul de cultură a celulelor P19.
- Celulele P19: Acest site web conține toate informațiile utile despre linia celulară P19, inclusiv condițiile de cultură, mediile de cultură pentru celulele P19, divizarea celulară și multe altele.
Explorarea liniei celulare P19: Întrebări frecvente
Referințe
- McBurney, M.W., Celule de carcinom embrionar P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): p. 135-40.
- Bressler, J., et al., Linia celulară de carcinom embrionar P19: un model pentru studierea interacțiunilor genă-mediu. Cell Culture Techniques, 2011: p. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey și G. Rödel, ROS mitocondrial direcționează diferențierea celulelor P19 pluripotente murine. Stem Cell Research, 2018. 30: p. 180-191.
- Fu, F. și colab., Acidul all-trans-retinoic induce diferențierea celulelor P19 în neuroni implicați în calea de semnalizare PI3K/Akt/GSK3β. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): p. 4386-4396.
- Jiang, Y., et al., ARN-ul lung necodificat SNHG6 contribuie la formarea defectului septal ventricular prin reglarea negativă a miR-101 și activarea căii Wnt/β-catenină. Die Pharmazie – O revistă internațională de științe farmaceutice, 2019. 74(1): p. 23-28.
- Kamkaen, N., et al., Extractul apos din semințele de Mucuna pruriens a îmbunătățit efectele neuroprotectoare și de inhibare a acetilcolinesterazei în comparație cu L-dopa sintetică. Molecules, 2022. 27(10): p. 3131.