Celulele NCI-H460 – Orientarea în cercetarea cancerului pulmonar cu ajutorul informațiilor oferite de linia celulară NCI-H460
NCI-H460 sunt celule de cancer pulmonar cu celule non-mici, de origine umană, utilizate frecvent în cercetarea carcinomului pulmonar și în toxicologie. Această linie celulară reprezintă un instrument valoros pentru studierea diverselor aspecte ale biologiei cancerului, inclusiv dezvoltarea și creșterea tumorii, precum și rezistența la medicamente. Mai mult, celulele NCI-H460 constituie un model adecvat pentru dezvoltarea de reactivi anticancerigeni.
- Mediu de creștere
- RPMI 1640 este utilizat ca mediu de cultură pentru NCI-H460. Acesta este suplimentat cu 10% ser fetal bovin, 2,1 mM glutamină stabilă și 2,0 g/L NaHCO3. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.
- Timpul de dublare
- Timpul de dublare al liniei celulare NCI-H460 este de aproximativ 33 de ore.
- Tipul de creștere
- Celulele canceroase pulmonare NCI-H460 sunt aderente.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-4
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați NCI-H460
Celulele NCI-H460: Origine și caracteristici generale
Originea și caracteristicile generale ale unei linii celulare contribuie în mare măsură la aplicațiile sale în cercetare. Această secțiune a articolului vă va ajuta să aflați originea și caracteristicile principale ale celulelor canceroase pulmonare NCI-H460. Veți afla: Ce sunt celulele NCI-H460? Care este tipul liniei celulare NCI-H460? Care este morfologia celulelor NCI-H460?
- Linia celulară NCI-H460 provine din efuziunea pleurală a unui bărbat european cu cancer pulmonar cu celule mari. A fost creată în 1982 de A.F. Gazdar și colegii săi.
- Celulele canceroase pulmonare NCI-H460 prezintă o morfologie epitelială.
- NCI-H460 este o linie celulară tumorigeneică cu cariotip hipotriploid. Numărul modal de cromozomi pentru aceste celule este 57. Celulele NCI-H460 prezintă, de asemenea, un număr modal de 58 de cromozomi, la rate comparabile.
- Aceste celule de cancer pulmonar prezintă numeroase mutații specifice, precum cele observate în tumorile pulmonare cu celule non-mici, de exemplu mutația KRAS, care sunt implicate în proliferarea, creșterea, invazia și metastazarea celulară.
Informații privind cultivarea celulelor NCI-H460
Trebuie să cunoașteți următoarele puncte cheie pentru manipularea și întreținerea corespunzătoare a liniei celulare NCI-H460. Acesta vă va informa cu privire la timpul de dublare NCI-H460, mediul de cultură NCI-H460 și procedurile de cultură celulară de bază pentru celulele de cancer pulmonar NCI-H460.
Puncte cheie pentru cultivarea celulelor NCI-H460
|
Timpul de dublare: |
Timpul de dublare a celulelor NCI-H460 este de aproximativ 33 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
Celulele de cancer pulmonar NCI-H460 sunt aderente. |
|
Raport de subcultivare: |
Raportul de divizare recomandat pentru linia celulară NCI-H460 este de 1:2 și 1:4. După îndepărtarea mediului vechi, celulele aderente sunt clătite cu soluție salină 1 x tampon fosfat. Ulterior, celulele sunt incubate cu soluția de transfer Accutase timp de 8 până la 10 minute la temperatura ambiantă. Celulele disociate sunt resuspendate într-un mediu de cultură și centrifugate. Celulele recoltate sunt din nou resuspendate și turnate în flacoane noi pentru cultivare. |
|
Mediu de cultură: |
RPMI 1640 este utilizat ca mediu de cultură NCI-H460. Acesta este suplimentat cu 10% ser fetal bovin, 2,1 mM glutamină stabilă și 2,0 g/L NaHCO3. Mediul trebuie înlocuit de 2 până la 3 ori pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Culturile NCI-H460 sunt menținute la temperatura de 37°C într-un incubator umidificat cu o alimentare continuă cu 5% CO2. |
|
Depozitare: |
Celulele de cancer pulmonar NCI-H460 pot fi stocate pe termen lung în faza de vapori a azotului lichid sau la o temperatură mai mică de -150°C într-un congelator electric pentru temperaturi foarte scăzute. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
Mediul CM-1 sau CM-ACF se utilizează pentru a congela și stoca celulele NCI-H460. Se recomandă o metodă de congelare lentă pentru a proteja viabilitatea celulară maximă. |
|
Procesul de decongelare: |
Celulele NCI-H460 congelate se dezgheață într-o baie de apă preîncălzită (la temperatura de 37°C) timp de 40 până la 60 de secunde, până când rămâne o mică aglomerare de gheață. Celulele decongelate se adaugă cu mediu proaspăt și se centrifughează pentru a elimina componentele mediului înghețat. Peletul celular colectat se resuspendă din nou, iar celulele se distribuie în flacoane noi care conțin mediul de creștere. Celulele NCI-H460 pot avea nevoie de aproape 24 de ore pentru a se fixa la suprafața flaconului. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Celulele de cancer pulmonar NCI-H460 sunt manipulate și menținute în laboratoare de nivel 1 de biosecuritate. |
Avantaje și dezavantaje ale celulelor NCI-H460
NCI-H460 este o linie celulară utilizată pe scară largă în cercetarea cancerului pulmonar. Această secțiune va acoperi avantajele și dezavantajele generale legate de celulele NCI-H460 pentru cancer pulmonar.
Avantaje
Avantajele liniei celulare NCI-H460 de cancer pulmonar cu celule non-small sunt:
-
Originea tumorală
Linia celulară NCI-H460 a fost obținută de la un pacient cu carcinom pulmonar cu celule mari, reprezentând acest tip particular de cancer pulmonar. Acestea sunt utilizate ca model pentru a studia biologia cancerului pulmonar și pentru a dezvolta tratamente noi și eficiente. Celulele NCI-H460 au potențial tumorigen și pot fi injectate în șoareci imunodeficienți pentru a crea modele tumorale in vivo în vederea studierii creșterii tumorale, a dezvoltării și a eficacității potențialelor medicamente.
-
Rate ridicate de proliferare
NCI-H460 prezintă rate de proliferare mai ridicate decât alte linii celulare de cancer pulmonar cu celule non-small, cum ar fi A549. Acest avantaj sporește disponibilitatea lor și ajută cercetătorii să efectueze experimente reproductibile și sensibile la timp.
Dezavantaje
Dezavantajele asociate celulelor de cancer pulmonar NCI-H460 sunt:
-
Omogenitate
Celulele NCI-H460 sunt omogene deoarece au fost obținute din tumoarea unui singur pacient. Prin urmare, în general, acestea nu prezintă complexitatea și eterogenitatea observate în tumorile pacienților.
Aplicații de cercetare ale celulelor NCI-H460
Celulele NCI-H460 pentru cancer pulmonar sunt utilizate pe scară largă în studiile legate de carcinomul pulmonar. Iată câteva dintre aplicațiile importante de cercetare ale celulelor NCI-H460:
- Cercetarea cancerului pulmonar: Celulele NCI-H460 sunt un model inestimabil pentru investigarea mecanismelor celulare și moleculare implicate în dezvoltarea, creșterea și metastazarea tumorilor. În plus, sunt utilizate pentru a studia căile de semnalizare imperative, țintele moleculare și diverse mutații genetice asociate cu progresia cancerului pulmonar. Mai multe studii au fost efectuate pe celule NCI-H460 pentru a studia acești factori în mod eficient. Un studiu efectuat în 2019 a propus că superexprimarea cazeinei ubiquitare nucleare și a substratului kinazelor dependente de ciclin (NUCKS) sunt implicate în creșterea celulelor tumorale prin reglarea căii de semnalizare PI3K/AKT [1]. În mod similar, un studiu in vitro și in vivo a utilizat celulele NCI-H460 pentru a studia rolul genei eIF4E. Rezultatele au arătat că gena eIF4E este implicată în creșterea carcinomului pulmonar și în angiogeneză și poate fi țintită pentru a dezvolta medicamente promițătoare împotriva cancerului pulmonar [2].
- Descoperirea și dezvoltarea medicamentelor: NCI-H460, o linie celulară de cancer pulmonar uman, este utilizată pe scară largă în studiile de descoperire și dezvoltare a medicamentelor. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a investiga toxicitatea și eficacitatea noilor candidați la medicamente, a terapiilor țintite și a tratamentelor care vizează în principal mutațiile NCI-H460 KRAS. Un studiu efectuat de Haoyue Hu și colegii săi în 2023 a utilizat celulele NCI-H460 pentru a studia efectele anticancerigene ale medicamentului anlotinib. Rezultatele au arătat că anlotinib a afectat parțial creșterea celulelor canceroase pulmonare mutante KRAS prin inhibarea cascadei de semnalizare MEK/ERK [3]. De asemenea, un compus fenolic, acidul carnosic, a fost analizat pentru activități antiproliferative și proapoptotice utilizând celule NCI-H460 [4].
- Rezistența la medicamente: Linia celulară NCI-H460 este ideală pentru studierea mecanismului de rezistență la medicamente al carcinomului pulmonar. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a dezvolta modele de rezistență la medicamente pentru a identifica genele, factorii moleculari și căile de semnalizare care stau la baza acestora. De exemplu, un studiu a dezvoltat celule NCI-H460 rezistente la pemetrexed, un agent antifolat cu ținte multiple, pentru a studia mecanismele moleculare subiacente ale rezistenței la pemetrexed în celulele cancerului pulmonar cu celule non-small [5].
Cumpărați linia celulară NCI-H460: Poarta dvs. către cercetarea cancerului pulmonar
Publicații de cercetare cu celule NCI-H460
Iată câteva publicații de cercetare interesante despre linia celulară de carcinom pulmonar NCI-H460.
Acest studiu din Molecules (2023) a propus că un α-1,6-glucan natural, BBWPW, din fasole neagră inhibă proliferarea celulelor NCI-H460 prin reglarea căii PI3K/AKT/MAPK.
Acest articol din Phytomedicine (2019) a studiat că dioscin-6′-O-acetatul, un compus natural nou, exercită un efect antiproliferativ asupra celulelor canceroase pulmonare NCI-H460.
miRNA-425-5p sporește creșterea cancerului pulmonar prin axa de semnalizare PTEN/PI3K/AKT
Cercetarea BMC Pulmonary Medicine (2020) afirmă că microARN-425-5p sporește tumorigeneza carcinomului pulmonar prin intermediul căii PTEN/PI3K/AKT.
Acest articol din Molecular Medicine Reports (2017) a propus potențialul antitumoral și mecanismele de bază ale compusului chinalizarin în NCI-H460 și alte celule de cancer pulmonar.
Această cercetare din Food and Function (2019) evidențiază potențialul efect anti-cancer al extractului de Eucalyptus globulus labill. folosind celule NCI-H460. Rezultatele au arătat că extractul de plantă a prezentat aceste efecte prin creșterea expresiei p53 NCI-H460 și modularea profilului ciclului celular.
Resurse pentru linia celulară NCI-H460: Protocoale, videoclipuri și multe altele
Iată câteva resurse online care prezintă celulele de cancer pulmonar NCI-H460.
- Transfecția celulelor NCI-H460: Acest tutorial video este un ghid pas cu pas pentru transfectarea celulelor NCI-H460 cu ADN plasmidic.
Următoarele link-uri conțin informații imperative privind cultura celulară pentru celulele H460.
- Celule NCI-H460: Acest site va furniza informații importante despre mediul de cultură al celulelor NCI-H460, procedurile de subcultură, congelare și decongelare.
- Transferul celulelor NCI-H460: Acest document vă va ghida cu privire la trecerea și subculturile liniei de celule NCI-H460. În plus, vă va ajuta să învățați protocolul de transfecție pentru celulele NCI-H460.
Explorarea liniei celulare NCI-H460: Întrebări frecvente și sugestii
Referințe
- Hu, C., și colab., NUCKS promovează proliferarea, migrația și invazia celulelor canceroase pulmonare prin calea de semnalizare Pi3k/Akt. Medicină clinică și investigativă, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., și colab., EGPI-1, un nou inhibitor al interacțiunii eIF4E/eIF4G, inhibă creșterea celulelor cancerului pulmonar și angiogeneza prin calea de semnalizare Ras/MNK/ERK/eIF4E. Interacțiuni chimico-biologice, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., și colab., Anlotinib exercită efecte anti-cancer asupra celulelor de cancer pulmonar cu mutație KRAS prin suprimarea căii MEK / ERK. Managementul și cercetarea cancerului, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., și colab., Acidul carnosic prezintă efecte antiproliferative și proapoptotice în celulele pulmonare tumorale NCI-H460 și non-tumorale IMR-90. Jurnalul de toxicologie și sănătatea mediului, Partea A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., și colab., Stabilirea și caracterizarea celulelor NCI-H460/PMT rezistente la pemetrexed. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (Formerly Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.