Celule NCI-H1299: Cercetare și implicații clinice ale celulelor NCI-H1299 pentru cancerul pulmonar
NCI-H1299 este o linie celulară imortalizată de cancer pulmonar uman cu celule non-smici utilizate pe scară largă în cercetarea oncologică imună, cancer și descoperirea de medicamente. Mai mult, cercetătorii au utilizat aceste celule pentru a investiga sensibilitatea la medicamente, căile de semnalizare subiacente și mecanismele moleculare legate de cancerul pulmonar. În plus, aceste celule sunt utilizate pentru a studia infecțiile virale, cum ar fi SARS-CoV-2.
Caracteristicile generale și originea celulelor NCI-H1299
Primul lucru pe care trebuie să îl știți despre o linie celulară este originea și caracteristicile sale generale, deoarece acestea vă ajută să concepeți utilizarea acesteia în cadrul cercetării dumneavoastră. Această secțiune a articolului vă va ajuta să aflați câteva informații importante despre originea și caracteristicile NCI-H1299. Cum ar fi, ce sunt celulele canceroase pulmonare NCI-H1299? Ce tip de celulă este NCI-H1299? Care este dimensiunea celulelor NCI-H1299? Care este diferența dintre A549 și NCI-H1299?
- Linia celulară NCI-H1299 provine dintr-o metastază ganglionară a plămânului unui bărbat caucazian de 43 de ani, bolnav de cancer.
- Aceste celule prezintă o deleție parțială homozigotă a genei p53; astfel, ele nu exprimă proteina p53. Lipsa expresiei proteinei p53 NCI-H1299 contribuie la tendința proliferativă a celulelor canceroase pulmonare H1299.
- Pe lângă p53, aceste celule imortalizate sunt raportate ca având mutația NCI-H1299 KRAS, responsabilă de proprietățile lor de creștere, proliferare, migrație și invazie.
- Cariotipul NCI-H1299 este aproape diploid.
- Celulele NCI-H1299 au o morfologie asemănătoare celulelor epiteliale.
- Aceste celule sunt aplatizate și au o grosime mai mică de 5 µm.
NCI-H1299 și A549
NCI-H1299 și A549 sunt linii celulare de cancer pulmonar non-small. Celulele NCI-H1299 sunt mai agresive și mai sensibile în comparație cu A549. Ambele au mutații relativ similare, cum ar fi KRAS. Cu toate acestea, spre deosebire de celulele NCI-H1299, celulele A549 exprimă gena P53.
Informații privind culturile
Menținerea unei culturi de linii celulare nu este ușoară până când nu cunoașteți toate informațiile cheie despre aceasta, inclusiv: Care este timpul de dublare al NCI-H1299? Care este densitatea de însămânțare a NCI-H1299? Ce este mediul celular NCI-H1299? Cum se cultivă liniile celulare NCI-H1299? Această secțiune vă va ajuta să aflați răspunsurile la toate aceste întrebări despre cultivarea celulelor NCI-H1299.
Puncte cheie pentru cultivarea celulelor NCI-H1299
|
Timpul de dublare: |
Timpul de dublare a celulelor NCI-H1299 variază între 22-30 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
NCI-H1299 este o linie celulară aderentă. |
|
Raport de subcultivare: |
Celulele NCI-H1299 sunt subcultivate la un raport recomandat de 1:3 până la 1:6. Pentru însămânțare, celulele aderente sunt spălate cu 1x PBS și incubate cu soluția de trecere Accutase timp de 8 până la 10 minute la temperatura ambiantă. Celulele detașate sunt adăugate cu mediu de cultură proaspăt și centrifugate. Peletul celular este apoi resuspendat, iar celulele sunt turnate în flacoane noi care conțin mediu de creștere. |
|
Mediu de creștere: |
RPM1 1640 este un mediu ideal pentru celulele NCI-H1299. Acesta este suplimentat cu 10% ser fetal bovin, 4500 mg/L glucoză, 2,0 mM L-glutamină, 1 mM piruvat de sodiu, 1500 mg/L NaHCO3 și 10 mM HEPES. Mediul trebuie reînnoit la fiecare 2 până la 3 ori pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Culturile de celule de cancer pulmonar NCI-H1299 sunt menținute într-un incubator umidificat la 37°C, cu o alimentare cu 5% CO2. |
|
Depozitare: |
Linia celulară NCI-H1299 poate fi depozitată pe termen lung în faza de vapori a azotului lichid sau în congelatoare cu temperaturi foarte scăzute, la temperaturi sub -150°C. |
|
Procesul și mediul de congelare: |
CM-1 sau CM-ACF sunt medii de congelare a celulelor NCI-H1299. Celulele sunt congelate folosind un proces de congelare lentă care permite o scădere a temperaturii de numai 1 grad pe minut pentru a proteja viabilitatea celulelor. |
|
Procesul de decongelare: |
Celulele NCI-H1299 congelate sunt agitate rapid într-o baie de apă preîncălzită la 37 de grade Celsius timp de 40 până la 60 de secunde până când rămâne o mică bucată de gheață. Celulele decongelate sunt adăugate cu mediu proaspăt și pot fi cultivate direct în flacoane noi sau centrifugate. În primul caz, mediul trebuie înlocuit după 24 de ore de incubare. Centrifugarea ajută la îndepărtarea elementelor de mediu înghețate. Ulterior, celulele recoltate sunt resuspendate în mediu proaspăt și distribuite în flacoane noi pentru cultivare. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Pentru manipularea culturii de celule NCI-H1299 este necesar un laborator cu nivel de biosecuritate 1. |
Cumpărați linia celulară NCI-H1299: instrumente de cercetare de înaltă calitate pentru investigarea biologiei cancerului pulmonar
Avantaje și dezavantaje ale celulelor NCI-H1299
Ca și alte linii celulare de cancer uman, NCI-H1299 posedă, de asemenea, unele caracteristici distincte asociate cu avantaje și dezavantaje specifice. În continuare, am sintetizat câteva dintre cele semnificative.
Avantaje
Principalele avantaje ale liniei celulare NCI-H1299 de cancer pulmonar cu celule non-small sunt:
-
Model in vitro de cancer pulmonar
Liniile celulare NCI-H1299 au fost dezvoltate din metastaze ganglionare ale carcinomului pulmonar și, prin urmare, dețin proprietăți relativ similare. Prin urmare, aceste celule pot servi ca model in vitro pentru investigarea biologiei cancerului pulmonar, a mecanismelor celulare și moleculare și pentru depistarea și testarea potențialelor terapii.
-
Ușor de cultivat
Celulele NCI-H1299 sunt ușor de cultivat și de întreținut într-un laborator de cercetare. Nu există cerințe și proceduri complicate de cultivare a celulelor.
-
NCI-H1299 P53 și NCI-H1299 mutație KRAS
Celulele NCI-H1299 nu au expresia genei p53, care permite celulelor să prolifereze viguros. În plus, ele posedă mutația KRAS, care contribuie la creșterea, proliferarea, invazia și migrația celulară. Având în vedere acestea, cercetătorii utilizează celulele H1299 pentru a investiga mecanismele moleculare relevante pentru mutațiile KRAS și P53.
Dezavantaje
Dezavantajele celulelor NCI-H1299 sunt:
-
Specificitate tisulară
NCI-H1299 provine din țesut pulmonar. Prin urmare, aplicabilitatea sa este limitată în principal la cercetarea carcinomului pulmonar. Este posibil să nu reprezinte pe deplin eterogenitatea și caracteristicile generale ale altor tipuri de cancer.
Aplicații de cercetare ale celulelor NCI-H1299
Linia celulară NCI-H1299 este utilizată pe scară largă în cercetarea cancerului pulmonar. Aici sunt menționate câteva aplicații promițătoare ale acestei linii celulare.
- Biologia cancerului: Celulele NCI-H1299 servesc drept un instrument de cercetare excelent pentru a investiga dezvoltarea și progresia cancerului, precum și mecanismele celulare și moleculare aferente. Aceste celule dispun de anumite mutații, permițând cercetătorilor să exploreze comportamentele celulelor canceroase, căile de semnalizare și profilurile de expresie genică aferente. Mai multe studii au utilizat linia celulară NCI-H1299 de carcinom pulmonar cu celule non-small pentru a studia biologia cancerului pulmonar. De exemplu, un studiu efectuat în 2018 a investigat calea de semnalizare implicată în apoptoza celulelor de cancer pulmonar utilizând celulele NCI-H1299. Cercetătorii au constatat că calea PI3K/AKT contribuie la proliferarea celulară, iar inhibarea acesteia poate provoca moartea celulelor canceroase [1]. De asemenea, o altă cercetare a investigat mecanismele implicate în tranziția epitelială la mezenchimală (EMT) NCI-H1299. Acest studiu a propus că o proteină extracelulară SPARC (proteină secretată acidă și bogată în cisteină) contribuie la EMT și migrația NCI-H1299, promovând astfel tumorogeneza în celule - proteina SPARC acționează ca un mediator al semnalizării TGF-β1 [2].
- Descoperirea și screeningul medicamentelor: NCI-H1299, o linie celulară de cancer pulmonar uman, este utilizată pe scară largă pentru evaluarea toxicității și eficacității potențialelor medicamente. În plus, este utilizată de cercetători pentru a investiga mecanismul de acțiune al medicamentelor antitumorale. Studiile au folosit, de asemenea, aceste celule pentru a identifica posibile ținte ale medicamentelor și mecanisme de rezistență. De exemplu, cercetările efectuate de Xiao-Yun Shen și colegii săi au investigat potențialul anticancerigen al compusului natural bruceină D (BD). Rezultatele au arătat că BD împiedică în mod semnificativ proliferarea, invazia și migrația celulelor NCI-H1299. Prin urmare, aceasta poate fi considerată o potențială terapie adjuvantă pentru tratarea carcinomului pulmonar cu celule non-small [3]. În mod similar, un studiu a evaluat efectele citotoxice ale xanthohumolului singur și în combinație cu medicamentul chimioterapeutic cisplatin asupra celulelor de cancer pulmonar NCI-H1299 [4].
Publicații de cercetare cu celule NCI-H1299
Unele publicații de cercetare semnificative și cele mai citate despre linia celulară de carcinom pulmonar NCI-H1299 sunt aici.
Acest articol este publicat în revista Human and Experimental Toxicology (2021). Studiul a propus că indole-3-carbinolul induce apoptoza în H1299 prin creșterea nivelului de specii reactive de oxigen (ROS).
Această cercetare a fost publicată în 2018 în revista Cellular Physiology and Biochemistry. Rezultatele cercetării au arătat că combinația de acid cafeic și paclitaxel exercită un efect anti-cancer sinergic în linia celulară de cancer pulmonar cu celule non-small, NCI-H1299.
Acest articol de cercetare a fost publicat în Molecular Medicine Reports (2018). Studiul a evaluat efectul antitumoral al tubeimoside-1, o saponină triterpenoidă, și mecanismele subiacente în linia celulară NCI-H1299.
Pristimerina induce apoptoza și inhibă proliferarea, migrația în celulele de cancer pulmonar H1299
Acest articol publicat în Journal of Cancer (2020) a propus că Pristimerin, un compus natural suprimă proliferarea și migrația celulelor NCI-H1299.
Mecanismul de reglare a genei VIPR1 în celulele adenocarcinomului pulmonar uman H1299
Acest studiu din Medical Oncology (2019) a explorat efectele potențiale ale supraexprimării genei VIPR1 asupra liniei celulare de adenocarcinom NCI-H1299.
Resurse pentru linia celulară NCI-H1299: Protocoale, videoclipuri și multe altele
Iată câteva resurse online care prezintă celulele NCI-H1299.
- Transfecția NCI-H1299: Acest videoclip va explica protocolul de transfecție tranzitorie pentru liniile celulare NCI-H1299.
- Subculturalizarea unei linii de celule aderente: Acest videoclip vă va ajuta să învățați o procedură generală de subcultură pentru o linie celulară aderentă.
Următorul link conține informații privind cultura celulară pentru celulele NCI-H1299.
- Linia celulară NCI-H1299: Acest link vă poate ajuta să aflați despre protocolul de trecere și transfecție a celulelor NCI-H1299.
Întrebări frecvente despre linia celulară NCI-H1299
Referințe
- Gu, J., et al., Studiul apoptozei induse de EGCG în celulele cancerului pulmonar prin inhibarea căii de semnalizare PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., și colab. SPARC acționează ca un mediator al TGF-β1 în promovarea tranziției epiteliale la mezenchimale în celulele de cancer pulmonar A549 și H1299. Biofactorii, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y. și colab. un studiu privind mecanismul bruceinei D în tratamentul celulelor H1299 de cancer pulmonar cu celule non-small. Jurnalul mondial de medicină tradițională chineză, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., și colab., Efectele citotoxice ale Xanthohumolului și ale combinației sale cu Cisplatin asupra celulelor H1299 de cancer pulmonar metastatic uman. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.