Celulele NCI-H1299: Cercetări și implicații clinice ale celulelor canceroase pulmonare NCI-H1299

Informații privind cultivarea

Menținerea unei culturi de linii celulare nu este ușoară până când nu cunoașteți toate informațiile esențiale despre aceasta, inclusiv: Care este timpul de dublare al liniei celulare NCI-H1299? Care este densitatea de însămânțare a liniei celulare NCI-H1299? Care este mediul de cultură pentru celulele NCI-H1299? Cum se cultivă liniile celulare NCI-H1299? Această secțiune vă va ajuta să aflați răspunsurile la toate aceste întrebări privind cultivarea celulelor NCI-H1299.

Puncte cheie pentru cultivarea celulelor NCI-H1299

Timpul de dublare:

Timpul de dublare al liniei celulare NCI-H1299 variază între 22 și 30 de ore.

Aderentă sau în suspensie:

NCI-H1299 este o linie celulară aderentă.

Raportul de subcultivare:

Celulele NCI-H1299 sunt subcultivate la un raport recomandat de 1:3 până la 1:6. Pentru însămânțare, celulele aderente sunt spălate cu PBS 1x și incubate cu soluție de pasaj Accutase timp de 8 până la 10 minute la temperatura camerei. Celulele desprinse sunt adăugate în mediu de cultură proaspăt și centrifugate. Peleta celulară este apoi resuspendată, iar celulele sunt transferate în flacoane noi care conțin mediu de creștere.

Mediu de creștere:

RPM1 1640 este un mediu ideal pentru celulele NCI-H1299. Este suplimentat cu 10% ser fetal bovin, 4500 mg/L glucoză, 2,0 mM L-glutamină, 1 mM piruvat de sodiu, 1500 mg/L NaHCO3 și 10 mM HEPES. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.

Condiții de creștere:

Culturile de celule canceroase pulmonare NCI-H1299 sunt menținute într-un incubator umidificat la 37 °C, cu un flux de CO₂ de 5%.

Depozitare:

Linia celulară NCI-H1299 poate fi păstrată pe termen lung în faza de vapori a azotului lichid sau în congelatoare la temperaturi extrem de scăzute, sub -150 °C.

Procesul de congelare și mediul:

CM-1 sau CM-ACF sunt medii de congelare pentru celulele NCI-H1299. Celulele sunt congelate folosind un proces de congelare lentă, care permite o scădere a temperaturii de doar 1 grad pe minut, pentru a proteja viabilitatea celulară.

Procesul de decongelare:

Celulele NCI-H1299 congelate sunt agitate rapid într-o baie de apă preîncălzită la 37 de grade Celsius timp de 40 până la 60 de secunde, până când rămâne doar o bucățică de gheață. Celulelor decongelate li se adaugă mediu proaspăt și pot fi cultivate direct în flacoane noi sau centrifugate. În primul caz, mediul trebuie înlocuit după 24 de ore de incubare. Centrifugarea ajută la îndepărtarea elementelor din mediul de congelare. Ulterior, celulele recoltate sunt resuspendate în mediu proaspăt și transferate în flaconul nou pentru cultivare.

Nivel de biosecuritate:

Pentru manipularea culturii celulare NCI-H1299 este necesar un laborator de nivel 1 de biosecuritate.

Achiziționați linia celulară NCI-H1299: instrumente de cercetare de înaltă calitate pentru studierea biologiei cancerului pulmonar

Avantajele și dezavantajele celulelor NCI-H1299

La fel ca alte linii celulare canceroase umane, NCI-H1299 prezintă, de asemenea, câteva caracteristici distincte, asociate cu avantaje și dezavantaje specifice. În continuare, am sintetizat câteva dintre cele mai semnificative.

Avantaje

Principalele avantaje ale liniei celulare NCI-H1299 de cancer pulmonar cu celule non-mici sunt:

• Model in vitro de cancer pulmonar

  Liniile celulare NCI-H1299 au fost dezvoltate din metastaze ganglionare ale carcinomului pulmonar și, prin urmare, prezintă proprietăți relativ similare. Prin urmare, aceste celule pot servi drept model in vitro pentru studierea biologiei cancerului pulmonar, a mecanismelor celulare și moleculare, precum și pentru screeningul și testarea potențialelor terapii.

• Ușor de cultivat

  Celulele NCI-H1299 sunt ușor de cultivat și de întreținut într-un laborator de cercetare. Nu există cerințe și proceduri complicate de cultivare celulară.

• Mutațiile P53 și KRAS ale celulelor NCI-H1299

  Celulele NCI-H1299 nu prezintă expresia genei p53, ceea ce le permite să se prolifereze viguros. În plus, acestea prezintă o mutație KRAS care contribuie la creșterea, proliferarea, invazia și migrația celulară. Având în vedere aceste aspecte, cercetătorii utilizează celulele H1299 pentru a studia mecanismele moleculare relevante pentru mutațiile KRAS și P53.

Dezavantaje

Dezavantajele celulelor NCI-H1299 sunt:

• Specificitatea țesutului

  NCI-H1299 provine din țesutul pulmonar. Prin urmare, aplicabilitatea sa este limitată în principal la cercetarea carcinomului pulmonar. Este posibil să nu reprezinte pe deplin heterogenitatea și caracteristicile generale ale altor tipuri de cancer.

Aplicații de cercetare ale celulelor NCI-H1299

Linia celulară NCI-H1299 este utilizată pe scară largă în cercetarea cancerului pulmonar. Câteva aplicații promițătoare ale acestei linii celulare sunt menționate aici.

• Biologia cancerului: Celulele NCI-H1299 constituie un instrument de cercetare excelent pentru studierea dezvoltării și progresiei cancerului, precum și a mecanismelor celulare și moleculare asociate. Aceste celule prezintă anumite mutații, permițând cercetătorilor să exploreze comportamentele celulelor canceroase, căile de semnalizare și profilurile de expresie genică asociate. Mai multe studii au utilizat linia celulară NCI-H1299 de carcinom pulmonar cu celule non-mici pentru a studia biologia cancerului pulmonar. De exemplu, un studiu realizat în 2018 a investigat calea de semnalizare implicată în apoptoza celulelor canceroase pulmonare folosind celule NCI-H1299. Cercetătorii au descoperit că calea PI3K/AKT contribuie la proliferarea celulară, iar inhibarea acesteia poate provoca moartea celulelor canceroase [1]. De asemenea, o altă cercetare a investigat mecanismele implicate în tranziția epitelial-mezenchimală (EMT) a liniei NCI-H1299. Acest studiu a sugerat că o proteină extracelulară, SPARC (proteină secretată acidă și bogată în cisteină), contribuie la EMT și la migrația celulelor NCI-H1299, promovând astfel tumorigeneza în celule — proteina SPARC acționează ca mediator al semnalizării TGF-β1 [2]. 

• Descoperirea și screeningul medicamentelor: NCI-H1299, o linie celulară de cancer pulmonar uman, este utilizată pe scară largă pentru a evalua toxicitatea și eficacitatea potențialelor medicamente. În plus, aceasta este folosită de cercetători pentru a investiga mecanismul de acțiune al medicamentelor antitumorale. Studiile au utilizat, de asemenea, aceste celule pentru a identifica posibile ținte terapeutice și mecanisme de rezistență. De exemplu, cercetarea condusă de Xiao-Yun Shen și colegii săi a investigat potențialul anticancerigen al compusului natural bruceină D (BD). Rezultatele au arătat că BD împiedică în mod semnificativ proliferarea, invazia și migrația celulelor NCI-H1299. Prin urmare, acesta poate fi considerat o potențială terapie adjuvantă pentru tratarea carcinomului pulmonar cu celule non-mici [3]. În mod similar, un studiu a evaluat efectele citotoxice ale xantohumolului, atât în monoterapie, cât și în asociere cu medicamentul chimioterapeutic cisplatină, asupra celulelor canceroase pulmonare NCI-H1299 [4].

Întrebări frecvente despre linia celulară NCI-H1299

Referințe

1. Gu, J. și colab., Studiu privind apoptoza indusă de EGCG în celulele canceroase pulmonare prin inhibarea căii de semnalizare PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
2. Sun, W., et al., SPARC acționează ca mediator al TGF-β1 în promovarea tranziției epitelial-mezenchimale în celulele canceroase pulmonare A549 și H1299. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
3. Shen, X.-Y., et al., Un studiu privind mecanismul de acțiune al bruceinei D în tratamentul celulelor H1299 de cancer pulmonar cu celule non-mici. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
4. Long, B. și colab., Efectele citotoxice ale xantohumolului și ale combinației acestuia cu cisplatina asupra celulelor H1299 de cancer pulmonar metastatic uman. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.