Linia celulară INS-1
INS-1 este o linie celulară de insulinom de șobolan bine caracterizată, utilizată pe scară largă în cercetarea diabetului. Celulele INS-1 secretă insulină la stimularea cu glucoză; prin urmare, acestea sunt utilizate pentru a studia metabolismul glucozei, fiziologia celulelor beta și reglarea secreției de insulină. Mai mult, aceste celule sunt, de asemenea, utilizate în screening, testarea și dezvoltarea de potențiale terapii împotriva diabetului zaharat.
Acest articol vă va oferi toate informațiile necesare despre celulele beta INS-1 pe care trebuie să le cunoașteți înainte de a le utiliza în cercetarea dumneavoastră. În principal, veți afla următoarele:
- Caracteristicile generale și originea celulelor INS-1
- Linia celulară INS-1: Informații privind cultivarea
- Avantaje și dezavantaje ale liniei celulare INS-1
- Aplicații de cercetare ale celulelor de insulinom de șobolan INS-1
- Publicații de cercetare cu celule beta INS-1
- Resurse pentru linia celulară INS-1: Protocoale, videoclipuri și multe altele
1. Caracteristicile generale și originea celulelor INS-1
Cunoașterea caracteristicilor generale și a originii unei linii celulare vă poate ajuta foarte mult să o utilizați eficient și eficace în cercetarea dumneavoastră. Această secțiune a articolului vă va informa despre originea și caracteristicile generale ale INS-1. Veți ști: Ce este linia celulară INS-1 Insulinom de șobolan? Care sunt caracteristicile generale ale INS-1? Ce este linia celulară INS-1 832/3? Ce este INS-1E?
- Celulele INS-1 au fost izolate inițial de la un șobolan în vârstă de 666 de zile cu insulinom transplantabil indus de raze X.
- Celulele INS-1 sunt bi-hormonale. Ele exprimă simultan proteinele insulină și proglucagon. Aceste celule sunt considerate imature deoarece prezintă niveluri scăzute de expresie a factorului de transcripție Nkx6.1 și sunt lipsite de markeri ai celulelor alfa [1].
- Există două subclone de celule INS-1, și anume, INS-1E și INS-1 832/3.
- INS-1E diferă de linia celulară părinte INS-1 în ceea ce privește răspunsurile secretare la glucoză și conținutul de insulină.
- INS-1 832/3 sau INS-1 832/13 este, de asemenea, o subclonă a liniei celulare INS-1. Acesta este un model neprețuit pentru studierea funcției celulelor beta ale insulelor pancreatice și a reglării secreției de insulină. De asemenea, diferă de celulele parentale INS-1 în contextul secrețiilor de insulină stimulate de glucoză (GSIS).
2. Linia celulară INS-1: Informații privind cultura
Pentru a manipula și menține eficient o linie celulară, trebuie să cunoașteți următoarele informații de cultură despre aceasta. Această secțiune a articolului va acoperi toate punctele cheie pentru cultivarea celulelor INS-1. Veți afla: Cum se fac culturile de celule beta INS-1? Care este protocolul de cultivare a celulelor INS-1? Care este timpul de dublare a celulelor INS-1? Care este mediul celular pentru insulinomul de șobolan INS-1?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor INS-1
|
Timpul de dublare: |
Timpul de dublare a populației de celule INS-1 este de aproximativ 44 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
Celulele INS-1 cresc atât în suspensie, cât și sub formă aderentă. |
|
Raportul de subcultivare: |
Celulele INS-1 sunt subcultivate la un raport de divizare de 1:3. Pe scurt, celulele în suspensie sunt colectate. Celulele aderente sunt clătite cu PBS și incubate cu soluția de Accutase. După detașare, celulele sunt adăugate cu mediu proaspăt. Ulterior, atât celulele suspendate, cât și cele aderente sunt centrifugate și colectate. Celulele sunt resuspendate cu atenție și distribuite în flacoane noi pentru creștere. |
|
Mediu de creștere: |
RPM1 1640 este utilizat pentru cultivarea liniei celulare INS-1rat insulinom. Mediul este suplimentat cu 10% ser fetal bovin inactivat termic, 2,1 mM glutamină stabilă, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 și 1 mM piruvat de sodiu. |
|
Condiții de creștere: |
Celulele INS-1 sunt păstrate într-un incubator umidificat, setat la temperatura de 37°C și cu o alimentare continuă cu 5% CO2. |
|
Depozitare: |
Celulele beta INS-1 pot fi stocate pe termen lung în faza de vapori a azotului lichid sau la o temperatură sub -150°C într-un congelator electric. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
Mediile CM-1 sau CM-ACF sunt utilizate pentru a congela celulele INS-1 printr-un proces lent de congelare. Acesta permite o scădere a temperaturii de numai 1°C pe minut pentru a proteja viabilitatea celulelor. |
|
Procesul de decongelare: |
Celulele INS-1 congelate se dezgheață într-o baie de apă prestabilită la 37 de grade Celsius timp de 40 până la 60 de secunde. După decongelare, celulele sunt adăugate cu mediu proaspăt și turnate direct într-un balon nou pentru creștere. După 24 de ore, mediul este înlocuit pentru a elimina componentele mediului care îngheață. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Pentru cultivarea celulelor insulinomului de șobolan INS-1 este necesar un laborator cu nivel de biosecuritate 1. |
3. avantaje și dezavantaje ale liniei celulare INS-1
Ca și alte linii celulare, INS-1 posedă, de asemenea, unele caracteristici distincte asociate cu anumite avantaje și dezavantaje. În continuare, am menționat câteva dintre cele semnificative.
Avantaje
Principalele avantaje ale liniei celulare INS-1 sunt:
-
Bine caracterizată
INS-1 este o linie celulară bine stabilită și bine caracterizată. Aceasta a fost utilizată în numeroase studii de cercetare. Aceasta își menține caracteristicile fenotipice și capacitățile de secreție a insulinei pe o perioadă mai lungă, oferind astfel rezultate experimentale fiabile și consecvente.
-
Model de celule beta
Celulele INS-1 sunt utilizate pentru a studia funcția celulelor beta ale insulelor pancreatice, deoarece secretă insulină și răspund la fluctuațiile nivelului de glucoză.
dezavantaje
Dezavantajele celulelor INS-1 sunt:
-
Origine non-umană
Celulele beta INS-1 au o origine non-umană. Acestea au fost derivate din insulinomul de șobolan. Acest lucru poate cauza diferențe specifice speciei și poate limita transpunerea directă a rezultatelor experimentale în fiziologia umană.
4. Aplicații de cercetare ale celulelor INS-1 insulinom de șobolan
Celulele beta INS-1 sunt utilizate pe scară largă în cercetarea diabetului. Câteva aplicații promițătoare ale acestei linii celulare sunt menționate aici.
- Studii privind secreția de insulină: Celulele INS-1 au capacitatea de a secreta insulină și, prin urmare, sunt utilizate pe scară largă pentru a studia mecanismele celulare de bază ale secreției de insulină. Cercetătorii investighează factorii esențiali implicați în eliberarea insulinei, inclusiv metabolismul glucozei, căile de semnalizare, hormonii și agenții farmacologici. Un studiu a constatat că o cale dependentă de canalul ionic K + ATP reglează secreția de insulină în celulele beta INS-1 [2]. În plus, studiile au mai arătat că căile GLP-1R și AKT/PDX1 sunt, de asemenea, implicate în secreția de insulină în celulele insulinomului de șobolan INS-1 [3].
- Studii privind funcția celulelor beta: Celulele INS-1 au caracteristici asemănătoare celulelor beta ale insulelor pancreatice, cum ar fi receptivitatea la metabolismul glucozei și secreția de insulină. Prin urmare, acestea sunt utilizate pentru a studia procesele și funcțiile fiziologice ale celulelor beta. Un studiu efectuat în 2022 a utilizat celule INS-1 și a dezvoltat un model de disfuncție a celulelor beta prin H2O2. Ei au studiat viabilitatea celulară, secreția de insulină și markerii legați de stresul oxidativ în aceste celule ca răspuns la tratamentul cu compuși naturali [4].
- Descoperirea și dezvoltarea medicamentelor: Celulele insulinomului de șobolan INS-1 sunt utilizate pe scară largă pentru depistarea și testarea compușilor sau medicamentelor antidiabetice. Ele pot fi utilizate pentru a studia efectele potențiale ale agenților terapeutici asupra secreției de insulină și a altor parametri relevanți. Un studiu a constatat că loganina, o componentă a unei formule chinezești pe bază de plante, a protejat funcția de secreție de insulină a celulelor INS-1 și a exercitat potențiale efecte antidiabetice. Componenta a mediat aceste efecte benefice prin inhibarea translocării nucleare a genei FOXO1 prin intermediul căii PI3K/AKT [5].
5. Publicații de cercetare care prezintă celulele beta INS-1
Iată câteva publicații de cercetare semnificative care prezintă linia celulară de insulinom de șobolan INS-1.
Acest studiu a fost publicat în Internation Journal of Molecular Sciences în 2018. Studiul a propus că un compus natural cristalin galben, Alpha-mangostin, promovează secreția de insulină în celulele beta INS-1 și le protejează împotriva leziunilor induse de toxina celulelor beta streptozotocin.
Această cercetare a fost publicată în acta pharmacologica sinica în 2018. Concluzia studiului a arătat că compusul epicatechin promovează secreția de insulină stimulată de glucoză în celulele beta INS-1 afectate de acizii grași saturați prin activarea căii CaMKII.
Acest articol din Molecules (2019) a propus că un nou compus natural Glicozid feniletanoid afectează secreția de insulină în celulele insulinomului de șobolan INS-1 și are astfel potențial antidiabetic.
Loureirin B promovează secreția de insulină prin intermediul căilor GLP-1R și AKT/PDX1
Această cercetare a fost publicată în European Journal of Pharmacology (2022). Studiul a propus că Loureirin B, un produs natural îmbunătățește secreția de insulină în celulele beta ale insulelor pancreatice INS-1 prin modularea căilor AKT/PDX1 și GLP-1R.
Acest articol Integrative Medicine Research (2018) a evaluat potențialul anticancerigen al extractului de Withania coagulans utilizând celulele canceroase INS-1.
6. Resurse pentru linia celulară INS-1: Protocoale, videoclipuri și multe altele
Iată câteva resurse online care prezintă celulele INS-1:
- Subcultură de celule în suspensie: Acest videoclip este un ghid cuprinzător pentru subcultura celulelor care cresc în culturi în suspensie.
- Subcultură de celule aderente: Acest videoclip vă va ajuta să învățați protocolul general pentru pasturarea celulelor aderente.
Următorul link conține protocolul de cultură a celulelor INS-1:
- Linia celulară INS-1: Acest site web conține toate informațiile despre cultura de celule INS-1. Acesta include informații privind cultura de celule INS-1 și mediile de congelare, protocoale pentru subcultură și manipularea culturilor INS-1 crioprezervate și proliferative.
Referințe
- Acosta-Montalvo, A., și colab., Expresia și secreția peptidelor derivate din proglucagon în celulele INS-1 de insulinom de șobolan. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
- Park, J.E. și J.S. Han, Un extract de Portulaca oleracea L. promovează secreția de insulină prin intermediul unei căi dependente de canalul K + ATP în celulele β pancreatice INS-1. Cercetare și practică în nutriție, 2018. 12(3): p. 183.
- Fang, H. și colab., Loureirin B promovează secreția de insulină prin căile GLP-1R și AKT / PDX1. Jurnalul European de Farmacologie, 2022. 936: p. 175377.
- Duan, J., și colab., Swietenina și swietenolida din Swietenia macrophylla king îmbunătățesc secreția de insulină și atenuează apoptoza în celulele INS-1 induse de H2O2. Toxicologia mediului, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
- Mo, F.-F., și colab. efectul antidiabetic al loganinului prin inhibarea translocării nucleare FOXO1 prin calea de semnalizare PI3K/Akt în celulele INS-1. Jurnalul iranian de științe medicale de bază, 2019. 22(3): p. 262.