Celulele Hep3B: Cercetare și descoperiri în domeniul carcinomului hepatocelular
HEP3B este o linie celulară imortalizată de carcinom hepatocelular de origine umană. Este utilizată pe scară largă în cercetarea hepatotoxicității și a metabolismului medicamentelor. Eficiența transfecției HEP3B este substanțială; prin urmare, aceste celule sunt utilizate în mod obișnuit pentru a studia dezvoltarea, progresia și intervențiile terapeutice în cazul cancerului hepatic. Acest articol acoperă toate informațiile necesare despre linia celulară HEP3B pentru a vă ajuta să lucrați cu aceasta. În principal, acesta va include:
- Mediu de creștere
- Pentru cultivarea celulelor HEP3B se utilizează mediu EMEM conținând 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-glutamină și soluție salină echilibrată Earle (EBSS).
- Timp de dublare
- Timpul de dublare al celulelor HEP3B este de aproximativ 36 de ore.
- Tipul de creștere
- Această linie celulară de hepatom este aderentă.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-1
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați HEP3B
- Caracteristici generale și originea celulelor HEP3B
- Informații privind cultivarea liniei celulare HEP3B
- Linia celulară HEP3B: Avantaje și limitări
- Aplicații ale celulelor HEP3B în cercetare
- Publicații despre linia celulară HEP3B
- Resurse pentru linia celulară HEP3B: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Caracteristici generale și originea celulelor HEP3B
- Informații privind cultivarea liniei celulare HEP3B
- Linia celulară HEP3B: avantaje și limitări
- Aplicații ale celulelor HEP3B în cercetare
- 5. Publicații despre linia celulară HEP3B
- Resurse pentru linia celulară HEP3B: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Întrebări frecvente
Caracteristici generale și originea celulelor HEP3B
Informațiile principale de care aveți nevoie despre o linie celulară sunt originea și caracteristicile generale ale acesteia. Acestea vă pot ajuta să decideți utilizarea acesteia în cercetarea dumneavoastră și vă pot ajuta în manipularea acesteia. Această secțiune a articolului acoperă toate informațiile esențiale despre originea și caracteristicile HEP3B. Aici veți afla: Ce sunt liniile celulare Hep 3B? Care este originea celulelor Hep3B? Care este morfologia celulelor HEP3B?
- HEP3B, o linie celulară continuă de hepatom uman, provine din țesutul hepatic al unui băiat african de 8 ani cu carcinom hepatocelular (HCC). Aceasta a fost creată de Aden și colegii săi în 1979 în laboratorul lui Barbara B. Knowles, Institutul Wistar, Philadelphia, SUA [1].
- Celulele HEP3B prezintă o integrare a genomului virusului hepatitei B (VHB) în cromozomul lor.
- Aceste celule de carcinom hepatocitar prezintă o morfologie epitelială.
- Celulele HEP3B au un număr modal de cromozomi de 60. Spre deosebire de HepG2, acestea nu prezintă o rearanjare a cromozomului 1.
Care este diferența dintre HepG2 și Hep3B?
HepG2 și HEP3B diferă în ceea ce privește numărul de cromozomi pe celulă. HEP3B conține 60 de cromozomi, în timp ce celulele HepG2 au în medie 55 de cromozomi. Mai mult, HepG2 este netumorigene și negativ pentru hepatita B, în timp ce HEP3B este tumorigene și pozitiv pentru HBV.
Informații privind cultivarea liniei celulare HEP3B
Cunoașterea informațiilor privind cultivarea unei linii celulare vă poate facilita munca. Această secțiune acoperă toate punctele cheie pentru cultivarea liniei celulare HEP3B HBV, inclusiv: Care este timpul de dublare al celulelor Hep3B? Care sunt condițiile de cultivare HEP3B? Cum se cultivă celulele HEP3B HCC?
Puncte cheie pentru cultivarea celulelor HEP3B
Timpul de dublare:
Timpul de dublare al celulelor HEP3B este de aproximativ 36 de ore.
Aderente sau în suspensie:
Această linie celulară de hepatom este aderentă.
Raport de divizare:
Celulele HEP3B sunt subcultivate la un raport de 1:2 până la 1:4. Celulele HEP3B aderente sunt clătite cu 1 x PBS și apoi incubate cu soluția de disociere Accutase. După 8-10 minute, se adaugă mediu proaspăt, iar celulele sunt centrifugate. Celulele recoltate sunt apoi resuspendate cu grijă și turnate în flacoane care conțin mediu de cultură la un raport de divizare recomandat.
Mediu de creștere:
Pentru cultivarea celulelor HEP3B se utilizează mediu EMEM conținând 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-glutamină și soluție salină echilibrată Earle (EBSS).
Condiții de creștere:
Celulele HEP3B sunt cultivate într-un incubator umidificat la 37 °C, cu o alimentare continuă cu 5% CO2.
Depozitare:
Celulele HEP3B congelate sunt depozitate la o temperatură sub -150 °C într-un congelator electric sau în faza de vapori a azotului lichid.
Procesul de congelare și mediul:
Mediul de congelare recomandat pentru celulele HEP3B este CM-1 sau CM-ACF. Celulele sunt congelate folosind un proces de congelare lentă care permite o scădere a temperaturii de numai 1 °C pe minut, pentru a proteja viabilitatea celulară.
Procesul de decongelare:
Celulele congelate sunt decongelate într-o baie de apă presetată la 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde. Ulterior, aceste celule sunt adăugate în mediu de creștere proaspăt și centrifugate pentru a îndepărta elementele mediului de congelare. Celulele colectate sunt resuspendate și distribuite în flacoane noi pentru creștere.
Nivel de biosecuritate:
Pentru cultivarea celulelor HEP3B este necesar un laborator de biosecuritate de nivel 1.
Linia celulară HEP3B: Avantaje și limitări
HEP3B este o linie celulară de carcinom hepatocelular utilizată pe scară largă. Această secțiune se va concentra asupra unor avantaje și limitări cheie ale acestor celule de hepatom.
Avantaje
Principalele avantaje ale celulelor HEP3B sunt:
Ușor de cultivat
Celulele HEP3B nu au cerințe stricte de cultivare, ceea ce le face ușor de manipulat și de întreținut într-un laborator de cercetare. Acest lucru simplifică procedurile experimentale.
Eficiență ridicată de transfecție
Celulele HEP3B prezintă o eficiență remarcabilă de transfecție, ceea ce le face să fie utilizate pe scară largă în manipularea genetică și în studiile legate de expresia genelor.
Tumorigeneitate
HEP3B este o linie celulară de carcinom hepatocelular tumorigene, capabilă să formeze tumori atunci când este injectată într-un șoarece imunocompromis. Acest lucru ajută la studierea progresiei și dezvoltării cancerului folosind modele de xenogrefă HEP3B.
Starea P53 a HEP3B
Celulele HEP3B prezintă o mutație a genei P53 similară cu cea din carcinomul hepatocelular (HCC) și alte tipuri de cancer, ceea ce le face relevante pentru studierea efectelor mutației P53 asupra creșterii, dezvoltării și progresiei cancerului.
Limitări
Limitarea asociată cu linia celulară HEP3B este:
Model celular in vitro
Linia celulară HEP3B servește ca model in vitro al celulelor de carcinom hepatocelular (HCC). Cu toate acestea, este posibil să nu reprezinte pe deplin complexitatea HCC așa cum se găsește în organismele vii. În consecință, rezultatele experimentale in vitro pot diferi de cele observate in vivo.
Aplicații ale celulelor HEP3B în cercetare
Linia celulară HEP3B oferă mai multe aplicații de cercetare în domeniul biomedical. Printre principalele aplicații de cercetare ale celulelor HEP3B se numără:
- Biologia cancerului: HEP3B este o linie celulară de carcinom hepatocelular uman. Este un model celular de neprețuit pentru investigarea mecanismelor celulare și moleculare care stau la baza dezvoltării și progresiei HCC. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a studia mutațiile genetice, procesele celulare și căile de semnalizare celulară asociate cu cancerul de ficat. De exemplu, un studiu a utilizat celule HEP3B și a constatat că microARN-223-3p reglează componentele inflamasomului NLRP3, inhibă proliferarea și intensifică apoptoza celulelor de carcinom hepatic HEP3B [2].
- Screeningul și dezvoltarea medicamentelor: Linia celulară HEP3B este utilizată și pentru testarea, screeningul și dezvoltarea de terapii noi împotriva carcinomului hepatic. Mai mult, aceasta este utilizată pentru evaluarea toxicității și eficacității diferitelor medicamente și tratamente anticanceroase. Cercetătorii au utilizat, de asemenea, aceste celule de hepatom pentru a studia metabolismul medicamentelor. Cercetătorii au utilizat celule HEP3B și au evaluat potențialul citotoxic al extractului din planta Cotinus coggygria asupra celulelor de carcinom hepatocitar HEP3B [3].
- Infecții virale: HEP3B este o linie celulară pozitivă la virusul hepatitei B; prin urmare, este utilizată pentru a studia infecțiile virale care pot duce la dezvoltarea cancerului de ficat, adică HBV și HCV. Acest lucru poate ajuta la o mai bună înțelegere a infecțiilor virale și la dezvoltarea unor potențiale tratamente antivirale. De exemplu, un studiu a utilizat celule canceroase hepatocitare HEP3B și a investigat importanța ubiquitinării pentru propagarea virusului hepatitei C. Rezultatele au sugerat că proteaza 15 specifică ubiquitinei (USP15) este implicată în propagarea HCV prin reglarea funcțiilor specifice hepatocitelor, inclusiv formarea picăturilor de lipide și translația ARN-ului HCV [4].
5. Publicații privind linia celulară HEP3B
Această secțiune a articolului va prezenta câteva publicații de cercetare interesante privind celulele HEP3B.
Această publicație din Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) a propus că stresul reticulului endoplasmatic indus de compusul luteolină poate exercita efecte antitumorale în celulele HEP3B P53-nul într-un mod independent de P53.
Acest studiu publicat în Archiv der Pharmazie (2021) a propus un triterpenoid pentaciclic, lupeolul, ca potențial agent anticancerigen împotriva celulelor HEP3B.
Acest articol este publicat în Molecular Medicine Reports (2017). Concluziile studiului arată că extractul de etanol din Cnidium monnieri (L.) Cusson induce moartea celulară (apoptoza) și oprirea ciclului celular în celulele de carcinom hepatocelular HepG2 și HEP3B prin reglarea căii de semnalizare p53 și Akt/GSK-3β.
Această cercetare publicată în Biomolecules and Therapeutics (2020) a propus că auranofinul prezintă activitate sinergică și promovează apoptoza mediată de sulforafan a celulelor HEP3B prin activarea căii PI3K/AKT.
Acest articol de cercetare din BioFactors (2023) a propus că ARN-ul circular-0072309 exercită efecte antitumorale în celulele de carcinom hepatocelular HEP3B prin țintirea miRNA-665.
Resurse pentru linia celulară HEP3B: protocoale, videoclipuri și multe altele
Iată câteva resurse disponibile pentru celulele HEP3B:
- Transfecția HEP3B: Acest videoclip explică protocolul de transfecție pentru celulele HEP3B.
- Eficiența transfecției HEP3B: Acest link vă va ajuta să aflați compoziția mediului DMEM HEP3B, pasarea celulelor și protocolul de transfecție pentru celulele HEP3B. În plus, oferă informații pentru optimizarea reactivului HEP3B lipofectamină 3000 în protocolul dvs. de transfecție.
Următorul link conține protocolul de cultură celulară HEP3B:
- Condiții de cultură HEP3B: Acest link vă va ajuta să aflați protocolul de manipulare și întreținere a culturilor Huh7 și HEP3B.
- Celule HEP3B: Acest site web conține numeroase informații despre celulele HEP3B, inclusiv mediile HEP3B, protocolul de divizare a celulelor, decongelare și manipulare a culturilor proliferative și crioconservate.
Referințe
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Originea și proprietățile liniilor celulare de carcinom hepatocelular. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
- Wan, L., et al., miRNA-223-3p reglează NLRP3 pentru a promova apoptoza și a inhiba proliferarea celulelor Hep3B. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. și S. Selen-Isbilir, Efectul citotoxic al extractului de Cotinus coggygria asupra liniei celulare canceroase Hep3B. Natural Product Research, 2022: p. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., USP15 participă la propagarea virusului hepatitei C prin reglarea traducerii ARN-ului viral și a formării picăturilor de lipide. Journal of Virology, 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.