Celule Hep3B: Cercetarea și descoperirea carcinomului hepatocelular

HEP3B este o linie celulară imortalizată de carcinom hepatocitar derivat de la om. Aceasta este utilizată pe scară largă în cercetarea hepatotoxicității și a metabolismului medicamentelor. Eficiența transfecției HEP3B este substanțială; prin urmare, aceste celule sunt utilizate în mod obișnuit pentru a studia dezvoltarea cancerului hepatic, progresia și intervențiile terapeutice. Acest articol acoperă toate informațiile necesare despre linia celulară HEP3B pentru a vă ajuta să lucrați cu aceasta. În principal, acesta va include:

  1. Caracteristicile generale și originea celulelor HEP3B
  2. Informații privind cultivarea liniei celulare HEP3B
  3. Linia celulară HEP3B: Avantaje și limitări
  4. Aplicații ale celulelor HEP3B în cercetare
  5. Publicații privind linia celulară HEP3B
  6. Resurse pentru linia celulară HEP3B: Protocoale, videoclipuri și altele

1.caracteristici generale și originea celulelor HEP3B

Informațiile primare de care aveți nevoie despre o linie celulară sunt originea și caracteristicile sale generale. Acestea vă pot ajuta să decideți utilizarea acesteia în cercetarea dvs. și vă pot ajuta în tratarea ei. Această secțiune a articolului acoperă toate informațiile esențiale despre originea și caracteristicile HEP3B. Aici veți afla: Ce sunt liniile celulare Hep 3B? Care este originea celulelor Hep3B? Care este morfologia celulelor HEP3B?

  • HEP3B, o linie celulară continuă de hepatom uman, provine din țesutul hepatic al unui băiat african de 8 ani cu carcinom hepatocelular (HCC). Aceasta a fost creată de Aden și colegii săi în 1979 în laboratorul Barbarei B. Knowles, Institutul Wistar, Philadelphia, SUA [1].
  • Celulele HEP3B au o integrare a genomului virusului hepatitei B (HBV) în cromozomul său.
  • Aceste celule de carcinom hepatocitar prezintă o morfologie epitelială.
  • Celulele HEP3B au un număr modal de cromozomi de 60. Spre deosebire de HepG2, ele nu posedă un cromozom 1 rearanjat.

Care este diferența dintre HepG2 și Hep3B?

HepG2 și HEP3B diferă prin numărul de cromozomi per celulă. HEP3B conține 60 de cromozomi, în timp ce celulele HepG2 au o medie de 55 de cromozomi. În plus, HepG2 nu este tumorigenă și este hepatită B negativă, în timp ce HEP3B este tumorigenă și HBV pozitivă.

Carcinom hepatic la microscop cu mărire mare.

2.informații de cultură despre linia celulară HEP3B

Cunoașterea informațiilor privind cultivarea unei linii celulare vă poate ușura munca cu aceasta. Această secțiune acoperă toate punctele cheie pentru cultivarea liniei celulare HEP3B HBV, inclusiv: Care este timpul de dublare al celulelor HEP3B? Care sunt condițiile de cultură ale HEP3B? Cum se cultivă celulele HEP3B HCC?

Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor HEP3B

Timpul de dublare:

Timpul de dublare a celulelor HEP3B este de aproximativ 36 de ore.

Aderente sau în suspensie:

Această linie celulară de hepatom este aderentă.

Raport de divizare:

Celulele HEP3B sunt subcultivate la un raport de 1:2 până la 1:4. Celulele HEP3B aderente sunt clătite cu 1 x PBS și apoi incubate cu soluția de disociere Accutase. După 8 până la 10 minute, se adaugă mediu proaspăt, iar celulele sunt centrifugate. Celulele recoltate sunt apoi resuspendate cu grijă și turnate în flacoane care conțin mediu de cultură la un raport de divizare recomandat.

Mediu de creștere:

Pentru cultivarea celulelor HEP3B se utilizează mediul EMEM care conține 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamină și Earle's Balanced Salt Solution (EBSS).

Condiții de creștere:

Celulele HEP3B sunt cultivate într-un incubator umidificat la 37°C cu o alimentare continuă cu 5% CO2.

Depozitare:

Celulele HEP3B congelate sunt depozitate la o temperatură sub -150°C într-un congelator electric sau în faza de vapori a azotului lichid.

Procesul și mediul de congelare:

Mediul de congelare recomandat pentru celulele HEP3B este CM-1 sau CM-ACF. Celulele sunt congelate folosind un proces de congelare lentă care permite o scădere a temperaturii de numai 1°C pe minut pentru a proteja viabilitatea celulelor.

Procesul de decongelare:

Celulele congelate sunt decongelate într-o baie de apă pre-setată la 37°C timp de 40-60 de secunde. Ulterior, aceste celule se adaugă la mediul de creștere proaspăt și se centrifughează pentru a îndepărta elementele din mediul de congelare. Celulele colectate sunt resuspendate și distribuite în flacoane noi pentru creștere.

Nivelul de biosecuritate:

Pentru cultivarea celulelor HEP3B este necesar un laborator cu nivel de biosecuritate 1.

Strat semi-confluent aderent de celule Hep3B la măriri de 10× și 20×.

3.linia celulară HEP3B: Avantaje și limitări

HEP3B este o linie celulară de carcinom hepatocelular utilizată pe scară largă. Această secțiune se va concentra asupra unor avantaje și limitări cheie ale acestor celule de hepatom.

Avantaje

Principalele avantaje ale celulelor HEP3B sunt:

Ușor de cultivat

Celulele HEP3B nu au cerințe de cultură celulară pretențioase, ceea ce le face ușor de manipulat și de întreținut într-un laborator de cercetare. Acest lucru simplifică procedurile experimentale.

Eficiență ridicată a transfecției

Celulele HEP3B prezintă o eficiență remarcabilă a transfecției, ceea ce le face utilizate pe scară largă în manipularea genetică și în studiile legate de expresia genelor.

Tumorigenitate

HEP3B este o linie celulară de carcinom hepatocelular tumorigenă capabilă să formeze tumori atunci când este injectată într-un șoarece imunocompromis. Acest lucru ajută la studiul progresiei și dezvoltării cancerului utilizând modele de xenogrefă HEP3B.

Statutul P53 al HEP3B

Celulele HEP3B posedă o mutație a genei P53 similară carcinomului hepatocelular (HCC) și altor tipuri de cancer, ceea ce le face relevante pentru studierea efectelor mutației P53 asupra creșterii, dezvoltării și progresiei cancerului.

Limitări

Limitarea asociată cu linia celulară HEP3B este:

Model celular in vitro

Linia celulară HEP3B servește drept model in vitro de celule de carcinom hepatocelular (HCC). Cu toate acestea, este posibil să nu reprezinte pe deplin complexitatea HCC, așa cum se găsește în organismele vii. În consecință, rezultatele experimentale in vitro pot fi diferite de cele observate in vivo.

4.aplicații ale celulelor HEP3B în cercetare

Linia celulară HEP3B oferă mai multe aplicații de cercetare în cercetarea biomedicală. Unele dintre principalele aplicații ale celulelor HEP3B în cercetare includ:

  • Biologia cancerului: HEP3B este o linie celulară de carcinom hepatocelular uman. Este un model celular neprețuit pentru investigarea mecanismelor celulare și moleculare care stau la baza dezvoltării și progresiei HCC. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a studia mutațiile genetice, procesele celulare și căile de semnalizare celulară asociate cu cancerul hepatic. Cum ar fi un studiu care a utilizat celulele HEP3B și a constatat că microARN-223-3p reglează componentele inflammasomului NLRP3, inhibă proliferarea și sporește apoptoza celulelor hepatocarcinomului HEP3B [2].
  • Screeningul și dezvoltarea medicamentelor: Linia celulară HEP3B este, de asemenea, utilizată pentru testarea, selectarea și dezvoltarea de noi produse terapeutice împotriva carcinomului hepatic. În plus, este utilizată pentru a evalua toxicitatea și eficacitatea diferitelor medicamente și tratamente anticancerigene. Cercetătorii au folosit, de asemenea, aceste celule de hepatom pentru a studia metabolismul medicamentelor. Cercetătorii au utilizat celule HEP3B și au evaluat potențialul citotoxic al extractului din planta Cotinus coggygria asupra celulelor HEP3B de carcinom hepatocitar [3].
  • Infecții virale: HEP3B este o linie celulară pozitivă pentru virusul hepatitei B; prin urmare, este utilizată pentru a studia infecțiile virale care pot duce la dezvoltarea cancerului hepatic, și anume, VHB și VHC. Acest lucru poate ajuta la o mai bună înțelegere a infecțiilor virale și la dezvoltarea unor potențiale tratamente antivirale. De exemplu, un studiu a utilizat celulele canceroase hepatocitare HEP3B și a investigat importanța ubiquitinației pentru propagarea virusului hepatitei C. Rezultatele au sugerat că proteaza 15 specifică ubiquitinei (USP15) este implicată în propagarea VHC prin reglarea funcțiilor specifice hepatocitelor, inclusiv formarea picăturilor lipidice și traducerea ARN-ului VHC [4].

5.publicații privind linia celulară HEP3B

Această secțiune a articolului va acoperi câteva publicații de cercetare interesante privind celulele HEP3B.

Reglarea apoptozei și autofagiei de către luteolină în celulele Hep3B de cancer hepatocelular uman

Această publicație din Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) a propus că stresul reticulului endoplasmatic indus de compusul luteolin poate exercita efecte antitumorale în celulele HEP3B P53-null într-un mod independent de P53.

Ținta potențială a celulelor hepatice canceroase Hep3B prin lupeol izolat din Avicennia marina

Acest studiu din Archiv der Pharmazie (2021) a propus un triterpenoid pentaciclic, lupeolul, ca potențial agent anticancerigen împotriva celulelor HEP3B.

Extractul de etanol din Cnidium monnieri (L.) Cusson induce oprirea ciclului celular și apoptoza prin reglarea căii independente de p53 în celulele carcinomului hepatocelular HepG2 și Hep3B

Acest articol este publicat în Molecular Medicine Reports (2017). Rezultatele studiului afirmă că extractul de etanol de Cnidium monnieri (L.) Cusson induce moartea celulară (apoptoză) și oprirea ciclului celular în celulele hepatocarcinomului HepG2 și HEP3B prin reglarea căii de semnalizare p53 și Akt/GSK-3β.

Auranofina sporește apoptoza mediată de sulforafan în celulele carcinomului hepatocelular Hep3B prin inactivarea căii de semnalizare PI3K/Akt

Această cercetare publicată în Biomolecules and Therapeutics (2020) a propus că auranofin prezintă activitate sinergică și promovează apoptoza mediată de sulforafan a celulelor HEP3B prin activarea căii PI3K/AKT.

Circular ARN-0072309 are influențe antitumorale în linia celulară Hep3B prin direcționarea microARN-665

Acest articol de cercetare din BioFactors (2023) a propus că ARN-0072309 circular exercită efecte antitumorale în celulele carcinomului hepatocelular HEP3B prin țintirea miARN-665.

6.resurse pentru linia celulară HEP3B: Protocoale, videoclipuri și multe altele

Următoarele sunt câteva resurse disponibile privind celulele HEP3B:

  • Transfecția HEP3B: Acest videoclip va explica protocolul de transfecție pentru celulele HEP3B.
  • Eficiența transfecției HEP3B: Acest link vă va ajuta să aflați compoziția mediului DMEM HEP3B, trecerea celulelor și protocolul de transfecție pentru celulele HEP3B. În plus, acesta oferă informații pentru optimizarea reactivului HEP3B lipofectamine 3000 în protocolul dvs. de transfecție.

Următorul link conține protocolul de cultură a celulelor HEP3B:

  • Condiții de cultură HEP3B: Acest link vă va ajuta să aflați protocolul pentru manipularea și întreținerea culturilor Huh7 și HEP3B.
  • Celule HEP3B: Acest site web conține numeroase informații privind celulele HEP3B, inclusiv mediul HEP3B, protocolul pentru divizarea celulelor, decongelarea și manipularea culturilor proliferative și crioprezervate.

Referințe

  1. Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
  2. Wan, L., et al., miARN-223-3p reglează NLRP3 pentru a promova apoptoza și a inhiba proliferarea celulelor hep3B. Medicină experimentală și terapeutică, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
  3. Danjolli-Hashani, D. și S. Selen-Isbilir, Efectul citotoxic al extractului de Cotinus coggygria asupra liniei celulare de cancer Hep3B. Natural Product Research, 2022: p. 1-4.
  4. Kusakabe, S. și colab., USP15 participă la propagarea virusului hepatitei C prin reglarea traducerii ARN viral și formarea picăturilor lipidice. Journal of Virology, 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.

Am detectat că vă aflați într-o altă țară sau că utilizați o altă limbă de browser decât cea selectată în prezent. Doriți să acceptați setările sugerate?

Închidere