Linia celulară HT22
HT22 este o linie celulară neuronală murină utilizată frecvent în cercetarea din domeniul neuroștiințelor. Aceasta este utilă pentru studierea tulburărilor neurodegenerative și testarea potențialelor terapii sau tratamente neuroprotectoare. În plus, celulele HT22 sunt sensibile la glutamat, fiind astfel utilizate pentru investigarea toxicității induse de glutamat sau a leziunilor neuronale.
- Mediu de creștere
- Pentru cultivarea celulelor HT22 se utilizează mediu DMEM. Acesta este suplimentat cu 10% FBS, 4,5 g/L glucoză, 4 mM L-glutamină, 1,5 g/L NaHCO3 și 1,0 mM piruvat de sodiu pentru o creștere optimă a celulelor.
- Timp de dublare
- Timpul de dublare a celulelor HT22 este de aproximativ 15 ore.
- Tipul de creștere
- Celulele HT22 sunt aderente.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-1
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați HT22
Acest articol evidențiază aspectele esențiale ale celulelor HT22 care vă pot ajuta în activitatea de cercetare. Acesta va aborda în principal:
- Caracteristicile generale și originea celulelor HT22
- Informații privind cultivarea liniei celulare HT22
- Avantajele și dezavantajele liniei celulare HT22
- Aplicații de cercetare ale liniei celulare HT22
- Publicații de cercetare care prezintă celulele HT22
- Resurse pentru celulele HT22: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Caracteristici generale și originea celulelor HT22
- Informații privind cultivarea liniei celulare HT22
- Avantajele și dezavantajele liniei celulare HT22
- 5. Publicații de cercetare care prezintă celulele HT22
- Resurse pentru celulele HT22: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Referințe
- Întrebări frecvente
Caracteristici generale și originea celulelor HT22
Această secțiune a articolului va oferi informații despre originea și caracteristicile generale ale celulelor HT22. Este necesar să cunoașteți aceste informații despre o linie celulară înainte de a începe lucrul cu aceasta. Aici veți afla: Ce sunt celulele HT22? Care este morfologia celulelor hipocampale HT22? Care este dimensiunea celulelor HT22?
HT22 este o linie celulară continuă derivată din regiunea hipocampului creierului de șoarece. Este o subclonă a liniei celulare parentale HT-4 dezvoltată prin imortalizarea țesuturilor neuronale murine prin intermediul unui antigen T al virusului simian 40 (SV40) poliomavirus sensibil la temperatură.
Aceste celule diferă de celulele hipocampale mature, deoarece nu au receptori de glutamat și colinergici, spre deosebire de neuronii maturi de origine hipocampală. Prin urmare, ele nu sunt potrivite pentru studii de cercetare legate de memorie [1].
Celulele HT22 au un aspect similar cu cel al celulelor epiteliale.
Informații privind cultivarea liniei celulare HT22
Celulele HT22 sunt utilizate în laboratoarele de cercetare din domeniul neuroștiințelor. Înainte de a cultiva aceste celule, cercetătorii caută informații esențiale despre cultura celulară care să le faciliteze și să le eficientizeze munca. Această secțiune acoperă toate punctele cheie pentru cultivarea celulelor HT22. Veți afla: Care este timpul de dublare a celulelor HT22? Cum se cultivă celulele HT22? Care este protocolul de cultură celulară HT22? Care este mediul de cultură celulară HT22?
Puncte cheie pentru cultivarea celulelor HT22
Timpul de dublare:
Timpul de dublare a celulelor HT22 este de aproximativ 15 ore.
Aderente sau în suspensie:
Celulele HT22 sunt aderente.
Raportul de subcultivare:
Raportul de subcultivare pentru celulele hipocampale HT22 este de 1:3 până la 1:6. Pe scurt, mediul este îndepărtat, iar celulele aderente sunt clătite cu 1 x PBS. Se adaugă soluție de disociere Accutase în flacon, iar celulele sunt incubate timp de 8 până la 10 minute la temperatura ambiantă. Ulterior, se adaugă mediu de cultură proaspăt, iar celulele sunt colectate într-o fiolă pentru centrifugare. Peleta celulară obținută este resuspendată cu grijă, iar celulele sunt distribuite într-un flacon de cultură pentru creștere.
Mediu de creștere:
Pentru cultivarea celulelor HT22 se utilizează mediu DMEM. Acesta este suplimentat cu 10% FBS, 4,5 g/L glucoză, 4 mM L-glutamină, 1,5 g/L NaHCO3 și 1,0 mM piruvat de sodiu pentru o creștere optimă a celulelor.
Condiții de creștere:
Culturile de celule HT22 sunt păstrate într-un incubator umidificat (temperatură de 37 °C) cu un aport de 5% CO2.
Depozitare:
Celulele HT22 congelate pot fi depozitate la o temperatură sub -150 °C, fie în faza de vapori a azotului lichid, fie într-un congelator electric cu temperatură ultra-scăzută, pe termen lung.
Procesul de congelare și mediu:
Celulele HT22 pot fi congelate în medii CM-1 sau CM-ACF folosind o metodă de congelare lentă. Acest proces permite o scădere de doar 1 °C a temperaturii probei pe minut, protejează celulele de șoc și ajută la menținerea viabilității acestora.
Procesul de decongelare:
Celulele sunt decongelate într-o baie de apă la 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde, până când rămâne doar un mic bulgăre de gheață. Ulterior, se adaugă mediu de cultură în celule, iar acestea sunt centrifugate pentru a elimina componentele mediului de congelare. Peleta celulară este resuspendată, iar celulele sunt turnate într-un nou flacon care conține mediu de cultură. După aceasta, celulele sunt incubate la 37 °C într-un incubator timp de cel puțin 24 de ore.
Nivel de biosecuritate:
Pentru cultivarea celulelor HT22 sunt obligatorii condițiile de laborator de nivel 1 de biosecuritate.
Avantajele și dezavantajele liniei celulare HT22
Celulele hipocampale HT22 prezintă o serie de avantaje și dezavantaje care le diferențiază de alte linii celulare neuronale. Câteva avantaje și dezavantaje notabile ale liniei celulare sunt menționate aici.
Avantaje
Avantajele liniei celulare neuronale murine HT22 sunt:
-
Rată de creștere rapidă
Celulele HT22 au un timp de dublare de 15 ore, ceea ce permite experimentarea rapidă și eficientă și contribuie la obținerea la timp a rezultatelor cercetării.
-
Imortalizare
HT22 este o linie celulară imortalizată, asigurând o creștere continuă pe perioade îndelungate. Acest lucru asigură disponibilitatea constantă a celulelor, reduce timpul și costurile și facilitează experimentele pe termen lung cu rezultate consistente.
Dezavantaje
Dezavantajele celulelor HT22 sunt:
-
Origine murină
Linia celulară HT22 a fost derivată din țesutul hipocampului creierului de șoarece, ceea ce poate să nu reprezinte pe deplin complexitatea fiziologiei și comportamentului celulelor neuronale umane, limitând relevanța lor translațională.
4. Aplicații de cercetare ale liniei celulare HT22
Celulele HT22 sunt utilizate pe scară largă în cercetarea neurobiologică. În această secțiune a articolului sunt discutate câteva aplicații promițătoare ale acestei linii celulare:
- Cercetarea în neuroștiințe: Celulele HT22 sunt utilizate pe scară largă în cercetarea bolilor neurodegenerative, adică a bolii Alzheimer și a bolii Parkinson. Acestea sunt considerate un instrument de cercetare valoros pentru studierea mecanismelor de neurotoxicitate și stres oxidativ legate de aceste boli. Cercetările efectuate în 2020 au descoperit că calea PI3K/AKT/CREB este implicată în toxicitatea neurală indusă de hiperglicemie în celulele HT22 [2]. În mod similar, un studiu recent a sugerat că calea Nrf2/HO-1 și axa de semnalizare NF-κB joacă un rol semnificativ în toxicitatea beta-amiloidă a celulelor HT22 [3].
- Screeningul medicamentelor: Celulele HT22 sunt utilizate pe scară largă în scopul testării și screeningului medicamentelor. Acestea ajută cercetătorii să identifice potențiali agenți terapeutici care prezintă efecte neuroprotectoare pentru combaterea bolilor neurodegenerative. Un studiu realizat în 2019 a explorat potențialul neuroprotector al compusului tetrahidrocurcumină în celulele hipocampale HT22 tratate cu glutamat. În acest context, glutamatul induce stres oxidativ în celulele HT22 și provoacă moartea celulară prin activarea protein-kinazelor activate de mitogen [4].
5. Publicații științifice care au ca subiect celulele HT22
Iată câteva lucrări de cercetare interesante care prezintă linia celulară HT22:
Acest studiu publicat în International Journal of Molecular Medicine (2019) a propus potențialul neuroprotector al crocinei, un compus izolat din Crocus sativus L., în celulele HT22 afectate de L-glutamat.
Această publicație din Neuropharmacology (2018) a raportat că derivații de oxindol protejează împotriva morții celulare HT22 induse de stresul oxidativ.
Acest articol de cercetare a fost publicat în Journal of Ginseng Research în 2019. Acest studiu a explorat efectele neuroprotectoare ale unui produs natural, ginsenosidul Rb2, folosind linia celulară HT22. Studiul a constatat că ginsenosidul Rb2 a redus eficient stresul oxidativ indus de glutamat și moartea celulară în celulele hipocampale murine HT22.
Acest studiu publicat în Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) a evaluat potențialul citotoxic al nanoparticulelor de argint în linia celulară HT22.
Ferrostatina-1 protejează celulele HT-22 de toxicitatea oxidativă
Acest articol de cercetare a fost publicat în 2020 în revista Neural regeneration research. Acesta a propus că ferrostatin-1, un inhibitor al ferroptosisului, previne toxicitatea oxidativă în celulele hipocampale HT22.
Resurse pentru celulele HT22: protocoale, videoclipuri și multe altele
Unele resurse online despre celulele HT22 explică protocoalele de transfecție, diferențiere și cultură celulară:
- Transfecția HT22: Acest document conține un protocol optimizat pentru transfecția HT22 în plăci de cultură celulară cu 24 și 96 de godeuri.
- Diferențierea celulelor HT22: Acest articol vă va ghida în mod cuprinzător cu privire la protocolul de diferențiere a celulelor HT22.
Următorul link conține protocolul de cultură celulară HT22:
- Subcultivarea celulelor HT22: Acest link vă va ajuta să învățați protocolul de subcultivare pentru linia celulară HT22. Mai mult, vă va ajuta să învățați protocolul de inducere a neurotoxicității în celule.
- Celule hipocampale HT22: Acest site web conține o mulțime de informații utile despre timpul de dublare a celulelor HT22, medii și protocoale de cultură celulară.
Referințe
- He, M., et al., Diferențierea determină susceptibilitatea la excitotoxicitate în neuronii HT22. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetina previne neurotoxicitatea indusă de glucoză ridicată în celulele HT22 prin intermediul căii de semnalizare PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Efectele protectoare ale berberinei împotriva neurotoxicității induse de β-amiloid în celulele HT22 prin intermediul căii Nrf2/HO‐1. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Efectele neuroprotectoare ale tetrahidrocurcuminei împotriva stresului oxidativ indus de glutamat în celulele HT22 din hipocamp. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.