Linia celulară HT-29

HT-29 este o linie celulară de cancer colorectal uman cu o gamă largă de aplicații în cercetarea cancerului și toxicologiei. De exemplu, aceste celule sunt sensibile la tratamentele chimioterapeutice standard împotriva cancerului colorectal. În plus, linia celulară HT-29 este un model in vitro bine caracterizat pentru a investiga răspunsul epiteliului intestinal la infecția bacteriană. Celulele HT-29 imită caracteristicile celulelor intestinale mature, și anume enterocitele, și, prin urmare, sunt potrivite pentru atașament și studii mecaniciste.

Acest articol va acoperi toate aspectele liniei celulare HT-29 pe care trebuie să le cunoașteți înainte de a lucra cu aceasta. Acesta va include în principal:

Celulele HT-29: Origine și informații generale
Informații privind cultura celulară a liniei celulare HT-29
Celule HT-29: Avantaje și limitări
Celule HT-29: Aplicații
Publicații de cercetare privind celulele HT-29
Resurse pentru celulele HT-29: Protocoale, videoclipuri și multe altele

1. Celule HT-29: Origine și informații generale

Înainte de a utiliza orice linie celulară, trebuie să știți despre caracteristicile generale și originea liniei celulare. Această secțiune vă va ajuta să aflați: Ce sunt celulele HT-29? Este HT-29 o linie celulară de cancer colorectal? Care este morfologia celulelor HT-29?

Ce este linia celulară HT-29? HT-29 este o linie celulară de adenocarcinom colorectal stabilită în 1964 de Trempe și Fogh. Celulele au fost derivate inițial din tumora primară a unei femei caucaziene (44 de ani) cu adenocarcinom colorectal [1]. De la crearea sa, această linie celulară a fost utilizată pentru a studia biologia cancerelor.

Morfologia celulelor HT-29: Linia celulară HT-29 are în general o morfologie de tip epitelial. Celulele diferențiate cresc în monostraturi, formează joncțiuni strânse celulă-celulă și posedă o margine apicală în perie. În cazul în care aceste celule sunt cultivate în mediu cu deficit de glucoză sau li se administrează inductori precum butirat sau acid, ele prezintă caracteristici asemănătoare enterocitelor.

Dimensiunea celulelor: Diametrul liniei celulare HT-29 de cancer colorectal este de 11 μm.

Genomul și ploidia: Numărul modal de cromozomi pentru linia celulară HT-29 este de 71. Acesta poate varia între 68-72. În plus, numărul raționalizat de cromozomi pentru celulele HT-29 este hiper-triploid, componenta 2S apărând în proporție de 2,4 %.

Ce este HT29 MTX? HT29 MTX este o linie celulară rezistentă la metotrexat izolată din linia celulară originală HT-29 de cancer de colon uman prin adaptare la 10 µM metotrexat. Aceste celule prezintă caracteristicile celulelor goblet mature care secretă mucus.

Diviziunea și mișcarea celulelor cancerului colorectal sub microscop.

2. Informații privind cultura celulară a liniei celulare HT-29

Cunoașterea cerințelor de cultură de bază ale unei linii celulare vă poate ușura munca cu aceasta. Ar trebui să știți: care este timpul de dublare al liniei celulare HT-29? Care este densitatea de însămânțare a celulelor HT-29? Care este mediul de cultură pentru celulele HT-29?

Timpul de dublare	Timpul mediu de dublare pentru linia celulară HT-29 este de 24 de ore.
Aderent/suspensie	HT-29 este o linie celulară aderentă.
Densitatea de însămânțare	Densitatea de însămânțare recomandată pentru celulele HT-29 este de 3 x¹⁰⁴ ^celule/cm2. Celulele cultivate sunt spălate cu 1 X PBS și detașate după incubarea cu Accutase timp de 8-10 minute. Se adaugă mediu proaspăt, iar celulele sunt centrifugate. Peletul celular este resuspendat, iar celulele sunt distribuite în flacoane noi la densitatea celulară recomandată.
Mediul de creștere	Mediul Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) suplimentat cu 2,5 mM L-glutamină și 10 % FBS este utilizat pentru cultivarea optimă a celulelor HT-29. Mediul trebuie înlocuit de 2 până la 3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere	Pentru creștere, celulele HT-29 au nevoie de un incubator umificat cu o temperatură de 37 °C și o cantitate de 5 %_CO2.
Stocarea	Aceste celule se depozitează în faza de vapori a azotului lichid la temperaturi sub -195°C.
Mediu și proces de congelare	Mediul de congelare utilizat pentru linia celulară HT-29 este CM-1 sau CM-ACF. Celulele sunt congelate printr-un proces lent de congelare care determină o scădere a temperaturii cu 1 °C și protejează eficient viabilitatea celulelor.
Procesul de decongelare	Celulele HT-29 congelate sunt dezghețate într-o baie de apă setată la temperatura de 37 °C. Aceste celule pot fi resuspendate și distribuite direct în flaconul cu mediu de creștere proaspăt. Spre deosebire de aceasta, celulele decongelate pot fi centrifugate pentru a elimina elementele mediului de congelare, resuspendate în mediu proaspăt și cultivate în flacoane.
Nivelul de biosecuritate	Nivelul de biosecuritate 1 este utilizat pentru manipularea și întreținerea liniei celulare HT-29.

Celule HT-29 sub mărire 10x și 20x.

3. Celule HT-29: Avantaje și limitări

Fiecare linie celulară are avantaje și dezavantaje unice care o deosebesc de alte linii celulare. Această secțiune va acoperi principalele avantaje și limitări asociate cu celulele HT-29.

Avantaje

Principalele avantaje ale celulelor HT-29 sunt:

Ușor de cultivat
Linia celulară HT-29 este ușor de manipulat și de întreținut, fără cerințe complexe pentru cultivare. Este cultivată pe scară largă în laboratoarele de cercetare.
Model in vitro de celule intestinale
Celulele HT-29 se pot diferenția în celule intestinale mature (enterocite și celule producătoare de mucus) în condiții de cultură specifice. Acestea sunt utilizate ca model celular pentru a studia digestia și biodisponibilitatea alimentelor.
Eficiență ridicată a transfecției
Celulele HT-29 de cancer de colon oferă o eficiență ridicată a transfecției, ceea ce le face potrivite pentru studiile privind expresia și reglarea genelor. Atât experimentele de transfecție tranzitorie, cât și cele de transfecție stabilă pot fi efectuate utilizând diverse metode.
Sensibilitate la medicamente
Celulele HT-29 sunt sensibile la medicamente chimioterapeutice precum fluorouracilul și oxaliplatinul, utilizate frecvent în tratamentul cancerului de colon. Acestea sunt utilizate pentru studierea rezistenței la medicamente și depistarea potențialelor medicamente terapeutice pentru carcinomul colorectal.

Limitări

Heterogenitate
Celulele HT-29, ca și alte linii celulare canceroase, prezintă eterogenitate și pot să nu formeze o populație celulară uniformă. Acest lucru poate afecta reproductibilitatea rezultatelor în anumite teste și poate duce la variații minore ale rezultatelor experimentale.
Diferențiere limitată
Celulele HT-29 au un potențial de diferențiere limitat. Ele nu se diferențiază complet în celule intestinale sau de colon, ci prezintă doar câteva trăsături caracteristice. Această limitare poate restricționa utilizarea lor în studiul proceselor biologice mai complexe.

4. celule HT-29: Aplicații

Linia celulară HT-29 este cultivată extensiv în laboratoarele de cercetare datorită gamei sale largi de aplicații. Această secțiune va acoperi doar câteva aplicații semnificative ale celulelor HT-29.

Cercetarea cancerului: HT-29 este o linie celulară de adenocarcinom colorectal, astfel încât este utilizată pentru a studia progresia cancerului, dezvoltarea și mecanismele moleculare subiacente. Un studiu efectuat în 2018 a utilizat linia celulară HT-29 pentru a investiga moleculele celulare responsabile de metastază. Acest studiu a observat că genele vimentin și CXCR4 reglează metastaza celulară. Întrucât transfectarea microARN-193a-5p mimic poate reduce nivelurile de ARNm ale acestor gene și poate reduce cu succes metastaza celulelor canceroase [2].

Cercetare toxicologică: Linia celulară HT-29 este utilizată pe scară largă în cercetarea toxicologică. Aceste celule de carcinom colorectal sunt utilizate pentru a evalua toxicitatea diferitelor medicamente candidate utilizând diferite teste. De exemplu, un studiu a explorat potențialul de toxicitate al extractului etanolic al plantei Syzygium cumini pe linia celulară HT-29. Rezultatele au arătat o suprimare semnificativă a creșterii celulelor HT-29, indicând proprietățile anti-cancer promițătoare ale extractului [3].

Microbiologie: HT-29 poate fi utilizată ca sistem celular gazdă pentru a investiga patogeneza microbilor potențiali, și anume bacteriile și virușii. Cercetătorii pot infecta celulele HT-29 cu microbi pentru a investiga virulența acestora și răspunsul gazdei. Un astfel de studiu a utilizat celulele HT-29 pentru a explora proprietățile probiotice ale bacteriilor lactice [4]. Un alt studiu a utilizat celulele HT-29 pentru a evalua eficacitatea și siguranța tratamentelor cu bacteriofagi [5].

430,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 300215

5. Publicații de cercetare privind celulele HT-29

Această secțiune va prezenta câteva publicații notabile privind celulele HT-29 care vă vor ajuta să vă elaborați studiul de cercetare.

Evaluarea efectului anticancerigen al extractului etanolic de Syzygium cumini pe linia celulară colorectală HT-29

Acest studiu a propus extractul etanolic de Syzygium cumini ca potențial agent anticancer împotriva liniei celulare HT-29 de cancer colorectal. Extractul a suprimat semnificativ creșterea celulelor canceroase.

Tetrandrina inhibă creșterea celulelor HT-29 de carcinom de colon prin calea Bcl-2/Caspase 3/PARP și faza G1/S

Această publicație din Bioscience Reports a testat activitatea anticancerigenă a unui compus, tetrandrina, asupra celulelor HT-29. Rezultatele au arătat că tetrandrina inhibă proliferarea și creșterea celulelor canceroase prin reglarea căilor de semnalizare celulară.

microARN-193a-5p inhibă migrația celulelor umane HT-29 de cancer de colon prin suprimarea căii de metastazare

Acest studiu a propus că miARN-193a-5p poate regla potențial metastaza celulelor HT-29 prin reglarea genelor legate de metastază.

Bacteriofagele sunt mai virulente pentru bacteriile cu celule umane decât sunt în cultura bacteriană; perspective din celulele HT-29

Această lucrare este publicată în Nature Scientific Reports în 2018. Acest studiu a utilizat linia celulară tumorigenă HT-29 ca model celular intestinal pentru a evalua eficacitatea tratamentului bacteriofag propus.

Proprietățile probiotice ale lactobacililor și capacitatea lor de a inhiba aderența bacteriilor enteropatogene la celulele Caco-2 și HT-29

În acest studiu, cercetătorii au folosit celule HT-29 pentru a investiga activitățile probiotice ale bacteriilor lactice. În mod interesant, studiul a indicat că bacteriile lactobacili previn aderarea bacteriilor patogene la celulele colonului.

6. Resurse pentru celulele HT-29: Protocoale, videoclipuri și altele

Această secțiune va acoperi câteva resurse online disponibile privind celulele HT-29 care vor ajuta la învățarea protocoalelor de întreținere, cultivare și transfecție a acestora.

Protocoale de cultură celulară

Următoarele resurse vă vor ghida cu privire la subculturile de celule HT-29.

Cultivarea celulelor HT-29: Acest link va oferi cunoștințe de bază despre mediul de creștere, decongelarea și subculturile de celule HT-29.
Menținerea culturilor HT-29: Acest articol conține toate informațiile utile despre cultivarea și întreținerea celulelor HT-29.

Protocoale de transfecție

Linia celulară HT-29 are o eficiență mare de transfecție și este frecvent utilizată în studiile de expresie genică. Următoarele resurse descriu protocoalele de transfecție posibile pentru aceste celule.

Transfectarea HT-29: Această legătură web conține protocolul detaliat pentru transfecția celulelor HT-29.
Transfectarea liniei celulare HT-29: Acest document descrie protocolul de transfecție a liniei celulare HT-29 cu ADN plasmidic.

Videoclipuri referitoare la linia celulară HT-29

Iată câteva videoclipuri privind cultivarea și întreținerea acestei linii celulare tumorigene.

Transferul celulelor: Acest videoclip prezintă protocolul de trecere a celulelor pentru liniile celulare aderente.
Transfectarea celulelor HT-29: Acest videoclip vă va ghida cu privire la metoda de transfecție utilizată pentru celulele HT-29.

Ne așteptăm ca informațiile din acest articol să fie valoroase și suficiente pentru a vă ocupa de manipularea și întreținerea liniilor celulare HT-29. Dacă intenționați să utilizați celule HT-29 în studiul dumneavoastră, comandați de la noi.

Referințe

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles și I. Recio, linia celulară HT29. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: p. 113-124.
Shirafkan, N., și colab. microARN-193a-5p inhibă migrația celulelor umane HT-29 de cancer de colon prin suprimarea căii de metastază. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean și R. Safaralizadeh, Evaluarea efectului anticancerigen al extractului etanolic de Syzygium cumini pe linia celulară colorectală HT-29. Jurnalul de cancer gastro-intestinal, 2021. 52: p. 575-581.
Fonseca, H.C. și colab., Proprietățile probiotice ale lactobacililor și capacitatea lor de a inhiba aderența bacteriilor enteropatogene la celulele Caco-2 și HT-29. Probiotice și proteine antimicrobiene, 2021. 13: p. 102-112.
Shan, J. și colab., Bacteriofagele sunt mai virulente pentru bacteriile cu celule umane decât sunt în cultura bacteriană; perspective din celulele HT-29. Rapoarte științifice, 2018. 8(1): p. 5091.