Linia celulară HT-29
HT-29 este o linie celulară umană de cancer colorectal cu o gamă largă de aplicații în cercetarea cancerului și toxicologiei. De exemplu, aceste celule sunt sensibile la tratamentele chimioterapeutice standard împotriva cancerului colorectal. În plus, linia celulară HT-29 este un model in vitro bine caracterizat pentru investigarea răspunsului epiteliului intestinal la infecția bacteriană. Celulele HT-29 imită caracteristicile celulelor intestinale mature, adică enterocitele, și, prin urmare, sunt potrivite pentru studii de atașare și mecaniciste.
- Mediu de creștere
- Consultați pagina produsului
- Timp de dublare
- Consultați pagina produsului
- Tip de creștere
- Aderent
- Nivel de biosecuritate
- BSL-1
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați HT-29
- Celule HT-29: Origine și informații generale
- Informații privind cultura celulară a liniei celulare HT-29
- Celule HT-29: Avantaje și limitări
- Celulele HT-29: Aplicații
- 5. Publicații de cercetare privind celulele HT-29
- Resurse privind celulele HT-29: protocoale, videoclipuri și altele
- Referințe
- Întrebări frecvente
Celulele HT-29: Origine și informații generale
Înainte de a utiliza orice linie celulară, ar trebui să cunoașteți caracteristicile generale și originea liniei celulare. Această secțiune vă va ajuta să aflați: Ce sunt celulele HT-29? HT-29 este o linie celulară de cancer colorectal? Care este morfologia celulelor HT-29?
Ce este linia celulară HT-29? HT-29 este o linie celulară de adenocarcinom colorectal înființată în 1964 de Trempe și Fogh. Celulele au fost inițial derivate din tumora primară a unei femei de rasă caucaziană (44 de ani) cu adenocarcinom colorectal [1]. De la înființare, această linie celulară a fost utilizată pentru a studia biologia cancerelor.
Morfologia celulelor HT-29: Linia celulară HT-29 are, în general, o morfologie de tip epitelial. Celulele diferențiate cresc în monostraturi, formează joncțiuni celulare strânse și posedă o margine apicală în formă de perie. Dacă aceste celule sunt cultivate într-un mediu cu deficit de glucoză sau li se administrează inductori precum butiratul sau acidul, ele prezintă caracteristici de tip enterocitar.
Dimensiunea celulei: Diametrul liniei celulare de cancer colorectal HT-29 este de 11 μm.
Genom și ploidie: Numărul modal de cromozomi pentru linia celulară HT-29 este 71. Acesta poate varia între 68 și 72. Mai mult, numărul de cromozomi standardizat pentru celulele HT-29 este hipertriploid, componenta 2S apărând la o rată de 2,4 %.
Ce este HT29 MTX? HT29 MTX este o linie celulară rezistentă la metotrexat, izolată din linia celulară originală HT-29 de cancer de colon uman prin adaptare la 10 µM metotrexat. Aceste celule prezintă caracteristici ale celulelor caliciforme mature secretatoare de mucus.
Informații privind cultivarea liniei celulare HT-29
Cunoașterea cerințelor de bază privind cultura unei linii celulare vă poate ușura munca cu aceasta. Ar trebui să știți: care este timpul de dublare al liniei celulare HT-29? Care este densitatea de însămânțare a celulelor HT-29? Ce medii de cultură se utilizează pentru celulele HT-29?
Timpul de dublare
Timpul mediu de dublare pentru linia celulară HT-29 este de 24 de ore.
Aderentă/în suspensie
HT-29 este o linie celulară aderentă.
Densitatea de însămânțare
Densitatea de însămânțare recomandată pentru celulele HT-29 este de 3 x 104 celule/cm2. Celulele cultivate sunt spălate cu PBS 1X și detașate după incubare cu Accutase timp de 8-10 minute. Se adaugă mediu proaspăt, iar celulele sunt centrifugate. Peleta celulară este resuspendată, iar celulele sunt distribuite în flacoane noi la densitatea celulară recomandată.
Mediu de creștere
Pentru cultivarea optimă a celulelor HT-29 se utilizează mediu minim esențial Eagle (EMEM) suplimentat cu 2,5 mM L-glutamină și 10 % FBS. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere
Celulele HT-29 necesită un incubator umidificat, cu o temperatură de 37 °C și un aport de 5 % CO2 pentru creștere.
Depozitare
Aceste celule sunt depozitate în faza de vapori a azotului lichid la o temperatură sub -195 °C.
Mediu și proces de congelare
Mediul de congelare utilizat pentru linia celulară HT-29 este CM-1 sau CM-ACF. Celulele sunt congelate printr-un proces de congelare lentă care determină o scădere a temperaturii cu 1 °C și protejează eficient viabilitatea celulelor.
Procesul de decongelare
Celulele HT-29 congelate sunt decongelate într-o baie de apă la temperatura de 37 °C. Aceste celule pot fi resuspendate și distribuite direct în flaconul cu mediu de creștere proaspăt. În schimb, celulele decongelate pot fi centrifugate pentru a îndepărta elementele mediului de congelare, resuspendate în mediu proaspăt și cultivate în flacoane.
Nivel de biosecuritate
Nivelul de biosecuritate 1 este utilizat pentru manipularea și întreținerea liniei celulare HT-29.
Celulele HT-29: Avantaje și limitări
Fiecare linie celulară are avantaje și dezavantaje unice care o disting de alte linii celulare. Această secțiune va prezenta principalele avantaje și limitări asociate cu celulele HT-29.
Avantaje
Principalele avantaje ale celulelor HT-29 sunt:
-
Ușor de cultivat
Linia celulară HT-29 este ușor de manipulat și întreținut, fără cerințe complexe de cultivare. Este cultivată pe scară largă în laboratoarele de cercetare.
-
Model in vitro al celulelor intestinale
Celulele HT-29 se pot diferenția în celule intestinale mature (enterocite și celule producătoare de mucus) în condiții specifice de cultivare. Acestea sunt utilizate ca model celular pentru studierea digestiei alimentelor și a biodisponibilității.
-
Eficiență ridicată de transfecție
Celulele canceroase de colon HT-29 oferă o eficiență ridicată de transfecție, ceea ce le face potrivite pentru studii de expresie și reglare genică. Se pot efectua experimente de transfecție atât tranzitorie, cât și stabilă, folosind diverse metode.
-
Sensibilitate la medicamente
Celulele HT-29 sunt sensibile la medicamente chimioterapeutice precum fluorouracilul și oxaliplatina, utilizate frecvent în tratamentul cancerului de colon. Acestea sunt utilizate pentru a studia rezistența la medicamente și pentru a selecta potențiale medicamente terapeutice pentru carcinomul colorectal.
Limitări
-
Heterogenitate
Celulele HT-29, la fel ca alte linii celulare canceroase, prezintă heterogenitate și este posibil să nu formeze o populație celulară uniformă. Acest lucru poate afecta reproductibilitatea rezultatelor în anumite teste și poate duce la variații minore în rezultatele experimentale.
-
Diferențiere limitată
Celulele HT-29 au un potențial de diferențiere limitat. Ele nu se diferențiază complet în celule intestinale sau de colon, ci prezintă doar câteva trăsături caracteristice. Această limitare poate restricționa utilizarea lor în studierea proceselor biologice mai complexe.
Celulele HT-29: Aplicații
Linia celulară HT-29 este cultivată pe scară largă în laboratoarele de cercetare datorită gamei sale largi de aplicații. Această secțiune va acoperi doar câteva aplicații semnificative ale celulelor HT-29.
Cercetarea cancerului: HT-29 este o linie celulară de adenocarcinom colorectal, astfel încât este utilizată pentru a studia progresia, dezvoltarea și mecanismele moleculare subiacente ale cancerului. Un studiu realizat în 2018 a utilizat linia celulară HT-29 pentru a investiga moleculele celulare responsabile de metastazare. Acest studiu a observat că genele vimentină și CXCR4 reglează metastazarea celulară. În timp ce transfecția mimicului microARN-193a-5p poate reduce nivelurile de ARNm ale acestor gene și poate diminua cu succes metastazarea celulelor canceroase [2].
Cercetare toxicologică: Linia celulară HT-29 este utilizată pe scară largă în cercetarea toxicologică. Aceste celule de carcinom colorectal sunt utilizate pentru a evalua toxicitatea diferiților candidați la medicamente folosind diferite teste. De exemplu, un studiu a explorat potențialul de toxicitate al unui extract etanolic din planta Syzygium cumini asupra liniei celulare HT-29. Rezultatele au arătat o suprimare semnificativă a creșterii celulelor HT-29, indicând proprietățile promițătoare anticanceroase ale extractului [3].
Microbiologie: HT-29 poate fi utilizată ca sistem de celule gazdă pentru a investiga patogeneza microbilor potențiali, adică a bacteriilor și a virusurilor. Cercetătorii pot infecta celulele HT-29 cu microbi pentru a investiga virulența acestora și răspunsul gazdei. Un astfel de studiu a utilizat celule HT-29 pentru a explora proprietățile probiotice ale bacteriilor lactice [4]. Un alt studiu a utilizat celule HT-29 pentru a evalua eficacitatea și siguranța tratamentelor cu bacteriofagi [5].
5. Publicații de cercetare privind celulele HT-29
Această secțiune va prezenta câteva publicații notabile privind celulele HT-29, care vă vor ajuta să vă elaborați studiul de cercetare.
Acest studiu a propus extractul etanolic de Syzygium cumini ca potențial agent anticancerigen împotriva liniei celulare colorectale HT-29. Extractul a suprimat semnificativ creșterea celulelor canceroase.
Această publicație din Bioscience Reports a testat activitatea anticancerigenă a unui compus, Tetrandrina, asupra celulelor HT-29. Rezultatele au arătat că tetrandrina inhibă proliferarea și creșterea celulelor canceroase prin reglarea căilor de semnalizare celulară.
Acest studiu a sugerat că miRNA-193a-5p poate regla potențial metastazarea celulelor HT-29 prin reglarea genelor legate de metastazare.
Acest articol a fost publicat în Nature Scientific Reports în 2018. Acest studiu a utilizat linia celulară tumorigene HT-29 ca model celular intestinal pentru a evalua eficacitatea tratamentului propus cu bacteriofagi.
În acest studiu, cercetătorii au utilizat celule HT-29 pentru a investiga activitățile probiotice ale bacteriilor lactice. Interesant este faptul că studiul a indicat că bacteriile lactobacili previn aderența bacteriilor patogene la celulele colonului.
Celule HT-29 Resurse: protocoale, videoclipuri și altele
Această secțiune va acoperi câteva resurse online disponibile despre celulele HT-29, care vă vor ajuta să învățați protocoalele de întreținere, cultivare și transfecție ale acestora.
Protocoale de cultură celulară
Următoarele resurse vă vor ghida în ceea ce privește subcultivarea celulelor HT-29.
- Cultivarea celulelor HT-29: Acest link vă va oferi cunoștințe de bază despre mediul de creștere, decongelarea și subcultivarea celulelor HT-29.
- Întreținerea culturilor HT-29: Acest articol conține toate informațiile utile despre cultivarea și întreținerea celulelor HT-29.
Protocoale de transfecție
Linia celulară HT-29 are o eficiență de transfecție excelentă și este frecvent utilizată în studiile de expresie genică. Următoarele resurse descriu protocoalele de transfecție posibile pentru aceste celule.
- Transfecția HT-29: Acest link conține protocolul detaliat pentru transfecția celulelor HT-29.
- Transfecția liniei celulare HT-29: Acest document descrie protocolul de transfecție al liniei celulare HT-29 cu ADN plasmidic.
Videoclipuri legate de linia celulară HT-29
Iată câteva videoclipuri despre cultivarea și întreținerea acestei linii celulare tumorigene.
- Pasarea celulelor: Acest videoclip prezintă protocolul de pasare a celulelor pentru liniile celulare aderente.
- Transfectarea celulelor HT-29: Acest videoclip vă va ghida cu privire la metoda de transfecție utilizată pentru celulele HT-29.
Sperăm că informațiile din acest articol sunt utile și suficiente pentru a vă ajuta să gestionați și să întrețineți linia celulară HT-29. Dacă intenționați să utilizați celule HT-29 în studiul dumneavoastră, comandați de la noi.
Referințe
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles și I. Recio, linia celulară HT29. Impactul bioactivelor alimentare asupra sănătății: modele in vitro și ex vivo, 2015: p. 113-124.
- Shirafkan, N. și colab., microRNA‐193a‐5p inhibă migrația celulelor canceroase umane HT‐29 din colon prin suprimarea căii de metastazare. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean și R. Safaralizadeh, Evaluarea efectului anticancerigen al extractului etanolic de Syzygium cumini asupra liniei celulare colorectale HT-29. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
- Fonseca, H.C., et al., Proprietățile probiotice ale lactobacililor și capacitatea acestora de a inhiba aderența bacteriilor enteropatogene la celulele Caco-2 și HT-29. Probiotice și proteine antimicrobiene, 2021. 13: p. 102-112.
- Shan, J., et al., Bacteriofagii sunt mai virulenți față de bacteriile cu celule umane decât în cultura bacteriană; concluzii din celulele HT-29. Rapoarte științifice, 2018. 8(1): p. 5091.
