Celulele HL-60: elemente esențiale pentru cercetarea leucemiei mieloide acute
HL-60 este o linie celulară imortală de leucemie umană. Este utilizată pe scară largă pentru studierea biologiei cancerului și pentru explorarea eficacității medicamentelor anticanceroase. Mai mult, poate fi utilizată și pentru înțelegerea diferitelor mecanisme celulare și moleculare implicate în proliferarea și diferențierea celulelor leucemice.
- Mediu de creștere
- Consultați pagina produsului
- Timp de dublare
- Consultați pagina produsului
- Tip de creștere
- Aderent
- Nivel de biosecuritate
- BSL-1
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați HL-60
- Linia celulară HL-60: Origine și informații generale
- Informații despre cultura celulară HL-60
- Celulele HL-60: Avantaje și dezavantaje
- Aplicații ale liniei celulare HL-60 în cercetare: de la cancer la imunologie și nu numai
- Linia celulară HL-60 pentru cercetarea dumneavoastră
- Celulele HL-60: Publicații de cercetare
- Resurse privind linia celulară HL-60: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Linia celulară HL-60: Întrebări frecvente esențiale pentru cercetători
- Referințe
- Întrebări frecvente
Linia celulară HL-60: Origine și informații generale
Linia celulară HL-60 servește ca model crucial în cercetarea hematologică, oferind informații aprofundate despre natura și tratamentul leucemiei promielocitare acute. Această postare de blog analizează originile și caracteristicile distinctive ale liniei celulare HL-60, punând în lumină rolul său crucial în cercetarea medicală și dezvoltările terapeutice.
HL-60 a fost creată inițial din celulele leucemice ale unei femei caucaziene în vârstă de 36 de ani, diagnosticată cu leucemie promielocitară acută. Această muncă de pionierat a fost realizată de S.J. Collins și echipa sa, marcând o descoperire semnificativă, deoarece HL-60 a fost prima linie celulară de leucemie mieloidă izolată și cultivată cu succes în suspensie. Această realizare a facilitat numeroase oportunități de cercetare în studierea leucemiei și a altor boli asociate. În ceea ce privește caracteristicile fizice, celulele HL-60 prezintă o morfologie limfoblastică și sunt cunoscute pentru faptul că cresc în suspensie, având o formă rotundă. Dimensiunea acestor celule variază, cu diametre cuprinse între 9 și 25 μm, ceea ce reflectă eterogenitatea lor. La nivel genomic, linia celulară HL-60 este predominant pseudodiploidă, cu un număr modal de cromozomi de 43. Interesant este faptul că un procent mic (6,2%) dintre celule prezintă o componentă 2S, adăugând un alt nivel de complexitate la structura lor genetică [1].
Înțelegerea acestor aspecte fundamentale ale celulelor HL-60 nu numai că ne îmbogățește cunoștințele despre leucemie la nivel celular, dar susține și eforturile de cercetare în curs pentru a descoperi noi modalități de tratament. În secțiunile următoare, vom explora modul în care proprietățile unice ale liniei celulare HL-60 au contribuit la progrese semnificative în cercetarea medicală.
Informații privind cultura celulară HL-60
Cultivarea celulelor HL-60 este simplă și ușoară. Această secțiune vă va familiariza cu noțiuni de bază, cum ar fi: Care este timpul de dublare al liniei celulare HL-60? HL-60 este o cultură aderentă sau în suspensie? Care este densitatea de însămânțare a liniei celulare HL-60? Ce mediu se utilizează pentru creșterea HL-60?
Timpul de dublare:
Timpul de dublare pentru celulele HL-60 este de aproximativ 36 până la 48 de ore.
Aderență sau suspensie:
Celulele HL-60 cresc ca culturi în suspensie.
Densitatea de însămânțare:
Aceste celule sunt însămânțate la o densitate de 1 x 106 celule/ml atunci când sunt subcultivate și la 2 x 105 celule/ml atunci când se începe o nouă cultură.
Mediu de creștere:
Pentru cultivarea celulelor HL-60 se utilizează mediu de creștere RPMI 1640 la care se adaugă 10 % FBS și 2,5 mM L-glutamină. Mediul trebuie reînnoit de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:
Celulele HL-60 sunt cultivate într-un incubator umidificat la o temperatură de 37 °C și cu un aport de 5 % CO2.
Depozitare:
Celulele HL-60 sunt depozitate la o temperatură sub -150 °C sau în faza de vapori a azotului lichid pentru a menține un număr maxim de celule viabile.
Mediu și proces de congelare:
Pentru congelarea celulelor HL-60 se utilizează mediile de congelare CM-1 sau CM-ACF. Pentru congelarea celulelor HL-60 se preferă o metodă de congelare lentă.
Procesul de decongelare:
Flaconul congelat cu celule HL-60 este agitat rapid într-o baie de apă setată la temperatura de 37 °C. Ulterior, celulele sunt centrifugate pentru a îndepărta mediul de congelare. Se adaugă un mediu de cultură nou, iar celulele sunt resuspendate pentru a fi transferate într-un balon de creștere.
Nivel de biosecuritate:
Pentru manipularea culturilor HL-60 se recomandă nivelul de biosecuritate 1.
Celulele HL-60: Avantaje și dezavantaje
Înainte de a lucra cu orice linie celulară, este posibil să doriți să aflați care sunt avantajele și dezavantajele acesteia. Această secțiune a articolului va prezenta câteva argumente pro și contra privind utilizarea celulelor HL-60.
Avantaje
Câteva avantaje importante ale liniei celulare HL-60 sunt:
- Versatilitate: Celulele HL-60 au capacitatea de a se diferenția în mai multe tipuri de celule, inclusiv monocite, macrofage și granulocite, în condiții de creștere adecvate. Acest lucru le face utile pentru studierea diferențierii celulare și a altor procese celulare.
- Ușor de cultivat: Celulele HL-60 sunt ușor de cultivat și de întreținut în culturi în suspensie, ceea ce le face un instrument convenabil pentru studierea mai multor procese celulare.
- Model in vitro de leucemie: aceste celule au fost obținute de la un pacient cu leucemie mieloidă acută și, prin urmare, au caracteristici genetice și moleculare similare cu cele ale bolii.
Dezavantaje
Dezavantajele liniei celulare HL-60 sunt:
- Potențial de diferențiere limitat: HL-60 se poate diferenția în unele linii mieloide ca răspuns la stimuli, dar potențialul lor de diferențiere este limitat în comparație cu celulele primare.
Aplicații ale liniei celulare HL-60 în cercetare: de la cancer la imunologie și mai departe
Linia celulară HL-60, derivată de la un pacient cu leucemie promielocitară acută, a devenit o piatră de temelie în cercetarea medicală datorită versatilității și ușurinței sale de cultivare. Aceste culturi cu întreținere redusă sunt esențiale într-o multitudine de aplicații de cercetare, iar noi ne propunem să explorăm unele dintre cele mai semnificative, incorporând o gamă largă de cuvinte-cheie de cercetare pentru a oferi o imagine de ansamblu cuprinzătoare.
Cercetarea cancerului
În domeniul oncologiei, linia celulară HL-60 a jucat un rol esențial în dezvăluirea complexității semnalizării celulelor canceroase, avansând înțelegerea noastră asupra expresiei oncogenelor și impulsionând descoperirea de noi ținte terapeutice. Această linie celulară face parte din panelul de linii celulare leucemice utilizat pentru screeningul noilor agenți chimioterapeutici. Un exemplu elocvent este utilizarea celulelor HL-60 pentru a determina proprietățile antileucemice ale compușilor extrași din organisme marine, revelând atât efecte antiproliferative, cât și pro-apoptotice [2]. Mai mult, linia celulară a facilitat examinarea căilor de semnalizare esențiale, precum JAK/STAT, și a influenței acestora asupra proliferării celulelor leucemice, alături de evaluarea potențialului terapeutic al compușilor bioactivi precum timochinona [3].
Imunologie
Celulele HL-60 constituie un sistem in vitro robust pentru studierea diverselor răspunsuri imune, inclusiv a procesului complex de chemotaxie și a reglării expresiei mediatorilor imuni cheie. Aceste celule se pot diferenția în celule mieloide asemănătoare macrofagelor și neutrofilelor, servind ca model versatil pentru investigarea căilor inflamatorii. De exemplu, celulele de tip macrofag derivate din HL-60 au fost utilizate pentru a explora potențialul antiinflamator al fitochimicalelor din genul Brassica [4]. Într-un alt studiu, diferențierea celulelor HL-60 în celule de tip neutrofil a permis cercetătorilor să identifice gene esențiale pentru diferențierea celulară și funcțiile imunitare asociate [5].
Descoperirea de medicamente
Capacitățile de diferențiere mieloidă ale HL-60 au fost, de asemenea, valorificate în descoperirea de medicamente, în special în identificarea candidaților care ar putea modula calea de diferențiere, ceea ce este crucial în tratamentul leucemiei. Acest lucru este ilustrat de studiile care au utilizat linia celulară HL-60 pentru a evalua potențialul anticancerigen al produselor naturale [6].
În plus, linia celulară HL-60 este utilizată pentru a studia diverse aspecte ale biologiei liniilor celulare mieloide, cum ar fi înțelegerea modului în care tratamentul cu agenți precum acidul retinoic poate duce la diferențierea monocitară sau modul în care aceste celule imită neutrofilele primare în generarea capcanelor extracelulare. Utilizarea modelului în elucidarea evenimentelor moleculare ale neoplaziilor hematologice este extinsă și mai mult prin aplicarea sa în studiile privind panoul de celule mutante, în special în contextul analizei hotspot-urilor p53 în leucemie.
Pentru cei care explorează mecanica celulară, timpul de dublare al HL-60 și răspunsul acestora la electroporare în canalele microfluidice, linia celulară oferă o platformă fiabilă pentru investigații.
Linia celulară HL-60 pentru cercetarea dumneavoastră
Celulele HL-60: Publicații de cercetare
Există mai multe studii de cercetare disponibile privind celulele HL-60. Aici am enumerat câteva exemple notabile:
Această lucrare de cercetare a propus efectul antitumoral al unui compus, Stigmast-5-en-3-ol, asupra celulelor leucemice HL-60 și a celulelor canceroase mamare MCF7.
Acest studiu descrie rolul semnalizării JAK/STAT în proliferarea celulelor HL-60. În plus, cercetătorii investighează potențialul terapeutic al compusului timochinonă folosind această linie celulară de leucemie. Compusul inhibă proliferarea celulară și induce moartea celulară prin reactivarea expresiei regulatorilor negativi ai cascadei JAK/STAT.
Acest studiu a utilizat celule HL-60 pentru a deriva un model celular de tip macrofag din investigarea activității antiinflamatorii a compușilor din planta Brassica.
Acest studiu, publicat în revista International Immunopharmacology, a dezvoltat o imitație a celulelor neutrofile din linia celulară HL-60 folosind dimetilsulfoxid. Studiul a observat că gena ERK este implicată în diferențierea acestor celule.
Această lucrare de cercetare investighează potențialul anticancerigen al compușilor polifenolici vegetali, și anume acidul galic și acidul elagic, asupra celulelor leucemice HL-60 sensibile și rezistente la medicamente.
Linia celulară HL-60 Resurse: protocoale, videoclipuri și altele
Sunt disponibile multiple resurse educaționale online privind linia celulară HL-60. Această secțiune va prezenta câteva resurse care descriu cultivarea și transfecția acestei linii celulare.
Protocoale de cultivare celulară
Resursele care descriu metodele de cultivare a celulelor HL-60 sunt:
- Propagarea HL-60: Acest document va oferi informații despre subcultivarea celulelor HL-60.
- Linia celulară HL-60: Acest site web conține informații de bază despre celulele HL-60 și protocoale, inclusiv cultivarea, congelarea și decongelarea celulelor.
Protocoale de transfecție
Iată câteva resurse care descriu metodele de transfecție alese pentru celulele HL-60.
- Transfecția celulelor HL-60: Acest link conține o procedură detaliată de transfecție pentru celulele leucemice HL-60.
- Transfecția tranzitorie a celulelor HL-60: Acest document conține informații utile despre linia celulară și oferă un protocol detaliat pentru transfecția tranzitorie a celulelor HL-60.
Videoclipuri legate de linia celulară HL-60
Există foarte puține resurse video despre celulele HL-60.
- Pasarea celulelor HL-60: Acest videoclip explică protocolul pentru subcultivarea celulelor HL-60.
Ne așteptăm ca acest articol să vă ofere informații de bază despre cultivarea și întreținerea liniei celulare HL-60. În plus, acesta vă poate îmbogăți cunoștințele despre avantajele utilizării acestor celule leucemice în cercetare. Dacă intenționați să utilizați această linie celulară, comandați-o de la noi.
Linia celulară HL-60: Întrebări frecvente esențiale pentru cercetători
Linia celulară HL-60 este o linie celulară de leucemie promielocitară provenită de la un pacient cu leucemie promielocitară acută. Această linie celulară este utilizată pe scară largă în cercetare pentru studierea diferențierii celulelor mieloide și a expresiei oncogenelor.
Acidul retinoic induce diferențierea în linia celulară HL-60, determinând celulele să se maturizeze în celule de tip granulocitar. Acest proces este esențial pentru studierea mecanismelor care stau la baza diferențierii mieloide.
Serul este o componentă esențială a mediului de cultură pentru celulele hematopoietice, furnizând factori de creștere și nutrienți esențiali necesari pentru proliferarea și menținerea celulelor HL-60 în cultură.
Da, linia celulară HL-60 este capabilă de chemotaxie, adică de mișcarea celulelor ca răspuns la stimuli chimici. Acest lucru o face utilă pentru testele de chemotaxie și pentru înțelegerea migrației celulare.
Linia celulară HL60, care prezintă expresia oncogenelor celulare, servește drept sistem model pentru studierea reglării expresiei oncogenelor și a rolului acestora în leucemogeneză.
Linia celulară HL-60 este extrem de utilă în studiile de biologie celulară, în special pentru cercetarea ciclului celular, a proceselor de diferențiere celulară și a evenimentelor moleculare care duc la leucemie.
Seturile de linii celulare leucemice permit realizarea de studii comparative asupra diverselor linii celulare leucemice, incluzând compoziția genetică a acestora, profilurile mutaționale, răspunsul la medicamente și căile moleculare implicate în leucemogeneză, precum calea MAPK.
Certificatele de analiză și de origine pot fi, de obicei, descărcate sau solicitate de la furnizorul sau banca de celule care pune la dispoziție linia celulară HL-60, asigurându-se astfel că cercetătorii primesc celule autentificate și fără contaminanți pentru studiile lor.
Linia celulară HL-60 poate fi diferențiată pentru a dobândi caracteristici similare cu cele ale neutrofilelor primare, inclusiv capacitatea de a forma capcane extracelulare, ceea ce permite cercetătorilor să o utilizeze ca model surogat pentru studierea comportamentului și funcției neutrofilelor.
Celulele HL-60 sunt utilizate ca model in vitro pentru studierea leucemiei promielocitare acute, a biologiei liniilor celulare mieloide și a efectelor diverselor compuși asupra diferențierii și proliferării. De asemenea, acestea sunt folosite în experimente care investighează răspunsurile celulare, precum chimiotaxia, expresia oncogenelor și impactul mutațiilor asupra proceselor celulare.
Abrevierea „HL-60” înseamnă „Leucemie umană 60”. Aceasta se referă la cea de-a 60-a linie celulară creată din celule provenite de la pacienți cu leucemie la momentul dezvoltării sale. Abrevierea „HL” indică faptul că se referă la celule de leucemie umană.
Timpul de dublare al celulelor HL-60 este de aproximativ 36–48 de ore în condiții optime de creștere. Totuși, acesta poate varia în funcție de condițiile de cultură și de numărul de pasaje al celulelor.
Atunci când celulele HL-60 sunt tratate cu 12-miristat-13-acetat de forbol (PMA), acestea se diferențiază de obicei într-un tip celular asemănător macrofagelor sau monocitelor. Această diferențiere face parte din studiul căilor de diferențiere monocitară și din înțelegerea mecanismelor de diferențiere a celulelor mieloide.
Referințe
- Fleck, R., S. Romero-Steiner și M. Nahm, Utilizarea liniei celulare HL-60 pentru măsurarea capacității opsonice a anticorpilor pneumococici. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
- Fernando, I.S. și colab., Efectele apoptotice și antiproliferative ale Stigmast-5-en-3-ol din Dendronephthya gigantea asupra celulelor HL-60 de leucemie umană și a celulelor MCF-7 de cancer mamar uman. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
- Almajali, B., et al., Timochinona suprimă proliferarea celulară și intensifică apoptoza celulelor leucemice HL60 prin reexprimarea regulatorilor negativi JAK/STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Analiza potențialului antiinflamator al compușilor bioactivi din Brassica într-un model celular uman de tip macrofag derivat din celule HL-60. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: p. 112804.
- Wang, D., et al., ERK este implicat în diferențierea și funcția celulelor de tip neutrofil HL-60 induse de dimetilsulfoxid, care imită neutrofilele inflamatorii. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Activitatea antileucemică a compușilor bioactivi derivați din Brassica în celulele leucemice mieloide HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.