Celule HL-60: Esențialul cercetării leucemiei mieloide acute
HL-60 este o linie celulară imortală de leucemie umană. Aceasta este utilizată pe scară largă pentru a studia biologia cancerului și pentru a explora eficacitatea medicamentelor împotriva cancerului. În plus, aceasta poate fi utilizată și pentru a înțelege diferite mecanisme celulare și moleculare implicate în proliferarea și diferențierea celulelor leucemice.
Linia celulară HL-60: Origine și informații generale
Linia celulară HL-60 servește drept model crucial în cercetarea hematologică, oferind o perspectivă profundă asupra naturii și tratamentului leucemiei promielocitice acute. Această postare pe blog aprofundează originile și caracteristicile distinctive ale liniei celulare HL-60, punând în lumină rolul său crucial în cercetarea medicală și evoluțiile terapeutice.
HL-60 a fost stabilită pentru prima dată din celulele leucemice ale unei femei caucaziene în vârstă de 36 de ani diagnosticată cu leucemie promielocitară acută. Această lucrare de pionierat a fost realizată de S.J. Collins și echipa sa, marcând o descoperire semnificativă, HL-60 fiind prima linie celulară de leucemie mieloidă izolată și cultivată cu succes în suspensie. Această realizare a facilitat numeroase oportunități de cercetare în studiul leucemiei și al altor boli înrudite. În ceea ce privește caracteristicile fizice, celulele HL-60 prezintă o morfologie limfoblastică și sunt cunoscute pentru faptul că se dezvoltă în suspensie, având o formă rotundă. Dimensiunea acestor celule variază, cu diametre cuprinse între 9 și 25 μm, reflectând eterogenitatea lor. La nivel genomic, linia celulară HL-60 este predominant pseudodiploidă, cu un număr modal de cromozomi de 43. Interesant este faptul că un procent mic (6,2%) din celule prezintă o componentă 2S, adăugând un alt nivel de complexitate la structura lor genetică [1].
Înțelegerea acestor aspecte fundamentale ale celulelor HL-60 nu numai că îmbunătățește cunoștințele noastre despre leucemie la nivel celular, dar sprijină, de asemenea, eforturile de cercetare în curs de desfășurare pentru a descoperi noi modalități de tratament. În secțiunile următoare, vom explora modul în care proprietățile unice ale liniei celulare HL-60 au contribuit la progrese semnificative în cercetarea medicală.
Informații despre cultura celulelor HL-60
Cultivarea celulelor HL-60 este simplă și ușoară. Această secțiune vă va familiariza cu elementele de bază, cum ar fi Care este timpul de dublare al liniei de celule HL-60? HL-60 este o cultură aderentă sau în suspensie? Care este densitatea de însămânțare a liniei de celule HL-60? Ce mediu este utilizat pentru creșterea HL-60?
|
Timpul de dublare: |
Timpul de dublare pentru celulele HL-60 este de aproximativ 36 până la 48 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
Celulele HL-60 cresc sub formă de culturi în suspensie. |
|
Densitatea de însămânțare: |
Aceste celule sunt însămânțate la o densitate de 1 x106 celule/ml atunci când sunt subcultivate și la 2 x105 celule/ml atunci când se începe o nouă cultură. |
|
Mediu de creștere: |
Pentru cultivarea celulelor HL-60 se utilizează mediul de creștere RPMI 1640 cu 10 % FBS și 2,5 mM L-glutamină. Mediul trebuie reînnoit de 2 până la 3 ori pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Celulele HL-60 sunt cultivate într-un incubator umidificat la o temperatură de 37 °C și o alimentare cu 5 %CO2. |
|
Depozitare: |
Celulele HL-60 se depozitează la temperaturi sub -150 °C sau în faza de vapori a azotului lichid pentru a păstra un număr maxim de celule viabile. |
|
Mediu și proces de congelare: |
Mediile de congelare CM-1 sau CM-ACF sunt utilizate pentru congelarea celulelor HL-60. Se preferă o metodă de congelare lentă pentru congelarea celulelor HL-60. |
|
Procesul de decongelare: |
Flaconul de celule HL-60 congelate se agită rapid într-o baie de apă reglată la temperatura de 37 °C. Ulterior, celulele sunt centrifugate pentru a elimina mediul de congelare. Se adaugă mediu de cultură nou, iar celulele sunt resuspendate pentru a fi distribuite într-un balon pentru creștere. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Se recomandă nivelul 1 de biosecuritate pentru manipularea culturilor HL-60. |
Celule HL-60: Avantaje și dezavantaje
Înainte de a lucra cu orice linie celulară, este posibil să doriți să știți despre avantajele și dezavantajele acesteia. Această secțiune a articolului va acoperi câteva avantaje și dezavantaje ale utilizării celulelor HL-60.
Avantaje
Câteva avantaje proeminente ale liniei celulare HL-60 sunt:
- Versatilitate: celulele HL-60 au capacitatea de a se diferenția în mai multe tipuri de celule, inclusiv monocite, macrofage și granulocite, în condiții de creștere adecvate. Acest lucru le face utile pentru studierea diferențierii celulare și a altor procese celulare
- Ușor de cultivat: Celulele HL-60 sunt ușor de crescut și menținut în culturi în suspensie, ceea ce le face un instrument convenabil pentru studierea mai multor procese celulare
- Model in vitro de leucemie: Aceste celule au fost obținute de la un pacient cu leucemie mieloidă acută și, prin urmare, au caracteristici genetice și moleculare similare bolii
Dezavantaje
Dezavantajele liniei celulare HL-60 sunt:
- Potențial de diferențiere limitat: HL-60 se poate diferenția în unele linii mieloide ca răspuns la stimuli, dar potențialul lor de diferențiere este limitat în comparație cu celulele primare.
Aplicații ale liniei celulare HL-60 în cercetare: De la cancer la imunologie și dincolo de aceasta
Linia celulară HL-60, derivată de la un pacient cu leucemie promielocitară acută, a devenit o piatră de temelie în cercetarea medicală datorită versatilității și ușurinței sale de cultivare. Aceste culturi cu întreținere redusă sunt esențiale într-o multitudine de aplicații de cercetare, iar noi ne propunem să explorăm unele dintre cele mai semnificative, încorporând o gamă largă de cuvinte-cheie de investigare pentru a oferi o prezentare cuprinzătoare.
Cercetarea cancerului
În domeniul oncologiei, linia celulară HL-60 a jucat un rol esențial în deslușirea complexității semnalizării celulelor canceroase, în progresul înțelegerii expresiei oncogene și în impulsionarea descoperirii de noi ținte terapeutice. Această linie celulară face parte din panoul de linii celulare de leucemie utilizat pentru depistarea noilor agenți chimioterapeutici. Un exemplu emoționant este utilizarea celulelor HL-60 pentru a stabili proprietățile antileucemice ale compușilor extrași din organisme marine, care au evidențiat atât efecte antiproliferative, cât și pro-apoptotice [2]. Mai mult, linia celulară a facilitat examinarea căilor de semnalizare esențiale, cum ar fi JAK/STAT și influența acestora asupra proliferării celulelor leucemice, alături de evaluarea promisiunilor terapeutice ale compușilor bioactivi, cum ar fi Timochinona [3].
Imunologie
Celulele HL-60 sunt un sistem in vitro robust pentru a studia diverse răspunsuri imune, inclusiv procesul complex de chemotaxis și reglarea expresiei mediatorilor imuni cheie. Aceste celule se pot diferenția în celule mieloide asemănătoare macrofagelor și neutrofilelor, servind drept model versatil pentru investigarea căilor inflamatorii. De exemplu, celulele asemănătoare macrofagelor derivate din HL-60 au fost utilizate pentru a explora potențialul antiinflamator al fitochimicelor din genul Brassica [4]. Într-un alt studiu, diferențierea celulelor HL-60 în celule asemănătoare neutrofilelor a permis cercetătorilor să identifice gene pivotale pentru diferențierea celulară și funcțiile imunitare aferente [5].
Descoperirea medicamentelor
Capacitățile de diferențiere mieloidă ale HL-60 au fost, de asemenea, exploatate în descoperirea de medicamente, în special în identificarea candidaților care ar putea modula calea de diferențiere, care este esențială în tratamentul leucemiei. Acest lucru este exemplificat de studiile care au utilizat linia celulară HL-60 pentru a evalua potențialul anticancerigen al produselor naturale [6].
În plus, linia celulară HL-60 este utilizată pentru a studia diverse aspecte ale biologiei liniei celulare mieloide, cum ar fi înțelegerea modului în care tratamentul cu agenți precum acidul retinoic poate duce la diferențierea monocitică sau modul în care aceste celule imită neutrofilele primare în generarea de capcane extracelulare. Utilizarea modelului în elucidarea evenimentelor moleculare ale malignităților hematologice este extinsă și mai mult prin aplicarea sa în studiile panourilor de celule cu mutații, în special în contextul analizei hotspot-urilor p53 ale leucemiei.
Pentru cei care explorează mecanica celulară, timpul de dublare a HL-60 și răspunsul acestora la electroporare în canale microfluidice, linia celulară oferă o platformă fiabilă pentru investigații.
Linia celulară HL-60 pentru cercetarea dumneavoastră
Celule HL-60: Publicații de cercetare
Sunt disponibile mai multe studii de cercetare privind celulele HL-60. Aici, am enumerat câteva exemple notabile:
Această lucrare de cercetare a propus efectul antitumoral al unui compus, Stigmast-5-en-3-ol, asupra celulelor leucemice HL-60 și a celulelor cancerului de sân MCF7.
Acest studiu descrie rolul semnalizării JAK/STAT în proliferarea celulelor HL-60. În plus, cercetătorii investighează potențialul terapeutic al compusului Thymoquinone folosind această linie celulară de leucemie. Compusul inhibă proliferarea celulară și induce moartea celulară prin revigorarea expresiei regulatorilor negativi ai cascadei JAK/STAT.
Acest studiu a utilizat celulele HL-60 pentru a deriva un model celular asemănător macrofagelor din investigarea activității antiinflamatorii a compușilor plantelor Brassica.
Acest studiu publicat în revista International Immunopharmacology a dezvoltat celule neutrofile mimice din linia celulară HL-60 prin utilizarea dimetil sulfoxidului. Studiul a observat că gena ERK este implicată în diferențierea acestor celule.
Această lucrare de cercetare investighează potențialul anticancerigen al compușilor polifenolici vegetali, și anume acidul galic și acidul elagic, asupra celulelor leucemice HL-60 sensibile și rezistente la medicamente.
Resurse pentru linia celulară HL-60: Protocoale, videoclipuri și multe altele
Sunt disponibile mai multe resurse educaționale online privind linia celulară HL-60. Această secțiune va acoperi câteva resurse care descriu cultivarea și transfecția acestei linii celulare.
Protocoale de cultură celulară
Resursele care descriu metodele de cultivare a celulelor HL-60 sunt:
- Propagarea celulelor HL-60: Acest document va furniza informații despre subculturile de celule HL-60.
- Linia celulară HL-60: Acest site web conține informații de bază despre celulele HL-60 și protocoale, inclusiv cultivarea, înghețarea și decongelarea celulelor.
Protocoale de transfecție
Iată câteva resurse care descriu metodele de transfecție optate pentru celulele HL-60.
- Transfecția celulelor HL-60: Acest link are o procedură detaliată de transfecție pentru celulele leucemice HL-60.
- Transfecția tranzitorie a celulelor HL-60: Acest document conține informații utile despre linia celulară și oferă un protocol detaliat pentru transfecția tranzitorie a celulelor HL-60.
Videoclipuri referitoare la linia celulară HL-60
Există resurse video foarte limitate privind celulele HL-60.
- Transferul celulelor HL-60: Acest videoclip explică protocolul de subcultură a celulelor HL-60.
Ne așteptăm ca acest articol să vă ofere informații de bază despre cultivarea și menținerea liniei de celule HL-60. În plus, vă poate îmbunătăți cunoștințele despre avantajele utilizării acestor celule leucemice în cercetare. Dacă intenționați să utilizați această linie celulară, comandați de la noi.
Linia celulară HL-60: Întrebări frecvente esențiale pentru cercetători
Referințe
- Fleck, R., S. Romero-Steiner și M. Nahm, Utilizarea liniei celulare HL-60 pentru a măsura capacitatea opsonică a anticorpilor pneumococici. Imunologie clinică și vaccinală, 2005. 12(1): p. 19-27.
- Fernando, I.S., și colab., Efectele apoptotice și antiproliferative ale Stigmast-5-en-3-ol din Dendronephthya gigantea asupra leucemiei umane HL-60 și a celulelor cancerului de sân uman MCF-7. Toxicologie in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
- Almajali, B., și colab., Timochinona suprimă proliferarea celulară și sporește apoptoza celulelor leucemice HL60 prin reexprimarea regulatorilor negativi JAK / STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., și colab., Analiza potențialului antiinflamator al compușilor bioactivi Brassica într-un model celular asemănător macrofagului uman derivat din celulele HL-60. Biomedicină și Farmacoterapie, 2022. 149: p. 112804.
- Wang, D., și colab., ERK este implicat în diferențierea și funcția celulelor HL-60 asemănătoare neutrofilelor induse de dimetil sulfoxid, care imită neutrofilele inflamatorii. Imunofarmacologie internațională, 2020. 84: p. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Anti-Leukemic Activity of Brassica-Derived Bioactive Compounds in HL-60 Myeloid Leukemia Cells. Jurnalul internațional de științe moleculare, 2022. 23(21): p. 13400.
