Celulele HK-2 – Analiza funcției și patologiei renale cu ajutorul celulelor HK-2 în cercetarea renală

HK-2 este o linie celulară epitelială renală umană imortalizată, utilizată frecvent în cercetarea toxicologică. Cercetătorii evaluează efectele toxinelor din mediu asupra acestor celule renale. În plus, ei utilizează celulele HK-2 pentru a investiga bolile renale și mecanismele care stau la baza acestora.

📋 Linia celulară HK-2 — Informații succinte

Mediu de creștere: Mediul ideal pentru celulele HK-2 este mediul pentru linii celulare keratinocitare care conține 10% ser fetal bovin, 0,05 mg/ml extract hipofizar bovin (BPE) și 5 ng/ml factor de creștere epidermic (EGF). Mediul trebuie înlocuit o dată la 2-3 zile pe săptămână.
Timp de dublare: Timpul de dublare pentru celulele HK-2 variază între 47,3 h și 61,7 h.
Tipul de creștere: Linia celulară epitelială renală HK-2 este aderentă.
Nivel de biosecuritate: BSL-2
Disponibil de la: Cytion — Comandați HK-2

📋 Conținut

Celule HK-2: Origine și caracteristici generale
Linia celulară HK-2: Informații privind cultivarea
Avantajele și limitările celulelor HK-2
Aplicații ale liniei celulare HK-2 în cercetare
5. Celule HK-2: Publicații de cercetare
Resurse pentru linia celulară HK-2: protocoale, videoclipuri și multe altele
Întrebări frecvente

Celulele HK-2: Origine și caracteristici generale

Este esențial să se cunoască originea și caracteristicile generale ale unei linii celulare pentru manipularea, întreținerea și utilizarea corespunzătoare a acesteia. Această secțiune a articolului va aborda următoarele aspecte: Ce sunt celulele HK-2 din rinichiul uman 2? Care este rolul HK2? Ce sunt celulele HK2? Care este originea liniei celulare HK-2? Care sunt dimensiunea și morfologia celulelor HK-2?

Celulele renale umane 2 (HK-2) sunt un tip de celule tubulare proximale provenite din țesutul renal normal al unui adult european. Linia celulară HK-2 a fost creată prin transfectarea celulelor renale cu un retrovirus recombinant care conține genele E6/E7 ale virusului papiloma uman 16. Acest experiment a dus la imortalizarea și crearea unei linii celulare epiteliale renale HK-2 cu creștere continuă.
Celulele HK-2 prezintă o morfologie epitelială.
Dimensiunea celulelor HK-2 variază între 17,4 și 18,6 µm în diametru. Diametrul mediu este de 18,2 µm [1].

Celule renale umane sănătoase la microscop.

Linia celulară HK-2: Informații privind cultivarea

Informațiile despre cultivarea liniei celulare renale umane 2 vă pot ajuta semnificativ înainte de a lucra cu aceasta. Informațiile esențiale despre cultura celulară HK-2 sunt menționate în această secțiune a articolului. Veți afla: Celulele HK-2 sunt aderente? Care este timpul de dublare al celulelor HK-2? Ce mediu se utilizează pentru cultivarea celulelor HK-2?

Puncte cheie pentru cultivarea celulelor HK-2

Timpul de dublare a populației:: Timpul de dublare pentru celulele HK-2 variază între 47,3 h și 61,7 h.
Aderente sau în suspensie:: Linia celulară epitelială renală HK-2 este aderentă.
Raport de subcultivare:: Celulele HK-2 sunt subcultivate la un raport de 1:2 până la 1:4. Celulele HK-2 aderente sunt spălate cu 1 x PBS și incubate la temperatura camerei timp de 8 până la 10 minute după adăugarea soluției Accutase. Mediul de cultură este adăugat la celulele disociate și centrifugat. Celulele colectate sunt resuspendate cu grijă și turnate în flacoane noi pentru cultivare.
Mediu de creștere:: Mediul ideal pentru celulele HK-2 este mediul pentru linia celulară de keratinocite care conține 10% ser fetal bovin, 0,05 mg/ml extract hipofizar bovin (BPE) și 5 ng/ml factor de creștere epidermic (EGF). Mediul trebuie înlocuit o dată la 2-3 zile pe săptămână.
Condiții de creștere:: Culturile de celule din linia celulară renală umană 2 sunt păstrate într-un incubator umidificat, cu un aport de 5% CO2, la 37 °C.
Depozitare:: Celulele congelate sunt depozitate în faza de vapori a azotului lichid sau la o temperatură sub -150 °C într-un congelator cu temperatură ultra-scăzută.
Procesul de congelare și mediul:: Mediile de congelare CM-1 sau CM-ACF sunt ideale pentru congelarea celulelor HK-2. Pe scurt, se optează pentru o metodă de congelare lentă, care permite o scădere a temperaturii de numai 1 grad Celsius pe minut și protejează celulele de orice șoc.
Procesul de decongelare:: Celulele congelate sunt decongelate într-o baie de apă la o temperatură de 37 de grade Celsius. Aceste celule sunt adăugate în medii de cultură proaspete și resuspendate. Ulterior, celulele sunt transferate într-un flacon nou care conține mediu de creștere. După 24 de ore, mediul este înlocuit pentru a îndepărta componentele mediului de congelare.
Nivel de biosecuritate:: Culturile celulare HK-2 sunt menținute în laboratoare de nivel 1 de biosecuritate.

Hk 2 cells

Celule HK-2 care se dezvoltă în insule, la o mărire de 10x și 20x.

Avantajele și limitările liniilor celulare HK-2

HK-2 este o linie celulară epitelială a tubului proximal uman utilizată pe scară largă. La fel ca alte linii celulare, aceasta prezintă, de asemenea, anumite avantaje și limitări. În această secțiune vor fi discutate câteva dintre principalele avantaje și dezavantaje ale liniei celulare renale umane 2.

Avantaje

Principalele avantaje ale liniei celulare HK-2 includ:

Bine caracterizată: Linia celulară HK-2 este caracterizată pe larg în ceea ce privește morfologia, dimensiunea și genomul. Au fost efectuate numeroase studii de cercetare asupra acestor celule renale normale.
Imortalizată: HK-2 este o linie celulară continuă cu o durată de viață prelungită, ceea ce îi permite să fie propagată prin mai multe pasaje. Această caracteristică asigură o aprovizionare continuă cu celule pentru experimentele de laborator.
Caracteristici epiteliale ale tubului proximal: Celulele HK-2 prezintă un fenotip bine diferențiat, caracteristic celulelor tubulare proximale (PTC) găsite în rinichiul uman. Această trăsătură unică face din celulele HK-2 un model in vitro valoros pentru studierea fiziologiei renale, a proceselor celulare și a răspunsurilor la diversi stimuli.

Limitări

Iată câteva limitări ale liniei celulare HK-2:

Model in vitro: HK-2 servește ca model in vitro al celulelor renale normale, prezentând în special caracteristicile celulelor epiteliale ale tubului proximal. Cu toate acestea, este posibil să nu reproducă pe deplin complexitatea țesutului renal uman și a micromediului întâlnit in vivo.

Aplicații ale liniei celulare HK-2 în cercetare

Linia celulară HK-2 are numeroase aplicații în cercetarea toxicologică. Aici am discutat câteva utilizări specifice și semnificative ale acestei linii celulare tubulare proximale umane în cercetare.

Fiziologia renală: Celulele HK-2 sunt utilizate în mod obișnuit pentru a studia fiziologia și funcțiile renale normale. Cercetătorii folosesc aceste celule epiteliale ale tubului proximal pentru a investiga canalele ionice, procesele de transport și alte mecanisme celulare care reglează homeostazia renală. De exemplu, cercetătorii au studiat rolul canalelor Transient Receptor Potential Channel 6 (TRPC6) în moartea celulară indusă de (+)-Conocarpan (CNCP), un neolignan, în celulele epiteliale renale, HK-2 [2].
Boli renale: Linia celulară renală umană 2 este utilizată pentru a investiga diferite boli renale, adică leziuni renale acute și nefropatie diabetică, precum și mecanismele celulare și moleculare care stau la baza acestora. De exemplu, cercetările au descoperit că nivelurile de metilare a proteinei klotho sunt legate de leziunile renale. Scăderea metilării promotorului genei Klotho poate spori expresia acesteia și poate atenua leziunile renale induse în modelele de șoareci diabetici db/db și în celulele HK-2 tratate cu glucoză ridicată [3].
Studii de toxicologie: Celulele HK-2 reprezintă un instrument de cercetare excelent pentru evaluarea efectelor potențiale ale diverselor medicamente, substanțe chimice și poluanți de mediu. Studiile pot ajuta cercetătorii să evalueze siguranța medicamentelor și efectele secundare asupra celulelor renale. De exemplu, un studiu publicat în 2022 a evaluat efectele potențiale ale polizaharidelor și extractului apos din planta naturală Polygonatumkingianum (PK) asupra nefrotoxicității induse de uraniu în celulele HK-2. S-a constatat că PK exercită efecte protectoare și previne intoxicația cu uraniu în celulele renale [4].

650,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 305021

5. Celulele HK-2: Publicații de cercetare

Iată câteva publicații de cercetare interesante care prezintă celulele epiteliale renale HK-2.

CircHIPK3 atenuează toxicitatea glucozei ridicate asupra celulelor epiteliale tubulare renale umane HK-2 prin reglarea miR-326/miR-487a-3p/SIRT1

Acest studiu publicat în revista Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) a sugerat că ARN-ul circular HIPK3 poate diminua inhibarea proliferării celulelor HK-2 cauzată de toxicitatea glucozei ridicate. În plus, acesta poate inhiba moartea celulară prin reglarea cascadei miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.

Mecanismul de toxicitate diferențiată al nanoparticulelor de aur în celulele tubulare proximale renale HK-2 și celulele carcinomului 786-0

Această publicație de cercetare din Nanomedicine (2020) a evaluat diferite mecanisme de toxicitate ale nanoparticulelor de aur (AuNPs) în celulele canceroase 786-0 și în celulele epiteliale tubulare proximale HK-2.

Toxicitatea indusă de glucoză ridicată în celulele HK-2 poate fi atenuată prin inhibarea miRNA-320c

Acest articol a fost publicat în Renal Failure (2022). Rezultatele arată că microARN-320c poate reduce toxicitatea indusă de nivelul ridicat de glucoză în celulele renale (HK-2) prin țintirea PTEN și inhibarea semnalizării PI3K/AKT.

Exozomii derivați din celule stem mezenchimale atenuează tranziția epitelial-mezenchimală a celulelor HK-2

Acest studiu publicat în Tissue Engineering Part A (2022) a propus că exozomii derivați din celule stem mezenchimale previn tranziția epitelial-mezenchimală a celulelor renale HK-2.

LncRNA TapSAKI favorizează leziunile inflamatorii în celulele HK-2 și leziunile renale induse de sepsisul derivat din urină

Articolul din Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) afirmă că lncRNA TapSAKI intensifică răspunsul inflamator și moartea celulară a celulelor HK-2 prin reglarea căii de semnalizare microRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB.

Resurse pentru linia celulară HK-2: protocoale, videoclipuri și multe altele

HK-2 este o linie celulară renumită. Iată câteva resurse care descriu protocolul de cultivare a celulelor HK-2.

Cultura celulară HK-2: Acest site web conține numeroase informații despre cultura celulară HK-2. De exemplu, oferă rețeta mediului celular HK-2, protocolul de repicare și protocolul pentru manipularea și menținerea culturilor proliferative și crioconservate.
Pasarea celulelor: Acest videoclip vă va ajuta să învățați un protocol general de divizare sau pasare pentru liniile celulare aderente.

Referințe

Handl, J., et al., Efectul pasajelor repetate asupra susceptibilității celulelor tubulare proximale umane HK-2 la compuși toxici. Physiological Research, 2020. 69(4): p. 731.
Yang, G., et al., Activarea canalelor TRPC6 contribuie la moartea celulară apoptotică indusă de (+)-conocarpan în celulele HK-2. Food and Chemical Toxicology, 2019. 129: p. 281-290.
Yang, X.H., et al., EGCG atenuează leziunile renale prin inversarea hipermetilării klotho la șoarecii diabetici db/db și la celulele HK-2. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020. 2020.
Li, W., et al., Efectele protectoare ale polizaharidelor și extractului apos de Polygonatum kingianum asupra toxicității induse de uraniu în celulele renale umane (HK-2). International Journal of Biological Macromolecules, 2022. 202: p. 68-79.