Celule HK-2 - Explorarea funcției și patologiei renale cu ajutorul celulelor HK-2 în cercetarea renală

HK-2 este o linie celulară epitelială imortalizată de rinichi uman utilizată în mod obișnuit în cercetarea toxicologică. Cercetătorii evaluează efectele toxinelor de mediu asupra acestor celule renale. În plus, ei folosesc celulele HK-2 și pentru a investiga bolile renale și mecanismele care stau la baza acestora.

Acest articol va explica aproape toate informațiile esențiale despre celulele HK-2, inclusiv caracteristicile lor generale, condițiile de cultură celulară, aplicațiile de cercetare și multe altele. Veți afla următoarele:

Celule HK-2: Origine și caracteristici generale
Linia celulară HK-2: Informații privind cultivarea
Avantaje și limitări ale celulelor HK-2
Aplicații ale liniei celulare HK-2 în cercetare
Celule HK-2: Publicații de cercetare
Resurse pentru linia celulară HK-2: Protocoale, videoclipuri și altele

1.celule HK-2: Origine și caracteristici generale

Originea și caracteristicile generale ale unei linii celulare sunt imperativ de cunoscut pentru manipularea, întreținerea și utilizarea corespunzătoare a unei linii celulare. Această secțiune a articolului va acoperi următoarele: Ce sunt celulele HK-2 din rinichiul uman 2? Care este rolul celulelor HK2? Ce sunt celulele HK2? Care este originea liniei celulare HK-2? Care sunt dimensiunea și morfologia celulelor HK-2?

Celulele Human Kidney 2 (HK-2) sunt un tip de celule tubulare proximale provenite din țesutul renal normal al unui adult european. Linia celulară HK-2 a fost stabilită prin transfectarea celulelor renale cu un retrovirus recombinant care cuprinde genele E6/E7 ale papilomavirusului uman 16. Acest experiment a dus la imortalizarea și stabilirea unei linii de celule epiteliale renale HK-2 în creștere continuă.
Celulele HK-2 prezintă o morfologie epitelială.
Dimensiunea celulelor HK-2 variază între 17,4 -18,6 µm în diametru. Diametrul mediu este de 18,2 µm [1].

Celule renale umane sănătoase sub microscop.

2.linia celulară HK-2: Informații despre cultivare

Informațiile despre cultivarea liniei celulare de rinichi uman 2 vă pot ajuta semnificativ înainte de a lucra cu aceasta. Informațiile imperative privind cultura celulei HK-2 sunt menționate în această secțiune a articolului. Veți ști: Sunt celulele HK-2 aderente? Care este timpul de dublare al celulelor HK-2? Ce mediu se utilizează pentru cultivarea celulelor HK-2?

Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor HK-2

Timpul de dublare a populației:	Timpul de dublare a celulelor HK-2 variază între 47,3 h și 61,7 h.
Aderente sau în suspensie:	Linia de celule epiteliale renale HK-2 este aderentă.
Raport de subcultivare:	Celulele HK-2 sunt subcultivate într-un raport de 1:2 până la 1:4. Celulele HK-2 aderente se spală cu 1 x PBS și se incubează la temperatura ambiantă timp de 8 până la 10 minute după adăugarea soluției Accutase. Mediul de cultură se adaugă la celulele disociate și se centrifughează. Celulele colectate sunt resuspendate cu atenție și turnate în flacoane noi pentru cultură.
Mediu de cultură:	Mediul pentru linia celulară de keratinocite care conține 10% ser fetal bovin, 0,05 mg/ml extract hipofizar bovin (BPE) și 5 ng/ml factor de creștere epidermal (EGF) este mediul ideal pentru celulele HK-2. Mediul trebuie înlocuit la fiecare 2 până la 3 zile pe săptămână.
Condiții de creștere:	Culturile de linii celulare de rinichi uman 2 sunt păstrate într-un incubator umidificat cu o aprovizionare cu 5% CO2 la 37°C.
Depozitare:	Celulele congelate se păstrează în faza de vapori a azotului lichid sau la o temperatură mai mică de -150 °C într-un congelator cu temperatură foarte scăzută.
Procesul de congelare și mediul:	Mediile de congelare CM-1 sau CM-ACF sunt ideale pentru congelarea celulelor HK-2. Pe scurt, se optează pentru o metodă de congelare lentă care permite scăderea temperaturii cu numai 1 grad Celsius pe minut și protejează celulele de orice șoc.
Procesul de decongelare:	Celulele congelate sunt dezghețate într-o baie de apă la o temperatură de 37 de grade Celsius. Aceste celule sunt adăugate cu mediu de cultură proaspăt și resuspendate. Ulterior, celulele sunt distribuite într-un flacon nou care conține mediu de cultură. După 24 de ore, mediul este înlocuit pentru a elimina componentele mediului de congelare.
Nivel de biosecuritate:	Culturile de celule HK-2 sunt menținute în laboratoare cu nivel de biosecuritate 1.

Celule HK-2 în creștere în insule la măriri de 10x și 20x.

3.avantaje și limitări ale celulelor HK-2

HK-2 este o linie celulară epitelială a tubului proximal uman utilizată pe scară largă. Ca și alte linii celulare, aceasta este, de asemenea, asociată cu unele avantaje și limitări. Această secțiune va discuta câteva avantaje și dezavantaje cheie ale liniei celulare de rinichi uman 2.

Avantaje

Principalele avantaje ale liniei celulare HK-2 includ:

Bine caracterizată	Linia celulară HK-2 este foarte bine caracterizată în ceea ce privește morfologia, dimensiunea și genomul. Numeroase studii de cercetare au fost efectuate pe aceste celule renale normale.
Imortalizate	HK-2 este o linie celulară continuă cu o durată de viață extinsă, care permite propagarea acesteia prin mai multe treceri. Această caracteristică asigură o aprovizionare continuă cu celule pentru experimentele de laborator.
Caracteristici epiteliale ale tubului proximal	Celulele HK-2 prezintă un fenotip bine diferențiat caracteristic celulelor tubului proximal (PTC) care se găsesc în rinichiul uman. Această caracteristică unică face din celulele HK-2 un model in vitro valoros pentru studiul fiziologiei renale, al proceselor celulare și al răspunsurilor la diferiți stimuli.

Limitări

Iată câteva limitări ale liniei celulare HK-2:

Model in vitro

HK-2 servește drept model in vitro de celule renale normale, prezentând în special caracteristici ale celulelor epiteliale ale tubului proximal. Cu toate acestea, este posibil să nu reproducă pe deplin complexitatea țesutului renal uman și micro-mediul găsit in vivo.

4.aplicații ale liniei celulare HK-2 în cercetare

Linia celulară HK-2 are numeroase aplicații în cercetarea toxicologică. Aici am discutat câteva utilizări specifice și semnificative în cercetare ale acestei linii de celule tubulare proximale umane.

Fiziologia renală: celulele HK-2 sunt utilizate în mod obișnuit pentru a studia fiziologia și funcțiile renale normale. Cercetătorii folosesc aceste celule epiteliale ale tubului proximal pentru a studia canalele ionice, procesele de transport și alte mecanisme celulare care reglează homeostazia renală. De exemplu, cercetătorii au studiat rolul canalelor Canalului potențial al receptorului tranzitoriu 6 (TRPC6) în moartea celulară indusă de (+)-Conocarpan (CNCP), un neolignan, în celulele epiteliale renale, HK-2 [2].
Boli ale rinichilor: Linia celulară de rinichi uman 2 este utilizată pentru a investiga diferite boli renale, și anume leziuni renale acute și nefropatie diabetică, precum și mecanismele lor celulare și moleculare subiacente. Astfel, cercetarea a constatat că nivelurile de metilare a proteinei klotho sunt legate de leziunile renale. Scăderea metilării promotorului genei Klotho poate spori expresia acesteia și poate atenua leziunile renale induse în modelele de șoareci diabetici db/db și în celulele HK-2 tratate cu glucoză ridicată [3].
Studii toxicologice: Celulele HK-2 sunt un instrument de cercetare excelent pentru evaluarea efectelor potențiale ale diferitelor medicamente, substanțe chimice și poluanți de mediu. Studiile pot ajuta cercetătorii să evalueze siguranța medicamentelor și efectele secundare asupra celulelor renale. Cum ar fi un studiu publicat în 2022, care a evaluat efectele potențiale ale polizaharidelor și extractului apos al unei plante naturale Polygonatumkingianum (PK) asupra nefrotoxicității induse de uraniu în celulele HK-2. Ei au constatat că PK exercită efecte de protecție și previne otrăvirea cu uraniu în celulele renale [4].

650,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 305021

5.celule HK-2: Publicații de cercetare

Următoarele sunt câteva publicații de cercetare interesante care prezintă celule epiteliale renale HK-2.

CircHIPK3 ameliorează toxicitatea glucozei ridicate la celulele HK-2 epiteliale tubulare renale umane prin reglarea miR-326/miR-487a-3p/SIRT1

Acest studiu din Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) a propus că ARN circular HIPK3 poate diminua inhibarea proliferării celulelor HK-2 cauzată de toxicitatea glucozei ridicate. În plus, acesta poate inhiba moartea celulară prin reglarea cascadei miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.

Mecanismul de toxicitate diferențiat al nanoparticulelor de aur în celulele tubulare proximale renale HK-2 și celulele carcinomului 786-0

Această publicație de cercetare în Nanomedicine (2020) a evaluat diferite mecanisme de toxicitate ale nanoparticulelor de aur (AuNPs) în celulele canceroase 786-0 și celulele epiteliale ale tubului proximal HK-2.

Toxicitatea indusă de glucoză ridicată în celulele HK-2 poate fi atenuată prin inhibarea miRNA-320c

Acest articol a fost publicat în Renal Failure (2022). Constatările afirmă că microARN-320c poate reduce toxicitatea indusă de glucoză ridicată în celulele renale (HK-2) prin țintirea PTEN și inhibarea semnalizării PI3K/AKT.

Exozomii derivați din celule stem mezenchimale atenuează tranziția epitelială-mesenchimală a celulelor HK-2

Acest studiu din Tissue Engineering Part A (2022) a propus că exozomii derivați din celulele stem mezenchimale împiedică tranziția epitelială la mezenchimală a celulelor renale HK-2.

LncRNA TapSAKI promovează leziunile inflamatorii în celulele HK-2 și leziunile renale induse de sepsis derivate din urină

Articolul din Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) afirmă că lncRNA TapSAKI sporește răspunsul HK-2 la inflamație și moartea celulară prin reglarea căii de semnalizare microRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB.

6.resurse pentru linia celulară HK-2: Protocoale, videoclipuri și multe altele

HK-2 este o linie celulară celebră. Iată câteva resurse care descriu protocolul de cultură celulară HK-2.

Cultura celulară HK-2: Acest site web este îmbogățit cu informații despre cultura celulară HK-2. De exemplu, acesta oferă rețeta mediului celular HK-2, protocolul de transfer și protocolul pentru manipularea și menținerea culturilor proliferative și crioconservate.
Transmiterea celulelor: Acest videoclip vă va ajuta să învățați un protocol general de divizare sau pasage pentru liniile celulare aderente.

Referințe

Handl, J. și colab., Efectul trecerii repetate asupra susceptibilității celulelor tubulare proximale umane HK-2 la compuși toxici. Cercetare fiziologică, 2020. 69(4): p. 731.
Yang, G., și colab., Activarea canalelor TRPC6 contribuie la moartea celulară apoptotică indusă de (+)-conocarpan în celulele HK-2. Toxicologie alimentară și chimică, 2019. 129: p. 281-290.
Yang, X.H. și colab., EGCG atenuează leziunile renale prin inversarea hipermetilării klotho la șoarecii diabetici db / db și la celulele HK-2. Medicina oxidativă și longevitatea celulară, 2020. 2020.
Li, W. și colab., Efectele protectoare ale polizaharidelor și extractului apos de Polygonatum kingianum asupra toxicității induse de uraniu în celulele renale umane (HK-2). Jurnalul Internațional de Macromolecule Biologice, 2022. 202: p. 68-79.