Celulele DU-145 – Ghid complet pentru cercetători

DU-145 este o linie celulară de carcinom de prostată uman utilizată pe scară largă în cercetarea biomedicală. Aceste celule servesc ca model de neprețuit pentru studierea biologiei cancerului de prostată, testarea medicamentelor și dezvoltarea acestora. În plus, cercetătorii utilizează celulele DU-145 pentru a investiga mecanismele moleculare care stau la baza dezvoltării, creșterii și progresiei cancerului de prostată.

📋 Linia celulară DU-145 — Informații succinte

Mediu de creștere: EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) cu suplimente de mediu, și anume 10% ser fetal bovin (FBS), 2 mM L-glutamină, 2,2 g/L NaHCO3 și EBSS. Mediul se reînnoiește de 2-3 ori pe săptămână.
Timp de dublare: Timpul de dublare al liniei DU-145 variază între 30 și 40 de ore.
Tipul de creștere: DU-145 este o linie celulară aderentă.
Nivel de biosecuritate: BSL-1
Disponibil de la: Cytion — Comandați DU-145

📋 Cuprins

Informații generale și originea liniei celulare DU-145
Cultivarea celulelor DU-145
Linia celulară DU-145: Avantaje și limitări
Aplicații de cercetare ale celulelor DU-145
5. Publicații de cercetare care prezintă celulele DU-145
Resurse pentru linia celulară DU-145: protocoale, videoclipuri și multe altele
Întrebări frecvente

Informații generale și originea liniei celulare DU-145

Înțelegerea atributelor fundamentale și a originii unei linii celulare este esențială înainte de a începe să lucrați cu aceasta. Această secțiune vă va oferi o înțelegere cuprinzătoare a caracteristicilor și originii liniei celulare DU-145. Veți afla: Ce sunt celulele canceroase DU145? Care este morfologia celulelor DU145? Care este diferența dintre PC-3 și DU145?

DU-145, o linie celulară de cancer de prostată uman, a fost derivată din creierul unui bărbat caucazian (în vârstă de 69 de ani) cu carcinom de prostată metastatic. Aceste celule au fost depuse pentru prima dată de K.R. Stone și colegii săi în 1978.
La fel ca celulele canceroase de prostată PC-3, DU-145 exprimă, de asemenea, receptori de androgeni. Cu toate acestea, atunci când aceste celule sunt supuse tratamentului cu liganzi androgeni, ele nu prezintă nicio activitate a genelor care răspund la receptorii de androgeni, fiind astfel considerate celule independente de androgeni.
Celulele DU-145 au o morfologie epitelială.
Celulele DU-145 sunt hipotriploide și au un număr modal de cromozomi de 64. Acestea prezintă mai mulți cromozomi markeri, precum del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) și del (9) (p11).

PC-3 vs DU145

Ambele linii celulare de cancer de prostată sunt independente de receptorul de androgeni. Ele diferă în ceea ce privește potențialul lor tumorigene și metastatic. Când este injectată într-un șoarece imunocompromis, linia celulară PC-3 formează un adenocarcinom de gradul IV cu grad ridicat de metastazare. În schimb, linia celulară DU-145 dezvoltă cancer de prostată cu potențial metastatic moderat [1].

Distrugerea microfilamentelor în celulele canceroase ale prostatei umane PC-3.

Cultivarea celulelor DU-145

Linia celulară DU-145 este utilizată pe scară largă în laboratoarele de cercetare a cancerului de prostată. Ar trebui să învățați următoarele puncte cheie pentru a facilita cultivarea ușoară și eficientă a acesteia. Această secțiune va include informații despre mediul DU145, timpul de dublare, condițiile de cultivare a celulelor și protocoalele.

Puncte cheie pentru cultivarea celulelor DU-145

Timpul de dublare a populației:: Timpul de dublare al liniei DU-145 variază între 30 și 40 de ore.
Aderente sau în suspensie:: DU-145 este o linie celulară aderentă.
Densitatea de însămânțare:: Celulele DU-145 sunt însămânțate la o densitate recomandată de 2 x 10⁴celule/cm². La această densitate, celulele formează un monostrat confluent în aproape 4 zile. Pentru însămânțare, celulele sunt spălate cu soluție salină tamponată cu fosfat 1x și incubate cu soluție de pasare, Accutase. După 8-10 minute de incubare la temperatura camerei, celulele sunt adăugate cu mediu de cultură proaspăt și centrifugate. Peleta celulară colectată este resuspendată cu grijă, iar celulele sunt turnate în flacoane de cultură noi pentru creștere.
Mediu de creștere:: EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) cu suplimente de mediu, și anume 10% ser fetal bovin (FBS), 2 mM L-glutamină, 2,2 g/L NaHCO3 și EBSS. Mediul este reînnoit de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:: Culturile DU-145 sunt păstrate într-un incubator umidificat la 37 °C cu o sursă de CO2 de 5%.
Depozitare:: Celulele DU-145 sunt depozitate în faza de vapori a azotului lichid sau la o temperatură sub -150 °C într-un congelator electric pentru a menține viabilitatea celulară pe termen lung.
Procesul de congelare și mediul:: Pentru celulele canceroase de prostată DU-145 se recomandă mediile de congelare CM-1 sau CM-ACF. Pentru congelarea celulelor se optează pentru o metodă de congelare lentă, care permite scăderea treptată a temperaturii cu 1 °C. Acest lucru previne șocul celular și ajută la menținerea viabilității acestora.
Procesul de decongelare:: Flacoanele cu celule DU-145 congelate sunt decongelate rapid într-o baie de apă la 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde. Ulterior, celulele sunt adăugate în medii de cultură și centrifugate pentru a îndepărta componentele mediului de congelare. Celulele recoltate sunt resuspendate într-un mediu de creștere și turnate în balon pentru creștere. Recuperarea după congelare durează aproape 24 de ore.
Nivel de biosecuritate:: Pentru cultivarea liniei celulare DU145 independente de receptorul de androgeni sunt necesare condiții de biosecuritate de nivel 1.

Du145 cells

Celule canceroase de prostată DU-145 la o mărire de 10x și 20x.

Linia celulară DU-145: Avantaje și limitări

La fel ca alte linii celulare, linia celulară de cancer de prostată DU-145 prezintă anumite avantaje și dezavantaje. Aceste caracteristici vă pot ajuta să decideți dacă o veți utiliza în cercetarea dumneavoastră. Principalele avantaje și dezavantaje ale celulelor DU-145 sunt menționate mai jos.

Avantaje

Avantajele celulelor DU-145 sunt:

Tumorigeneza: DU-145 este o linie celulară agresivă de cancer de prostată, cu potențial metastatic moderat. Este utilizată pentru dezvoltarea modelului de xenogrefă DU145 la șoareci imunocompromiși, în scopul studierii biologiei, dezvoltării și creșterii cancerului de prostată in vitro și in vivo.
Independența față de receptorul de androgen: Celulele canceroase de prostată DU-145 sunt independente de receptorul de androgeni. Ele nu depind de androgeni pentru creștere și nu prezintă nicio reacție la nivel celular și molecular atunci când sunt tratate cu androgeni. Ideale pentru cercetarea mecanismelor cancerului de prostată independent de hormoni.

Limitări

Limitările liniei celulare DU-145 sunt:

Model in vitro: DU-145 este un model celular in vitro de carcinom de prostată metastatic, astfel încât este posibil să nu reprezinte pe deplin complexitatea tumorilor primare de prostată. Mai mult, este posibil să nu includă toate tipurile și subtipurile de cancer de prostată din cauza unor caracteristici specifice, cum ar fi independența de receptorul de androgeni.

Aplicații de cercetare ale celulelor DU-145

Linia celulară de cancer de prostată DU-145 are o gamă largă de aplicații de cercetare. Câteva aplicații promițătoare sunt enumerate aici.

Biologia cancerului de prostată: DU-145 este un model relevant pentru studierea biologiei cancerului de prostată. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a investiga mecanismele moleculare care determină dezvoltarea, progresia și metastazarea cancerului. Mai mult, sunt explorate și alterările genetice asociate în mod obișnuit cu cancerul de prostată. Cercetările efectuate în 2021 au examinat celulele DU-145 pentru a identifica potențiali biomarkeri pentru implicații diagnostice și terapeutice eficiente. Studiul a sugerat actina gamma 1 (ACTG1) ca potențial biomarker al cancerului de prostată, deoarece aceasta promovează proliferarea celulelor canceroase și reglează metastazarea prin activarea căii MAPK/ERK [2].
Screeningul și dezvoltarea medicamentelor: Celulele canceroase de prostată DU-145 sunt utilizate pe scară largă pentru a testa citotoxicitatea și eficacitatea potențialelor medicamente anticanceroase. Acest lucru ajută cercetătorii să identifice noi medicamente, să înțeleagă rezistența la medicamente și mecanismele moleculare subiacente. Un studiu realizat în 2022 a explorat efectul citotoxic al unui amestec rășinos, propolisul sau „lipiciul de albine”, în liniile celulare de cancer de prostată PC-3 și DU-145. Studiul a demonstrat efectele inhibitoare asupra creșterii ale acestei substanțe naturale în ambele linii celulare și a propus potențialul său anticancerigen [3]. Un alt studiu a fost realizat în 2019, care a investigat efectele antiproliferative ale unui compus natural, betaina, în celulele canceroase de prostată DU-145. Cercetarea a arătat că betaina exercită activități antiproliferative prin creșterea morții celulare mediate de stresul oxidativ și a inflamației în celulele DU-145 [4].

430,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 300168

5. Publicații științifice referitoare la celulele DU-145

Următoarele sunt câteva publicații de cercetare privind linia celulară DU-145.

Efectele dependente de concentrație ale sulfatului de zinc asupra liniei celulare DU-145 de cancer de prostată uman: analize oxidative, apoptotice, inflamatorii și morfologice

Acest studiu, publicat în revista Biological Trace Element Research în 2020, a sugerat că sulfatul de zinc (ZnSO₄) exercită efecte antiproliferative asupra celulelor DU-145 prin inducerea apoptozei, a modificărilor morfologice, a leziunilor oxidative și a inflamației.

Activitate citotoxică și anti-metastatică selectivă în celulele canceroase de prostată DU-145 indusă de extractul de scoarță de Annona muricata L. și de fitochimicul annonacin

Acest articol de cercetare a fost publicat în BMC Complementary Medicine and Therapies în 2020. Acest studiu a explorat potențialul citotoxic și anti-metastatic al unei plante, extractul de scoarță de Annona muricata L., și al annonacinei sale bioactive în linia celulară DU-145.

Calea legată de LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFR reglează rezistența la doxorubicină a celulelor canceroase de prostată DU-145

Această publicație din IUBMB Life (2019) a propus că interacțiunea ARN-ului lung necodificat LOXL1-AS1 cu miR-let-7a-5p și calea EGFR reglează rezistența la doxorubicină în celulele canceroase de prostată DU-145.

Reglarea negativă a DDR1 induce apoptoza și inhibă EMT prin fosforilarea Pyk2/MKK7 în liniile celulare de cancer de prostată DU-145 și Lncap-FGC

Acest articol din Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) a afirmat că reglarea negativă a genei Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) provoacă moartea celulelor DU-145 și inhibă tranziția epitelial-mezenchimală (EMT) prin activarea căii Pyk2/MKK7.

Casticina inhibă migrația și invazia celulelor canceroase de prostată umane DU 145 prin intermediul căilor de semnalizare Ras/Akt/NF-κB

Acest studiu publicat în Journal of Food Biochemistry (2019) a propus că casticina, o polimetoxiflavonă, inhibă migrația și invazia celulelor DU-145 prin reglarea semnalizării Ras/Akt/NF-κB.

Resurse pentru linia celulară DU-145: protocoale, videoclipuri și multe altele

Există numeroase resurse online disponibile privind linia celulară DU-145 de cancer de prostată. În această secțiune vom menționa câteva resurse care explică manipularea, întreținerea și protocolul de transfecție pentru aceste celule:

Transfecția DU-145: Acest tutorial video este un ghid pas cu pas pentru învățarea protocolului de transfecție a celulelor DU-145.

Protocolul de cultură celulară DU-145 este menționat aici.

Subcultivarea DU-145: Acest link vă va ajuta să învățați protocolul de subcultivare a celulelor DU-145.
Celule DU-145: Acest site web conține o mulțime de informații utile despre linia celulară DU-145, inclusiv mediul DU145, protocolul de subcultivare și manipularea culturilor proliferative și crioconservate.

Referințe

Lima, A.R., et al., Discriminarea între exometabolomul celulelor normale și cel al celulelor canceroase ale prostatei umane prin GC-MS. Rapoarte științifice, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., Silențierea expresiei ACTG1 induce tranziția epitelial-mezenchimală a cancerului de prostată prin calea de semnalizare MAPK/ERK. Biologie celulară și ADN, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Efectele anticanceroase ale extractelor de propolis obținute prin metoda de separare la rece asupra liniilor celulare de cancer de prostată PC-3 și DU-145. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betaina suprimă proliferarea celulară prin creșterea apoptozei mediate de stresul oxidativ și a inflamației în linia celulară de cancer de prostată umană DU-145. Stresul celular și chaperonele, 2019. 24: p. 871-881.