Celule DU-145 - Ghid cuprinzător pentru cercetători
DU-145 este o linie celulară de carcinom de prostată uman aplicată pe scară largă în cercetarea biomedicală. Aceste celule servesc drept model neprețuit pentru studiul biologiei cancerului de prostată, testarea și dezvoltarea medicamentelor. În plus, cercetătorii utilizează, de asemenea, celulele DU-145 pentru a investiga mecanismele moleculare care stau la baza dezvoltării, creșterii și progresiei cancerului de prostată.
Acest articol vă va oferi informații valoroase despre celulele de cancer de prostată DU-145. În special, acesta va acoperi:
- Informații generale și originea liniei celulare DU-145
- Cultivarea celulelor DU-145
- Linia celulară DU-145: Avantaje și limitări
- Aplicații de cercetare ale celulelor DU-145
- Publicații de cercetare cu celule DU-145
- Resurse pentru linia celulară DU-145: Protocoale, videoclipuri și multe altele
1. Informații generale și originea liniei celulare DU-145
Înțelegerea atributelor fundamentale și a originii unei linii celulare este esențială înainte de a începe să lucrați cu aceasta. Această secțiune va oferi o înțelegere cuprinzătoare a caracteristicilor și originii liniei celulare DU-145. Veți afla: Ce sunt celulele canceroase DU145? Care este morfologia celulelor DU145? Care este diferența dintre PC-3 și DU145?
- DU-145, o linie celulară umană de cancer de prostată, a fost obținută din creierul unui bărbat caucazian (69 de ani) cu carcinom de prostată metastatic. Aceste celule au fost depuse pentru prima dată de K.R. Stone și colegii săi în 1978.
- Ca și celulele canceroase de prostată PC-3, DU-145 exprimă, de asemenea, receptori androgeni. Cu toate acestea, atunci când aceste celule sunt supuse unui tratament cu ligand androgen, ele nu prezintă nicio activitate a genelor care răspund la receptorii androgeni, fiind astfel considerate celule independente de androgeni.
- Celulele DU-145 au o morfologie epitelială.
- Celulele DU-145 sunt hipotriploide și au un număr modal de cromozomi de 64. Ele prezintă mai mulți cromozomi markeri, precum del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) și del (9) (p11).
PC-3 vs DU145
Ambele linii celulare de cancer de prostată sunt independente de receptorii androgeni. Ele diferă în ceea ce privește potențialul lor tumorigen și metastatic. Atunci când este injectată într-un șoarece imunocompromis, linia celulară PC-3 formează adenocarcinom de gradul IV foarte metastatic. În schimb, linia celulară DU-145 dezvoltă cancer de prostată cu potențial metastatic moderat [1].
2. cultivarea celulelor DU-145
Linia celulară DU-145 este utilizată pe scară largă în laboratoarele de cercetare a cancerului de prostată. Ar trebui să învățați următoarele puncte-cheie pentru a facilita cultivarea sa ușoară și eficientă. Această secțiune va include informații despre mediul DU145, timpul de dublare, condițiile de cultură celulară și protocoale.
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor DU-145
|
Timpul de dublare a populației: |
Timpul de dublare a populației DU-145 variază între 30 și 40 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
DU-145 este o linie celulară aderentă. |
|
Densitate de însămânțare: |
Celulele DU-145 sunt însămânțate la o densitate celulară recomandată de 2 x104 celule/cm2. La această densitate, celulele produc un monocelular confluent în aproape 4 zile. Pentru însămânțare, celulele sunt spălate cu soluție salină 1 x tampon fosfat și incubate cu soluția de transfer, Accutase. După 8 până la 10 minute de incubare la temperatura camerei, celulele sunt adăugate cu mediu de cultură proaspăt și centrifugate. Peletul celular colectat este resuspendat cu atenție, iar celulele sunt turnate în flacoane de cultură noi pentru creștere. |
|
Mediu de creștere: |
EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) cu suplimente de mediu, și anume, 10% ser fetal bovin (FBS), 2 mM L-Glutamină, 2,2 g/L NaHCO3 și EBSS. Mediul este reînnoit de 2 până la 3 ori pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Culturile DU-145 sunt menținute într-un incubator umidificat la 37°C cu o sursă de CO2 de 5%. |
|
Depozitare: |
Celulele DU-145 sunt stocate în faza de vapori a azotului lichid sau la o temperatură sub -150°C într-un congelator electric pentru a menține viabilitatea celulară pe termen lung. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
Mediile de congelare CM-1 sau CM-ACF sunt recomandate pentru celulele de cancer de prostată DU-145. Pentru congelarea celulelor se optează pentru o metodă de congelare lentă care permite scăderea treptată a temperaturii cu 1 °C. Acest lucru previne orice șoc al celulelor și contribuie la menținerea viabilității acestora. |
|
Procesul de decongelare: |
Fiolele cu celule DU-145 congelate sunt dezghețate rapid într-o baie de apă la 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde. Ulterior, celulele sunt adăugate cu mediul de cultură și centrifugate pentru a elimina componentele mediului de congelare. Celulele recoltate sunt resuspendate într-un mediu de creștere și turnate în flacon pentru creștere. Recuperarea congelării durează aproape 24 de ore. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Sunt necesare setări de nivel 1 de biosecuritate pentru cultivarea liniei de celule DU145 independente de receptorii androgeni. |
3. linia celulară DU-145: Avantaje și limitări
Ca și alte linii celulare, linia celulară de cancer de prostată DU-145 este asociată cu unele avantaje și dezavantaje. Aceste atribute vă pot ajuta să decideți utilizarea sa în cercetarea dumneavoastră. Principalele avantaje și dezavantaje ale celulelor DU-145 sunt menționate mai jos.
Avantaje
Avantajele celulelor DU-145 sunt:
|
Tumorigenicitate |
DU-145 este o linie celulară tumorigenă agresivă de cancer de prostată cu potențial metastatic moderat. Utilizată pentru dezvoltarea modelului de xenogrefă DU145 la șoareci imunocompromiși pentru a studia biologia, dezvoltarea și creșterea cancerului de prostată in vitro și in vivo. |
|
Independență față de receptorul de androgeni |
Celulele de cancer de prostată DU-145 sunt independente de receptorii androgeni. Acestea nu se bazează pe androgeni pentru creștere și nu prezintă niciun răspuns la nivel celular și molecular atunci când sunt tratate cu androgeni. Ideale pentru cercetarea mecanismelor cancerului de prostată independent de hormoni. |
Limitări
Limitările liniei celulare DU-145 sunt:
|
Model in vitro |
DU-145 este un model celular in vitro de carcinom metastatic de prostată, astfel încât este posibil să nu reprezinte pe deplin complexitatea tumorilor primare de prostată. În plus, este posibil să nu implice toate tipurile și subtipurile de cancer de prostată din cauza unor caracteristici specifice, cum ar fi independența de receptorul androgen. |
4. aplicații de cercetare ale celulelor DU-145
Linia celulară de cancer de prostată DU-145 are o gamă largă de aplicații de cercetare. Câteva aplicații promițătoare sunt enumerate aici.
- Biologia cancerului de prostată: DU-145 este un model relevant pentru studiul biologiei cancerului de prostată. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a investiga mecanismele moleculare care determină dezvoltarea, progresia și metastazarea cancerului. În plus, sunt explorate și alterările genetice asociate în mod obișnuit cu cancerul de prostată. Cercetările efectuate în 2021 au examinat celulele DU-145 pentru a identifica biomarkeri potențiali pentru un diagnostic eficient și implicații terapeutice. Studiul a sugerat actin gama 1 (ACTG1) ca biomarker potențial al cancerului de prostată, deoarece promovează proliferarea celulelor canceroase și reglează metastaza prin activarea căii MAPK/ERK [2].
- Screeningul și dezvoltarea medicamentelor: Celulele de cancer de prostată DU-145 sunt utilizate pe scară largă pentru a testa citotoxicitatea și eficacitatea potențialelor medicamente anti-cancer. Acest lucru ajută cercetătorii să identifice noi medicamente, să înțeleagă rezistența la medicamente și mecanismele moleculare subiacente. Un studiu efectuat în 2022 a explorat efectul citotoxic al unui amestec rășinos, propolis sau clei de albine, în liniile celulare de cancer de prostată PC-3 și DU-145. Studiul a arătat efectele inhibitoare de creștere ale acestei substanțe naturale în ambele linii celulare și a propus potențialul său anticancer [3]. Un alt studiu a fost efectuat în 2019, care a investigat efectele antiproliferative ale unui compus natural, betaina, în celulele canceroase de prostată DU-145. Cercetarea a arătat că betaina exercită activități antiproliferative prin creșterea morții celulare mediate de stresul oxidativ și a inflamației în celulele DU-145 [4].
5.publicații de cercetare cu celule DU-145
Următoarele sunt câteva publicații de cercetare privind linia celulară DU-145.
Acest studiu din Biological Trace Element Research, 2020, a propus că sulfatul de zinc (ZnSo4) exercită efecte antiproliferative în celulele DU-145 prin inducerea apoptozei, a modificărilor morfologice, a leziunilor oxidative și a inflamației.
Acest articol de cercetare a fost publicat în BMC Complementary Medicine and Therapies în 2020. Acest studiu a explorat potențialul citotoxic și anti-metastatic al unei plante, extractul de scoarță Annona muricata L., și al său bioactiv, annonacin, în linia celulară DU-145.
Această publicație în IUBMB Life (2019) a propus că interacțiunea ARN lung necodificator LOXL1-AS1 cu miR-let-7a-5p și calea EGFR reglează rezistența la doxorubicină în celulele de cancer de prostată DU-145.
Acest articol din Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) a afirmat că reducerea genei Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) determină moartea celulelor DU-145 și inhibă tranziția epitelială la mezenchimală (EMT) prin activarea căii Pyk2/MKK7.
Acest studiu din Journal of Food Biochemistry (2019) a propus că Casticin, o polimetoxiflavonă, inhibă migrația și invazia celulelor DU-145 prin reglarea semnalizării Ras/Akt/NF-κB.
6. resurse pentru linia celulară DU-145: Protocoale, videoclipuri și multe altele
Sunt disponibile numeroase resurse online privind linia celulară de cancer de prostată DU-145. În această secțiune vor fi menționate câteva resurse care explică manipularea, întreținerea și protocolul de transfecție pentru aceste celule:
- Transfecția DU-145: Acest tutorial video este un ghid pas cu pas pentru învățarea protocolului de transfectare a celulelor DU-145.
Protocolul de cultivare a celulelor DU-145 este menționat aici.
- Subcultivarea celulelor DU-145: Acest link vă va ajuta să învățați protocolul de subcultură sau subcultivare a celulelor DU-145.
- Celule DU-145: Acest site web conține o mulțime de informații utile despre linia celulară DU-145, inclusiv mediul DU145, protocolul pentru subcultură și manipularea culturilor proliferative și crioprezervate.
Referințe
- Lima, A.R., et al., Discriminarea dintre exometabolomul celulelor normale și canceroase ale prostatei umane prin GC-MS. Rapoarte științifice, 2018. 8(1): p. 5539.
- Xiao, L., și colab., Silențierea expresiei ACTG1 induce tranziția epitelială mezenchimală a cancerului de prostată prin calea de semnalizare MAPK / ERK. ADN și biologie celulară, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
- Gogacz, M., și colab., Efectele anticancerigene ale extractelor de propolis obținute prin metoda separării la rece asupra liniilor celulare de cancer de prostată PC-3 și DU-145. Molecule, 2022. 27(23): p. 8245.
- Kar, F. și colab., Betaina suprimă proliferarea celulară prin creșterea apoptozei și inflamației mediate de stresul oxidativ în linia celulară de cancer de prostată uman DU-145. Stresul celular și Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.