Celule DLD-1: Aplicații și perspective ale celulelor DLD-1 în cercetarea cancerului colorectal

DLD-1 este o linie celulară de carcinom colorectal uman utilizată în mod obișnuit în cercetarea cancerului. Este un instrument valoros pentru investigarea diferitelor aspecte ale cancerului de colon, inclusiv dezvoltarea tumorii, progresia, mecanismele moleculare subiacente și răspunsul la agenții terapeutici. Astfel, DLD-1 este remarcabilă în înțelegerea bolii și în dezvoltarea potențialelor strategii de tratament.

Acest articol va furniza informații importante despre linia celulară DLD-1 pe care trebuie să le cunoașteți înainte de a lucra cu aceasta. Acesta va acoperi:

  1. Caracteristicile generale și originea celulelor DLD-1
  2. Informații privind cultivarea liniei celulare DLD-1
  3. Linia celulară DLD-1: Avantaje și limitări
  4. Aplicații de cercetare ale liniei celulare DLD-1
  5. Publicații de cercetare privind celulele DLD-1
  6. Resurse pentru linia celulară DLD-1: Protocoale, videoclipuri și multe altele

1. Caracteristicile generale și originea celulelor DLD-1

Înainte de a lucra pe o linie celulară, primul considerent al unui cercetător este originea și atributele generale ale acesteia. Această secțiune a articolului este o introducere detaliată la linia celulară DLD-1. Aceasta va acoperi următoarele întrebări frecvente: Ce sunt celulele DLD-1? Ce este o linie celulară canceroasă DLD-1? Care sunt mutațiile liniei celulare DLD-1? Care este dimensiunea unei celule DLD-1? Care este morfologia celulelor DLD-1?

  • DLD-1, o linie celulară de cancer de colon, provine din intestinul gros al unui pacient de 67 de ani cu adenocarcinom colorectal. Aceasta a fost izolată de D.L. Dexter și colegii săi în perioada 1977-1979. Această linie celulară împărtășește aceeași origine cu liniile celulare HCT-8, HCT-15 și HRT-18.
  • Ca și cancerele colorectale, celulele DLD-1 posedă un fenotip de instabilitate a microsateliților [1].
  • Mutațiile DLD-1 includ KRAS, P53, BRAF, BRCA1 și BRCA2. Datorită statutului DLD-1 P53, mutațiilor DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 și DLD-1 KRAS, aceste celule sunt considerate ideale pentru studiul cancerului.
  • Aceste celule posedă o morfologie de tip epitelial.
  • Dimensiunea liniei celulare DLD-1 este de aproximativ 15 µm.
  • Linia celulară DLD-1 de cancer colorectal uman posedă un cariotip pseudodiploid. Aproximativ 86% din celule au un număr modal de cromozomi de 46. Cu toate acestea, poliploidia poate exista și în 17,1% din populația celulară.

reprezentare 3D a unei colonografii CT sau a unei scanări CT a intestinului gros afișată pe ecran pentru diagnosticarea cancerului intestinului gros, a cancerului de colon și a cancerului colorectal.

2.informații privind cultivarea liniei celulare DLD-1

Înainte de a cultiva orice linie celulară, trebuie să cunoașteți cerințele sale de bază pentru cultura celulară. Această secțiune va evidenția punctele importante pe care trebuie să le aflați înainte de a începe lucrul pe linia celulară DLD-1. Acestea includ: Care este timpul de dublare DLD-1? Care este mediul de cultură DLD-1? Care este densitatea de însămânțare a celulelor DLD-1? Cum se cultivă celulele DLD-1?

Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor DLD-1

Timpul de dublare:

Timpul de dublare a celulelor DLD-1 este de aproximativ 15 ore.

Aderente sau în suspensie:

DLD-1 este o linie celulară umană aderentă de cancer de colon. Celulele se dezvoltă în monostraturi.

Densitate de însămânțare:

Celulele DLD-1 sunt însămânțate la o densitate de 1 până la 2 x104 celule/cm2. Celulele aderente sunt spălate cu soluție salină tampon fosfat 1x (PBS) și incubate cu soluție de transfer (Accutase) la temperatura ambiantă. După o incubare de 8 până la 10 minute, celulele detașate sunt adăugate în mediul de cultură și centrifugate. Peletul celular este apoi resuspendat cu atenție, iar celulele sunt turnate în vase de cultură noi care conțin mediu de creștere.

Mediu de creștere:

Pentru cultivarea celulelor DLD-1 se utilizează RPMI 1640 cu suplimente de mediu, inclusiv 10% ser fetal bovin FBS, 2,1 mM glutamină stabilă și 2,0 g/L NaHCO3. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.

Condiții de creștere:

Culturile DLD-1 sunt menținute într-un incubator umidificat la 37°C cu o alimentare cu 5% CO2.

Depozitare:

Celulele DLD-1 se depozitează în faza de vapori a azotului lichid sau într-un congelator electric cu temperatură foarte scăzută (la o temperatură sub -150°C).

Procesul de congelare și mediul:

Mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF poate fi utilizat pentru a congela celulele DLD-1. Se recomandă întotdeauna un proces lent de congelare, care să permită o scădere treptată a temperaturii cu 1 °C, prevenind astfel șocul celulelor și protejându-le viabilitatea.

Procesul de decongelare:

Celulele congelate se dezgheață într-o baie de apă prestabilită la temperatura de 37 °C timp de 40-60 de secunde, până când rămâne o mică aglomerare de gheață. Ulterior, celulele sunt adăugate într-un mediu proaspăt și centrifugate. Această etapă este necesară pentru a elimina componentele mediului de congelare din celule. Celulele colectate sunt resuspendate într-un mediu de creștere și distribuite în balon pentru creștere.

Nivelul de biosecuritate:

Linia celulară DLD-1 este menținută în laboratoare cu nivel de biosecuritate 1.

Celule DLD-1 observate la măriri de 10x și 20x, dezvăluind morfologia epitelială caracteristică.

3.linia celulară DLD-1: Avantaje și limitări

În această secțiune a articolului, vom analiza avantajele și limitările liniei celulare de cancer de colon DLD-1.

Avantaje

Principalele avantaje ale liniei celulare DLD-1 sunt:

Model de cancer colorectal

Celulele DLD-1 posedă mutații frecvent întâlnite la pacienții cu cancer colorectal, cum ar fi mutația DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA și DLD-1 BRCA2. Această relevanță le face un model celular adecvat din punct de vedere clinic pentru studierea acestei boli.

Linie celulară tumorigenă

Celulele DLD-1 sunt tumorigene. Ele pot provoca tumori atunci când sunt injectate în șoareci nude. Prin urmare, cercetătorii folosesc aceste celule pentru a dezvolta modele tumorale xenograft care ajută la investigarea formării, dezvoltării și progresiei tumorilor in vivo.

Limitări

Limitările asociate cu celulele DLD-1 sunt:

Heterogenitate

Populațiile de celule de cancer de colon DLD-1 prezintă eterogenitate genetică și fenotipică. Aceasta poate influența generalizabilitatea rezultatelor cercetării.

4.aplicații de cercetare ale liniei celulare DLD-1

Linia celulară DLD-1 oferă o gamă largă de aplicații în cercetarea cancerului. Unele aplicații proeminente sunt discutate în această secțiune.

  • Studiul cancerului: Celulele DLD-1 servesc drept un model in vitro valoros pentru înțelegerea mecanismelor moleculare care stau la baza creșterii, dezvoltării și progresiei cancerului colorectal. În plus, ele sunt utilizate pentru studierea expresiei genelor, a căilor de semnalizare și a influenței mutațiilor genetice specifice asupra comportamentului celulelor canceroase. Cercetările efectuate în 2022 au observat că cascada de semnalizare PI3K/Akt/YAP reglează migrația și invazia liniei celulare de cancer colorectal DLD-1 [2].
  • Dezvoltarea medicamentelor: Cercetătorii utilizează linia celulară DLD-1 pentru a testa eficacitatea medicamentelor împotriva cancerului și pentru a evalua potențialul acestora pentru tratamentul cancerului de colon. Acest lucru ajută la dezvoltarea de medicamente și la combaterea eficientă a bolii. Un studiu efectuat în 2022 a utilizat linia celulară de cancer DLD-1 și a explorat activitatea anticancer a ftalocianinelor de siliciu, compuși sintetizați chimic. Rezultatele studiului au sugerat că acești compuși sunt agenți anti-cancer puternici [3]. În mod interesant, o altă cercetare a constatat potențialul anticancerigen al unei proteine P8 derivate din probiotice utilizând celule DLD-1 [4].

5.publicații de cercetare privind celulele DLD-1

Această secțiune va evidenția câteva publicații interesante și citate frecvent care prezintă linia celulară de carcinom de colon DLD-1.

Glicozida flavonoidă diosmin induce apoptoza și oprirea ciclului celular în linia celulară de cancer de colon uman DLD-1

Această publicație se află în Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). Studiul a constatat că diosmina, un flavonoid, a indus moartea celulară în celulele DLD-1 și a provocat, de asemenea, oprirea ciclului celular; astfel, acesta poate fi un potențial agent anti-cancer.

Bromelaina suprimă eficient cancerul colorectal cu mutație Kras prin stimularea feroptozei

Acest studiu din Animal Cells and Systems (2018) a propus că bromelaina, o enzimă, reprimă mutația DLD-1 KRAS și exercită efecte citotoxice puternice.

Bergaptenul induce oprirea G1 și cascada pro-apoptotică în celulele cancerului colorectal asociindu-se cu axa p53/p21/PTEN

Acest articol de cercetare a fost publicat în 2019 în revista "Environmental Toxicology". Studiul a explorat efectele antitumorale ale unui compus natural, Bergapten, utilizând o linie celulară corectală DLD-1.

Fabricarea ecologică a compozitului Nanocurcumin/Nano oxid de fier: Activitate anticancerigenă in vitro îmbunătățită împotriva liniilor celulare DLD-1

Acest studiu din Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) a constatat că nanocompozitele curcumină/oxid de fier sunt foarte eficiente împotriva celulelor canceroase colorectale DLD-1.

Epibrassinolida activează AKT pentru a declanșa autofagia cu metabolismul poliaminelor în liniile celulare de cancer de colon SW480 și DLD-1

Acest articol de cercetare a fost publicat în 2020 în Turkish Journal of Biology. Studiul a propus că un produs natural, activarea mediată de epibrassinolide a AKT în celulele DLD-1, stimulează autofagia legată de poliamine.

6.resurse pentru linia celulară DLD-1: Protocoale, videoclipuri și multe altele

Următoarele sunt câteva resurse privind celulele DLD-1:

  • Transfecția DLD-1: Acest tutorial video este un ghid cuprinzător despre protocolul de transfecție in vitro DLD-1.
  • Celule DLD-1: Această lucrare de cercetare descrie pe scurt cerințele de cultură a celulelor DLD-1, inclusiv mediile și condițiile de cultură. În plus, vă poate ajuta să învățați protocolul de transfecție utilizat pentru celulele DLD-1.

Următoarele link-uri conțin protocolul pentru cultivarea celulelor DLD-1, celule canceroase de colon derivate de la om.

  • Linia celulară DLD-1: Acest site va furniza informații de bază despre linia celulară DLD-1. Acesta vă va ajuta să învățați diferite protocoale de cultivare a celulelor DLD-1, inclusiv subculturile și manipularea culturilor crioprezervate și proliferante.

Referințe

  1. Gavrilas, L.I., et al., Genele pro-apoptotice ca noi ținte pentru tratamentele unice și combinatorii cu resveratrol și curcumină în cancerul colorectal. Alimente și funcții, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
  2. Takeda, T. și colab., Semnalarea PI3K/Akt/YAP promovează migrația și invaziacelulelor canceroase colorectale DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
  3. Farajzadeh, N. și colab., Activitatea anticancerigenă a noilor ftalocianine de siliciu împotriva liniei celulare de adenocarcinom colorectal (DLD-1). Noul Jurnal de Chimie, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
  4. An, B.C., și colab. roluri anticancerigene ale proteinei P8 derivate din probiotice în linia celulară de cancer colorectal DLD-1. Jurnalul internațional de științe moleculare, 2023. 24(12): p. 9857.

Am detectat că vă aflați într-o altă țară sau că utilizați o altă limbă de browser decât cea selectată în prezent. Doriți să acceptați setările sugerate?

Închidere