Celulele DLD-1: Aplicații și perspective privind celulele DLD-1 în cercetarea cancerului colorectal
DLD-1 este o linie celulară de carcinom colorectal uman utilizată frecvent în cercetarea cancerului. Este un instrument valoros pentru investigarea diverselor aspecte ale cancerului de colon, inclusiv dezvoltarea tumorii, progresia, mecanismele moleculare subiacente și răspunsul la agenții terapeutici. Astfel, DLD-1 joacă un rol esențial în înțelegerea bolii și dezvoltarea potențialelor strategii de tratament.
- Mediu de creștere
- Pentru cultivarea celulelor DLD-1 se utilizează RPMI 1640 cu suplimente de mediu, inclusiv 10% ser fetal bovin (FBS), 2,1 mM glutamină stabilă și 2,0 g/L NaHCO3. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.
- Timp de dublare
- Timpul de dublare al DLD-1 este de aproximativ 15 ore.
- Tipul de creștere
- DLD-1 este o linie celulară aderentă de cancer de colon uman. Celulele cresc în monostraturi.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-1
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați DLD-1
- Caracteristici generale și originea celulelor DLD-1
- Informații privind cultivarea liniei celulare DLD-1
- Linia celulară DLD-1: Avantaje și limitări
- Aplicații de cercetare ale liniei celulare DLD-1
- 5. Publicații de cercetare privind celulele DLD-1
- Resurse pentru linia celulară DLD-1: protocoale, videoclipuri și altele
- Întrebări frecvente
Caracteristici generale și originea celulelor DLD-1
Înainte de a lucra cu o linie celulară, primul aspect pe care îl ia în considerare un cercetător este originea și caracteristicile generale ale acesteia. Această secțiune a articolului reprezintă o introducere detaliată în linia celulară DLD-1. Ea va răspunde la următoarele întrebări frecvente: Ce sunt celulele DLD-1? Ce este o linie celulară canceroasă DLD-1? Care sunt mutațiile liniei celulare DLD-1? Care este dimensiunea unei celule DLD-1? Care este morfologia celulelor DLD-1?
- DLD-1, o linie celulară de cancer de colon, provine din intestinul gros al unui pacient de sex masculin în vârstă de 67 de ani, cu adenocarcinom colorectal. A fost izolată de D.L. Dexter și colegii săi în perioada 1977-1979. Această linie celulară are aceeași origine cu liniile celulare HCT-8, HCT-15 și HRT-18.
- La fel ca în cazul cancerelor colorectale, celulele DLD-1 prezintă un fenotip de instabilitate a microsateliților [1].
- Mutațiile DLD-1 includ KRAS, P53, BRAF, BRCA1 și BRCA2. Datorită statutului P53 al DLD-1, mutațiilor DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 și DLD-1 KRAS, aceste celule sunt considerate ideale pentru studiile asupra cancerului.
- Aceste celule prezintă o morfologie de tip epitelial.
- Dimensiunea liniei celulare DLD-1 este de aproximativ 15 µm.
- Linia celulară de cancer colorectal uman DLD-1 are un cariotip pseudodiploid. Aproximativ 86% dintre celule au un număr modal de cromozomi de 46. Cu toate acestea, poliploidia poate exista și la 17,1% din populația celulară.
Informații privind cultivarea liniei celulare DLD-1
Înainte de a cultiva orice linie celulară, trebuie să cunoașteți cerințele de bază ale culturii celulare. Această secțiune va evidenția punctele importante pe care trebuie să le cunoașteți înainte de a începe lucrul cu linia celulară DLD-1. Acestea includ: Care este timpul de dublare al DLD-1? Ce este mediul de cultură DLD-1? Care este densitatea de însămânțare a celulelor DLD-1? Cum se cultivă celulele DLD-1?
Puncte cheie pentru cultivarea celulelor DLD-1
Timpul de dublare:
Timpul de dublare al DLD-1 este de aproximativ 15 ore.
Aderentă sau în suspensie:
DLD-1 este o linie celulară aderentă de cancer de colon uman. Celulele cresc în monostraturi.
Densitatea de însămânțare:
Celulele DLD-1 sunt însămânțate la o densitate de 1 până la 2 x 104 celule/cm2. Celulele aderente sunt spălate cu soluție salină tamponată cu fosfat (PBS) 1x și incubate cu soluție de pasare (Accutase) la temperatura camerei. După o incubare de 8 până la 10 minute, celulele desprinse sunt adăugate în mediul de cultură și centrifugate. Peleta celulară este apoi resuspendată cu grijă, iar celulele sunt turnate în recipiente de cultură noi care conțin mediu de creștere.
Mediu de creștere:
Pentru cultivarea celulelor DLD-1 se utilizează RPMI 1640 cu suplimente de mediu, inclusiv 10% ser fetal bovin (FBS), 2,1 mM glutamină stabilă și 2,0 g/L NaHCO3. Mediile trebuie înlocuite de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:
Culturile DLD-1 sunt menținute într-un incubator umidificat la 37 °C, cu o alimentare cu 5% CO2.
Depozitare:
Celulele DLD-1 sunt depozitate în faza de vapori a azotului lichid sau într-un congelator electric cu temperatură ultra-scăzută (la o temperatură sub -150 °C).
Procesul de congelare și mediul:
Pentru congelarea celulelor DLD-1 se pot utiliza mediile de congelare CM-1 sau CM-ACF. Se recomandă întotdeauna un proces de congelare lentă, care permite o scădere treptată a temperaturii cu 1 °C, prevenind astfel șocul celular și protejând viabilitatea celulelor.
Procesul de decongelare:
Celulele congelate sunt decongelate într-o baie de apă presetată la temperatura de 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde, până când rămâne doar un mic bulgăre de gheață. Apoi, celulele sunt adăugate într-un mediu proaspăt și centrifugate. Acest pas este necesar pentru a îndepărta componentele mediului de congelare din celule. Celulele colectate sunt resuspendate într-un mediu de creștere și distribuite în flacon pentru creștere.
Nivel de biosecuritate:
Linia celulară DLD-1 este menținută în laboratoare de nivel de biosecuritate 1.
Linia celulară DLD-1: Avantaje și limitări
În această secțiune a articolului, vom analiza avantajele și limitările liniei celulare DLD-1 de cancer de colon.
Avantaje
Principalele avantaje ale liniei celulare DLD-1 sunt:
Model de cancer colorectal
Celulele DLD-1 prezintă mutații frecvent întâlnite la pacienții cu cancer colorectal, precum mutația DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA și DLD-1 BRCA2. Această relevanță le face un model celular adecvat din punct de vedere clinic pentru studierea acestei boli.
Linie celulară tumorigene
Celulele DLD-1 sunt tumorigene. Ele pot provoca tumori atunci când sunt injectate în șoareci nude. Prin urmare, cercetătorii utilizează aceste celule pentru a dezvolta modele tumorale de xenogrefă care ajută la investigarea formării, dezvoltării și progresiei tumorale in vivo.
Limitări
Limitările asociate cu celulele DLD-1 sunt:
Heterogenitate
Populațiile de celule canceroase de colon DLD-1 prezintă heterogenitate genetică și fenotipică. Acest lucru poate influența generalizabilitatea rezultatelor cercetării.
Aplicații de cercetare ale liniei celulare DLD-1
Linia celulară DLD-1 oferă o gamă largă de aplicații în cercetarea cancerului. În această secțiune sunt discutate câteva aplicații importante.
- Studiul cancerului: Celulele DLD-1 servesc ca un model in vitro valoros pentru înțelegerea mecanismelor moleculare care stau la baza creșterii, dezvoltării și progresiei cancerului colorectal. Mai mult, acestea sunt utilizate pentru studierea expresiei genelor, a căilor de semnalizare și a influenței mutațiilor genetice specifice asupra comportamentului celulelor canceroase. Cercetările efectuate în 2022 au observat că cascada de semnalizare PI3K/Akt/YAP reglează migrația și invazia liniei celulare de cancer colorectal DLD-1 [2].
- Dezvoltarea medicamentelor: Cercetătorii utilizează linia celulară DLD-1 pentru a testa eficacitatea medicamentelor anticanceroase și pentru a evalua potențialul acestora în tratamentul cancerului de colon. Acest lucru contribuie la dezvoltarea medicamentelor și la combaterea eficientă a bolii. Un studiu realizat în 2022 a utilizat linia celulară canceroasă DLD-1 și a explorat activitatea anticancerigenă a ftalocianinelor de siliciu, compuși sintetizați chimic. Rezultatele studiului au sugerat că acești compuși sunt agenți anticancerigeni puternici [3]. Interesant este faptul că o altă cercetare a descoperit potențialul anticancerigen al unei proteine P8 derivate din probiotice, utilizând celule DLD-1 [4].
5. Publicații științifice privind celulele DLD-1
Această secțiune va evidenția câteva publicații interesante și frecvent citate care prezintă linia celulară de carcinom de colon DLD-1.
Această publicație apare în Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). Studiul a constatat că diosmina, un flavonoid, a indus moartea celulară în celulele DLD-1 și a provocat, de asemenea, oprirea ciclului celular; astfel, poate fi un potențial agent anticancerigen.
Bromelaina suprimă eficient cancerul colorectal cu mutație Kras prin stimularea ferroptosis
Acest studiu publicat în Animal Cells and Systems (2018) a sugerat că bromelaina, o enzimă, reprimă mutația DLD-1 KRAS și exercită efecte citotoxice puternice.
Acest articol de cercetare a fost publicat în 2019 în revista „Environmental Toxicology”. Studiul a explorat efectele antitumorale ale unui compus natural, bergaptenul, utilizând o linie celulară colorectală DLD-1.
Acest studiu publicat în Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) a constatat că nanocompozitele de curcumină/oxid de fier sunt extrem de eficiente împotriva celulelor canceroase colorectale DLD-1.
Acest articol de cercetare a fost publicat în 2020 în Turkish Journal of Biology. Studiul a propus că un produs natural, activarea AKT mediată de epibrassinolidă în celulele DLD-1, stimulează autofagia legată de poliamine.
Resurse pentru linia celulară DLD-1: protocoale, videoclipuri și multe altele
Iată câteva resurse despre celulele DLD-1:
- Transfecția DLD-1: Acest tutorial video este un ghid cuprinzător despre protocolul de transfecție in vitro DLD-1.
- Celule DLD-1: Acest articol de cercetare descrie pe scurt cerințele de cultură celulară DLD-1, inclusiv mediile și condițiile de cultură. În plus, vă poate ajuta să învățați protocolul de transfecție utilizat pentru celulele DLD-1.
Următoarele linkuri conțin protocolul de cultivare a celulelor DLD-1, celule de cancer de colon de origine umană.
- Linia celulară DLD-1: Acest site web vă va oferi informații de bază despre linia celulară DLD-1. Vă va ajuta să învățați diferite protocoale de cultivare a celulelor DLD-1, inclusiv subcultivarea și manipularea culturilor crioconservate și proliferative.
Referințe
- Gavrilas, L.I., et al., Genele pro-apoptotice ca noi ținte pentru tratamente unice și combinate cu resveratrol și curcumină în cancerul colorectal. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., Semnalizarea PI3K/Akt/YAP promovează migrația și invazia celulelor canceroase colorectale DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Activitatea anticancerigenă a noilor ftalocianine de siliciu împotriva liniei celulare de adenocarcinom colorectal (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
- An, B.C., et al., Rolurile anticanceroase ale proteinei P8 derivate din probiotice în linia celulară de cancer colorectal DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.