Linia celulară BeWo
BeWo este o linie celulară derivată din coriocarcinomul uman, utilizată pe scară largă în cercetarea biomedicală. Aceasta servește ca un model in vitro valoros pentru explorarea procesului complex de dezvoltare placentară și sincitizare a trofoblastelor umane. Cercetătorii utilizează aceste celule și pentru a studia comportamentul celulelor trofoblastice, producția de hormoni și transportul substanțelor prin placentă. În plus, celulele BeWo au aplicații și în studiile de toxicologie, infecții și transmiterea bolilor.
Acest articol cuprinde cunoștințe fundamentale despre celulele BeWo care vă pot ajuta să le utilizați în cercetarea dumneavoastră. Acesta va include:
- Caracteristicile generale și originea celulelor BeWo
- Linia celulară BeWo: Informații privind cultivarea
- Avantajele și dezavantajele liniei celulare BeWo
- Aplicații de cercetare ale celulelor BeWo
- Publicații de cercetare care prezintă celulele BeWo
- Resurse pentru linia celulară BeWo: protocoale, videoclipuri și multe altele
Caracteristici generale și originea celulelor BeWo
Cunoașterea prealabilă a originii și a caracteristicilor generale ale unei linii celulare este esențială pentru utilizarea acesteia în cercetarea dumneavoastră. Această parte a articolului explorează originea liniei celulare BeWo, trăsăturile caracteristice și multe altele. Aici veți afla: Ce este linia celulară de coriocarcinom BeWo? Ce este sincitizarea BeWo? De unde provin celulele BeWo? Care este morfologia celulelor BeWo? Care este ploidia BeWo?
- Linia celulară placentară BeWo a luat naștere din coriocarcinomul gestațional malign al unei placente fetale masculine în 1968 [1]. Astfel, aceasta servește ca un model de neprețuit pentru cercetarea placentară.
- Celulele BeWo prezintă o morfologie de tip epitelial.
- Celulele BeWo sunt relativ mici, având dimensiuni cuprinse între 20 și 30 µm [2].
- Celulele BeWo prezintă un cariotip stabil. Numărul lor de cromozomi este hipo-tetraploid. Numărul modal de cromozomi al celulelor BeWo este 86. Acesta poate varia între 71 și 178.
- Celulele BeWo produc mai mulți hormoni, și anume somatomamotropina corionică umană, gonadotropina corionică umană (hCG) și hormoni steroizi.
- Celulele BeWo exprimă markeri moleculari, inclusiv CK 7, E-caderină și VE-caderină.
Sublinia B30
B30 este sublinia celulelor BeWo. Este utilizată pentru a investiga absorbția și transportul nutrienților. Acest lucru se datorează creșterii lor viguroase pe membrane poroase.
BeWo și JEG-3
Liniile celulare BeWo și JEG-3 sunt derivate din coriocarcinoame și utilizate în cercetarea placentară. Celulele BeWo produc hormoni la niveluri mai scăzute decât JEG-3, cum ar fi gonadotropina corionică umană (hCG) și estradiolul.
2. Linia celulară BeWo: Informații despre cultură
Menținerea unei culturi celulare poate fi complicată dacă nu cunoașteți detaliile cheie. Cum ar fi: Care este timpul de dublare al BeWo? Ce este mediul celular BeWo? Cum se cultivă linia celulară BeWo? și Cum se congelează celulele BeWo?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor BeWo
|
Timpul de dublare: |
Timpul de dublare a populației pentru celulele BeWo este de aproximativ 30 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
BeWo este o linie celulară aderentă. |
|
Densitatea de însămânțare a celulelor: |
Densitatea de însămânțare recomandată pentru celulele BeWo este de 1 x104 celule/cm2. Pentru însămânțare, mediul vechi este îndepărtat de celule, iar celulele sunt clătite cu 1 x PBS. Ulterior, se adaugă Accutase (soluție de transfer), iar celulele sunt incubate timp de 8 până la 10 minute la temperatura ambiantă. Apoi, celulele detașate sunt adăugate cu mediu de cultură și centrifugate. Celulele recoltate sunt apoi resuspendate și turnate într-un nou balon. |
|
Mediu de creștere: |
Mediul Ham's F12K conținând 10% FBS, 2,0 mM L-Glutamină, 2,0 mM piruvat de sodiu și 2,5 g/L NaHCO3 este utilizat pentru cultivarea celulelor BeWo. Mediul celulelor BeWo trebuie înlocuit de 2 până la 3 ori pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Celulele BeWo sunt menținute într-un incubator umidificat la o temperatură de 37 de grade Celsius și cu un aport de 5% CO2. |
|
Depozitare: |
Celulele BeWo congelate se păstrează la temperaturi sub -150°C într-un congelator electric cu temperaturi foarte scăzute sau în faza de vapori a azotului lichid. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
Se recomandă congelarea celulelor BeWo în mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF. Celulele sunt congelate folosind o metodă de congelare lentă. Această metodă permite o scădere a temperaturii de numai 1 grad pe minut, prevenind astfel orice șoc și protejând viabilitatea celulelor. |
|
Procesul de decongelare: |
Celulele congelate se dezgheață prin scufundarea lor într-o baie de apă la 37 °C prestabilită timp de 40-60 de secunde, până când rămâne o mică aglomerare de gheață. Apoi, se adaugă mediu de creștere proaspăt, iar celulele sunt centrifugate pentru a îndepărta componentele mediului de congelare. Peletul celular colectat este resuspendat și distribuit într-un balon de cultură pentru creștere. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Pentru manipularea și întreținerea culturilor de celule BeWo este necesar un laborator de nivel 1 de biosecuritate. |
Publicat: 2023 | Ultima revizuire: mai 2026
- Avantajele și dezavantajele liniei celulare BeWo
- Aplicații de cercetare ale celulelor BeWo
- Linia celulară BeWo: Informații privind cultivarea
- Caracteristici generale și originea celulelor BeWo
- 5. Publicații de cercetare referitoare la celulele BeWo
- Resurse pentru linia celulară BeWo: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Întrebări frecvente
Avantajele și dezavantajele liniei celulare BeWo
Celulele BeWo prezintă caracteristici unice și au avantaje și dezavantaje specifice. În această secțiune, vom explora câteva dintre cele mai importante.
Avantaje
Principalele avantaje ale liniei celulare de coriocarcinom BeWo sunt:
-
Modelul celular placentar in vitro
Celulele BeWo oferă un model in vitro pentru studierea comportamentului celulelor trofoblastice și a sincitizării placentare, reproducând procese dificil de observat in vivo.
-
Producția de hormoni
Celulele BeWo secretă hormoni, precum hCG și lactogenul placentar, ceea ce le face valoroase pentru studiile de reglare hormonală și cercetarea în domeniul biologiei reproductive.
Dezavantaje
Dezavantajele celulelor trofoblastice BeWo sunt:
-
Linie celulară canceroasă
Celulele BeWo au fost derivate din coriocarcinom, care este o tumoare placentară. Această origine poate să nu reprezinte pe deplin funcția normală a celulelor placentare.
Aplicații de cercetare ale celulelor BeWo
Linia celulară BeWo este utilizată pe scară largă în cercetarea placentară. Câteva aplicații specifice ale acestei linii celulare sunt menționate aici:
- Cercetarea placentei și a sarcinii: Celulele BeWo sunt esențiale în cercetarea placentei și a sarcinii. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a studia transportul substanțelor, inclusiv medicamente, nutrienți și toxine, prin bariera placentară. În plus, ei investighează și producția și reglarea hormonilor, inclusiv gonadotropina corionică umană (hCG), lactogenul placentar și hormonii steroizi. Acest lucru este important pentru înțelegerea schimbărilor hormonale din timpul sarcinii. Cercetările efectuate în 2018 au investigat efectul substanțelor ignifuge bromurate (BFR) asupra activității sulfotransferazei în linia celulară trofoblastică umană (BeWo). Această enzimă este implicată în reglarea nivelurilor intracelulare ale hormonului tiroidian [3].
- Cercetarea în domeniul infecțiilor și bolilor: Celulele BeWo sunt utilizate și pentru a examina interacțiunea dintre agenții patogeni și celulele placentare. Această cercetare este valoroasă pentru înțelegerea bolilor care pot fi transmise de la mamă la făt și pentru dezvoltarea de strategii de protejare a sănătății fetale. Mai mult, această linie celulară ajută cercetătorii să investigheze complicațiile care apar în timpul sarcinii, cum ar fi preeclampsia. De exemplu, un studiu realizat de Michalina Bralewska în 2023 a utilizat modelul celular trofoblastic BeWo și a constatat că atât cromogranina A (CgA), cât și peptida derivată din aceasta, catestatina (CST), pot juca un rol în procesul complex al patogenezei preeclampsiei (PE) [4]. În continuare, un alt studiu a explorat potențialul anticancerigen al trichosantinei utilizând linia celulară de coriocarcinom BeWo. Cercetarea a depus, de asemenea, un efort suplimentar pentru a descoperi biomarkeri prin efectuarea unei analize proteomice comparative înainte și după experiment [5].
5. Publicații științifice dedicate celulelor BeWo
Iată câteva publicații științifice importante care prezintă celulele trofoblastice BeWo.
Acest studiu publicat în Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) a propus că semnalizarea AMPK activează mitofagia în celulele trofoblastice BeWo prin intermediul căilor de mitofagie facilitate de FUNDC1 și PRKN. Ca rezultat, mitofagia ajută la menținerea producției de ATP și a potențialului membranei mitocondriale.
Acest articol a fost publicat în Animal Cells and Systems (2020). Studiul a propus că etilparabenul mediază apoptoza celulelor BeWo prin reglarea căii caspazei 3.
Acest studiu, publicat în revista Drug Metabolism and Disposition (2023), a utilizat linii celulare placentare, inclusiv BeWo, JAR, JEG-3 și HTR-8/SVneo, pentru a investiga depunerea de xenobiotice și steroizi în celule.
Acest articol de cercetare publicat în International Journal of Molecular Medicine (2020) a propus că apelinul, ligandul receptorului APJ, promovează proliferarea celulelor BeWo prin semnalizarea APJ și ERK1/2, stat3 și AMPK. Astfel, acesta ar putea fi o adipokină esențială care reglează dezvoltarea placentei.
Acest studiu publicat în Epilepsia (2021) a explorat efectele nutrienților fetali și ale medicamentelor anticonvulsivante asupra transportorilor de colină în linia celulară trofoblastică de origine umană, BeWo.
Resurse pentru linia celulară BeWo: protocoale, videoclipuri și multe altele
Iată câteva resurse online disponibile despre celulele BeWo:
- Transfecție in vitro: Acest videoclip vă va ajuta să învățați protocolul de transfecție in vitro a ADN-ului plasmidic pentru celule aderente.
Următorul link conține informații despre cultura celulară pentru celulele BeWo:
- Celulele BeWo: Acest site web conține informații esențiale despre cultura celulară a liniei celulare BeWo. Acestea includ informații privind mediile celulare și condițiile de cultivare. De asemenea, conține protocoale pentru subcultivare și manipularea culturilor crioconservate și proliferative.
Referințe
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Caracteristicile trofoblastelor în culturi pe termen lung. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt și H.M. Stapleton, Perturbarea activității sulfotransferazei hormonului tiroidian de către substanțele chimice bromurate ignifuge în linia celulară placentară de coriocarcinom uman, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha și A. Sakowicz, Reducerea nivelului proteinei CST derivate din CgA în liniile celulare trofoblastice HTR-8/SVneo și BeWo cauzată de mediul preeclampic. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y. și colab., Analiză proteomică comparativă a adăugării medicamentului trichosantin la linia celulară BeWo. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.