Linia celulară BEWO
BeWo este o linie celulară derivată din coriocarcinom uman utilizată pe scară largă în cercetarea biomedicală. Aceasta servește drept un model in vitro valoros pentru explorarea procesului complex de dezvoltare a placentei și de sincitizare a trofoblastelor umane. De asemenea, cercetătorii utilizează aceste celule pentru a studia comportamentul celulelor trofoblastice, producția de hormoni și transportul substanțelor prin placentă. În plus, celulele BeWo oferă, de asemenea, aplicații în toxicologie, infecții și studii privind transmiterea bolilor.
Acest articol cuprinde cunoștințe fundamentale despre celulele BeWo care vă pot ajuta să le abordați în cercetările dumneavoastră. Acesta va include:
- Caracteristicile generale și originea celulelor BeWo
- Linia celulară BeWo: Informații privind cultivarea
- Avantaje și dezavantaje ale liniei celulare BeWo
- Aplicații de cercetare ale celulelor BeWo
- Publicații de cercetare cu celule BeWo
- Resurse pentru linia celulară BeWo: Protocoale, videoclipuri și multe altele
1. Caracteristicile generale și originea celulelor BeWo
Cunoașterea prealabilă a originii și a caracteristicilor generale ale unei linii celulare este esențială pentru utilizarea acesteia în cercetarea dumneavoastră. Această parte a articolului explorează originea liniei celulare BeWo, caracteristicile ei și multe altele. Aici, veți afla: Ce este linia celulară de coriocarcinom BeWo? Ce este sincițializarea BeWo? De unde provin celulele BeWo? Care este morfologia celulelor BeWo? Care este ploidia celulei BeWo?
- Linia celulară placentară, BeWo, provine din coriocarcinomul malign gestațional al unei placente fetale masculine în 1968 [1]. Astfel, aceasta servește drept un model neprețuit pentru cercetarea placentară.
- Celulele BeWo prezintă o morfologie de tip epitelial.
- Celulele BeWo sunt relativ mici, variind între 20 și 30 µM [2].
- Celulele BeWo prezintă un cariotip stabil. Numărul lor de linii stem este hipo-tetraploid. Numărul modal de cromozomi al celulelor BeWo este 86. Acesta poate varia de la 71 la 178.
- Celulele BeWo produc mai mulți hormoni, și anume somatomamotropină corionică umană, gonadotropină corionică umană (hCG) și hormoni steroizi.
- Celulele BeWo exprimă markeri moleculari, inclusiv CK 7, E-caderină și VE-caderină.
Sublinia B30
B30 este sublinia de celule BeWo. Aceasta este utilizată pentru a investiga absorbția și transportul nutrienților. Acest lucru este atribuit creșterii lor viguroase pe membrane poroase.
BeWo și JEG-3
Liniile celulare BeWo JEG-3 sunt derivate din coriocarcinoame și utilizate în cercetarea placentară. Celulele BeWo produc hormoni la niveluri mai scăzute decât JEG-3, cum ar fi gonadotropina corionică umană (hCG) și estradiolul.
2. Linia celulară BeWo: Informații despre cultură
Menținerea unei culturi celulare poate fi complicată dacă nu cunoașteți detaliile cheie. Cum ar fi: Care este timpul de dublare al BeWo? Ce este mediul celular BeWo? Cum se cultivă linia celulară BeWo? și Cum se congelează celulele BeWo?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor BeWo
|
Timpul de dublare: |
Timpul de dublare a populației pentru celulele BeWo este de aproximativ 30 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
BeWo este o linie celulară aderentă. |
|
Densitatea de însămânțare a celulelor: |
Densitatea de însămânțare recomandată pentru celulele BeWo este de 1 x104 celule/cm2. Pentru însămânțare, mediul vechi este îndepărtat de celule, iar celulele sunt clătite cu 1 x PBS. Ulterior, se adaugă Accutase (soluție de transfer), iar celulele sunt incubate timp de 8 până la 10 minute la temperatura ambiantă. Apoi, celulele detașate sunt adăugate cu mediu de cultură și centrifugate. Celulele recoltate sunt apoi resuspendate și turnate într-un nou balon. |
|
Mediu de creștere: |
Mediul Ham's F12K conținând 10% FBS, 2,0 mM L-Glutamină, 2,0 mM piruvat de sodiu și 2,5 g/L NaHCO3 este utilizat pentru cultivarea celulelor BeWo. Mediul celulelor BeWo trebuie înlocuit de 2 până la 3 ori pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Celulele BeWo sunt menținute într-un incubator umidificat la o temperatură de 37 de grade Celsius și cu un aport de 5% CO2. |
|
Depozitare: |
Celulele BeWo congelate se păstrează la temperaturi sub -150°C într-un congelator electric cu temperaturi foarte scăzute sau în faza de vapori a azotului lichid. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
Se recomandă congelarea celulelor BeWo în mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF. Celulele sunt congelate folosind o metodă de congelare lentă. Această metodă permite o scădere a temperaturii de numai 1 grad pe minut, prevenind astfel orice șoc și protejând viabilitatea celulelor. |
|
Procesul de decongelare: |
Celulele congelate se dezgheață prin scufundarea lor într-o baie de apă la 37 °C prestabilită timp de 40-60 de secunde, până când rămâne o mică aglomerare de gheață. Apoi, se adaugă mediu de creștere proaspăt, iar celulele sunt centrifugate pentru a îndepărta componentele mediului de congelare. Peletul celular colectat este resuspendat și distribuit într-un balon de cultură pentru creștere. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Pentru manipularea și întreținerea culturilor de celule BeWo este necesar un laborator de nivel 1 de biosecuritate. |
3. Avantaje și dezavantaje ale liniei celulare BeWo
Celulele BeWo prezintă caracteristici unice și vin cu avantaje și dezavantaje specifice. În această secțiune, vom explora unele dintre cele notabile.
Avantaje
Principalele avantaje ale liniei celulare de coriocarcinom BeWo sunt:
-
Model de celule placentare in vitro
Celulele BeWo oferă un model in vitro pentru studierea comportamentului celulelor trofoblastice și a sincițializării placentare, replicând procese dificil de observat in vivo.
-
Producția de hormoni
Celulele BeWo secretă hormoni, cum ar fi hCG și lactogen placentar, ceea ce le face valoroase pentru studiile privind reglarea hormonală și cercetarea în domeniul biologiei reproducerii.
Dezavantaje
Dezavantajele celulelor trofoblaste BeWo sunt:
-
Linie celulară canceroasă
Celulele BeWo au fost derivate din coriocarcinom, care este o tumoră placentară. Această origine poate să nu reprezinte pe deplin funcția normală a celulelor placentare.
4. Aplicații de cercetare ale celulelor BeWo
Linia celulară BeWo este utilizată pe scară largă în cercetarea placentară. Câteva aplicații specifice ale acestei linii celulare sunt menționate aici:
- Cercetarea legată de placentă și sarcină: Celulele BeWo sunt esențiale în cercetarea legată de placentă și sarcină. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a studia transportul de substanțe, inclusiv medicamente, nutrienți și toxine, prin bariera placentară. În plus, ei studiază și producția și reglarea hormonilor, inclusiv gonadotropina corionică umană (hCG), lactogenul placentar și hormonii steroizi. Acest lucru este important pentru înțelegerea modificărilor hormonale din timpul sarcinii. Cercetarea efectuată în 2018 a investigat efectul agenților ignifugi bromurați (BFR) asupra activității sulfotransferazei în linia celulară trofoblastică umană (BeWo). Această enzimă este implicată în reglarea nivelurilor intracelulare ale hormonului tiroidian [3].
- Cercetarea infecțiilor și a bolilor: Celulele BeWo sunt, de asemenea, utilizate pentru a examina interacțiunea dintre agenții patogeni și celulele placentare. Această cercetare este valoroasă pentru înțelegerea bolilor care pot fi transmise de la mamă la făt și pentru dezvoltarea de strategii de protecție a sănătății fătului. În plus, această linie celulară ajută cercetătorii să studieze complicațiile care apar în timpul sarcinii, cum ar fi preeclampsia. De exemplu, un studiu efectuat de Michalina Bralewska în 2023 a utilizat modelul celular trofoblast BeWo și a constatat că atât Chromogranina A (CgA), cât și peptida derivată din aceasta, catestatina (CST), pot avea roluri în procesul complex al patogenezei preeclampsiei (PE) [4]. Mergând mai departe, un alt studiu a explorat potențialul anti-cancer al trichosanthinului folosind linia celulară de coriocarcinom BeWo. Cercetarea a făcut, de asemenea, un efort suplimentar pentru a descoperi biomarkeri prin efectuarea unei analize proteomice comparative înainte și după experiment [5].
5. Publicații de cercetare cu celule BeWo
Iată câteva publicații de cercetare semnificative care prezintă celulele trofoblastice BeWo.
Acest studiu din Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) a propus că semnalizarea AMPK activează mitofagia în celulele trofoblastice BeWo prin intermediul căilor mitofagiei facilitate de FUNDC1 și PRKN. Ca urmare, mitofagia ajută la menținerea producției de ATP și a potențialului membranei mitocondriale.
Acest articol a fost publicat în Animal Cells and Systems (2020). Studiul a propus că etilparabenul mediază apoptoza celulelor BeWo prin reglarea căii caspase 3.
Acest studiu din Metabolismul și depozitarea medicamentelor (2023) a utilizat linii celulare placentare, inclusiv BeWo, JAR, JEG-3 și HTR-8/SVneo, pentru a investiga depunerea de xenobiotice și steroizi în celule.
Acest articol de cercetare din International Journal of Molecular Medicine (2020) a propus că Apelin, ligandul receptorului APJ, promovează proliferarea celulelor BeWo prin semnalizarea APJ și ERK1/2, stat3 și AMPK. Astfel, ar putea fi o adipokină esențială care reglează dezvoltarea placentei.
Acest studiu din Epilepsia (2021) a explorat efectele nutrienților fetali și ale anticonvulsivantelor asupra transportatorilor de colină în linia celulară trofoblastică de origine umană, BeWo.
6. Resurse pentru linia celulară BeWo: Protocoale, videoclipuri și multe altele
Iată câteva resurse online disponibile privind celulele BeWo:
- Transfecție in vitro: Acest videoclip vă va ajuta să învățați protocolul de transfecție in vitro a ADN plasmidic pentru celulele aderente.
Următorul link conține informații despre cultura celulară pentru celulele BeWo:
- Celule BeWo: Acest site web conține informații esențiale privind cultura celulară pentru linia celulară BeWo. Acestea includ informații privind mediul celular și condițiile de cultivare. Acesta conține, de asemenea, protocoale pentru subcultură și manipularea culturilor crioprezervate și proliferative.
Referințe
- Weber, M., et al., Citogenomica a șase linii celulare trofoblastice umane. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Caracteristici ale trofoblastelor în culturi pe termen lung. Buletin de biologie experimentală și medicină, 2017. 164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt și H.M. Stapleton, Perturbarea activității sulfotransferazei hormonului tiroidian de către substanțele chimice ignifuge bromurate în linia celulară a placentei coriocarcinomului uman, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha și A. Sakowicz, Reducerea nivelului proteinei CST derivate din CgA în liniile de celule trofoblastice HTR-8/SVneo și BeWo cauzată de mediul preeclamptic. Jurnalul internațional de științe moleculare, 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y., și colab., Analiza proteomică comparativă a adaosului de tricosantină medicamentoasă la linia celulară BeWo. Molecule, 2022. 27(5): p. 1603.