Linia celulară BxPC-3
BxPC-3 este o linie celulară de cancer pancreatic derivată de la om. Aceasta este aplicată pe scară largă în studiile privind cancerul. Cercetătorii utilizează în principal aceste celule pentru a studia biologia cancerului pancreatic, a identifica ținte terapeutice și a dezvolta medicamente împotriva cancerului.
Acest articol cuprinde informații esențiale despre linia celulară BxPC-3 care vă pot ajuta semnificativ să lucrați cu aceasta. În principal, se va discuta despre:
- Informații generale și originea liniei celulare BxPC-3
- Cultivarea celulelor BxPC-3
- Linia celulară BxPC-3: Avantaje și limitări
- Aplicații ale celulelor BxPC-3 în cercetare
- Publicații de cercetare privind celulele BxPC-3
- Resurse pentru linia celulară BxPC-3: Protocoale, videoclipuri și altele
1. informații generale și originea liniei celulare BxPC-3
Cunoașterea originii unei linii celulare este esențială pentru aplicabilitatea acesteia în cercetare. Familiarizarea cu caracteristicile acesteia, inclusiv morfologia, dimensiunea celulelor și ploidia, face ca utilizarea sa să fie mai simplă și mai convenabilă. În continuare, veți afla originea și caracteristicile generale ale celulelor BxPC-3: Ce sunt celulele BxPC-3? Ce este linia celulară BxPC-3? Care este originea liniei de celule BxPC-3? Care este morfologia celulelor BxPC-3?
- BxPC-3, celulele carcinomului pancreatic uman, au fost derivate de la o femeie europeană în vârstă de 61 de ani cu adenocarcinom pancreatic în 1986. Aceste celule au fost confirmate tumorigene chiar și după ce pacienta a fost supusă mai multor ședințe de radio și chimioterapie. Astfel, linia celulară stabilită este un model neprețuit pentru studierea dezvoltării și progresiei cancerului.
- Celulele BxPC-3 au o morfologie asemănătoare celulelor epiteliale.
- Numărul cromozomial modal pentru BxPC-3 este 59. Aceste celule au o deleție homozigotă la nivelul cromozomului 18q, care codifică pentru proteina SMAD4/DPC4. În plus, liniei celulare îi lipsește mutația BxPC-3 kras, comună în rândul tumorilor pancreatice. Deleția BxPC-3 braf se găsește, de asemenea, în aceste celule canceroase pancreatice.
Care este diferența dintre BxPC3 și PANC-1?
Celulele BxPC-3 PADC (adenocarcinom ductal pancreatic) și PANC-1 sunt linii celulare de cancer pancreatic primar cu o morfologie epitelială. Aici, primele celule posedă mai multe proprietăți de tip epitelial, în timp ce celulele ulterioare prezintă mai multe atribute mezenchimale [1].
2. cultivarea celulelor BxPC-3
Linia celulară BxPC-3 este utilizată pe scară largă în laboratoarele de cercetare a cancerului. Trebuie să cunoașteți următoarele puncte-cheie pentru cultivarea eficientă a acestei linii celulare de cancer pancreatic. Veți afla: Care este timpul de dublare pentru BxPC3? Cum se cultivă linia celulară BxPC-3?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor BxPC-3
|
Timpul de dublare a populației: |
Timpul de dublare a celulelor BxPC-3 variază între 48 și 60 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
BxPC-3 este o linie celulară aderentă. |
|
Raport de divizare: |
Celulele BxPC-3 sunt subcultivate la un raport de 1:2 până la 1:4. Celulele sunt spălate cu 1 x PBS și incubate cu o soluție de trecere numită accutase. După 8-10 minute, se adaugă mediu proaspăt celulelor, iar celulele sunt centrifugate. Peletul este din nou resuspendat în mediu, iar celulele sunt turnate într-un nou vas de cultură pentru creștere. |
|
Mediu de creștere: |
Mediul RPMI 1640 este utilizat pentru cultivarea liniei celulare BxPC-3. Acesta este suplimentat cu 10% ser fetal bovin, 2,1 mM glutamină stabilă și 2,0 g/L NaHCO3 pentru a obține o creștere celulară ideală. Mediul trebuie înlocuit de 2 până la 3 ori pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Culturile de celule BxPC-3 sunt menținute într-un incubator umidificat la 37 °C conectat la o sursă de 5% CO2. |
|
Depozitare: |
Celulele congelate sunt, în general, depozitate la temperaturi sub -150 °C sau în faza de vapori a azotului lichid pentru a proteja viabilitatea celulelor. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
CM-1 sau CM-ACF pot fi utilizate pentru a congela culturile de celule BxPC-3. Se urmează un proces lent de congelare care permite o scădere a temperaturii de numai 1 °C pentru a preveni orice șoc al celulelor. |
|
Procesul de decongelare: |
Celulele BxPC-3 congelate se dezgheață într-o baie de apă pre-setată la 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde. După ce rămâne o mică aglomerare de gheață, celulele se adaugă cu mediu de cultură proaspăt și se centrifughează pentru a elimina elementele de mediu congelate. Apoi, peletul celular este resuspendat, iar celulele sunt distribuite în balon pentru creștere. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Culturile de celule BxPC-3 sunt menținute în laboratoare de nivel 1 de biosecuritate. |
3. linia celulară BxPC-3: Avantaje și limitări
BxPC-3 este o linie celulară cunoscută de adenocarcinom pancreatic asociată cu mai multe avantaje și limitări. Principalele avantaje și dezavantaje ale liniei celulare sunt enumerate aici.
Avantaje
Principalele avantaje ale celulelor BxPC-3 sunt:
-
Model in vitro de cancer pancreatic
Celulele BxPC-3, derivate de la pacienții cu adenocarcinom pancreatic, prezintă caracteristici relevante, ceea ce le face un model adecvat pentru studierea comportamentului cancerului pancreatic in vitro.
-
Linie celulară tumorigenă
Celulele BxPC-3 posedă proprietăți tumorigene și pot forma tumori atunci când sunt injectate în șoareci nude sau imunocompromiși. Aceste tumori seamănă foarte mult cu tumorile de adenocarcinom pancreatic primar, ceea ce face ca modelul xenograft BxPC-3 să fie ideal pentru studiul creșterii și progresiei cancerului.
Limitări
Limitările asociate cu linia celulară BxPC-3 sunt:
-
Contaminare încrucișată
Linia celulară BxPC-3, ca oricare alta, prezintă un risc de contaminare încrucișată. Cercetătorii trebuie să dea dovadă de prudență și să respecte protocoale stricte de prevenire a contaminării atunci când manipulează aceste celule.
-
Rata de creștere lentă
Celulele BxPC-3 prezintă o rată de proliferare relativ lentă, cu un timp de dublare cuprins între 48 și 60 de ore. Această caracteristică poate necesita perioade de incubare mai lungi pentru anumite experimente, ceea ce poate cauza întârzieri în progresul cercetării.
4. aplicații ale celulelor BxPC-3 în cercetare
Celulele BxPC-3 oferă numeroase aplicații în cercetarea cancerului. Cele mai frecvente aplicații sunt:
- Cercetarea cancerului pancreatic: Celulele BxPC-3 imită adenocarcinomul pancreatic și sunt astfel utilizate pentru a explora mecanismele genetice și moleculare care stau la baza dezvoltării și creșterii tumorilor. În plus, cercetătorii descoperă noi biomarkeri și ținte terapeutice folosind aceste celule. În plus, celulele BxPC-3 exprimă în mod semnificativ factori angiogenici, și anume interleukina-8 (IL-8), prostaglandina E2 (PGE2) și factorul de creștere endotelială vasculară (VEGF), ceea ce le face potrivite pentru studiul angiogenezei. În acest sens, angiogeneza este un proces crucial asociat cu creșterea și metastazarea cancerului. Un studiu publicat în 2022 a studiat că supraexpresia lamininei-5 gamma-2 (LAMC2) în PDAC BxPC3 (adenocarcinom ductal pancreatic) sporește tumorigeneza acestuia prin reglarea căii de semnalizare EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR BxPC3 [2].
- Descoperirea și dezvoltarea medicamentelor: Linia celulară BxPC-3 servește drept un model neprețuit de testare a medicamentelor anticancer. Cercetătorii examinează efectele citotoxice, antimetastatice și apoptotice ale potențialelor medicamente asupra PDAC BxPC3. Un studiu efectuat de Alexandria Turner și colegii săi în 2020 a explorat proprietățile apoptotice ale extractelor de fructe Elaeocarpus reticulatus în celulele cancerului pancreatic BxPC-3 [3]. În mod similar, în 2020 a fost efectuată o cercetare care a determinat potențialul anticancerigen al unui extract metanolic al unei plante numite Oxialis obtriangulata în celulele BxPC-3. În plus, cercetătorii au studiat și calea mecanică celulară prin care extractul de plantă exercita efectele terapeutice [4].
5.publicații de cercetare privind celulele BxPC-3
Această secțiune enumeră unele dintre cele mai citate și interesante publicații care prezintă linia celulară BxPC-3.
Licocumarona induce moartea celulelor adenocarcinomului pancreatic BxPC-3 prin inhibarea DYRK1A
Această publicație din Chemico-Biological Interactions (2020) a explorat efectele apoptotice ale unui produs natural, licocumarona, asupra celulelor BxPC-3 de cancer pancreatic.
Acest articol de cercetare a fost publicat în Anticancer Research (2022). Studiul a propus că hidroxiclorochina provoacă moartea celulelor BxPC3 prin inhibarea genei BCL-XL.
Această cercetare a fost publicată în 2020 în Journal of Cellular Biochemistry. Studiul afirmă că un compus natural, salidrosida, prezintă activități anticancerigene în celulele BxPC-3 prin reglarea cascadei de semnalizare HIF-1α (factor inductibil în hipoxie) și LOXL2.
Acest articol din Biomedicine & Pharmacotherapy sugerează că ibrutinib poate fi utilizat ca un mare radiosensibilizator la pacienții cu cancer pancreatic. In vitro, studiul în celulele BxPC-3 indică faptul că acesta scade fosforilarea EGFR BxPC3 și expresia pAKT și a genelor din aval suprareglementate de radioterapie.
Chelidonina induce apoptoza prin reglarea GADD45a-p53 în celulele cancerului pancreatic uman
Acest studiu din Integrative Cancer Therapies a propus că un produs natural, chelidonina, exercită activitate apoptotică în celulele pancreatice umane BxPC-3 prin reglarea semnalizării BxPC3 p53 și GADD45a.
6. resurse pentru linia celulară BxPC-3: Protocoale, videoclipuri și multe altele
Linia celulară BxPC-3 are multe avantaje captivante care o fac potrivită pentru utilizarea în cercetare. Multe resurse online privind linia celulară BxPC-3 menționează manipularea, întreținerea și protocolul de transfecțies.
- Transfecția BxPC3: Acest videoclip este un ghid pas cu pas pentru învățarea protocolului de transfecție pentru celulele BxPC-3.
Această secțiune a articolului cuprinde câteva linkuri care explică protocoalele de cultură a celulelor BxPC3.
- Cultura celulelor BxPC3: Acest site vă va ajuta să învățați protocoale pentru subcultură și manipularea culturilor BxPC-3 crioprezervate și proliferative.
Referințe
- Kim, Y., și colab., Profilul proteomic comparativ al liniilor celulare de adenocarcinom ductal pancreatic. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., și colab., Supraexprimarea lamininei-5 gamma-2 promovează tumorigeneza adenocarcinomului ductal pancreatic prin cascada EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Științele vieții celulare și moleculare, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A. și colab., Extractele de fructe Elaeocarpus reticulatus reduc viabilitatea și induc apoptoza în celulele cancerului pancreatic in vitro. Rapoarte de biologie moleculară, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J. și colab., Potențialul anticancerigen al Oxialis obtriangulata în celulele de cancer pancreatic prin reglarea căii mediate de ERK/Src/STAT3. Molecule, 2020. 25(10): p. 2301.