Linia celulară BxPC-3
BxPC-3 este o linie celulară de cancer pancreatic de origine umană. Aceasta este utilizată pe scară largă în studiile privind cancerul. Cercetătorii folosesc aceste celule în principal pentru a studia biologia cancerului pancreatic, pentru a identifica ținte terapeutice și pentru a dezvolta medicamente împotriva cancerului.
- Mediu de creștere
- Pentru cultivarea liniei celulare BxPC-3 se utilizează mediul RPMI 1640. Acesta este suplimentat cu 10% ser fetal bovin, 2,1 mM glutamină stabilă și 2,0 g/L NaHCO3 pentru a obține o creștere celulară ideală. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.
- Timp de dublare
- Timpul de dublare al celulelor BxPC-3 variază între 48 și 60 de ore.
- Tipul de creștere
- BxPC-3 este o linie celulară aderentă.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-3
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați BxPC-3
Acest articol cuprinde informații esențiale despre linia celulară BxPC-3, care vă pot ajuta semnificativ în lucrul cu aceasta. În principal, se vor discuta:
- Informații generale și originea liniei celulare BxPC-3
- Cultivarea celulelor BxPC-3
- Linia celulară BxPC-3: Avantaje și limitări
- Aplicațiile celulelor BxPC-3 în cercetare
- Publicații de cercetare privind celulele BxPC-3
- Resurse pentru linia celulară BxPC-3: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Informații generale și originea liniei celulare BxPC-3
- Cultivarea celulelor BxPC-3
- Linia celulară BxPC-3: avantaje și limitări
- Aplicații ale celulelor BxPC-3 în cercetare
- 5. Publicații de cercetare privind celulele BxPC-3
- Resurse pentru linia celulară BxPC-3: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Întrebări frecvente
Informații generale și originea liniei celulare BxPC-3
Cunoașterea originii unei linii celulare este esențială pentru aplicabilitatea sa în cercetare. Familiarizarea cu caracteristicile sale, inclusiv morfologia, dimensiunea celulelor și ploidia, face utilizarea sa mai simplă și mai convenabilă. În acest articol, veți afla originea și caracteristicile generale ale celulelor BxPC-3: Ce sunt celulele BxPC-3? Ce este linia celulară BxPC-3? Care este originea liniei celulare BxPC-3? Care este morfologia BxPC-3?
- BxPC-3, celule de carcinom pancreatic uman, au fost obținute de la o femeie europeană în vârstă de 61 de ani cu adenocarcinom pancreatic în 1986. Aceste celule s-au dovedit a fi tumorigene chiar și după ce pacienta a fost supusă mai multor sesiuni de radioterapie și chimioterapie. Astfel, linia celulară stabilită este un model de neprețuit pentru studierea dezvoltării și progresiei cancerului.
- Celulele BxPC-3 au o morfologie asemănătoare celulelor epiteliale.
- Numărul modal de cromozomi pentru BxPC-3 este 59. Aceste celule prezintă o deleție homozigotă la cromozomul 18q, care codifică proteina SMAD4/DPC4. În plus, linia celulară nu prezintă mutația BxPC-3 kras, frecventă în cazul tumorilor pancreatice. Deleția BxPC-3 braf se regăsește, de asemenea, în aceste celule canceroase pancreatice.
Care este diferența dintre BxPC3 și PANC-1?
Celulele BxPC-3 PADC (adenocarcinom ductal pancreatic) și PANC-1 sunt linii celulare primare de cancer pancreatic cu morfologie epitelială. În acest context, primele celule posedă mai multe proprietăți de tip epitelial, în timp ce cele din urmă prezintă mai multe atribute mezenchimale [1].
Cultivarea celulelor BxPC-3
Linia celulară BxPC-3 este utilizată pe scară largă în laboratoarele de cercetare a cancerului. Trebuie să cunoașteți următoarele puncte cheie pentru cultivarea eficientă a acestei linii celulare de cancer pancreatic. Veți afla: Care este timpul de dublare pentru BxPC-3? Cum se cultivă linia celulară BxPC-3?
Puncte cheie pentru cultivarea celulelor BxPC-3
Timpul de dublare a populației:
Timpul de dublare al celulelor BxPC-3 variază între 48 și 60 de ore.
Aderentă sau în suspensie:
BxPC-3 este o linie celulară aderentă.
Raport de divizare:
Celulele BxPC-3 sunt subcultivate la un raport de 1:2 până la 1:4. Celulele sunt spălate cu 1 x PBS și incubate cu o soluție de pasare numită accutase. După 8-10 minute, se adaugă mediu proaspăt la celule, iar celulele sunt centrifugate. Sedimentul este resuspendat din nou în mediu, iar celulele sunt turnate într-un nou vas de cultură pentru creștere.
Mediu de creștere:
Mediul RPMI 1640 este utilizat pentru cultivarea liniei celulare BxPC-3. Acesta este suplimentat cu 10% ser fetal bovin, 2,1 mM glutamină stabilă și 2,0 g/L NaHCO3 pentru a obține o creștere celulară ideală. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:
Culturile celulare BxPC-3 sunt menținute într-un incubator umidificat la 37 °C, conectat la o sursă de CO2 de 5%.
Depozitare:
Celulele congelate sunt, în general, depozitate la o temperatură sub -150 °C sau în faza de vapori a azotului lichid pentru a proteja viabilitatea celulelor.
Procesul de congelare și mediul:
CM-1 sau CM-ACF pot fi utilizate pentru congelarea culturilor celulare BxPC-3. Se urmează un proces de congelare lentă, care permite o scădere a temperaturii de numai 1 °C, pentru a preveni șocul celular.
Procesul de decongelare:
Celulele BxPC-3 congelate sunt decongelate într-o baie de apă preîncălzită la 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde. După ce rămâne o mică bucată de gheață, celulele sunt adăugate cu medii de cultură proaspete și centrifugate pentru a îndepărta elementele mediului de congelare. Apoi, peleta celulară este resuspendată, iar celulele sunt distribuite în balon pentru creștere.
Nivel de biosecuritate:
Culturile celulare BxPC-3 sunt menținute în laboratoare de nivel 1 de biosecuritate.
Linia celulară BxPC-3: Avantaje și limitări
BxPC-3 este o linie celulară binecunoscută de adenocarcinom pancreatic, asociată cu o serie de avantaje și limitări. Principalele avantaje și dezavantaje ale liniei celulare sunt enumerate aici.
Avantaje
Principalele avantaje ale celulelor BxPC-3 sunt:
-
Model in vitro al cancerului pancreatic
Celulele BxPC-3, derivate de la pacienți cu adenocarcinom pancreatic, prezintă caracteristici relevante, ceea ce le face un model adecvat pentru studierea comportamentului cancerului pancreatic in vitro.
-
Linie celulară tumorigene
Celulele BxPC-3 posedă proprietăți tumorigene și pot forma tumori atunci când sunt injectate în șoareci nude sau imunocompromiși. Aceste tumori seamănă foarte mult cu tumorile primare de adenocarcinom pancreatic, ceea ce face ca modelul de xenogrefă BxPC-3 să fie ideal pentru studierea creșterii și progresiei cancerului.
Limitări
Limitările asociate liniei celulare BxPC-3 sunt:
-
Contaminare încrucișată
Linia celulară BxPC-3, ca oricare alta, prezintă un risc de contaminare încrucișată. Cercetătorii trebuie să fie precauți și să respecte protocoale stricte de prevenire a contaminării atunci când manipulează aceste celule.
-
Rată de creștere lentă
Celulele BxPC-3 prezintă o rată de proliferare relativ lentă, cu un timp de dublare cuprins între 48 și 60 de ore. Această caracteristică poate necesita perioade de incubare mai lungi pentru anumite experimente, ceea ce poate cauza întârzieri în progresul cercetării.
Aplicații ale celulelor BxPC-3 în cercetare
Celulele BxPC-3 oferă numeroase aplicații în cercetarea cancerului. Cele mai comune aplicații sunt:
- Cercetarea cancerului pancreatic: celulele BxPC-3 imită adenocarcinomul pancreatic și, prin urmare, sunt utilizate pentru a explora mecanismele genetice și moleculare care stau la baza dezvoltării și creșterii tumorii. În plus, cercetătorii descoperă noi biomarkeri și ținte terapeutice folosind aceste celule. Mai mult, celulele BxPC-3 exprimă în mod semnificativ factori angiogenici, și anume interleukina-8 (IL-8), prostaglandina E2 (PGE2) și factorul de creștere endotelial vascular (VEGF), ceea ce le face potrivite pentru studierea angiogenezei. În acest context, angiogeneza este un proces crucial asociat cu creșterea cancerului și metastazarea. Un studiu publicat în 2022 a arătat că supraexpresia lamininei-5 gamma-2 (LAMC2) în BxPC3 PDAC (adenocarcinom ductal pancreatic) îmbunătățește tumorigeneza prin reglarea căii de semnalizare BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR [2].
- Descoperirea și dezvoltarea medicamentelor: linia celulară BxPC-3 servește ca un model de testare a medicamentelor anticanceroase de neprețuit. Cercetătorii examinează efectele citotoxice, antimetastatice și apoptotice ale medicamentelor potențiale asupra BxPC3 PDAC. Un studiu realizat de Alexandria Turner și colegii săi în 2020 a explorat proprietățile apoptotice ale extractelor din fructele de Elaeocarpus reticulatus în celulele canceroase pancreatice BxPC-3 [3]. În mod similar, în 2020 s-a desfășurat o cercetare care a determinat potențialul anticancerigen al unui extract metanolic dintr-o plantă numită Oxialis obtriangulata în celulele BxPC-3. În plus, cercetătorii au studiat și calea mecanică celulară prin care extractul din plantă exercita efecte terapeutice [4].
5. Publicații științifice privind celulele BxPC-3
Această secțiune prezintă câteva dintre cele mai citate și interesante publicații care au ca subiect linia celulară BxPC-3.
Licocumarona induce moartea celulelor adenocarcinomului pancreatic BxPC-3 prin inhibarea DYRK1A
Această publicație din Chemico-Biological Interactions (2020) a explorat efectele apoptotice ale unui produs natural, licocumarona, asupra celulelor canceroase pancreatice BxPC-3.
Acest articol de cercetare a fost publicat în Anticancer Research (2022). Studiul a sugerat că hidroxiclorochina provoacă moartea celulelor BxPC3 prin inhibarea genei BCL-XL.
Această cercetare a fost publicată în 2020 în Journal of Cellular Biochemistry. Studiul afirmă că un compus natural, salidrosida, prezintă activități anticanceroase în celulele BxPC-3 prin reglarea HIF-1α (factorul inducibil de hipoxie) și a cascadei de semnalizare LOXL2.
Acest articol din Biomedicine & Pharmacotherapy sugerează că ibrutinibul poate fi utilizat ca un excelent radiosensibilizator la pacienții cu cancer pancreatic. In vitro, studiul efectuat pe celule BxPC-3 indică faptul că acesta reduce fosforilarea EGFR în BxPC3 și expresia pAKT și a genelor din aval, reglate în sens ascendent de radioterapie.
Chelidonina induce apoptoza prin reglarea GADD45a-p53 în celulele canceroase pancreatice umane
Acest studiu publicat în Integrative Cancer Therapies a propus că un produs natural, chelidonina, exercită activitate apoptotică în celulele pancreatice umane BxPC-3 prin reglarea semnalizării BxPC3 p53 și GADD45a.
Resurse pentru linia celulară BxPC-3: protocoale, videoclipuri și multe altele
Linia celulară BxPC-3 are multe avantaje captivante care o fac potrivită pentru utilizarea în cercetare. Multe resurse online despre linia celulară BxPC-3 menționează protocoalele sale de manipulare, întreținere și transfecție.
- Transfecția BxPC3: Acest videoclip este un ghid pas cu pas pentru învățarea protocolului de transfecție pentru celulele BxPC-3.
Această secțiune a articolului cuprinde câteva linkuri care explică protocoalele de cultură celulară BxPC3.
- Cultura celulară BxPC3: Acest site web vă va ajuta să învățați protocoalele pentru subcultivarea și manipularea culturilor BxPC-3 crioconservate și proliferative.
Referințe
- Kim, Y., et al., Profil proteomic comparativ al liniilor celulare de adenocarcinom ductal pancreatic. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Supraexpresia lamininei-5 gamma-2 favorizează tumorigeneza adenocarcinomului ductal pancreatic prin cascada EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Extractele din fructele Elaeocarpus reticulatus reduc viabilitatea și induc apoptoza în celulele canceroase pancreatice in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Potențialul anticancerigen al Oxialis obtriangulata în celulele canceroase pancreatice prin reglarea căii mediate de ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.