Celule B16 - Ghid fundamental pentru celulele de melanom B16 în cercetarea oncologică

B16 este linia celulară de cancer de piele (melanom) de origine murină. Această linie celulară este un model in vitro eficient pentru studierea cancerelor cutanate umane. Este frecvent utilizată pentru a studia formarea tumorilor solide și metastazarea celulelor canceroase.

Acest articol vă va ajuta să înțelegeți elementele de bază ale liniei celulare de melanom B16. În mod specific, acesta va trece în revistă următoarele:

1.caracteristicile generale și originea liniei celulare B16

Această secțiune a articolului va acoperi trăsăturile caracteristice ale liniei celulare de melanom B16. Veți afla răspunsurile la următoarele întrebări frecvente. Cum ar fi Ce este linia celulară de cancer B16? De unde sunt derivate celulele B16? Care este dimensiunea celulelor B16?

Linia celulară B16 a fost stabilită în 1954. Aceste celule au fost derivate de la șoareci C57BL/6J care au dezvoltat spontan o tumoare la nivelul pielii la Laboratoarele Jackson din Maine.
Acestea sunt celule epiteliale producătoare de melanină care au capacitatea de a metastaza în splină, ficat și plămâni.
Celulele melanomului B16 cresc sub formă de monocameră și prezintă o morfologie celulară de tip epitelial și fusiformă.
Dimensiunea liniei celulare B16 este de aproximativ 15,4 μm.
Există subclone distincte de celule B16, inclusiv B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 și B16F10. Aceste sublinii sunt diferite de celulele B16 parentale și păstrează unele caracteristici specifice. De exemplu, ele prezintă diferențe în ceea ce privește morfologia, dimensiunea celulelor și alte proprietăți. B16F10 are o capacitate ridicată de metastazare pulmonară, iar B164A5 este cea mai agresivă linie celulară de cancer de piele comparativ cu B16F10, B16-GMCSF și B16FLT3 [1].

animație 3D a unui prim-plan al unui cancer de piele în creștere, cum ar fi melanomul malign, care inflamează țesutul înconjurător.

2.informații privind cultivarea liniei celulare B16

Înainte de a menține sau cultiva o linie celulară, este posibil să căutați informații cheie despre timpul de dublare, tipul de celule, mediul de creștere, condițiile de cultivare etc. Această secțiune conține toate informațiile necesare pentru cultivarea celulelor B16.

Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor B16

Timpul de dublare a populației:	Timpul mediu de dublare a populației pentru celulele B16 este estimat la 24 de ore.
Aderente sau în suspensie:	Celulele B16 sunt aderente și cresc în straturi monolaterale.
Densitatea de însămânțare:	Se recomandă însămânțarea celulelor B16 la o densitate celulară de 1 până la 2 x¹⁰⁴ ^celule/cm2. Celulele B16 atașate se clătesc cu 1 x PBS și se disociază de la suprafață cu ajutorul soluției Accutase. Celulele sunt centrifugate, iar peletul celular este resuspendat în mediul de creștere. Ulterior, aceste celule sunt distribuite într-un nou balon pentru creștere.
Mediu de creștere:	Celulele B16 sunt cultivate în mediu EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) care conține 10 % ser fetal bovin (FBS). Mediul de creștere trebuie reînnoit de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:	Pentru cultivarea liniei celulare B16 se utilizează un incubator umidificat cu un aport de 5 %_CO2 și o temperatură de 37 °C.
Depozitare:	Aceste celule sunt depozitate la temperaturi sub -150 °C sau în faza de vapori a azotului lichid pentru a proteja viabilitatea celulară.
Procesul de congelare și mediul:	Mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF este utilizat pentru a congela celulele B16 printr-un proces de congelare lentă.
Procesul de decongelare:	Celulele B16 congelate sunt decongelate la 37 °C într-o baie de apă care conține un agent antimicrobian. Celulele decongelate pot fi cultivate direct prin distribuirea lor în flacoane care conțin mediu de creștere. În plus, aceste celule pot fi centrifugate pentru a elimina componentele mediului de congelare și apoi cultivate în medii noi.
Nivelul de biosecuritate:	Linia celulară B16 trebuie manipulată sau menținută în laboratorul cu nivel de biosecuritate unu.

Strat semi-confluent de celule de melanom B16 sub mărire de 10x și 20x.

3. linia celulară B16: Avantaje și dezavantaje

Ca și alte linii celulare, B16 posedă un amestec unic de avantaje și dezavantaje. Unele avantaje și dezavantaje semnificative ale acestei linii celulare de melanom sunt enumerate în această secțiune.

Avantaje

B16 este primul instrument murin eficient utilizat pe scară largă în cercetarea metastazelor datorită avantajelor pe care le oferă. Unele avantaje ale acestei linii celulare de cancer de piele sunt:

Ușor de cultivat	Linia celulară B16 este ușor de cultivat în laboratoarele de cercetare. Este utilizată pe scară largă pentru a studia biologia celulelor canceroase, căile de semnalizare și multe altele.
Creștere rapidă	Linia celulară de melanom B16 prezintă o rată de proliferare ridicată, ceea ce o face potrivită pentru studierea proceselor de diviziune și creștere celulară.
Tumorigenitate	B16 este o linie celulară tumorigenă cu proprietăți asemănătoare tumorilor, cum ar fi invazia, migrația și proliferarea. Este valoroasă pentru studiul formării, progresiei și metastazelor tumorale.

Dezavantaje

Dezavantajele asociate cu linia celulară B16 sunt:

Lipsa de relevanță umană	Datorită faptului că B16 este o linie celulară de melanom de șoarece, este posibil ca aceasta să nu reprezinte cu exactitate biologia cancerului de piele la om, ceea ce limitează capacitatea de transpunere a rezultatelor cercetării.
Heterogenitatea	Celulele B16 sunt eterogene, prezentând proprietăți genetice și fenotipice variate în cadrul aceleiași culturi. Acest lucru poate afecta fiabilitatea și reproductibilitatea rezultatelor.

4. aplicații ale celulelor B16

Linia celulară B16 este utilizată pe scară largă în studiile de cercetare. Câteva aplicații promițătoare ale acestei linii celulare sunt:

Biologia tumorală: Această linie celulară murină de cancer de piele este tumorigenă și utilizată pe scară largă pentru a înțelege biologia tumorală. Au fost efectuate mai multe studii pentru a explora mecanismele celulare care stau la baza creșterii, proliferării și metastazelor celulelor tumorale, utilizând celulele B16. Un studiu de cercetare efectuat în 2020 a utilizat celulele B16 pentru a investiga rolul ARN lung necodificator, LncRNA MEG3, în formarea, creșterea și metastazarea melanomului. Această cercetare a constatat că ARN-ul necodificator modulează axa miARN-21/E-Cadherin pentru a stimula aceste evenimente celulare [2]. La fel, au fost efectuate cercetări pentru a investiga rolul potențial al semnalizării Notch1 în imunosupresia indusă de tumori utilizând celule B16 [3].
Descoperirea medicamentelor: Celulele B16 sunt utilizate pentru validarea și testarea potențialelor efecte terapeutice ale medicamentelor candidate. Un studiu a evaluat efectul antitumoral al acidului neogambogic, un compus natural, utilizând o linie celulară B16. Rezultatele studiului au arătat că acest compus modulează calea de semnalizare PI3K/Akt/mTOR pentru a provoca moartea celulelor canceroase [4]. Un alt studiu a investigat efectul anti-melanom al Ginsenosidei Rg3, o saponină, utilizând linia celulară B16. Cercetarea a propus că acest compus natural a cauzat activitate antitumorală prin reglarea în jos a căilor ERK și Akt [5].

430,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 305154

5.publicații de cercetare cu celule B16

Aici sunt câteva publicații de cercetare semnificative care prezintă linia celulară de melanom B16.

LncRNA MEG3 promovează creșterea, metastazarea și formarea melanomului prin modularea axei miR-21/E-cadherină

Această publicație din revista Cancer Cell International (2020), a propus că ARN-ul lung necodificator MEG3 îmbunătățește formarea, creșterea și metastazarea celulelor de melanom B16 prin modularea axei miRNA-21/E-Cadherin.

Un nou derivat psoralen-MPFC îmbunătățește melanogeneza prin activarea căilor de semnalizare p38 MAPK și PKA în celulele B16

Această lucrare a fost publicată în International Journal of Molecular Medicine în 2018. Acest studiu a investigat efectul melanogen și mecanismele unui derivat psoralen- 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g] cromen-2-one (MPFC) în celulele B16. Studiul a propus că acest derivat promovează melanogeneza prin stimularea semnalizării celulare PKA și p38 MAPK.

Semnalarea Notch1 în celulele melanomului a promovat imunosupresia indusă de tumoră prin creșterea TGF-β1

Această cercetare a fost publicată în 2018 în Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Concluziile studiului sugerează că activarea semnalizării Notch1 în celulele B16 poate preveni imunitatea antitumorală prin creșterea expresiei genei TGF-β1.

Acidul neogambogic induce apoptoza celulelor melanomului B16 prin intermediul căii de semnalizare PI3K/Akt/mTOR

Acest studiu a fost realizat de Chunlan Wu și colegii săi în 2020 și publicat în revista Acta Biochimica Polonica. Această cercetare afirmă că acidul neogambogic, un compus natural, poate provoca moartea celulelor melanomului B16 prin modularea cascadei de semnalizare PI3K/Akt/mTOR.

Un complex de iridiu (III) ca agent anticancerigen puternic induce apoptoza și autofagia în celulele B16 prin inhibarea căii AKT/mTOR

Această lucrare de cercetare a fost publicată în European Journal of Medicinal Chemistry în 2018. În acest studiu, cercetătorii au investigat activitatea anticancer a unui compus, complexul de iridiu (III), folosind celule de melanom B16.

Ailanthone induce oprirea ciclului celular și apoptoza în celulele de melanom B16 și A375

Acest studiu a propus că un bioactiv vegetal, Ailanthone posedă potențial anticancerigen, deoarece poate induce apoptoza și oprirea ciclului celular în celulele de melanom B16 și A375. Această lucrare a fost publicată în Biomolecules în 2019.

6. resurse pentru linia celulară B16: Protocoale, videoclipuri și multe altele

Există resurse limitate privind linia celulară B16 care explică protocoalele sale de cultivare și transfecție.

Cultivarea celulelor de melanom: Acest videoclip oferă sfaturi valoroase pentru cultivarea liniilor celulare de melanom.
Subculturalizarea unei linii celulare: Acest videoclip explică un protocol general de subcultură pentru o linie celulară.
Transfecția liniei celulare B16F10: Acest videoclip explică protocolul de transfecție pentru o sublinie de celule de melanom B16. Acesta vă poate ajuta să optimizați protocolul de transfecție pentru celulele B16.

Următoarele sunt câteva protocoale de cultură celulară pentru celulele B16.

Cultivarea celulelor B16: Acest site web conține toate informațiile necesare pentru cultivarea celulelor B16, inclusiv mediile de creștere, subculturile, decongelarea și congelarea celulelor.

Referințe

Danciu, C., et al., Comportamentul a patru sublinii diferite de celule de melanom murin B 16: C57 BL/6J piele. Jurnalul internațional de patologie experimentală, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., și colab., LncRNA MEG3 promovează creșterea, metastazarea și formarea melanomului prin modularea axei miR-21/E-cadherină. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., și colab., Semnalarea Notch1 în celulele melanomului a promovat imunosupresia indusă de tumoare prin creșterea TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C. și colab. acidul neogambogic induce apoptoza celulelor melanomului B16 prin intermediul căii de semnalizare PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., și colab., Activitatea antitumorală a ginsenosidei Rg3 în melanom prin scăderea căilor ERK și Akt. Jurnalul internațional de oncologie, 2019. 54(6): p. 2069-2079.