Celulele B16 – Ghid fundamental privind celulele de melanom B16 în cercetarea oncologică

B16 este o linie celulară de cancer de piele (melanom) de origine murină. Această linie celulară este un model in vitro eficient pentru studierea cancerelor de piele la om. Este frecvent utilizată pentru a investiga formarea tumorilor solide și metastazarea celulelor canceroase.

📋 Linia celulară B16 — Informații succinte

Mediu de creștere: Celulele B16 sunt cultivate în mediu EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) care conține 10 % ser fetal bovin (FBS). Mediul de creștere trebuie reînnoit de 2-3 ori pe săptămână.
Timp de dublare: Timpul mediu de dublare a populației pentru celulele B16 este estimat la 24 de ore.
Tipul de creștere: Celulele B16 sunt aderente și cresc în monostraturi.
Nivel de biosecuritate: BSL-1
Disponibil de la: Cytion — Comandați B16

Acest articol vă va ajuta să înțelegeți noțiunile de bază ale liniei celulare de melanom B16. Mai exact, va aborda următoarele aspecte:

📋 Cuprins

Caracteristicile generale și originea liniei celulare B16
Informații privind cultivarea liniei celulare B16
Linia celulară B16: Avantaje și dezavantaje
Aplicații ale celulelor B16
5. Publicații de cercetare referitoare la celulele B16
Resurse pentru linia celulară B16: protocoale, videoclipuri și multe altele
Întrebări frecvente

Caracteristici generale și originea liniei celulare B16

Această secțiune a articolului va prezenta caracteristicile liniei celulare de melanom B16. Veți afla răspunsurile la următoarele întrebări frecvente. Cum ar fi: Ce este linia celulară canceroasă B16? De unde provin celulele B16? Care este dimensiunea celulelor B16?

Linia celulară B16 a fost creată în 1954. Aceste celule provin de la șoareci C57BL/6J care au dezvoltat spontan o tumoare la nivelul pielii la Jackson Laboratories din Maine.
Acestea sunt celule epiteliale producătoare de melanină, având capacitatea de a metastaza în splină, ficat și plămâni.
Celulele de melanom B16 cresc sub formă de monostraturi și prezintă o morfologie celulară de tip epitelial și în formă de fus.
Dimensiunea liniei celulare B16 este de aproximativ 15,4 μm.
Există subclone distincte ale celulelor B16, inclusiv B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 și B16F10. Aceste sublinii sunt diferite de celulele B16 părinte și păstrează unele caracteristici specifice. De exemplu, acestea prezintă diferențe în ceea ce privește morfologia, dimensiunea celulară și alte proprietăți. B16F10 are o capacitate metastatică pulmonară ridicată, iar B164A5 este cea mai agresivă linie celulară de cancer de piele în comparație cu B16F10, B16-GMCSF și B16FLT3 [1].

Animație 3D care prezintă un prim-plan al unui cancer de piele în stadiu incipient, cum ar fi melanomul malign, care provoacă inflamația țesutului înconjurător.

Informații privind cultivarea liniei celulare B16

Înainte de a întreține sau cultiva o linie celulară, este posibil să căutați informații cheie despre timpul de dublare, tipul de celule, mediile de creștere, condițiile de cultivare etc. Această secțiune conține toate informațiile necesare pentru cultivarea celulelor B16.

Puncte cheie pentru cultivarea celulelor B16

Timpul de dublare a populației:: Timpul mediu de dublare a populației pentru celulele B16 este estimat la 24 de ore.
Aderente sau în suspensie:: Celulele B16 sunt aderente și cresc în monostraturi.
Densitatea de însămânțare:: Se recomandă însămânțarea celulelor B16 la o densitate de 1 până la 2 x 10⁴ celule/cm². Celulele B16 atașate sunt clătite cu 1 x PBS și disociate de suprafață folosind soluție Accutase. Celulele sunt centrifugate, iar peleta celulară este resuspendată în mediul de creștere. Ulterior, aceste celule sunt transferate într-un nou flacon pentru creștere.
Mediu de creștere:: Celulele B16 sunt cultivate în mediu EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) conținând 10 % ser fetal bovin (FBS). Mediul de creștere trebuie reînnoit de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:: Pentru cultivarea liniei celulare B16 se utilizează un incubator umidificat, cu o concentrație de 5 % CO₂ și o temperatură de 37 °C.
Depozitare:: Aceste celule sunt depozitate la o temperatură sub -150 °C sau în faza de vapori a azotului lichid pentru a proteja viabilitatea celulară.
Procesul de congelare și mediul:: Pentru congelarea celulelor B16 se utilizează mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF, printr-un proces de congelare lentă.
Procesul de decongelare:: Celulele B16 congelate sunt decongelate la 37 °C într-o baie de apă care conține un agent antimicrobian. Celulele decongelate pot fi cultivate direct prin introducerea lor în flacoane care conțin mediu de creștere. În plus, aceste celule pot fi centrifugate pentru a îndepărta componentele mediului de congelare și apoi cultivate în medii noi.
Nivel de biosecuritate:: Linia celulară B16 trebuie manipulată sau menținută într-un laborator de nivel de biosecuritate 1.

B16 cells

Strat semi-confluent de celule de melanom B16 la o mărire de 10x și 20x.

Linia celulară B16: Avantaje și dezavantaje

La fel ca alte linii celulare, B16 prezintă o combinație unică de avantaje și dezavantaje. În această secțiune sunt enumerate câteva avantaje și dezavantaje semnificative ale acestei linii celulare de melanom.

Avantaje

B16 este primul instrument murin eficient utilizat pe scară largă în cercetarea metastazelor datorită avantajelor pe care le oferă. Unele avantaje ale acestei linii celulare de cancer de piele sunt:

Ușor de cultivat: Linia celulară B16 este ușor de cultivat în laboratoarele de cercetare. Este utilizată pe scară largă pentru a studia biologia celulelor canceroase, căile de semnalizare și multe altele.
Creștere rapidă: Linia celulară de melanom B16 prezintă o rată de proliferare ridicată, ceea ce o face potrivită pentru studierea proceselor de diviziune și creștere celulară.
Tumorigeneitate: B16 este o linie celulară tumorigene cu proprietăți similare tumorilor, precum invazia, migrația și proliferarea. Este valoroasă pentru studierea formării, progresiei și metastazării tumorilor.

Dezavantaje

Dezavantajele asociate liniei celulare B16 sunt:

Lipsa relevanței pentru om: Deoarece B16 este o linie celulară de melanom de șoarece, este posibil să nu reprezinte cu exactitate biologia cancerului de piele la om, limitând aplicabilitatea rezultatelor cercetării.
Heterogenitate: Celulele B16 sunt eterogene, prezentând proprietăți genetice și fenotipice variate în cadrul aceleiași culturi. Acest lucru poate afecta fiabilitatea și reproductibilitatea rezultatelor.

Aplicații ale celulelor B16

Linia celulară B16 este utilizată pe scară largă în studiile de cercetare. Câteva aplicații promițătoare ale acestei linii celulare sunt:

Biologia tumorilor: această linie celulară de cancer de piele murină este tumorigene și este utilizată pe scară largă pentru a înțelege biologia tumorilor. Au fost efectuate mai multe studii pentru a explora mecanismele celulare care stau la baza creșterii, proliferării și metastazării celulelor tumorale folosind celule B16. Un studiu de cercetare efectuat în 2020 a utilizat celule B16 pentru a investiga rolul ARN-ului lung necodificat, LncRNA MEG3, în formarea, creșterea și metastazarea melanomului. Această cercetare a descoperit că ARN-ul necodificat modulează axa miRNA-21/E-Cadherină pentru a stimula aceste evenimente celulare [2]. În mod similar, s-au efectuat cercetări pentru a investiga rolul potențial al semnalizării Notch1 în imunosupresia indusă de tumori, utilizând celule B16 [3].
Descoperirea de medicamente: Celulele B16 sunt utilizate pentru a valida și testa potențialele efecte terapeutice ale medicamentelor candidate. Un studiu a evaluat efectul antitumoral al acidului neogambogic, un compus natural, utilizând o linie celulară B16. Rezultatele studiului au arătat că acest compus modulează calea de semnalizare PI3K/Akt/mTOR pentru a provoca moartea celulelor canceroase [4]. Un alt studiu a investigat efectul anti-melanom al ginsenosidei Rg3, o saponină, utilizând linia celulară B16. Cercetarea a sugerat că acest compus natural a determinat activitate antitumorală prin reglarea negativă a căilor ERK și Akt [5].

430,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 305154

5. Publicații științifice care au ca subiect celulele B16

Iată câteva publicații științifice importante care prezintă linia celulară de melanom B16.

LncRNA MEG3 promovează creșterea, metastazarea și formarea melanomului prin modularea axei miR-21/E-cadherin

Această publicație din revista Cancer Cell International (2020) a propus că ARN-ul lung necodificat MEG3 îmbunătățește formarea, creșterea și metastazarea celulelor de melanom B16 prin modularea axei miRNA-21/E-Cadherin.

Un nou derivat al psoralenului, MPFC, intensifică melanogeneza prin activarea căilor de semnalizare p38 MAPK și PKA în celulele B16

Acest articol a fost publicat în International Journal of Molecular Medicine în 2018. Acest studiu a investigat efectul melanogenic și mecanismele unui derivat al psoralenului – 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g]cromen-2-onă (MPFC) – în celulele B16. Studiul a sugerat că acest derivat favorizează melanogeneza prin stimularea semnalizării celulare PKA și p38 MAPK.

Semnalizarea Notch1 în celulele de melanom a favorizat imunosupresia indusă de tumoră prin reglarea în sus a TGF-β1

Această cercetare a fost publicată în 2018 în Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Rezultatele studiului sugerează că activarea semnalizării Notch1 în celulele B16 poate împiedica imunitatea antitumorală prin creșterea expresiei genei TGF-β1.

Acidul neogambogic induce apoptoza celulelor B16 de melanom prin intermediul căii de semnalizare PI3K/Akt/mTOR

Acest studiu a fost realizat de Chunlan Wu și colegii săi în 2020 și publicat în revista Acta Biochimica Polonica. Cercetarea arată că acidul neogambogic, un compus natural, poate provoca moartea celulelor de melanom B16 prin modularea cascadei de semnalizare PI3K/Akt/mTOR.

Un complex de iridiu (III), ca agent anticancerigen puternic, induce apoptoza și autofagia în celulele B16 prin inhibarea căii AKT/mTOR

Acest articol de cercetare a fost publicat în European Journal of Medicinal Chemistry în 2018. În acest studiu, cercetătorii au investigat activitatea anticancerigenă a unui compus, complexul de iridiu (III), folosind celule de melanom B16.

Ailantona induce oprirea ciclului celular și apoptoza în celulele de melanom B16 și A375

Acest studiu a sugerat că o substanță bioactivă vegetală, ailantona, are potențial anticancerigen, deoarece poate induce apoptoza și oprirea ciclului celular în celulele de melanom B16 și A375. Acest articol a fost publicat în Biomolecules în 2019.

Resurse pentru linia celulară B16: protocoale, videoclipuri și multe altele

Există resurse limitate privind linia celulară B16 care explică protocoalele sale de cultivare și transfecție.

Cultivarea celulelor de melanom: Acest videoclip oferă sfaturi valoroase pentru cultivarea liniilor celulare de melanom.
Subcultivarea unei linii celulare: Acest videoclip explică un protocol general de subcultivare pentru o linie celulară.
Transfecția liniei celulare B16F10: Acest videoclip explică protocolul de transfecție pentru o sublinie de celule de melanom B16. Vă poate ajuta să optimizați protocolul de transfecție pentru celulele B16.

Următoarele sunt câteva protocoale de cultură celulară pentru celulele B16.

Cultivarea celulelor B16: Acest site web conține toate informațiile necesare pentru cultivarea celulelor B16, inclusiv medii de creștere, subcultivare, decongelare și congelare a celulelor.

Referințe

Danciu, C., et al., Comportamentul a patru sublinii diferite de celule de melanom murin B 16: piele C57 BL/6J. Revista internațională de patologie experimentală, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 promovează creșterea, metastazarea și formarea melanomului prin modularea axei miR-21/E-cadherină. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Semnalizarea Notch1 în celulele de melanom a favorizat imunosupresia indusă de tumoră prin reglarea în sus a TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Acidul neogambogic induce apoptoza celulelor de melanom B16 prin intermediul căii de semnalizare PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., Activitatea antitumorală a ginsenosidului Rg3 în melanom prin reglarea negativă a căilor ERK și Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.