Celulele AGS – Studiul celulelor AGS de adenocarcinom gastric în cercetarea cancerului
Celulele AGS constituie o linie celulară de adenocarcinom gastric uman utilizată pe scară largă în cercetarea biomedicală. În special, aceasta este utilizată pentru a studia biologia cancerului gastric, inclusiv creșterea, dezvoltarea și progresia tumorii, precum și intervențiile terapeutice. În plus, este utilizată pentru a investiga interacțiunile gazdă-patogen.
- Mediu de creștere
- Pentru cultivarea celulelor AGS se utilizează mediu DMEM conținând 10% FBS, 4 mM L-glutamină, 4,5 g/L glucoză, 1,5 g/L NaHCO3 și 1,0 mM piruvat de sodiu. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.
- Timp de dublare
- Timpul de dublare a celulelor AGS variază între 24 și 48 de ore.
- Tipul de creștere
- Celulele AGS sunt aderente. Ele cresc în monostraturi.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-2
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați AGS
- Caracteristici generale și originea celulelor AGS
- Informații privind cultivarea liniei celulare AGS
- Linia celulară AGS: Avantaje și limitări
- Aplicații ale celulelor AGS
- 5. Publicații de cercetare privind linia celulară AGS
- Resurse pentru linia celulară AGS: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Întrebări frecvente
Caracteristici generale și originea celulelor AGS
Este necesar să cunoașteți originea și caracteristicile generale ale unei linii celulare înainte de a începe să lucrați cu aceasta. Această secțiune va aborda următoarele aspecte: Ce sunt celulele AGS? Care este originea celulei AGS? Care este morfologia liniei celulare canceroase AGS?
- Linia celulară AGS a fost derivată din țesutul gastric al unei femei caucaziene în vârstă de 54 de ani, cu adenocarcinom gastric. A fost izolată în 1979 [1].
- Celulele AGS au o morfologie de tip epitelial.
- Celulele AGS epiteliale gastrice sunt hiperdiploide. Numărul modal de cromozomi pentru celulele AGS este 49, care apare în aproape 60% din celule. Poliploidia apare, de asemenea, în aproximativ 3,6% din celule.
Informații privind cultivarea liniei celulare AGS
Pentru manipularea și gestionarea corespunzătoare a unei linii celulare, trebuie să cunoașteți conceptele de bază ale cultivării. În special, ar trebui să aflați: Care este timpul de dublare a celulelor AGS? Care este mediul de cultură pentru celulele AGS? Cum se realizează subcultivarea celulelor AGS? Ce medii de congelare se utilizează pentru celulele epiteliale gastrice AGS?
Puncte cheie pentru cultivarea celulelor AGS
Timpul de dublare:
Timpul de dublare a celulelor AGS variază între 24 și 48 de ore.
Aderente sau în suspensie:
Celulele AGS sunt aderente. Ele cresc în monostraturi.
Densitatea de însămânțare:
Celulele AGS sunt însămânțate la o densitate celulară de 1 x 104 celule/cm2. La această densitate, celulele formează un monostrat confluent în 3-5 zile. După îndepărtarea mediului vechi, celulele sunt clătite cu 1 x PBS și incubate cu soluție de disociere Accutase. Celulele desprinse au fost resuspendate în mediu de cultură și centrifugate. Peleta celulară a fost resuspendată din nou și, după numărarea celulelor AGS, acestea sunt distribuite în noul flacon pentru creștere.
Mediu de creștere:
Pentru cultivarea celulelor AGS se utilizează mediu DMEM conținând 10% FBS, 4 mM L-glutamină, 4,5 g/L glucoză, 1,5 g/L NaHCO3 și 1,0 mM piruvat de sodiu. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:
Celulele AGS sunt păstrate într-un incubator umidificat (la temperatura de 37 °C) cu o alimentare cu 5% CO2.
Depozitare:
Celulele AGS congelate sunt păstrate în congelatoare electrice la o temperatură sub -150 °C sau în faza de vapori a azotului lichid pentru o perioadă mai lungă de timp.
Procesul de congelare și mediu:
Pentru congelarea celulelor AGS se utilizează mediul CM-1 sau CM-ACF. Congelarea celulelor se realizează printr-un proces de congelare lentă, care permite o scădere a temperaturii de numai 1 °C pe minut și protejează viabilitatea celulelor.
Procesul de decongelare:
Celulele epiteliale gastrice congelate sunt agitate rapid într-o baie de apă la 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde. Celulele decongelate sunt resuspendate în medii de cultură proaspete și turnate în flacoane noi pentru creștere. După 24 de ore de incubare, mediul este reînnoit pentru a îndepărta componentele mediului de congelare. În schimb, celulele decongelate sunt centrifugate, iar elementele mediului de congelare sunt îndepărtate. Apoi, celulele recoltate sunt resuspendate din nou și distribuite în flaconul care conține mediul de cultură.
Nivel de biosecuritate:
Pentru cultivarea celulelor AGS sunt esențiale condiții de laborator de nivel 2 de biosecuritate.
Linia celulară AGS: Avantaje și limitări
Această secțiune a articolului va prezenta câteva dintre avantajele și limitările cheie asociate cu celulele AGS.
Avantaje
Principalele avantaje ale celulelor epiteliale gastrice AGS sunt:
Ușor de cultivat
Linia celulară AGS de carcinom gastric este ușor de întreținut în laboratoarele de cultură celulară. Nu are cerințe complicate și pretențioase de cultură celulară. Mai mult, prezintă caracteristici bune de creștere, ceea ce o face o alegere ideală pentru studierea biologiei cancerului gastric.
Relevanța pentru cancerul gastric
Celulele AGS au fost derivate din adenocarcinomul gastric uman, ceea ce le face să fie utilizate pe scară largă pentru studierea biologiei carcinomului gastric și a intervențiilor terapeutice.
Limitări
Limitarea asociată cu linia celulară AGS este:
Model celular in vitro
Celulele AGS sunt cultivate în laboratoare de cercetare biomedicală în condiții artificiale. Prin urmare, este posibil ca acestea să nu reproducă în totalitate micromediul cancerului gastric in vivo și alte interacțiuni celulare și moleculare.
Aplicații ale celulelor AGS
Celulele AGS sunt utilizate în mod specific pentru studierea biologiei cancerului gastric. Acestea au multe alte aplicații promițătoare în domeniul biomedical. Unele dintre aplicațiile interesante de cercetare ale celulelor AGS sunt:
- Studiul cancerului gastric: Celulele AGS sunt un instrument de cercetare excelent pentru investigarea mecanismelor celulare și moleculare care stau la baza creșterii, metastazării și invaziei cancerului gastric. Cercetătorii utilizează, de asemenea, celule epiteliale gastrice AGS pentru a studia diferite procese celulare, mutații genetice și căi de semnalizare în dezvoltarea cancerului gastric. Un studiu publicat în Oncology Reports (2019) a constatat că microARN-183-5p.1 încurajează proliferarea, migrația și invazia celulelor tumorale prin inhibarea cascadei de semnalizare Bcl 2/P53. În plus, acesta reglează în jos gena TPM1 pentru a exercita aceste efecte. Astfel, atât microARN-ul, cât și TPM1 sunt sugerate ca ținte moleculare eficiente pentru dezvoltarea terapiilor țintite împotriva cancerului gastric [2].
- Screeningul medicamentelor: Celulele AGS au fost utilizate în mod obișnuit pentru screeningul medicamentelor noi și eficiente împotriva cancerului gastric. Cercetătorii evaluează citotoxicitatea și eficacitatea medicamentelor potențiale folosind linia celulară AGS. De asemenea, au fost efectuate studii privind identificarea de noi ținte moleculare și dezvoltarea de terapii țintite noi pentru combaterea carcinoamelor gastrice. Cercetările efectuate în 2021 au utilizat celule canceroase gastrice AGS și au studiat efectul terapeutic al medicamentului paclitaxel. Rezultatele au arătat că paclitaxelul induce o catastrofă mitotică, un mecanism integral al apoptozei sau al morții celulare în celulele AGS. În plus, acesta a favorizat și autofagia în celulele canceroase gastrice [3].
- Interacțiuni gazdă-patogen: Linia celulară canceroasă AGS studiază, de asemenea, interacțiunile gazdă-patogen. Acest lucru ajută cercetătorii să înțeleagă mecanismele celulare și răspunsurile implicate într-o infecție. De exemplu, un studiu realizat în 2020 a observat că ARN-urile mici necodificatoare prezente în veziculele membranei externe ale Helicobacter pylori reduc secreția de interleukină 8 în celulele AGS umane [4].
5. Publicații științifice privind linia celulară AGS
Această secțiune a articolului va prezenta câteva publicații de cercetare interesante și cele mai citate care au ca subiect celulele AGS.
Acest studiu publicat în Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) a sugerat că salidrosida, un compus natural, induce autofagia protectoare și moartea celulară în celulele epiteliale gastrice AGS prin modularea căii de semnalizare PI3K/AKT/mTOR.
Acest studiu a fost publicat în revista Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Acesta a explorat efectele anticanceroase sinergice ale polizaharidului de astragalus și ale medicamentului apatinib în celulele AGS. Rezultatele studiului au arătat că astragalusul potențează efectele antitumorale ale apatinibului prin suprimarea semnalizării AKT.
Această cercetare publicată în Journal of Ethnopharmacology (2018) a sugerat că curcuzedoalida, un compus natural din planta Curcuma zedoaria Roscoe, contribuie la potențialul său citotoxic împotriva celulelor AGS.
Supraexpresia FOXA1 inhibă proliferarea celulară și EMT a celulelor AGS de cancer gastric uman
Această publicație din revista Gene (2018) a sugerat că reglarea în sus a FOXA1 suprimă proliferarea celulelor de adenocarcinom gastric AGS, precum și tranziția epitelial-mezenchimală (EMT) și invazia.
Acest articol de cercetare a fost publicat în International Journal of Medical Microbiology în 2020. În acest studiu, celulele AGS au fost utilizate pentru a studia interacțiunile gazdă-patogen. Rezultatele au arătat că Helicobacter pylori conține unele ARN-uri necodante în veziculele membranei sale externe care afectează nivelurile de IL-8 în celulele AGS.
Resurse pentru linia celulară AGS: protocoale, videoclipuri și multe altele
Iată câteva resurse referitoare la celulele AGS.
- Protocolul de transfecție a celulelor AGS: Acest videoclip este un ghid pas cu pas pentru învățarea protocolului de transfecție pentru celulele epiteliale gastrice AGS.
Următorul link conține protocolul de cultură celulară AGS.
- Protocolul de cultivare a celulelor AGS: Acest site web conține informații utile despre mediile de cultură celulară AGS și protocoalele de cultivare celulară. Pe scurt, acesta oferă un protocol pentru subcultivarea celulelor epiteliale gastrice AGS și manipularea culturilor AGS în proliferare și crioconservate.
- Subcultivarea celulelor AGS: Acest site explică în detaliu procedura de subcultivare a celulelor AGS.
Referințe
- Phuc, B.H., et al., Genomică comparativă a două tulpini vietnameze de Helicobacter pylori, CHC155 provenind de la un pacient cu cancer gastric non-cardia și VN1291 provenind de la un pacient cu ulcer duodenal. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
- Lin, J., et al., miRNA‑183‑5p. 1 promovează migrația și invazia celulelor AGS de cancer gastric prin țintirea TPM1. Rectificare în /10.3892/or. 2020.7902. Rapoarte oncologice, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., Efectul paclitaxelului asupra apoptozei, autofagiei și catastrofei mitotice în celulele AGS. Scientific Reports, 2021. 11(1): p. 23490.
- Zhang, H., et al., sncARN-urile ambalate de veziculele membranei externe ale Helicobacter pylori atenuează secreția de IL-8 în celulele umane. Revista Internațională de Microbiologie Medicală, 2020. 310(1): p. 151356.