Celulele AGS - Explorarea adenocarcinomului gastric Celulele AGS în studiile privind cancerul
CeluleleAGS constituie o linie celulară de adenocarcinom gastric uman care este utilizată pe scară largă în cercetarea biomedicală. Aceasta este utilizată în special pentru a studia biologia cancerului gastric, inclusiv creșterea, dezvoltarea, progresia și intervențiile terapeutice ale tumorii. În plus, este utilizată pentru a investiga interacțiunile gazdă-patogen.
Acest articol va discuta elementele fundamentale ale celulelor AGS epiteliale gastrice. În special, acesta va acoperi:
- Caracteristicile generale și originea celulelor AGS
- Informații privind cultivarea liniei celulare AGS
- Linia celulară AGS: Avantaje și limitări
- Aplicații ale celulelor AGS
- Publicații de cercetare privind linia celulară AGS
- Resurse pentru linia celulară AGS: Protocoale, videoclipuri și multe altele
1.caracteristicile generale și originea celulelor AGS
Cunoașterea originii și a caracteristicilor generale ale unei linii celulare este necesară înainte de a începe să lucrați cu aceasta. Această secțiune va acoperi următoarele: Ce sunt celulele AGS? Care este originea celulei AGS? Care este morfologia liniei celulare canceroase AGS?
- Linia celulară AGS a fost derivată din țesutul gastric al unei femei caucaziene în vârstă de 54 de ani cu adenocarcinom gastric. Aceasta a fost izolată în 1979 [1].
- Celulele AGS au morfologie de tip epitelial.
- Celulele AGS din epiteliul gastric sunt hiperdiploide. Numărul modal de cromozomi pentru celulele AGS este 49, care apare în aproape 60% din celule. Poliploidia apare, de asemenea, în aproximativ 3,6% din celule.
2.informații privind cultivarea liniei celulare AGS
Pentru manipularea și gestionarea corespunzătoare a unei linii celulare, trebuie să cunoașteți conceptele de bază ale cultivării acesteia. În special, trebuie să aflați: Care este timpul de dublare a celulelor AGS? Care este mediul celular AGS? Cum se face subcultura celulelor AGS? Ce medii de congelare sunt utilizate pentru celulele AGS epiteliale gastrice?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor AGS
|
Timpul de dublare: |
Timpul de dublare a celulelor AGS variază între 24 și 48 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
Celulele AGS sunt aderente. Ele cresc în monostraturi. |
|
Densitate de însămânțare: |
Celulele AGS sunt însămânțate la o densitate celulară de 1 x104 celule/cm2. La această densitate, celulele formează un monostrat confluent în 3 până la 5 zile. După îndepărtarea mediului vechi, celulele sunt clătite cu 1 x PBS și incubate cu soluție de disociere Accutase. Celulele detașate au fost resuspendate în mediul de cultură și centrifugate. Peletul celular a fost din nou resuspendat, iar după numărarea celulelor AGS, acestea sunt distribuite în balonul nou pentru creștere. |
|
Mediu de creștere: |
Pentru cultivarea celulelor AGS se utilizează mediul DMEM care conține 10% FBS, 4 mM L-Glutamină, 4,5 g/L Glucoză, 1,5 g/L NaHCO3 și 1,0 mM piruvat de sodiu. Mediul trebuie înlocuit de 2 până la 3 ori pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Celulele AGS sunt păstrate într-un incubator umidificat (la o temperatură de 37°C) cu un aport de 5% CO2. |
|
Depozitare: |
Celulele AGS congelate sunt păstrate în congelatoare electrice la temperaturi sub -150°C sau în faza de vapori a azotului lichid pentru o perioadă mai lungă. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
Mediul CM-1 sau CM-ACF este utilizat pentru a congela celulele AGS. Congelarea celulelor se realizează printr-un proces lent de congelare care permite o scădere a temperaturii de numai 1°C pe minut și protejează viabilitatea celulelor. |
|
Procesul de decongelare: |
Celulele epiteliale gastrice congelate sunt agitate rapid într-o baie de apă la 37°C timp de 40 până la 60 de secunde. Celulele decongelate sunt resuspendate în mediu de cultură proaspăt și turnate în flacoane noi pentru creștere. După 24 de ore de incubare, mediul este reînnoit pentru a elimina componentele mediului care îngheață. Spre deosebire de aceasta, celulele decongelate sunt centrifugate, iar elementele mediului de congelare sunt îndepărtate. Apoi, celulele recoltate sunt din nou resuspendate și distribuite în balonul care conține mediul de cultură. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Condițiile de laborator de nivel 2 de biosecuritate sunt esențiale pentru cultivarea celulelor AGS. |
3.linia celulară AGS: Avantaje și limitări
Această secțiune a articolului va clarifica unele dintre principalele avantaje și limitări asociate cu celulele AGS.
Avantaje
Principalele avantaje ale celulelor AGS epiteliale gastrice sunt:
|
Ușor de cultivat |
Linia celulară de carcinom gastric AGS este ușor de întreținut în laboratoarele de cultură celulară. Aceasta nu are cerințe complicate și pretențioase în ceea ce privește cultura celulară. În plus, prezintă caracteristici bune de creștere, ceea ce o face o alegere ideală pentru studiul biologiei cancerului gastric. |
|
Relevanță pentru cancerul gastric |
Celulele AGS au fost derivate din adenocarcinom gastric uman, ceea ce le face utilizate pe scară largă pentru a studia biologia carcinomului gastric și intervențiile terapeutice. |
Limitări
Limitarea asociată cu linia celulară AGS este:
|
Model celular in vitro |
Celulele AGS sunt cultivate în laboratoare de cercetare biomedicală în condiții artificiale. Prin urmare, acestea ar putea să nu reproducă pe deplin micro-mediul cancerului gastric in vivo și alte interacțiuni celulare și moleculare. |
4.aplicații ale celulelor AGS
Celulele AGS sunt utilizate în special pentru a studia biologia cancerului gastric. Ele au multe alte aplicații promițătoare în domeniul biomedical. Unele dintre aplicațiile de cercetare interesante ale celulelor AGS sunt:
- Studiul cancerului gastric: Celulele AGS sunt un instrument de cercetare excelent pentru investigarea mecanismelor celulare și moleculare care stau la baza creșterii, metastazelor și invaziei cancerului gastric. De asemenea, cercetătorii utilizează celulele AGS epiteliale gastrice pentru a studia diferite procese celulare, mutații genetice și căi de semnalizare în dezvoltarea cancerului gastric. Un studiu Oncology Reports (2019) a constatat că microARN-183-5p.1 încurajează proliferarea, migrația și invazia celulelor tumorale prin inhibarea cascadei de semnalizare Bcl 2/P53. În plus, acesta reglează în jos și gena TPM1 pentru a exercita aceste efecte. Astfel, atât microARN, cât și TPM1 sunt sugerate ca ținte moleculare eficiente pentru dezvoltarea terapiilor țintite împotriva cancerului gastric [2].
- Screeningul medicamentelor: Celulele AGS au fost utilizate în mod obișnuit pentru a depista medicamente noi și eficiente împotriva cancerului gastric. Cercetătorii evaluează citotoxicitatea și eficacitatea potențialelor medicamente utilizând linia celulară AGS. De asemenea, au fost efectuate studii privind identificarea de noi ținte moleculare și dezvoltarea de noi terapii țintite pentru combaterea carcinoamelor gastrice. Cercetările efectuate în 2021 au utilizat celulele AGS de cancer gastric și au studiat efectul terapeutic al medicamentului paclitaxel. Rezultatele au arătat că paclitaxelul induce o catastrofă mitotică, un mecanism integral de apoptoză sau moarte celulară în celulele AGS. În plus, acesta a promovat, de asemenea, autofagia în celulele cancerului gastric [3].
- Interacțiuni gazdă-patogen: Linia celulară de cancer AGS studiază, de asemenea, interacțiunile gazdă-patogen. Acest lucru ajută cercetătorii să înțeleagă mecanismele celulare și răspunsurile implicate într-o infecție. Cum ar fi un studiu efectuat în 2020 a observat că ARN-urile mici necodificatoare prezente în veziculele membranei externe a Helicobacter pylori scad secreția de interleukină 8 în celulele AGS umane [4].
5.publicații de cercetare privind linia celulară AGS
Această secțiune a articolului va acoperi câteva publicații de cercetare interesante și cele mai citate care prezintă celulele AGS.
Acest studiu din Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) a propus că salidrosida, un compus natural, induce autofagia protectoare și moartea celulară în celulele AGS epiteliale gastrice prin modularea căii de semnalizare PI3K/AKT/mTOR.
Acest studiu a fost publicat în Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Acesta a explorat efectele anticanceroase sinergice ale polizaharidei de astragalus și ale medicamentului apatinib în celulele AGS. Rezultatele studiului au arătat că astragalus sporește efectele antitumorale ale apatinib prin suprimarea semnalizării AKT.
Această cercetare din Journal of Ethnopharmacology (2018) a propus că curcuzedoalide, un compus natural din planta Curcuma zedoaria Roscoe, contribuie la potențialul său de citotoxicitate împotriva celulelor AGS.
Supraexprimarea FOXA1 inhibă proliferarea celulară și EMT a celulelor AGS de cancer gastric uman
Această publicație în Gene (2018) a propus că supraexprimarea FOXA1 suprimă proliferarea celulelor adenocarcinomului gastric AGS și tranziția epitelială la mezenchimală (EMT) și invazia.
Acest articol de cercetare a fost publicat în International Journal of Medical Microbiology în 2020. În acest studiu, celulele AGS au fost utilizate pentru a studia interacțiunile gazdă-patogen. Rezultatele au arătat că Helicobacter pylori conține unele ARN necodificatoare în veziculele membranei sale externe care afectează nivelurile de IL-8 în celulele AGS.
6.resurse pentru linia celulară AGS: Protocoale, videoclipuri și altele
Următoarele sunt câteva resurse care prezintă celulele AGS.
- Protocolul de transfecție a celulelor AGS: Acest videoclip este un ghid pas cu pas pentru învățarea protocolului de transfecție pentru celulele AGS epiteliale gastrice.
Următorul link conține protocolul de cultură a celulelor AGS.
- Protocolul de cultură a celulelor AGS: Acest site web conține informații utile despre mediul celular AGS și protocoalele de cultură celulară. Pe scurt, acesta oferă un protocol de subcultură a celulelor AGS epiteliale gastrice și de manipulare a culturilor AGS proliferante și crioprezervate.
- Subcultură de celule AGS: Acest site va explica în detaliu procedura de subcultură pentru celulele AGS.
Referințe
- Phuc, B.H. și colab., Genomica comparativă a două tulpini vietnameze de Helicobacter pylori, CHC155 de la un pacient cu cancer gastric non-cardiac și VN1291 de la un pacient cu ulcer duodenal. Rapoarte științifice, 2023. 13(1): p. 8869.
- Lin, J., și colab. miRNA-183-5p. 1 promovează migrația și invazia celulelor AGS de cancer gastric prin țintirea TPM1 Corrigendum în/10.3892/or. 2020.7902. Rapoarte de oncologie, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
- Khing, T.M., și colab. efectul paclitaxelului asupra apoptozei, autofagiei și catastrofei mitotice în celulele AGS. Rapoarte științifice, 2021. 11(1): p. 23490.
- Zhang, H. și colab. sncRNAs ambalate de veziculele membranei exterioare Helicobacter pylori atenuează secreția IL-8 în celulele umane. Jurnalul internațional de microbiologie medicală, 2020. 310(1): p. 151356.