Celule A431 - Analiza în profunzime a celulelor de carcinom epidermoid în cercetarea dermatologică
A431 este o linie celulară de cancer epidermoid uman. Aceasta este utilizată pe scară largă în domeniul cercetării biomedicale, în principal în biologia cancerului, imuno-oncologie și studii toxicologice. În plus, celulele A431 supraexprimă EGFR (receptorul factorului de creștere epidermal), fiind astfel utilizate ca un model in vitro valoros pentru a studia ciclul celular și căile de semnalizare celulară asociate cancerului.
Acest articol va explica elementele de bază ale liniei celulare canceroase A431. Veți afla următoarele:
- Celulele A431: Caracteristici generale și origine
- Linia celulară A431: Informații privind cultivarea
- Avantaje și dezavantaje ale liniei celulare A431
- Aplicații de cercetare ale celulelor A431
- Publicații de cercetare cu celule A431
- Resurse pentru linia celulară A431: Protocoale, videoclipuri și multe altele
1. Celule A431: Caracteristici generale și origine
Această secțiune a articolului vă va ajuta să cunoașteți informațiile generale despre linia celulară A431 pe care trebuie să le știți înainte de a lucra cu aceasta. Cum ar fi, care este originea Ce este linia celulară A431? Care sunt caracteristicile liniei celulare A431? Care este morfologia celulelor A431? De unde provin celulele A431?
- A431, o linie celulară umană de cancer de piele, a fost obținută din epiderma unei paciente de 85 de ani cu carcinom epidermoid [1]. Ea a fost stabilită de D.J. Giard și colab. care au dezvoltat multe alte linii celulare din tumori solide.
- Celulele A-431 posedă morfologie epitelială. Ele se agregă și formează grupuri de celule.
- Linia celulară de cancer de piele a431 este hipertriploidă. Numărul modal de cromozomi pentru această linie celulară este 74, care apare în aproximativ 36% din celule. Ploidii superioare există, de asemenea, în aproximativ 1% din populația celulară.
2.linia celulară A431: Informații privind cultura
Cunoașterea cerințelor și procedurilor de cultură celulară ale unei linii celulare poate face ca manipularea acesteia să nu prezinte probleme. Această parte a articolului vă va ajuta să aflați punctele-cheie pentru cultivarea liniei celulare A431. Astfel, veți ști: Care este timpul de dublare al celulelor A431? Linia de celule canceroase A431 este aderentă? Ce mediu de creștere este utilizat pentru A431?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor A431
|
Timpul de dublare: |
Timpul de dublare a populației pentru celulele A431 variază de la 80 la 100 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
A431 este o linie celulară aderentă. |
|
Densitate de însămânțare: |
densitatea celulară de 1 x104 celule/cm2 este ideală pentru linia celulară A431. Celulele au nevoie de aproape 4 zile pentru a deveni confluente la această densitate. Celulele aderente sunt spălate cu PBS (1x) și incubate cu soluția Accutase passaging. Ulterior, celulele au fost resuspendate într-un mediu de cultură și centrifugate. Celulele recoltate au fost din nou resuspendate și distribuite în flacoane noi pentru creștere. |
|
Mediu de creștere: |
Mediul DMEM suplimentat cu 10% ser fetal bovin, 4,5 g/L glucoză, 1,0 mM piruvat de sodiu, 1,5 g/L NaHCO3 și 4 mM L-Glutamină este utilizat pentru cultivarea liniei celulare A431. Mediul trebuie înlocuit la fiecare 2 până la 3 zile pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Celulele canceroase A431 sunt cultivate într-un incubator umidificat echipat cu o sursă de 5% CO2 la o temperatură de 37°C. |
|
Stocare: |
Linia celulară poate fi depozitată într-un congelator electric sau în faza de vapori a azotului lichid la o temperatură sub -150°C, deoarece ajută la protejarea viabilității celulare. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
CM-1 sau CM-ACF sunt cele două medii de congelare foarte recomandate pentru celulele A431. Celulele sunt congelate prin utilizarea unei metode de congelare lentă care permite scăderea temperaturii cu numai 1 grad pe minut. |
|
Procesul de decongelare: |
Celulele A431 congelate se dezgheață într-o baie de apă la 37°C care conține un agent antimicrobian timp de 40-60 de secunde. Când nu mai rămâne decât o mică aglomerare de gheață, celulele sunt adăugate cu mediul de cultură și centrifugate. Celulele recoltate sunt resuspendate și turnate în flacoane de cultură pentru creștere. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Nivelul unu de biosecuritate este recomandat pentru manipularea și întreținerea culturilor A431. |
3.avantaje și dezavantaje ale liniei celulare A431
Linia celulară A431 posedă caracteristici distincte și oferă mai multe avantaje și dezavantaje. În continuare, am rezumat câteva dintre acestea.
Avantaje
Principalele avantaje ale liniei celulare canceroase A431 sunt:
|
Supraexprimarea EGFR |
Celulele A431 supraexprimă receptorul factorului de creștere epidermic (EGFR). Acestea servesc drept control pozitiv pentru studierea semnalizării EGFR și a implicațiilor sale în cancer. Ele sunt, de asemenea, utilizate pentru evaluarea noilor terapii împotriva cancerului. |
|
Tumorigenicitate |
Celulele A431 sunt tumorigene și au capacitatea de a forma tumori. Ele pot fi utilizate pentru a dezvolta modele de cancer xenograft, care sunt instrumente valoroase pentru studierea dinamicii creșterii tumorale și pentru evaluarea noilor tratamente împotriva cancerului. |
Dezavantaje
Dezavantajele celulelor A431 sunt:
|
Anomalii genetice |
A431 este o linie celulară canceroasă care cuprinde mutații și alterări genetice care o pot deosebi de caracteristicile tumorii originale. |
|
Contaminare microbiană |
A431 este predispusă la contaminare microbiană, în principal bacteriană. Cu toate acestea, menținerea condițiilor standard de cultură aseptică poate ajuta la prevenirea unei astfel de contaminări în culturile de celule A431. |