Linia celulară A375 - un ghid privind cercetarea melanomului

A375 este o linie celulară de melanom uman utilizată pe scară largă în cercetarea toxicologică și imuno-oncologică. Cercetătorii utilizează această linie celulară pentru a studia biologia cancerului și căile de semnalizare, pentru a testa sau depista potențiali agenți anticancer și pentru a dezvolta terapii noi și eficiente.

Originea și caracteristicile generale ale celulelor A375

Cunoașterea originii și a caracteristicilor generale ale unei linii celulare vă poate ajuta să planificați utilizarea acesteia în cercetare. Această secțiune a articolului va acoperi originea și caracteristicile liniei celulare A375. De exemplu, ce este linia celulară A375? Care sunt caracteristicile liniei celulare A375? De unde provin celulele A375? Care este morfologia celulelor de melanom A375? Care este dimensiunea celulelor A375?

Linia celulară de cancer de piele A375 provine din cultura de explant a unei tumori solide a unei femei de 54 de ani cu melanom malign [1].
Celulele A375 au morfologie de tip epitelial.
Dimensiunea celulelor A375 este relativ mai mică în comparație cu alte linii celulare. Ele posedă aproximativ un diametru de 12 µm.
Celulele de melanom A375 sunt hipotriploide. Numărul modal de cromozomi pentru această linie celulară este 62. De obicei, fiecare celulă are nouă cromozomi marker și o copie a cromozomilor normali N2, N6 și N22.

Un medic examinează excrescențele de pe pielea unui adult în vederea depistării cancerului de piele.

Celule A375: Informații despre cultura celulară

Culturile de celule A375 sunt ușor de întreținut. Ele nu au cerințe pretențioase privind cultura celulară. Această secțiune vă va ajuta să aflați informațiile necesare privind cultura celulară. Cum ar fi care este timpul de dublare A375. Care este mediul liniei celulare A375? Care este densitatea de însămânțare a A375? Sunt celulele de melanom A375 aderente?

Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor A375

Timpul de dublare a populației:	Timpul de dublare a populației A375 este de 20 de ore.
Aderente sau în suspensie:	A375 este o linie celulară de melanom uman aderentă.
Densitate de însămânțare:	densitatea^celularăde 1 x¹⁰⁴ celule/cm2 este ideală pentru culturile de celule A375. Celulele aderente sunt clătite cu 1 x tampon fosfat salin (PBS) și incubate cu soluție de trecere (Accutase). Ulterior, celulele au fost adăugate cu medii de cultură și centrifugate. Celulele recoltate au fost resuspendate într-un mediu de cultură și distribuite în flacoane noi pentru creștere.
Mediu de creștere:	DMEM este recomandat ca mediu ideal pentru A375 atunci când este suplimentat cu 10% ser fetal bovin (FBS), 4,5 g/L glucoză, 1,5 g/L NaHCO3, 4 mM L-Glutamină și 1,0 mM piruvat de sodiu. Mediul A375 trebuie reînnoit 2-3 zile pe săptămână.
Condiții de creștere:	Celulele de melanom A375 sunt cultivate într-un incubator umidificat (37°C) cu o aprovizionare cu 5% CO2.
Depozitare:	Celulele A375 congelate trebuie păstrate sub -150°C în faza de vapori a azotului lichid sau într-un congelator electric.
Procesul de congelare și mediul:	Mediile CM-1 sau CM-ACF sunt utilizate pentru a congela linia celulară A375. S-a optat pentru un proces lent de congelare care permite o scădere treptată a temperaturii cu 1 °C pentru a proteja viabilitatea celulară.
Procesul de decongelare:	Flaconul cu celule de melanom A375 congelate se agită rapid în baia de apă timp de 40 până la 60 de secunde, până când rămâne doar o mică aglomerare de gheață. Celulele se adaugă cu mediu proaspăt și se centrifughează pentru a elimina elementele de mediu înghețat. Peletul celular obținut se resuspendă din nou și se toarnă în flacoane noi.
Nivelul de biosecuritate:	Culturile A375 sunt manipulate și menținute în condiții de laborator de nivel de biosecuritate 1.

Strat confluent de celule A375 aderente la o mărire de 20x.

Avantaje și limitări ale liniei celulare A375

Ca și alte linii celulare, linia celulară de melanom A375 este asociată cu o combinație unică de avantaje și limitări, ceea ce o face un instrument valoros pentru cercetarea cancerului de melanom. Această secțiune a enumerat doar câteva avantaje și dezavantaje semnificative ale liniei celulare A375.

Avantaje

Avantajele semnificative ale celulelor A375 sunt menționate mai jos:

Model tumoral de melanom: Linia celulară A375 a fost derivată dintr-o tumoare malignă de melanom, servind astfel drept un model tumoral neprețuit pentru cercetarea biologiei melanomului și a intervențiilor terapeutice. Aceste celule prezintă proprietăți asemănătoare melanomului, cum ar fi o rată ridicată de proliferare și invazivitate.
Tumorigenicitate: Celulele A375 sunt foarte tumorigene, ceea ce înseamnă că pot forma tumori. S-a raportat că celulele A375 produc melanoame amelanotice agresive la șoarecii NIH Swiss tratați cu ser antitimocitar (un agent imunosupresor).
Bine caracterizate: A375 este o linie celulară bine caracterizată genetic. Ea posedă mutații genetice specifice ca melanomul. Mutațiile A375 includ alterarea genei BRAF A375, ceea ce o face sensibilă la inhibitorii specifici BRAF. Acest profil genetic face astfel din celulele A375 un instrument excelent de cercetare a cancerului pentru a studia căile moleculare subiacente și terapiile țintite.

Limitări

Limitările asociate cu celulele A375 sunt:

Limitări in vitro: A375 este un model tumoral in vitro. Deși imită caracteristicile melanomului, acesta nu poate reprezenta pe deplin complexitatea tumorilor de melanom. Prin urmare, este necesară prudență atunci când constatările in vitro sunt generalizate la studiile clinice.

Achiziționați celulele A375 acum

430,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 300110

Aplicații de cercetare ale liniei celulare A375

Linia celulară A375 are aplicații de cercetare extinse în cercetarea cancerului. Iată câteva dintre domeniile comune în care sunt utilizate celulele A375.

Cercetarea cancerului: Celulele A375 au aplicații pe scară largă în cercetarea melanomului. Cercetătorii au utilizat aceste celule pentru a investiga biologia cancerului de piele, procesele și mecanismele de semnalizare celulară subiacente, inclusiv proliferarea celulară, migrația și invazia. Acest lucru poate ajuta, de asemenea, cercetătorii să identifice noi ținte terapeutice moleculare. Un studiu efectuat de Lin Zhu și colegii săi în 2019 a utilizat celule de melanom foarte agresive A375 și a constatat rolul microARN-3662 asupra creșterii și invaziei celulelor de melanom A375. Concluziile studiului afirmă că microARN-3662 vizează gena ZEB1 și reglează creșterea celulelor de melanom in vitro și in vivo în modelul tumoral A375 [2]. În mod similar, cercetarea efectuată în 2018 a constatat că căile PI3K/AKT și MAPK/ERK sunt implicate în proliferarea și metastazarea liniei celulare A375 [3].
Descoperirea și testarea medicamentelor: Linia celulară A375 este un model tumoral in vitro util pentru testarea și depistarea potențialilor agenți anticancerigeni. Cercetătorii evaluează toxicitatea și eficacitatea noilor medicamente chimioterapeutice, compuși și alte terapii utilizând aceste celule de melanom A375. De exemplu, un studiu a explorat proprietățile anticancerigene ale micro și nanoveziculelor derivate din grapefruit pe celulele canceroase de melanom uman A375. Rezultatele au arătat că micro și nanoveziculele induc oprirea ciclului celular și apoptoza și împiedică expresia genelor în proliferarea, migrația și invazia celulară [4].

Celule A375: Publicații

Sunt menționate aici câteva publicații de cercetare semnificative care prezintă celulele A375.

Vitamina D și analogii săi hipocalcemici modulează proprietățile anticancerigene ale cisplatinei și dacarbazinei în linia celulară de melanom uman A375

Acest studiu a fost publicat în Journal of Oncology în 2019. Studiul a propus că co-tratamentul cu vitamina D și analogi îmbunătățește activitatea anticancerigenă a cisplatinei și dacarbazinei în celulele de melanom A375.

Evaluarea in vitro a efectelor anti-melanom (linia celulară A375) ale extractelor de gel și frunze întregi din specii selectate de aloe

Această cercetare a fost publicată în Journal of Herbal Medicine în 2022. Acest studiu a explorat efectele anti-melanom ale gelului de aloe vera în celulele de melanom A375.

Membrul 2 al familiei fermitin promovează progresia melanomului prin creșterea legării p-α-Pix la Rac1 pentru a activa calea MAPK

Acest studiu din Oncogene (2021) a propus că membrul 2 al familiei fermitin (FERMT2 sau kindlin-2) încurajează progresia melanomului prin activarea MAPK prin legarea cu p-α-Pix și Rac1.

FARP1 facilitează proliferarea celulară prin modularea căii de semnalizare MAPK în melanomul cutanat

Acest studiu din The American Journal of Dermatopathology (2019) a propus că FARP1 poate facilita dezvoltarea și progresia melanomului cutanat. Astfel, acesta poate fi o țintă terapeutică utilă.

Potențialul citotoxic și apoptotic al extractelor de Phyllodium elegans pe liniile celulare de cancer uman

Acest articol de cercetare a fost publicat în Bioengineered (2019). Acest studiu a explorat activitatea citotoxică și apoptotică a unui extract de plantă Phyllodium elegans pe liniile celulare de carcinom uman, inclusiv A375.

Resurse pentru linia celulară A375: Protocoale, videoclipuri și multe altele

Următoarele sunt câteva resurse online care prezintă celulele A375.

Transfecția celulelor A375: Acest tutorial video vă va ajuta să învățați transfecția celulelor A375 pas cu pas.
Cultivarea celulelor: Acest videoclip conține informații foarte utile cu privire la cultivarea liniilor celulare.

Protocoalele de cultură celulară pentru celulele A375 sunt enumerate aici.

Linia celulară A375: Acest link conține informații utile despre cultivarea și întreținerea liniei celulare A375, inclusiv medii A375 și manipularea culturilor A375 congelate și proliferate.

Întrebări frecvente (FAQ) pentru celulele A375

Referințe

Avram, S., și colab., Standardizarea modelelor de melanom uman A375 pe membrana corioallantoică a embrionului de pui și pe șoareci Balb/c nude. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., și colab. microARN-3662 țintește ZEB1 și atenuează invazia liniei celulare de melanom foarte agresivă A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X. și colab. Oxyfadichalcone C inhibă proliferarea și metastazarea celulelor de melanom A375 prin suprimarea căilor PI3K/Akt și MAPK/ERK. Științele vieții, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C. și colab. micro și nanovezicule derivate din grapefruit prezintă profiluri metabolome distincte și activități anticancerigene în linia celulară de melanom uman A375. Celule, 2020. 9(12): p. 2722.