Celule endoteliale din vena ombilicală umană (HUVEC)

HUVEC sunt celule endoteliale primare care servesc drept instrument esențial în cercetarea biomedicală. Ele ajută cercetătorii să studieze angiogeneza, biologia vasculară și boli precum ateroscleroza și cancerul. HUVEC sunt utilizate pentru a explora comportamentul celulelor endoteliale, mecanismele de semnalizare celulară și testarea medicamentelor, oferind perspective valoroase asupra potențialelor terapii sau tratamente pentru bolile cardiovasculare și cancer. De asemenea, servește ca sistem model pentru studiile de biologie vasculară.

Acest articol cuprinde toate informațiile fundamentale de care aveți nevoie înainte de a lucra cu celulele HUVEC. Acesta va acoperi:

Originea și atributele generale ale celulelor HUVEC
Informații privind cultivarea liniei de celule HUVEC
Linia celulară HUVEC: Avantaje și limitări
Aplicații ale celulelor HUVEC în cercetare
Publicații cu celule HUVEC
Resurse pentru linia celulară HUVEC: Protocoale, videoclipuri și multe altele

1. Originea și caracteristicile generale ale celulelor HUVECs

Cunoașterea originii și a atributelor generale ale unei linii celulare este esențială pentru a decide dacă aceasta este adecvată pentru studiul dumneavoastră. Această secțiune vă va ajuta să aflați aceste informații esențiale despre celulele endoteliale HUVEC: Pentru ce sunt utilizate celulele HUVEC? Care este forma completă a celulelor HUVEC? Care sunt caracteristicile distinctive ale HUVEC? Ce este morfologia HUVEC? Care este diametrul celulelor HUVEC? Care este dimensiunea celulelor Huvec?

Celulele HUVEC sunt extrase din endoteliul venei cordonului ombilical uman.
Morfologia HUVEC este de tip endotelial. Ele au de obicei formă poligonală și un nucleu rotund în centru.
Dimensiunea celulelor HUVEC este de 17 μm în diametru.
Aceste celule endoteliale sunt diploide. Ele posedă un număr modal de cromozomi de 46.

HUVEC TERT2

HUVEC TERT2 este o linie celulară imortalizată derivată din celule endoteliale umane primare din vena ombilicală (HUVEC). Aceasta a fost dezvoltată prin introducerea genei telomerazei umane de transcriptază inversă (TERT) în genomul celulelor HUVEC. Această modificare a contribuit la prelungirea duratei lor de viață în cultură, permițând experimente pe termen mai lung fără limitările asociate cu HUVEC primare.

Care este diferența dintre HUVEC și HMEC-1?

Structura și complexitatea liniilor de celule endoteliale HUVEC și HMEC-1 sunt comparabile. Cu toate acestea, celulele HMEC-1 prezintă o populație mai omogenă decât HUVEC-urile în ceea ce privește dimensiunea și granularitatea celulelor. Acest lucru poate reduce variațiile în datele experimentale.

O călătorie microscopică de înaltă calitate la măriri multiple - mișcare lină și examinare focalizată a unei mostre reale de venă umană.

2.informații despre cultivarea liniei celulare HUVEC

Această secțiune a articolului este axată pe echiparea dumneavoastră cu cunoștințe cruciale despre cultura celulelor HUVEC. Acest lucru vă va ajuta foarte mult munca cu acestea. Aici, veți găsi răspunsuri la următoarele întrebări frecvente: Care este timpul de dublare a HUVEC? Care este densitatea de însămânțare a HUVEC? Câte pasaje au HUVEC-urile? Ce este mediul celular HUVEC? Cum se cultivă HUVEC-urile?

Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor HUVEC

Timpul de dublare:	Timpul de dublare a celulelor HUVEC este de aproximativ 23,5 ore. Cu toate acestea, acesta poate varia în funcție de condițiile de cultură celulară și de numărul de treceri.
Aderente sau în suspensie:	HUVEC este o linie celulară aderentă. Celulele cresc și formează monostraturi.
Raport de divizare:	Raportul de subcultivare pentru HUVEC este de 1:2 până la 1:4. Pentru însămânțare; celulele sunt spălate cu soluție salină tampon fosfat 1x și adăugate cu o soluție de disociere (Accutase) timp de 8 până la 10 minute la temperatura ambiantă. După aceea, se adaugă mediul de cultură, iar celulele detașate sunt centrifugate. Supernatantul se aruncă, iar peletul celular se resuspendă cu grijă. Celulele sunt distribuite într-un nou balon de cultură pentru creștere.
Mediu de creștere:	Mediul de creștere a celulelor endoteliale este utilizat pentru cultivarea celulelor HUVEC. Mediul este înlocuit la fiecare 2-3 zile. HUVEC pot fi utilizate până la 8-10 treceri.
Condiții de creștere:	Linia de celule endoteliale umane (HUVEC) este menținută într-un incubator umidificat cu 5% CO2 la 37°C.
Depozitare:	Celulele HUVEC sunt, de obicei, depozitate la temperaturi sub -150 °C într-un congelator cu temperaturi foarte scăzute sau în faza de vapori a azotului lichid. Acest lucru protejează viabilitatea celulelor pentru perioade mai lungi.
Procesul de congelare și mediul:	Pentru conservarea celulelor HUVEC, se recomandă mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF. În general, se recomandă un proces lent de congelare, deoarece acesta permite o scădere a temperaturii de numai 1 °C pe minut, prevenind șocul celulelor și menținând viabilitatea.
Procesul de decongelare:	Pentru a dezgheța celulele congelate, puneți-le într-o baie de apă preîncălzită la 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde, până când rămâne doar o mică bucată de gheață. Apoi, adăugați mediu proaspăt în celule și centrifugați. Acest pas este necesar pentru a îndepărta celulele pentru a elimina orice resturi de mediu de congelare. Se resuspendă peletul celular și se transferă celulele într-un balon nou cu mediul de cultură.
Nivelul de biosecuritate:	Pentru manipularea corespunzătoare a culturilor de celule HUVEC este necesar un laborator de nivel de biosecuritate 1.

O vedere microscopică detaliată a celulelor endoteliale din vena ombilicală umană la diferite densități și măriri.

3. Avantaje și limitări

Ca și alte linii de celule umane, celulele HUVEC au propriile avantaje și limitări. În această secțiune, vom analiza câteva dintre cele mai importante care au un impact semnificativ asupra utilizării lor în cercetare.

Avantaje

Principalele avantaje ale celulelor HUVEC sunt:

Model de celulă endotelială
Modele extrem de relevante pentru studierea angiogenezei, a biologiei vasculare și a bolilor legate de funcția endotelială.
Ușor de cultivat
Relativ ușor de izolat din cordonul ombilical uman. Nu au cerințe de cultură celulară pretențioase și sunt ușor de întreținut în laboratoarele de cercetare.

Limitări

Limitările asociate cu linia celulară endotelială HUVEC sunt:

Durata de viață finită
HUVEC au o durată de viață limitată, de obicei de 8 până la 10 pasaje, ceea ce reprezintă o limitare pentru experimentele pe termen lung. Acestea pot suferi senescență pe măsură ce numărul de treceri crește.

4. Aplicații ale celulelor HUVEC în cercetare

Celulele HUVEC au un potențial semnificativ pentru diverse aplicații în domeniul biomedical. În continuare, vom evidenția câteva utilizări importante ale celulelor HUVEC în cercetare.

Studii privind bolile cardiovasculare: Linia celulară HUVEC este un model valoros de celule endoteliale, oferind astfel o perspectivă asupra mecanismelor care stau la baza bolilor cardiovasculare, cum ar fi ateroscleroza, tromboza și hipertensiunea. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a investiga mecanismele care stau la baza disfuncției endoteliale, stresului oxidativ și inflamației. Cum ar fi un studiu efectuat în 2020 care a utilizat HUVEC și a explorat faptul că ARN-ul lung necodificator TTTY15 joacă un rol esențial în ameliorarea leziunilor celulelor endoteliale vasculare mediate de hipoxie prin țintirea axei miRNA-186-5p [1].
Cercetarea cancerului: HUVEC-urile sunt ideale pentru studiul biologiei vasculare. Prin urmare, acestea sunt utilizate pentru a explora angiogeneza tumorală și interacțiunile celulelor endoteliale. Acest lucru îi ajută pe cercetători să înțeleagă modul în care tumorile obțin un surplus de sânge și proliferează. Cum ar fi Hui Wang și colegii săi au descoperit că exozomii eliberați de celulele carcinomului oral cu celule scuamoase (OSCC) cresc nivelul miARN-210-3p și scad expresia efrinei A3 în celulele HUVEC și promovează formarea de tuburi prin reglarea cascadei PI3K/AKT, după cum s-a confirmat prin testul de formare a tuburilor HUVEC [2].
Testarea medicamentelor: Celulele endoteliale HUVEC sunt utilizate pe scară largă pentru testarea medicamentelor. Cercetătorii pot evalua eficacitatea, toxicitatea și potențialele efecte secundare ale compușilor naturali, nanoparticulelor și ale altor agenți terapeutici in vitro utilizând HUVEC. De exemplu, un studiu a evaluat toxicitatea nanoparticulelor de argint sintetizate din extract de Rheum ribes utilizând celule HUVEC [3].

5. Publicații cu celule HUVEC

Această secțiune a articolului va enumera câteva publicații de cercetare citate frecvent și interesante care prezintă celule HUVEC.

Un nou mecanism al acidului gamma-aminobutiric (GABA) care protejează celulele endoteliale din vena ombilicală umană (HUVEC) împotriva leziunilor oxidative induse de H2O2

Acest studiu a fost publicat în Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology (2019). Acesta a afirmat că acidul gamma-aminobutiric (GABA), un neurotransmițător, inhibă stresul oxidativ _indus_{de H2O2}în celulele HUVEC; astfel, acesta ar putea fi un agent farmacologic eficient împotriva bolilor cardiovasculare legate de leziunile oxidative.

Estrogenul reduce expresia gp130 în HUVEC prin reglarea ADAM10 și ADAM17 prin intermediul receptorului de estrogen

Acest studiu din Biochemical and Biophysical Research Communications (2020) a explorat modul în care estrogenul reglează un transductor de semnal, glicoproteina130 (gp130) în celulele HUVEC.

Rigiditatea substratului a reglementat migrația și potențialul de angiogeneză al celulelor A549 și HUVECs

Acest articol de cercetare din Journal of Cellular Physiology (2017) a investigat efectele variației rigidității substratului asupra migrației și angiogenezei celulelor endoteliale (A549 și HUVECs). Ei au efectuat testele de migrare și angiogeneză HUVEC pentru a evalua aceste efecte.

Depunerea lizozomală a nanoparticulelor de oxid de cupru declanșează moartea celulelor HUVEC

Această cercetare din Biomaterials (2018) investighează mecanismele potențiale responsabile de toxicitatea nanoparticulelor de oxid de cupru în celulele endoteliale vasculare.

Quercetina inhibă apoptoza și inflamația HUVECs indusă de TNF-α prin reglarea descendentă a căii de semnalizare NF-kB și AP-1 in vitro

Acest studiu din Medicine (2020) a propus că un compus natural, quercetina, suprimă apoptoza și inflamația HUVEC mediată de TNF-alfa prin reglarea căilor de semnalizare AP-1 și NF-kB.

430,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 300605

6. Resurse pentru linia celulară HUVEC: Protocoale, videoclipuri și multe altele

Următoarele sunt câteva resurse online disponibile privind celulele HUVEC.

Transfecția HUVEC: Această legătură web va oferi cunoștințe complete privind transfecția HUVEC. De exemplu, acesta include informații privind reactivii de transfecție și un protocol pentru transfecția HUVEC in vitro.

Următorul link conține protocolul de cultivare a celulelor HUVEC.

Cultura celulară HUVEC: Acest document vă va ajuta să învățați protocoalele de cultură celulară HUVEC pentru subcultură și manipularea culturilor crioprezervate.

Referințe

Zheng, J., și colab., LncRNA TTTY15 reglează leziunile celulelor endoteliale vasculare induse de hipoxie prin direcționarea miR-186-5p în bolile cardiovasculare. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
Wang, H. și colab. exozomii OSCC reglează miR-210-3p care vizează EFNA3 pentru a promova angiogeneza cancerului oral prin calea PI3K/AKT. BioMed research international, 2020. 2020.
Unal, İ. și S. Egri, Biosinteza nanoparticulelor de argint folosind extractul apos de Rheum ribes, caracterizarea și evaluarea toxicității sale asupra HUVECs și Artemia salina. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022: p. 1-14.