Celule endoteliale din vena ombilicală umană (HUVEC)
HUVEC sunt celule endoteliale primare care servesc ca instrument crucial în cercetarea biomedicală. Ele ajută cercetătorii să studieze angiogeneza, biologia vasculară și boli precum ateroscleroza și cancerul. HUVEC sunt utilizate pentru a explora comportamentul celulelor endoteliale, mecanismele de semnalizare celulară și testarea medicamentelor, oferind informații valoroase despre potențiale terapii sau tratamente pentru bolile cardiovasculare și cancer. De asemenea, servesc ca sistem model pentru studiile de biologie vasculară.
Originea și caracteristicile generale ale celulelor HUVEC
Cunoașterea originii și a caracteristicilor generale ale unei linii celulare este esențială pentru a decide dacă aceasta este potrivită pentru studiul dumneavoastră. Această secțiune vă va ajuta să aflați aceste informații esențiale despre celulele endoteliale HUVEC: Pentru ce sunt utilizate celulele HUVEC? Care este denumirea completă a celulelor HUVEC? Care sunt caracteristicile distinctive ale HUVEC? Care este morfologia HUVEC? Care este diametrul celulelor HUVEC? Care este dimensiunea celulelor HUVEC?
- Celulele HUVEC sunt extrase din endoteliul venei cordonului ombilical uman.
- Morfologia HUVEC este de tip endotelial. Acestea au de obicei o formă poligonală și un nucleu rotund în centru.
- Dimensiunea celulelor HUVEC este de 17 μm în diametru.
- Aceste celule endoteliale sunt diploide. Ele au un număr modal de cromozomi de 46.
HUVEC TERT2
HUVEC TERT2 este o linie celulară imortalizată derivată din celule endoteliale primare din vena ombilicală umană (HUVEC). Aceasta a fost dezvoltată prin introducerea genei telomerazei revers-transcriptazei umane (TERT) în genomul celulelor HUVEC. Această modificare a contribuit la prelungirea duratei de viață a acestora în cultură, permițând experimente pe termen mai lung fără limitările asociate cu HUVEC-urile primare.
Care este diferența dintre HUVEC și HMEC-1?
Structura și complexitatea liniilor celulare endoteliale HUVEC și HMEC-1 sunt comparabile. Cu toate acestea, celulele HMEC-1 prezintă o populație mai omogenă decât HUVEC în ceea ce privește dimensiunea și granularitatea celulelor. Acest lucru poate reduce variațiile datelor experimentale.
Informații privind cultivarea liniei celulare HUVEC
Această secțiune a articolului are ca scop să vă ofere cunoștințe esențiale despre cultura celulară HUVEC. Acest lucru vă va ajuta foarte mult în lucrul cu acestea. Aici veți găsi răspunsuri la următoarele întrebări frecvente: Care este timpul de dublare al HUVEC? Care este densitatea de însămânțare a HUVEC? Câte pasaje există în HUVEC? Ce este mediul celular HUVEC? Cum se cultivă HUVEC?
Puncte cheie pentru cultivarea celulelor HUVEC
Timpul de dublare:
Timpul de dublare al HUVEC este de aproximativ 23,5 ore. Cu toate acestea, acesta poate varia în funcție de condițiile de cultură celulară și de numărul de pasaje.
Aderente sau în suspensie:
HUVEC este o linie celulară aderentă. Celulele cresc și formează monostraturi.
Raportul de divizare:
Raportul de subcultivare pentru HUVEC este de 1:2 până la 1:4. Pentru însămânțare, celulele sunt spălate cu soluție salină tamponată cu fosfat 1x și se adaugă o soluție de disociere (Accutase) timp de 8 până la 10 minute la temperatura camerei. Ulterior, se adaugă mediu de cultură, iar celulele desprinse sunt centrifugate. Supernatantul este eliminat, iar peleta celulară este resuspendată cu grijă. Celulele sunt distribuite într-un nou flacon de cultură pentru creștere.
Mediu de creștere:
Mediul de creștere a celulelor endoteliale este utilizat pentru cultivarea celulelor HUVEC. Mediul este înlocuit la fiecare 2-3 zile. Celulele HUVEC pot fi utilizate pentru până la 8-10 pasaje.
Condiții de creștere:
Linia celulară endotelială umană (HUVEC) este menținută într-un incubator umidificat cu 5% CO2 la 37 °C.
Depozitare:
Celulele HUVEC sunt de obicei depozitate la o temperatură sub -150 °C într-un congelator cu temperatură ultra-scăzută sau în faza de vapori a azotului lichid. Acest lucru protejează viabilitatea celulelor pe termen lung.
Procesul de congelare și mediul:
Pentru conservarea celulelor HUVEC, se recomandă utilizarea mediilor de congelare CM-1 sau CM-ACF. În general, se recomandă un proces de congelare lentă, deoarece acesta permite o scădere a temperaturii de numai 1 °C pe minut, prevenind șocul celular și menținând viabilitatea.
Procesul de decongelare:
Pentru a decongela celulele congelate, plasați-le într-o baie de apă preîncălzită la 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde, până când rămâne doar un mic aglomerat de gheață. Apoi, adăugați mediu proaspăt în celule și centrifugați. Acest pas este necesar pentru a îndepărta orice resturi de mediu de congelare din celule. Resuspendeți peleta celulară și transferați celulele într-un flacon nou cu mediu de cultură.
Nivel de biosecuritate:
Pentru manipularea corespunzătoare a culturilor de celule HUVEC este necesar un laborator de nivel 1 de biosecuritate.
Publicat: 2023 | Ultima revizuire: mai 2026
- Avantaje și limitări
- Aplicații ale celulelor HUVEC în cercetare
- Publicații despre celulele HUVEC
- Informații privind cultivarea liniei celulare HUVEC
- Originea și caracteristicile generale ale celulelor HUVEC
- 6. Resurse pentru linia celulară HUVEC: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Întrebări frecvente
Avantaje și limitări
La fel ca alte linii celulare umane, celulele HUVEC au propriile avantaje și limitări. În această secțiune, vom analiza câteva dintre cele mai importante, care au un impact semnificativ asupra utilizării lor în cercetare.
Avantaje
Principalele avantaje ale celulelor HUVEC sunt:
-
Model de celule endoteliale
Modele extrem de relevante pentru studierea angiogenezei, a biologiei vasculare și a bolilor legate de funcția endotelială.
-
Ușor de cultivat
Relativ ușor de izolat din cordoanele ombilicale umane. Nu au cerințe exigente de cultivare celulară și sunt ușor de întreținut în laboratoarele de cercetare.
Limitări
Limitările asociate liniei celulare endoteliale HUVEC sunt:
-
Durată de viață limitată
Celulele HUVEC au o durată de viață limitată, de obicei fiind viabile pentru 8 până la 10 pasaje, ceea ce reprezintă o limitare pentru experimentele pe termen lung. Acestea pot suferi senescență pe măsură ce numărul de pasaje crește.
Aplicații ale celulelor HUVEC în cercetare
Celulele HUVEC au un potențial semnificativ pentru diverse aplicații în domeniul biomedical. În continuare, vom evidenția câteva utilizări importante ale celulelor HUVEC în cercetare.
- Studii privind bolile cardiovasculare: Linia celulară HUVEC este un model valoros de celule endoteliale, oferind astfel informații despre mecanismele care stau la baza bolilor cardiovasculare, cum ar fi ateroscleroza, tromboza și hipertensiunea. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a investiga mecanismele care stau la baza disfuncției endoteliale, stresului oxidativ și inflamației. De exemplu, un studiu realizat în 2020 a utilizat HUVEC și a explorat faptul că ARN-ul lung necodificat TTTY15 joacă un rol esențial în ameliorarea leziunilor celulelor endoteliale vasculare mediate de hipoxie, vizând axa miRNA-186-5p [1].
- Cercetarea cancerului: HUVEC-urile sunt ideale pentru studierea biologiei vasculare. Prin urmare, ele sunt utilizate pentru a explora angiogeneza tumorală și interacțiunile celulelor endoteliale. Acest lucru ajută cercetătorii să înțeleagă modul în care tumorile obțin un surplus de sânge și se proliferează. De exemplu, Hui Wang și colegii săi au descoperit că exozomii eliberați de celulele carcinomului scuamos oral (OSCC) cresc nivelurile de miRNA-210-3p și scad expresia ephrinei A3 în celulele HUVEC și promovează formarea tuburilor prin reglarea cascadei PI3K/AKT, așa cum a fost confirmat prin testul de formare a tuburilor HUVEC [2].
- Testarea medicamentelor: Celulele endoteliale HUVEC sunt utilizate pe scară largă pentru testarea medicamentelor. Cercetătorii pot evalua in vitro eficacitatea medicamentelor, toxicitatea și potențialele efecte secundare ale compușilor naturali, nanoparticulelor și altor agenți terapeutici folosind HUVEC. De exemplu, un studiu a evaluat toxicitatea nanoparticulelor de argint sintetizate din extract de Rheum ribes folosind celule HUVEC [3].
Publicații care prezintă celule HUVEC
Această secțiune a articolului va enumera câteva publicații de cercetare interesante și frecvent citate care prezintă celule HUVEC.
Acest studiu a fost publicat în Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology (2019). Acesta a arătat că acidul gamma-aminobutiric (GABA), un neurotransmițător, inhibă stresul oxidativ indus de H2O2 în celulele HUVEC; astfel, acesta ar putea fi un agent farmacologic eficient împotriva bolilor cardiovasculare legate de leziunile oxidative.
Acest studiu publicat în Biochemical and Biophysical Research Communications (2020) a explorat modul în care estrogenul reglează un transductor de semnal, glicoproteina 130 (gp130), în celulele HUVEC.
Rigiditatea substratului a reglat potențialul de migrare și angiogeneză al celulelor A549 și HUVEC
Acest articol de cercetare publicat în Journal of Cellular Physiology (2017) a investigat efectele variației rigidității substratului asupra migrației și angiogenezei celulelor endoteliale (A549 și HUVEC). Au fost efectuate teste de migrație și angiogeneză HUVEC pentru a evalua aceste efecte.
Depunerea lizozomală a nanoparticulelor de oxid de cupru declanșează moartea celulelor HUVEC
Această cercetare publicată în Biomaterials (2018) investighează mecanismele potențiale responsabile de toxicitatea nanoparticulelor de oxid de cupru în celulele endoteliale vasculare.
Acest studiu publicat în revista Medicine (2020) a propus că un compus natural, quercetina, suprimă apoptoza și inflamația HUVEC mediate de TNF-alfa prin reglarea căilor de semnalizare AP-1 și NF-kB.
6. Resurse pentru linia celulară HUVEC: protocoale, videoclipuri și multe altele
Iată câteva resurse online disponibile despre celulele HUVEC.
- Transfecția HUVEC: Acest link către un site web oferă informații complete privind transfecția HUVEC. De exemplu, include informații despre reactivi de transfecție și un protocol pentru transfecția HUVEC in vitro.
Următorul link conține protocolul de cultură celulară HUVEC.
- Cultura celulară HUVEC: Acest document vă va ajuta să învățați protocoalele de cultură celulară HUVEC pentru subcultivare și manipularea culturilor crioconservate.
Referințe
- Zheng, J., et al., LncRNA TTTY15 reglează leziunea celulelor endoteliale vasculare indusă de hipoxie prin țintirea miR-186-5p în bolile cardiovasculare. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
- Wang, H., et al., Exozomii OSCC reglează miR-210-3p care vizează EFNA3 pentru a promova angiogeneza cancerului oral prin calea PI3K/AKT. BioMed research international, 2020. 2020.
- Unal, İ. și S. Egri, Biosinteza nanoparticulelor de argint folosind extractul apos de Rheum ribes, caracterizarea și evaluarea toxicității sale asupra HUVEC-urilor și Artemia salina. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022: p. 1-14.