Linia celulară KG-1
CeluleleKG-1 constituie o linie celulară de leucemie de origine umană care este utilizată pe scară largă în cercetarea biomedicală. Acestea oferă diverse aplicații în imunologie, cancer și cercetare toxicologică. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a studia mecanismele bolilor și pentru a testa potențiale terapii. Acest articol va oferi informații complete despre linia celulară KG-1 care vă pot ajuta în activitatea dumneavoastră. În special, se va discuta despre:
- Caracteristicile generale și originea liniei celulare KG-1
- Informații privind cultivarea liniei celulare KG-1
- Linia celulară KG-1: Avantaje și limitări
- Aplicații ale celulelor KG-1 în cercetare
- Publicații privind celulele KG-1
- Resurse pentru linia celulară KG-1: Protocoale, videoclipuri și altele
1. Caracteristici generale și originea liniei de celule KG-1
Originea și caracteristicile generale ale unei linii celulare ajută un cercetător să decidă utilizarea acesteia în activitatea sa. Puteți investiga aceste informații înainte de a începe să lucrați pe ea. Această secțiune a articolului este despre originea și caracteristicile macrofagelor KG-1. Aici, veți afla: Ce sunt celulele KG-1? Ce este linia celulară KG-1a? Care este originea liniei celulare KG-1? Care este morfologia KG-1?
- KG-1 este o linie celulară de tip limfoblast derivată din aspiratul măduvei osoase a unui bărbat caucazian (59 de ani) cu leucemie mielogenă acută. Ea a fost stabilită de Koeffler și Golde în 1978. Aceste celule se află în principal în stadiul de maturare promielocitară sau mieloblastică [1].
- Celulele KG-1 au o morfologie asemănătoare limfoblastului.
- Cariotipul liniei celulare KG-1 prezintă un număr modal pseudodiploid de cromozomi.
KG-1 și KG-1a
KG-1a este o sublinie a celulelor KG-1 parentale. Aceasta a fost dezvoltată după 35 de treceri ale liniei celulare KG1. Aceasta este mai puțin diferențiată în comparație cu linia celulară KG-1. În plus, această sublinie este mai puțin matură din punct de vedere citochimic, morfologic și funcțional comparativ cu linia celulară parentală (KG-1).
2. Informații despre cultivarea liniei celulare KG-1
Această secțiune a articolului va acoperi toate informațiile imperative despre cultivarea celulelor KG-1 care vă pot ușura munca. Aici veți afla: Care este timpul de dublare al liniei celulare KG 1? Care sunt condițiile de cultură ale macrofagelor KG-1? Cum se fac culturile de celule KG-1?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor KG-1
|
Timpul de dublare: |
Timpul de dublare a KG-1 este de aproximativ 45 de ore. Cu toate acestea, acesta poate varia în funcție de condițiile de cultivare. |
|
Aderente sau în suspensie: |
Celulele KG-1 cresc în suspensie. |
|
Densitate celulară: |
Densitatea celulară optimă pentru linia celulară KG1 este de la 1 la 3 x105 celule/ml. Pentru subcultură, suspensia celulară este transferată într-un tub steril și centrifugată. Celulele recoltate sunt apoi adăugate cu mediu proaspăt și resuspendate cu atenție. Ulterior, celulele sunt distribuite în flacoane noi și cultivate la o densitate celulară optimă. Celulele pot fi divizate atunci când ating o densitate celulară maximă de 1 - 2 x106 celule/ml. |
|
Mediu de creștere: |
Pentru cultivarea celulelor KG-1 se utilizează IMDM (mediu Dulbecco modificat Iscove) care conține 10% FBS, 4,5 g/L glucoză, 4 mM L-glutamină, 1,0 mM piruvat de sodiu și 3,0 g/L NaHCO3. Mediul trebuie înlocuit după trei zile. |
|
Condiții de creștere: |
Linia celulară KG1 AML este cultivată într-un incubator umidificat la o temperatură de 37°C și cu un aport de 5% CO2. |
|
Depozitare: |
Celulele congelate sunt păstrate în faza de vapori a azotului lichid sau la o temperatură mai mică de -150 °C într-un congelator electric cu temperatură foarte scăzută pentru a proteja viabilitatea celulelor. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
CM-1 sau CM-ACF este adecvat pentru congelarea celulelor KG-1. Celulele sunt congelate folosind un proces de congelare lentă pentru a proteja celulele de orice șoc. Această metodă permite o scădere treptată a temperaturii cu 1 °C pe minut. |
|
Procesul de decongelare: |
Celulele se dezgheață într-o baie de apă preîncălzită la 37 °C până când rămâne o mică aglomerare de gheață. Celulele decongelate se adaugă la mediul proaspăt și se centrifughează pentru a elimina componentele mediului de congelare. Peletul celular este resuspendat cu grijă și turnat în flacoane noi care conțin mediu de creștere. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Laboratorul cu nivel de biosecuritate 1 este esențial pentru menținerea culturilor de celule KG-1. |
3. Linia celulară KG-1: Avantaje și limitări
Ca și alte linii celulare, linia celulară de leucemie mieloidă KG-1 este, de asemenea, asociată cu multe avantaje și limitări. În această secțiune, vom afla câteva dintre acestea, care pot fi cruciale în luarea deciziei de utilizare a acesteia în cadrul cercetării dumneavoastră.
Avantaje
Principalele avantaje ale celulelor KG-1 sunt:
-
Ușurința de cultivare
Celulele KG-1 sunt ușor de cultivat în laboratoarele de cercetare, având cerințe de cultură celulară necomplicate. Condițiile lor ușoare de întreținere și creștere oferă accesibilitate unui spectru larg de cercetători care dispun de instalații de cultură celulară de bază.
-
Model de leucemie mieloidă acută (AML)
Derivată de la un pacient de sex masculin cu leucemie mieloidă acută (LMA), linia celulară KG-1 LMA este un instrument valoros pentru investigarea biologiei LMA și pentru cercetarea potențialelor terapii, oferind informații despre mecanismele de bază ale acestei boli și despre strategiile de tratament.
limitări
Limitările asociate cu linia celulară KG1 sunt:
-
Model in vitro
Celulele KG-1 sunt un model in vitro valoros pentru cercetarea LMA; cu toate acestea, este important să rețineți că este posibil ca acestea să nu reproducă pe deplin complexitatea bolii in vivo, servind drept model celular simplificat care ar putea să nu cuprindă toate aspectele biologiei LMA.
4. Aplicații ale celulelor KG-1 în cercetare
KG-1 oferă mai multe aplicații promițătoare în cercetarea biomedicală. Unele dintre cele mai importante utilizări în cercetare ale macrofagelor KG1 includ:
- Cercetarea cancerului: Celulele KG-1 au fost derivate de la un pacient cu leucemie mieloidă acută și, prin urmare, sunt considerate un instrument de cercetare valoros pentru investigarea biologiei LMA. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a studia mecanismele celulare și moleculare care determină dezvoltarea, creșterea și rezistența la medicamente a LMA. Aceasta implică, de asemenea, identificarea și descoperirea de noi biomarkeri, mutații genetice și căi de semnalizare asociate cu LMA. Cum ar fi, un studiu efectuat în 2019 a investigat faptul că ARN-ul lung necodificator linc00239 facilitează rezistența la doxorubicină și comportamentul malign în celulele leucemiei mieloide acute, KG-1. Studiul ulterior a arătat că lncRNA activează semnalizarea PI3K/Akt/mTOR pentru a exercita aceste efecte în celulele AML [2].
- Toxicologie: Linia celulară KG1 este utilizată pe scară largă în cercetarea toxicologică. Cercetătorii testează toxicitatea și eficacitatea potențialilor agenți terapeutici, inclusiv medicamente chimioterapeutice și terapii țintite pe celulele KG1 de leucemie mieloidă, pentru a identifica candidați promițători pentru viitoare evaluări preclinice și clinice. Cercetarea efectuată în 2018 a analizat toxicitatea nano-niosomilor care conțin doxorubicină pe linia celulară KG1 AML. Studiul a propus că nano-niosomul este un purtător adecvat pentru administrarea de medicamente, deoarece sporește eficacitatea tratamentului [3]. Într-o altă investigație, cercetătorii au explorat efectele terapeutice ale ceaiului de urzică preparat din frunzele plantei Urtica dioica. Studiul a arătat că acest extract apos din frunze de plantă exercită efecte antitumorale în celulele leucemiei mieloide acute, KG-1 și U937 [4].
5. Publicații privind celulele KG-1
Această secțiune a articolului enumeră câteva publicații de cercetare interesante privind celulele KG-1.
Această lucrare a fost publicată în Journal of Cellular Physiology (2019). Studiul a propus că compusul quercetin sensibilizează linia celulară KG1 AML împotriva ligandului indus de apoptoză legat de TNF (TRAIL) și poate amplifica efectul citotoxicității induse de TRAIL în celule.
Acest articol din Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) a propus că downreglementarea factorului de transcripție 8 asemănător lui krüppel suprimă proliferarea celulelor LMA și glicoliza, încurajând apoptoza prin reglarea căii de semnalizare AKT/mTOR.
Acest studiu din Cell Journal (Yakhteh) (2020) a explorat efectele potențiale ale trioxidului de arsenic și sorafenibului asupra celulelor U937 și KG-1.
Acest studiu publicat în Medical Oncology (2020) a evaluat OXPHOS și glicoliza ca ținte terapeutice în linia celulară de LMA, KG-1.
Această publicație Drug Design, Development, and Therapy, 2020 a propus că compușii de curcumină și talidomidă exercită sinergic efecte apoptotice în celulele KG-1 prin scăderea expresiei STAT3 și Bcl-xL.
6. Resurse pentru linia celulară KG-1: Protocoale, înregistrări video și altele
Următoarele sunt câteva resurse online disponibile privind celulele KG-1.
- Subcultură de celule în suspensie: Acest videoclip descrie protocolul de subcultură a culturilor de celule în suspensie precum KG-1.
Următorul link conține protocolul culturii de celule KG-1:
- Linia celulară KG-1: Acest site web conține informații de bază privind cultura celulară a liniei celulare KG-1. Acesta include informații despre mediile liniei celulare și protocoale pentru subcultură și manipularea culturilor crioprezervate și proliferative.
Referințe
- Pelliccia, F., V. Ubertini și N. Bosco, The importance of molecular cytogenetic analysis prior to using cell lines in research: The case of the KG-1a leukemia cell line. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., și colab.,ARN-ul lungnecodificatorlinc00239 promovează comportamentele maligne și chimiorezistența la doxorubicină parțial prin activarea căii PI3K/Akt/mTOR în celulele leucemiei mieloide acute. Rapoarte de oncologie, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Prepararea și studiul nano-niosomilor care conțin doxorubicină și evaluarea toxicității acestora pe linia celulară KG-1 de leucemie mieloblastică acută. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., și colab., Ceaiul de urzică inhibă creșterea celulelor leucemiei mieloide acute in vitro prin promovarea apoptozei. Nutrienți, 2020. 12(9): p. 2629.