Celule SH-SY5Y - Cercetarea neuroblastomului și relevanța neuroștiințifică a celulelor SH-SY5Y

Linia celulară SH-SY5Y, derivată din neuroblastom uman, este utilizată pe scară largă în cercetarea medicală pentru investigarea bolilor neurodegenerative și dezvoltarea de medicamente. Cercetătorii utilizează aceste celule în forma lor originală nediferențiată sau le diferențiază în celule asemănătoare neuronilor.

Informații generale și originea liniei celulare SH-SY5Y

Această secțiune va cuprinde informații de bază despre linia celulară SH-SY5Y, inclusiv originea, definiția și structura sa celulară. Vom aborda întrebări precum morfologia sa și originea celulelor.

SH-SY5Y este o linie celulară de origine umană care provine din subclonarea liniei celulare de neuroblastom SK-N-SH în 1970.
Linia celulară mamă, SK-N-SH, a fost dezvoltată din biopsia de măduvă osoasă a unei paciente de patru ani cu neuroblastom.
Celulele SH-SY5Y sunt fenotipic adrenergice și exprimă markeri dopaminergici, ceea ce le face un model in vitro util pentru studiul bolilor neurodegenerative, al neurogenezei și al caracteristicilor celulelor cerebrale [1].
Celulele SH-SY5Y cresc sub formă de aglomerări de celule neuroblastice viabile cu neurite și sunt slab aderente.
Dimensiunea celulelor SH-SY5Y este de 12 μm.
Numărul modal de cromozomi pentru celulele SH-SY5Y este 47 și acestea posedă un marker rar al cromozomului numărul 1, trisomia 1q, cauzată de inserția unei copii suplimentare a segmentului 1q în brațul lung al cromozomului 1.

Cultivarea celulelor SH-SY5Y

În laboratoarele de cercetare neurobiologică, celulele SH-SY5Y sunt cele mai cultivate celule de neuroblastom. Pentru a lucra cu aceste celule, este esențial să înțelegeți ce tip de mediu de creștere este potrivit pentru cultivarea lor, caracteristicile lor de creștere, densitatea optimă de însămânțare și metoda adecvată de congelare. Această secțiune va furniza informații esențiale privind cultivarea celulelor SH-SY5Y pentru a vă ajuta cu aceste aspecte.

Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor SH-SY5Y

Timpul de dublare a populației: Timpul mediu de dublare a populației pentru celulele SH-SY5Y este de aproximativ 3 până la 4 zile.

Aderente sau în suspensie: SH-SY5Y sunt celule slab aderente. Ele cresc sub formă de aglomerări atunci când sunt însămânțate la o densitate mare.

Densitatea de însămânțare: Densitatea optimă de însămânțare pentru SH-SY5Y este de 1 x 104 celule/cm2. Culturile SH-SY5Y sunt formate atât din celule aderente, cât și din celule flotante.

Mediu de creștere: Mediul DMEM:Ham's F12 suplimentat cu 3,1 g/L glucoză, 10% FBS și 1,6 mM L-glutamină este ideal pentru creșterea liniei celulare SH-SY5Y.

Condiții de creștere (temperatură, CO2): Celulele SH-SY5Y sunt cultivate la o temperatură de 37°C într-un incubator umidificat cu un aport de 5% CO2.

Depozitare: Pentru a menține viabilitatea celulelor SH-SY5Y, acestea sunt stocate în faza de vapori de azot lichid la o temperatură sub -150°C.

Procesul de congelare și mediul: Mediile de congelare CM-1 sau CM-ACF sunt utilizate pentru a congela celulele SH-SY5Y. Pentru congelarea acestei linii celulare de neuroblastom se optează pentru o metodă de congelare lentă care scade treptat temperatura cu 1°C.

Procesul de decongelare: Fiolele congelate care conțin celule SH-SY5Y sunt plasate într-o baie de apă reglată la temperatura de 37°C. Fiola este agitată rapid până când celulele se dezgheață și rămâne doar o mică aglomerare de gheață.

Nivelul de biosecuritate: Celulele SH-SY5Y pot fi cultivate într-un laborator cu nivel de biosecuritate 1.

Celule SH-SY5Y la confluență medie și înaltă.

Celule SH-SY5Y: Avantaje și limitări

Avantaje

Diferențierea în neuroni: Celulele SH-SY5Y pot fi diferențiate în neuroni funcționali folosind compuși specifici, oferind o alternativă mai convenabilă la neuronii primari și evitând preocupările etice asociate cu utilizarea acestora [2].
Model in vitro pentru bolile neurodegenerative: Expresia markerilor moleculari, inclusiv a markerilor neuronali dopaminergici, face ca celulele SH-SY5Y să fie potrivite pentru studierea afecțiunilor neurodegenerative precum Parkinson.

Limitări

Ciclu celular nesincronizat: Culturile de celule SH-SY5Y prezintă cicluri celulare nesincronizate într-o stare nediferențiată [3].
Stare de diferențiere nedefinită: Celulele SH-SY5Y au o stare de diferențiere nedefinită care variază de la o stare de neuroblastom tumorigen până la neuroni postmitotici sau celule progenitoare neurale. Ele nu exprimă markerii moleculari pe care îi exprimă celulele neuronale mature [4].

Celule SH-SY5Y pentru neurofarmacologie in vitro și descoperirea medicamentelor

430,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 300154

Aplicații ale celulelor SH-SY5Y

Cercetarea bolilor neurodegenerative: Celulele SH-SY5Y sunt utilizate pentru a studia tulburările neurodegenerative, cum ar fi boala Alzheimer și boala Parkinson. De exemplu, un studiu a tratat celulele SH-SY5Y cu peptida β amiloidă 1-42 pentru a stabili un model in vitro al bolii Alzheimer. Linia celulară dezvoltată a fost apoi transfectată cu pcDNA-17A și 17A shRNA pentru a examina efectul ARN lung necodificator 17A asupra celulelor similare bolii Alzheimer. Studiul a arătat că LncRNA-17A reglează apoptoza și autofagia celulelor SH-SY5Y, imitând AD [5].

Dezvoltarea medicamentelor: Celulele SH-SY5Y sunt utilizate pentru depistarea și validarea medicamentelor pentru efectul lor terapeutic împotriva bolilor neurodegenerative. De exemplu, un studiu efectuat în 2021 a indus parkinsonismul în celulele SH-SY5Y folosind un erbicid (Paraquat) și apoi a folosit aceste celule pentru a investiga potențialul terapeutic al unui flavonoid, Naringenin. Compusul a demonstrat un efect protector împotriva neurodegenerării și neurotoxicității mediate de boala Parkinson în modelele celulare, indicând potențialul său pentru dezvoltarea tratamentelor pentru PD [6].

Publicații de cercetare cu celule SH-SY5Y

Există numeroase studii de cercetare privind celulele SH-SY5Y. Această secțiune va acoperi câteva exemple semnificative.

LncRNA17A reglează autofagia și apoptoza liniei celulare SH-SY5Y ca model in vitro pentru boala Alzheimer: În această publicație, s-a propus că LncRNA17A mediază apoptoza și autofagia celulelor SH-SY5Y transformate experimental în modelul bolii Alzheimer.
Naringenina ameliorează pierderea neuronală dopaminergică indusă de paraquat în celulele SH-SY5Y și într-un model de șobolan al bolii Parkinson: Acest studiu a sugerat compușii Naringenin ca un neuroprotector împotriva unui model celular și animal dezvoltat experimental al bolii Parkison.
Caracterizarea biochimică a liniei celulare SH-SY5Y proliferative și diferențiate ca model pentru boala Parkinson: Celulele SH-SY5Y diferențiate au fost utilizate pentru caracterizarea și evaluarea mai multor procese biochimice frecvent studiate în boala Parkinson.
Efectele in vitro ale acitretinei asupra celulelor neuronale umane SH-SY5Y: Celulele SH-SY5Y au fost utilizate pentru a studia diferențierea neuronală. Cercetătorii au investigat faptul că Acitretin promovează diferențierea neuronală și tratează tulburările neurodegenerative și de neurodezvoltare și tumorile cerebrale.
Transformarea liniei de celule SH-SY5Y în celule asemănătoare neuronilor: Investigarea modificărilor electrofiziologice și biomecanice: Acest studiu a transformat celulele de blastom neural SH-SY5Y în neuroni prin tratarea acestora cu acid retinoic și molecule de factor neurotrofic derivat din creier (BDNF) și a examinat modificările biochimice și electrofiziologice ale acestora.

Resurse pentru celulele SH-SY5Y: Protocoale, videoclipuri și multe altele

Sunt disponibile mai multe resurse online privind această linie celulară celebră de neuroblastom. Aceste resurse vă pot instrui cu privire la manipularea și întreținerea culturilor SH-SY5Y.

Protocoale de cultură celulară

Următoarele articole de pe site vă pot ajuta să învățați metodele de cultivare, congelare și decongelare a celulelor SH-SY5Y.

Cultivarea celulelor SH-SY5Y:Informații de bazădespre celulele SH-SY5Y, inclusiv decongelarea, înghețarea și subculturile de celule.
Subcultură SH-SY5Y: Prezintă informații despre mediul de creștere utilizat și etapele de subcultură pentru celulele SH-SY5Y.
Transfectarea celulelor SH-SY5Y: Acest document descrie un protocol de transfecție tranzitorie pentru linia celulară SH-SY5Y.
Protocol de diferențiere: Acest videoclip explică protocolul de diferențiere a celulelor SH-SY5Y.

Ne așteptăm ca acest articol să ofere informații utile cu privire la manipularea, cultivarea și utilizarea celulelor SH-SY5Y în studiile de cercetare; dacă doriți să lucrați cu această linie celulară de neuroblastom, luați în considerare posibilitatea de a comanda de la noi.

Linia celulară SH-SY5Y: Întrebări frecvente

Referințe

Carvajal-Oliveros, A., et al., Linia celulară BE (2)-M17 are un fenotip dopaminergic mai bun decât SH-SY5Y, utilizată în mod tradițional pentru cercetarea bolii Parkinson, care este în principal serotoninergică. IBRO Neuroscience Reports, 2022. 13: p. 543-551.
Kovalevich, J. și D. Langford, Considerations for the use of SH-SY5Y neuroblastoma cells in neurobiology. Neuronal cell culture: methods and protocols, 2013: p. 9-21.
Martin, E.-R., J. Gandawijaya și A. Oguro-Ando, O nouă metodă de generare a celulelor glutamatergice SH-SY5Y asemănătoare neuronilor utilizând suplimentul B-27. Frontiers in Pharmacology, 2022: p. 4042.
Feles, S., et al., Raționalizarea condițiilor de cultură pentru linia celulară de neuroblastom SH-SY5Y: o condiție prealabilă pentru studiile funcționale. Metode și protocoale, 2022. 5(4): p. 58.
Wang, X., M. Zhang și H. Liu, LncRNA17A reglează autofagia și apoptoza liniei celulare SH-SY5Y ca model in vitro pentru boala Alzheimer. Bioscience, biotehnologie și biochimie, 2019. 83(4): p. 609-621.
Ahmad, M.H., și colab., Naringenina ameliorează pierderea neuronală dopaminergică indusă de paraquat în celulele SH-SY5Y și un model de șobolan al bolii Parkinson. Neurofarmacologie, 2021. 201: p. 108831.