celulele 4T1 - Perspective esențiale în cercetarea și aplicațiile celulelor pentru cancerul mamar
4T1 este o linie celulară murină transplantabilă de cancer mamar. Aceasta este utilizată pe scară largă ca model tumoral in vitro genetic identic pentru investigarea cancerului de sân uman. celulele 4T1 sunt foarte invazive și tumorigene; ele tind să metastaze de la locul tumorii primare din glanda mamară la alte locuri, inclusiv ficatul, ganglionii limfatici, plămânii, oasele și creierul, fiind astfel ideale pentru studiul metastazelor cancerului de sân [1].
Caracteristicile generale și originea celulelor 4T1
Cunoașterea originii și a caracteristicilor generale ale unei linii celulare este esențială înainte de a lucra cu aceasta. Aici, în această secțiune, am menționat elementele de bază ale celulelor 4T1 de cancer mamar. De exemplu, ce sunt celulele 4T1? Care sunt caracteristicile liniei celulare 4t1? Care este originea liniei celulare 4T1? Care este morfologia liniei celulare 4T1?
- 4T1 este o linie celulară tumorală mamară care provine dintr-o tumoră mamară apărută spontan la șoarecele din tulpina BALB/c. Aceste celule foarte invazive și tumorigene imită îndeaproape comportamentul cancerului mamar uman în ceea ce privește creșterea și răspândirea metastatică. În mod specific, modelul tumoral 4T1 investighează cancerul de sân triplu negativ (TNBC).
- celulele 4T1 sunt aderente și au o morfologie asemănătoare celulelor epiteliale.
linia celulară 4T1 vs EMT-6
4T1 și EMT-6 sunt modele celulare murine, neimunogene, pentru studiile privind cancerul de sân triplu-negativ. Aici, 4T1 sunt celule tumorale mai agresive și invazive decât EMT-6 cu proprietăți mai puțin invazive [2].
celulele 4T1 vs 4T07
4T07 este, de asemenea, o linie celulară de cancer de șoarece. Diferența majoră dintre celulele 4T1 și 4T07 este următoarea; celulele 4T1 pot părăsi locul tumorii primare și se pot răspândi pentru a forma metastaze secundare vizibile, în timp ce celulele 4T07 nu pot forma metastaze vizibile, deși părăsesc locul primar [3].
Informații privind cultivarea liniei celulare 4T1
linia celulară de cancer mamar 4T1 oferă aplicații extinse de cercetare în domeniul biomedical. Pentru cultivarea acestor celule, ar trebui să parcurgeți următoarele puncte-cheie care descriu; ce este timpul de dublare 4T1? Cum sunt cultivate celulele 4T1? Care este densitatea de însămânțare a celulelor 4T1?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor 4T1
|
Timpul de dublare: |
Timpul mediu de dublare a populației raportat pentru celulele 4T1 de cancer mamar este de 14 ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
4T1 este o linie celulară aderentă. |
|
Raport de subcultivare: |
Se recomandă un raport de divizare de 1:6 și 1:8 pentru linia celulară de cancer mamar triplu negativ 4T1. Pentru divizare, celulele sunt clătite cu PBS și incubate cu enzima Accutase timp de 8 până la 10 minute. Celulele disociate sunt colectate prin centrifugare și resuspendate într-un mediu proaspăt. Celulele resuspendate sunt distribuite în balonul nou pentru creștere. |
|
Mediu de creștere: |
Mediul RPMI 1640 este utilizat pentru cultivarea celulelor 4T1. în mediul de cultură se adaugă 10% ser fetal bovin (FBS), 2,0 g/L NaHCO3 și 2,1 mM glutamină stabilă pentru creșterea ideală a celulelor. |
|
Condiții de creștere: |
celulele tumorale 4T1 sunt păstrate într-un incubator umidificat la 37°C cu o alimentare cu 5%CO2. |
|
Depozitare: |
celulele 4T1 trebuie depozitate la o temperatură sub -150 °C, adică în congelator electric sau în faza de vapori a azotului lichid, pentru a menține viabilitatea celulară. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
CM-1 sau CM-ACF sunt recomandate pentru linia celulară 4T1. Se preferă o metodă de congelare lentă, deoarece aceasta protejează viabilitatea celulară permițând o scădere treptată a temperaturii cu 1 °C. |
|
Procesul de decongelare: |
Flaconul cu celule congelate este ținut într-o baie de apă la 37°C timp de câteva secunde până când celulele se dezgheață și rămâne doar o mică aglomerare de gheață. Aceste celule sunt resuspendate în mediu proaspăt și turnate în flacon pentru cultivare. După 24 de ore de incubare, mediul este înlocuit pentru a elimina componentele mediului care îngheață. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Pentru cultivarea celulelor cancerului mamar 4T1 se recomandă un laborator cu nivel de biosecuritate 1. |
linia celulară 4T1: Avantaje și dezavantaje
Această secțiune a articolului va acoperi avantajele și dezavantajele asociate cu modelul metastatic 4T1.
Avantaje
Principalele avantaje ale liniei celulare 4T1 sunt:
- Tumorigenicitate:
4T1 este o linie celulară foarte tumorigenă. Atunci când sunt injectate într-un șoarece, aceste celule au capacitatea de a forma un model de șoarece 4T1 syngeneic pentru studiul cancerului de sân. Prin urmare, modelul 4T1 este utilizat în mod ideal pentru a studia dezvoltarea, creșterea și metastazarea tumorilor. În plus, este util pentru depistarea și evaluarea medicamentelor terapeutice.
- Model metastatic in vitro:
modelul 4T1 are o tendință naturală de metastazare care permite cercetătorilor să investigheze eficient mecanismele și căile subiacente implicate în procesul de metastazare. În plus, celulele 4T1 sunt rezistente la 6-tioguanină. Acest lucru ajută la detectarea eficientă a celulelor micrometastatice cu o precizie îmbunătățită în comparație cu alte modele, deoarece elimină necesitatea de a cântări organele țintă și de a număra nodulii.
Dezavantaje
Dezavantajul asociat cu linia celulară 4T1 este:
- Agresivitate/rapidă rată de creștere:
linia celulară 4T1 este o linie celulară de cancer mamar triplu negativ foarte agresivă. Din cauza ratei rapide de creștere, utilizarea acestei linii celulare în experimente pe termen lung și controlul variabilelor experimentale devin o provocare.
Achiziționați linia celulară 4T1: model de cancer de sân de înaltă calitate
linia celulară 4T1: Aplicații în cercetarea cancerului
Linia celulară model de șoarece 4T1 este un instrument de cercetare valoros pentru studiul biologiei cancerului și evaluarea noilor tratamente. Aplicațiile majore ale celulelor 4T1 sunt enumerate aici:
Biologia cancerului
Linia celulară 4T1 este utilizată pe scară largă pentru a studia dezvoltarea și creșterea cancerului. Este un model in vitro ideal pentru investigarea și explorarea diferitelor mecanisme celulare și moleculare implicate în progresia tumorală și metastază. În plus, poate dezvălui rolul căilor de semnalizare celulară, al micro-mediului și al expresiei genice în aceste procese. Cercetările efectuate în 2019 au utilizat celule 4T1 pentru a descoperi mecanismele care stau la baza invaziei și migrației celulelor canceroase. Rezultatele au arătat că genele STAT3, MMP2 și MMP9 sunt implicate, iar inhibarea acestor gene poate restricționa semnificativ migrația și invazia celulelor canceroase [4]. Studii similare au indicat, de asemenea, mai multe alte căi de semnalizare implicate în dezvoltarea tumorală și metastază.
În plus, modelul 4T1 este esențial în înțelegerea micro-mediului cancerului de sân, inclusiv infiltrarea celulelor imune și creșterea tumorii primare. Studiile axate pe micro-mediul tumoral 4T1 au arătat informații semnificative cu privire la rolul celulelor imune și al citokinelor, cum ar fi expresia CXCL13, în progresia tumorală. Modelul ajută, de asemenea, la investigarea nișelor metastatice și a metastazelor tumorale, în special în stadiile avansate ale cancerului de sân, unde colonizarea carcinomului mamar este prevalentă.
Cercetarea terapiei împotriva cancerului
Linia celulară 4T1 este aplicată pe scară largă în cercetarea terapiei cancerului pentru depistarea și evaluarea noilor tratamente. Un studiu a explorat potențialul citotoxic al nanoparticulelor de fier sintetizate verde din extract de rozmarin (Rosemary-FeNPs) și extractul pur de rozmarin pe linia celulară 4T1. Rezultatele cercetării au propus că Rosemary-FeNPs sunt mai promițătoare decât extractul pur [5]. În mod similar, un studiu efectuat în 2021 a examinat potențialul antitumoral al extractului de ghimbir în celulele cancerului de sân 4T1 și un model de șoarece 4T1 [6].
În plus față de extractele naturale, linia celulară 4T1 este utilizată pentru a evalua eficacitatea agenților chimioterapeutici tradiționali. De exemplu, cercetările care implică combinarea cisplatinei cu alte terapii au arătat o moarte sporită a celulelor tumorale și o progresie redusă a tumorii în modelul 4T1. Introducerea luciferazei de licurici în celulele 4T1 a permis imagistica în timp real a creșterii tumorii și a fenotipului metastatic, facilitând evaluarea impactului diferitelor tratamente.
În plus, rezistența liniei celulare 4T1 la 6-tioguanină a facilitat studiile asupra celulelor micrometastatice, îmbunătățind detectarea și analiza metastazelor. Această linie celulară joacă, de asemenea, un rol crucial în studiul imunității antitumorale și al efectelor imunoterapiei, în special în contextul modelelor orthotopice de șoareci, unde cercetătorii pot imita îndeaproape cancerele umane.
În general, linia celulară 4T1 rămâne un instrument indispensabil în cercetarea oncologică, de la înțelegerea mecanismelor fundamentale ale biologiei cancerului la dezvoltarea și testarea de noi strategii terapeutice.
celule 4T1: Publicații de cercetare
Această secțiune de articole va acoperi câteva publicații interesante și cele mai citate privind celulele 4T1.
Acest articol a fost publicat în 2018 în Journal of Photochemistry and Photobiology. Cercetarea a propus că nanoparticulele de argint sintetizate din Madhuca longifolia exercită un efect antiproliferativ în celulele tumorale 4T1 prin degradarea peretelui celular și generarea de ROS.
Citotoxicitatea și efectele apoptotice ale verbascosidei asupra liniei celulare 4T1 de cancer mamar
Acest studiu din revista BMC Pharmacology and Toxicology (2021) a propus că verbascoside, un compus natural, a indus efecte apoptotice în celulele cancerului de sân 4T1 prin semnalizarea TLR4.
Această cercetare a fost publicată în Integrative Cancer Therapies în 2020. Acest studiu a folosit celule 4T1 pentru a dezvolta un model de șoarece 4T1 syngeneic și a explorat potențialul anticancerigen al Eupatorin folosind acesta. Eupatorin a întârziat dezvoltarea tumorilor în modelul de șoarece 4T1.
Această cercetare publicată în Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018) a propus că o plantă medicinală, Viola odorata, are potențiale efecte citotoxice asupra celulelor 4T1.
Acest studiu a propus că nanoparticulele lipidice solide încărcate cu docetaxel (SLN încărcate cu DTX) pot fi un agent promițător pentru tratarea cancerului mamar și prevenirea metastazelor, deoarece limitează creșterea cancerului și metastazele pulmonare ale celulelor 4T1.
Resurse pentru linia celulară 4T1: Protocoale, videoclipuri și multe altele
Următoarele sunt câteva resurse privind celulele 4T1:
- tutorial de transfecție 4T1: Acest videoclip este un ghid pas cu pas pentru efectuarea transfecției liniei celulare 4T1.
- Subcultura unei linii celulare: Acest videoclip explică protocolul de subcultură pentru liniile celulare aderente.
Următorul link conține protocolul de cultură celulară pentru celulele 4T1:
- linia celulară 4T1: Această legătură web conține toate informațiile utile privind manipularea culturilor 4T1. Acesta conține informații despre mediile de cultură, protocoale de manipulare a culturilor crioconservate și a culturilor proliferante.
Întrebări frecvente despre linia celulară 4T1
Referințe
- Pulaski, B.A. și S. Ostrand-Rosenberg, Mouse 4T1 breast tumor model. Curr Protoc Immunol, 2001. Capitolul 20: p. Unitatea 20.2.
- Maxwell, K.G., Imunomodularea celulelor cancerului de sân pentru vaccinarea întregii tumori. 2016.
- Walker, I., et al., Tumorile mamare induc expresia centrală a citokinelor proinflamatorii, dar nu și deficite comportamentale la șoarecii Balb/C. Rapoarte științifice, 2017. 7(1): p. 1-13.
- Li, Y., et al., Inhibarea căii de semnalizare Stat3 de către produsul natural pectolinarigenin atenuează metastaza cancerului de sân. Frontiere în farmacologie, 2019. 10: p. 1195.
- Farshchi, H.K., et al., Sinteza verde a nanoparticulelor de fier prin extract de rozmarin și evaluarea efectului citotoxic asupra liniilor celulare canceroase. Biocataliză și biotehnologie agricolă, 2018. 16: p. 54-62.
- Gholizadeh, A.P., et al., Efectul extractului de ghimbir asupra liniei celulare de cancer de sân 4T1 la șoarecele Balb/c. Medicamente clinice pentru cancer, 2021. 8(1): p. 43-49.