Células SH-SY5Y - Investigação sobre neuroblastoma e a relevância neurocientífica das células SH-SY5Y

A linha celular SH-SY5Y, derivada do neuroblastoma humano, é amplamente utilizada na investigação médica para investigar doenças neurodegenerativas e desenvolver medicamentos. Os investigadores utilizam estas células na sua forma indiferenciada original ou diferenciam-nas em células que se assemelham a neurónios.

Informações gerais e origem da linha celular SH-SY5Y

Esta secção abordará informações básicas sobre a linha celular SH-SY5Y, incluindo a sua origem, definição e estrutura celular. Abordaremos questões como a sua morfologia e a origem das células.

A SH-SY5Y é uma linha celular derivada de humanos que teve origem na subclonagem da linha celular de neuroblastoma SK-N-SH em 1970.
A linha celular mãe, SK-N-SH, foi desenvolvida a partir da biópsia da medula óssea de uma doente com neuroblastoma de quatro anos de idade.
As células SH-SY5Y são fenotipicamente adrenérgicas e expressam marcadores dopaminérgicos, o que as torna um modelo in vitro útil para o estudo de doenças neurodegenerativas, neurogénese e caraterísticas das células cerebrais [1].
As células SH-SY5Y crescem como aglomerados de células neuroblásticas viáveis com neurites e são pouco aderentes.
O tamanho das células SH-SY5Y é de 12 μm.
O número cromossómico modal das células SH-SY5Y é 47, e estas possuem um marcador raro do número cromossómico 1, a trissomia do 1q, causada pela inserção de uma cópia extra do segmento 1q no braço longo do cromossoma 1.

Cultura de células SH-SY5Y

Nos laboratórios de investigação neurobiológica, as células SH-SY5Y são as células de neuroblastoma mais cultivadas. Para trabalhar com estas células, é essencial compreender que tipo de meio de crescimento é adequado para a sua cultura, as suas caraterísticas de crescimento, a densidade de sementeira ideal e o método correto para as congelar. Esta secção fornecerá informações essenciais sobre a cultura de células SH-SY5Y para o ajudar nestes aspectos.

Pontos-chave para a cultura de células SH-SY5Y

Tempo de duplicação da população: O tempo médio de duplicação da população para as células SH-SY5Y é de aproximadamente 3 a 4 dias.

Aderentes ou em suspensão: As células SH-SY5Y são células pouco aderentes. Crescem como aglomerados quando semeadas a uma densidade elevada.

Densidade de sementeira: A densidade de sementeira óptima para SH-SY5Y é de 1 x 104 células/cm2. As culturas de SH-SY5Y consistem em células aderentes e flutuantes.

Meio de crescimento: O meio DMEM:Ham's F12 suplementado com 3,1 g/L de glucose, 10% de FBS e 1,6 mM de L-glutamina é ideal para o crescimento da linha celular SH-SY5Y.

Condições de crescimento (temperatura, CO2): As células SH-SY5Y são cultivadas a uma temperatura de 37°C numa incubadora humidificada com um fornecimento de 5% de CO2.

Armazenamento: Para manter a viabilidade das células SH-SY5Y, estas são armazenadas na fase de vapor do azoto líquido a uma temperatura inferior a -150°C.

Processo e meio de congelação: Os meios de congelação CM-1 ou CM-ACF são utilizados para congelar as células SH-SY5Y. Para congelar esta linha de células de neuroblastoma, opta-se por um método de congelação lenta que diminui gradualmente a temperatura em 1°C.

Processo de descongelação: Os frascos congelados que contêm células SH-SY5Y são colocados num banho de água a uma temperatura de 37°C. O frasco é agitado rapidamente até que as células descongelem e reste apenas um pequeno aglomerado de gelo.

Nível de biossegurança: As células SH-SY5Y podem ser cultivadas num laboratório de nível de biossegurança 1.

Células SH-SY5Y em confluência média e alta.

Células SH-SY5Y: Vantagens e limitações

Vantagens

Diferenciação em neurónios: As células SH-SY5Y podem ser diferenciadas em neurónios funcionais utilizando compostos específicos, constituindo uma alternativa mais conveniente aos neurónios primários e evitando as preocupações éticas associadas à sua utilização [2].
Modelo in vitro para doenças neurodegenerativas: A expressão de marcadores moleculares, incluindo marcadores neurais dopaminérgicos, torna as células SH-SY5Y adequadas para o estudo de doenças neurodegenerativas como a doença de Parkinson.

Limitações

Ciclo celular não sincronizado: As culturas de células SH-SY5Y apresentam ciclos celulares não sincronizados num estado indiferenciado [3].
Estado de diferenciação indefinido: As células SH-SY5Y têm um estado de diferenciação indefinido que varia de um estado de neuroblastoma tumorigénico a neurónios pós-mitóticos ou células progenitoras neurais. Não expressam os marcadores moleculares que as células neuronais maduras expressam [4].

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Número do produto: 300154

Aplicações das células SH-SY5Y

Investigação de doenças neurodegenerativas: As células SH-SY5Y são utilizadas para estudar doenças neurodegenerativas, como a doença de Alzheimer e a doença de Parkinson. Por exemplo, um estudo tratou as células SH-SY5Y com o péptido β amiloide 1-42 para estabelecer um modelo in vitro da doença de Alzheimer. A linha celular desenvolvida foi então transfectada com pcDNA-17A e shRNA 17A para examinar o efeito do RNA longo não codificante 17A em células semelhantes à doença de Alzheimer. O estudo mostrou que o LncRNA-17A regula a apoptose e a autofagia das células SH-SY5Y, imitando a DA [5].

Desenvolvimento de medicamentos: As células SH-SY5Y são usadas para rastrear e validar drogas para seu efeito terapêutico contra doenças neurodegenerativas. Por exemplo, um estudo realizado em 2021 induziu o parkinsonismo em células SH-SY5Y utilizando um herbicida (Paraquat) e depois utilizou estas células para investigar o potencial terapêutico de um flavonoide, a Naringenina. O composto demonstrou um efeito protetor contra a neurodegeneração e a neurotoxicidade mediadas pela doença de Parkinson em modelos celulares, indicando o seu potencial para o desenvolvimento de tratamentos para a DP [6].

Publicações de investigação com células SH-SY5Y

Existem muitos estudos de investigação sobre as células SH-SY5Y. Esta secção abordará alguns exemplos significativos.

O LncRNA17A regula a autofagia e a apoptose da linha celular SH-SY5Y como modelo in vitro da doença de Alzheimer: Nesta publicação, foi proposto que o LncRNA17A medeia a apoptose e a autofagia das células SH-SY5Y convertidas experimentalmente em modelo da doença de Alzheimer.
A naringenina alivia a perda neuronal dopaminérgica induzida pelo paraquat nas células SH-SY5Y e num modelo de rato da doença de Parkinson: Este estudo sugeriu os compostos de naringenina como neuroprotectores contra um modelo celular e animal da doença de Parkison desenvolvido experimentalmente.
Caracterização bioquímica da linha celular SH-SY5Y proliferativa e diferenciada como modelo da doença de Parkinson: As células SH-SY5Y diferenciadas foram utilizadas para caraterizar e avaliar vários processos bioquímicos frequentemente estudados na doença de Parkinson.
Efeitos in vitro da acitretina em células neuronais humanas SH-SY5Y: As células SH-SY5Y foram utilizadas para estudar a diferenciação neuronal. Os investigadores verificaram que a acitretina promove a diferenciação dos neurónios e trata as doenças neurodegenerativas e do desenvolvimento neurológico e os tumores cerebrais.
Transformação da linha celular SH-SY5Y em células semelhantes a neurónios: Investigação das alterações electrofisiológicas e biomecânicas: Este estudo converteu as células de blastoma neural SH-SY5Y em neurónios, tratando-as com ácido retinóico e moléculas de Fator Neurotrófico Derivado do Cérebro (BDNF) e examinou as alterações bioquímicas e electrofisiológicas.

Recursos para células SH-SY5Y: Protocolos, vídeos e muito mais

Estão disponíveis vários recursos online sobre esta famosa linha de células de neuroblastoma. Estes recursos podem ensinar-lhe o manuseamento e a manutenção de culturas SH-SY5Y.

Protocolos de cultura de células

Os seguintes artigos do website podem ajudá-lo a aprender métodos de cultura, congelamento e descongelamento de células SH-SY5Y.

Cultura de células SH-SY5Y:Informações básicassobre as células SH-SY5Y, incluindo descongelação, congelação e subcultura de células.
Subcultura de SH-SY5Y: Mostra informações sobre os meios de crescimento utilizados e as etapas de subcultura para células SH-SY5Y.
Transfecção de células SH-SY5Y: Este documento descreve um protocolo de transfecção transiente para a linha de células SH-SY5Y.
Protocolo de diferenciação: Este vídeo explica o protocolo de diferenciação das células SH-SY5Y.

Esperamos que este artigo forneça informações úteis sobre o manuseamento, a cultura e a utilização das células SH-SY5Y em estudos de investigação; se quiser trabalhar com esta linha de células de neuroblastoma, considere encomendar-nos.

Linha celular SH-SY5Y: Perguntas mais frequentes

Referências

Carvajal-Oliveros, A., et al., The BE (2)-M17 cell line has a better dopaminergic phenotype than the traditionally used for Parkinson' s research SH-SY5Y, which is mostly serotonergic. IBRO Neuroscience Reports, 2022. 13: p. 543-551.
Kovalevich, J. e D. Langford, Considerações sobre o uso de células de neuroblastoma SH-SY5Y em neurobiologia. Cultura de células neuronais: métodos e protocolos, 2013: p. 9-21.
Martin, E.-R., J. Gandawijaya, e A. Oguro-Ando, Um novo método para gerar células glutamatérgicas semelhantes a neurónios SH-SY5Y utilizando o suplemento B-27. Frontiers in Pharmacology, 2022: p. 4042.
Feles, S., et al., Simplificando as condições de cultura para a linha celular de neuroblastoma SH-SY5Y: um pré-requisito para estudos funcionais. Métodos e Protocolos, 2022. 5(4): p. 58.
Wang, X., M. Zhang e H. Liu, LncRNA17A regula a autofagia e a apoptose da linha celular SH-SY5Y como um modelo in vitro para a doença de Alzheimer. Biociência, biotecnologia e bioquímica, 2019. 83(4): p. 609-621.
Ahmad, M.H., et al., Naringenin alivia a perda neuronal dopaminérgica induzida por paraquat em células SH-SY5Y e um modelo de rato da doença de Parkinson. Neuropharmacology, 2021. 201: p. 108831.