Células Wilms3

800,00 €*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco em criotubos. Cada criotubo contém normalmente 3 × 10^⁶ células para linhas aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhas em suspensão (consulte o CoA do lote para obter detalhes).

Preços sem impostos mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 300414

Ficha de dados de segurança

Ficha de produto

Certificado de análise (CoA)

Acordo de transferência de material

Descrição	A linha celular Wilms3 foi estabelecida a partir de um tumor primário de Wilms num doente pediátrico, caracterizado por uma mutação somática WT1. Ao contrário de muitas outras linhas celulares de tumores de Wilms, a Wilms3 apresenta uma mutação heterozigótica do tipo frameshift no gene WT1 (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), levando à produção de uma proteína WT1 truncada. Esta perda parcial da função da WT1 está associada ao desenvolvimento de tumores que apresentam um fenótipo estromal ou mesenquimal. No entanto, a mutação WT1 em Wilms3 não é homozigótica, o que acrescenta complexidade ao seu estudo, uma vez que mantém alguma função WT1 que pode influenciar a biologia tumoral de forma diferente em comparação com as linhas celulares com perda completa de WT1. A Wilms3 também é portadora de uma mutação no gene CTNNB1, afectando especificamente a treonina 41 (p.T41A), que desempenha um papel crítico na via de sinalização Wnt. Esta mutação estabiliza a β-Catenina, impedindo a sua degradação e conduzindo à ativação constitutiva da via Wnt. A ativação persistente da sinalização Wnt impulsiona a proliferação celular e contribui para a tumorigénese no Wilms3, tornando-o um modelo-chave para o estudo do impacto das mutações CTNNB1 no contexto de um fundo WT1 parcialmente funcional. Fenotipicamente, as células Wilms3 exibem uma morfologia semelhante à mesenquimal, expressando vimentina e sem citoqueratina, consistente com as caraterísticas estromais observadas no tumor original. Estas células apresentam um potencial de diferenciação limitado, com a capacidade de sofrer alguma diferenciação mesenquimal em condições específicas. As análises proteómicas das Wilms3 revelaram a ativação de vários receptores tirosina-quinases (RTKs), incluindo o PDGFRβ e o AXL, que apoiam a sobrevivência e a proliferação celular. Além disso, as vias de sinalização a jusante, como a MAPK e a PI3K/AKT, são activadas, reforçando as propriedades malignas das células Wilms3. Um aspeto único das Wilms3 é a sua funcionalidade parcial de WT1, o que proporciona uma perspetiva distinta sobre a forma como as mutações de WT1 contribuem para a biologia do tumor de Wilms quando a mutação não é completa. A interação entre o WT1 e a sinalização Wnt no Wilms3 oferece uma oportunidade valiosa para estudar os papéis diferenciados que estas vias desempenham no desenvolvimento do tumor. Em geral, Wilms3 serve como um modelo importante para investigar os mecanismos moleculares subjacentes ao tumor de Wilms na presença de perda parcial de WT1 e ativação constitutiva da via Wnt.
Organismo	Humano
Tecido	Rim
Doença	Tumor de Wilms
Aplicações	Modelo de cultura celular in vitro. Estudos bioquímicos

Idade	11-12 meses
Género	Masculino
Etnia	Caucasiano
Morfologia	Em forma de fuso
Tipo de célula	Células de Wilms
Propriedades de crescimento	Aderente

Citação	Wilms3 (número de catálogo Cytion 300414)
Nível de biossegurança	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAcessão	CVCL_A5SF

Perfil mutacional	Estado da mutação WT1: homozigótico c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, Estado da mutação CTNNB1: tipo selvagem

Meio de cultura	Kit MSCGM (da Lonza)
Reagente de dissociação	Accutase
Subcultura	Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e, nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Congelar o meio	Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Descongelamento e cultura de células	Confirme que o frasco permanece profundamente congelado aquando da entrega, uma vez que as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após a receção, armazenar o frasco criogénico imediatamente a temperaturas inferiores a -150°C para garantir a preservação da integridade celular, ou avançar para o passo 3 se for necessária uma cultura imediata. Para uma cultura imediata, descongelar rapidamente o frasco imergindo-o num banho de água a 37°C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente durante 40-60 segundos até ficar um pequeno aglomerado de gelo. Efetuar todos os passos subsequentes em condições estéreis numa capela de fluxo, desinfectando o frasco criogénico com etanol a 70% antes de o abrir. Abrir cuidadosamente o frasco desinfectado e transferir a suspensão de células para um tubo de centrifugação de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando suavemente. Centrifugar a mistura a 300 x g durante 3 minutos para separar as células e eliminar cuidadosamente o sobrenadante que contém o meio de congelação residual. Ressuspender suavemente o pellet de células em 10 ml de meio de cultura fresco. No caso de células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; no caso de culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 para promover uma interação e um crescimento eficazes das células. Cumprir os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento e manutenção contínuos da linha celular, garantindo resultados experimentais fiáveis.
Atmosfera de incubação	37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.
Revestimento de frascos	Nenhum
Procedimento de congelação	As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
Condições de envio	As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Esterilidade	A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
Alelos HLA	A: '03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: '04:01:01 DRB1: '04:03:01, '11:04:01 DQA1: '03:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

Número do lote	Tipo de certificado	Data	Número de catálogo
300414-221	Certificado de análise	23. May. 2025	300414

Se pretende utilizar as linhas celulares Cytion exclusivamente para investigação interna num único local de investigação, preencha e assine o nosso Acordo de Transferência de Material (MTA) e envie-o juntamente com a sua encomenda.

Para quaisquer aplicações comerciais — incluindo, entre outras, trabalhos remunerados, testes de controlo de qualidade, lançamento de produtos, uso diagnóstico ou estudos regulatórios — preencha o Formulário de Uso Pretendido para que possamos preparar um acordo adequado ao seu projeto.

Observação: o MTA se aplica apenas a determinadas linhas celulares. Se este aviso e o documento MTA aparecerem na página de um produto, o acordo é aplicável. Para linhas celulares não cobertas pelo MTA, nenhuma referência ao acordo será exibida. O MTA não é válido para clientes nas Américas, China ou Taiwan. Entre em contacto com a nossa entidade nos EUA para receber o acordo apropriado.

Células Wilms3

Informações gerais

Caraterísticas

Dados regulamentares

Dados biomoleculares

Manuseamento

Controlo de qualidade / Perfil genético / HLA

Certificado de análise (CoA)

Acordo de transferência de material