Solução para desprendimento celular Accutase - 100 ml

Solução de desprendimento celular Accutase com EDTA e vermelho de fenol – 100 ml

Accutase é uma solução de desprendimento celular pronta a usar e filtrada esterilizada, concebida como uma alternativa suave à tripsina/EDTA para a dissociação de células de mamíferos aderentes de material plástico padrão para cultura de tecidos e superfícies revestidas para adesão. Combina atividade enzimática proteolítica e colagenolítica numa solução salina equilibrada para proporcionar uma dissociação eficaz, mas controlada, preservando as proteínas da superfície celular e favorecendo uma elevada viabilidade pós-passagem e uma rápida readesão.

A formulação do Accutase baseia-se na solução salina tamponada com fosfato de Dulbecco (DPBS) com EDTA e vermelho de fenol como indicador visual de pH. As enzimas são de origem não mamífera e não bacteriana, tornando o Accutase particularmente adequado para a investigação com células estaminais, fluxos de trabalho de vacinas e qualquer aplicação em que seja necessário minimizar os contaminantes de origem animal ou microbiana. A solução autoinibe-se a 37 °C, pelo que não é necessário qualquer reagente neutralizante ou meio contendo soro após a dissociação – as células podem ser transferidas diretamente para um meio fresco.

Características principais

• Líquido 1x pronto a usar e filtrado esterilizado – não requer diluição nem reconstituição
• Atividade enzimática proteolítica e colagenolítica combinada para uma dissociação suave
• Cada lote padronizado para uma atividade de dissociação definida, garantindo a consistência entre lotes
• Enzimas de origem não mamífera e não bacteriana
• Autoinibe-se a 37 °C – não é necessária solução neutralizante
• Formulado em PBS de Dulbecco com EDTA
• Fenol vermelho incluído como indicador visual de pH
• pH 6,8 – 7,8

Aplicações típicas

O Accutase dissocia suavemente uma ampla variedade de tipos de células aderentes e sensíveis, incluindo células estaminais embrionárias humanas (hESCs), células estaminais pluripotentes induzidas humanas (iPSCs), células estaminais neurais, neurónios primários e linhas aderentes cultivadas rotineiramente, tais como HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 e A549. Casos de utilização típicos incluem:

• Subcultura e passagem de rotina de células mamíferas aderentes
• Dissociação suave de células individuais de hESCs, iPSCs e outras linhas sensíveis
• Preparação de amostras para citometria de fluxo e análise FACS
• Análise de marcadores da superfície celular em que a integridade do epítopo é importante
• Ensaios de migração, proliferação e apoptose celular
• Ensaios de quiescência por privação de soro e estudos de transfecção de oncogenes
• Ensaios de migração de células tumorais e de crista neural
• Aumento da escala de produção em fluxos de trabalho com biorreatores

Para trabalhos de rotina, aplique aproximadamente 10 ml de Accutase por 75 cm^² de superfície de cultura e incube durante 5–10 minutos à temperatura ambiente. O tempo de incubação ideal deve ser determinado para cada linha celular e não deve exceder uma hora. Antes da adição, lave a camada celular com uma solução salina isenta ^de Ca^²⁺/Mg^²⁺, como DPBS sem cálcio e magnésio, para remover soro residual e catiões divalentes.

Manuseamento e armazenamento

Armazene o frasco fechado congelado a -15 °C ou abaixo. Descongele à temperatura ambiente ou durante a noite a +2 °C a +8 °C. Não descongele o Accutase num banho-maria a 37 °C, uma vez que as temperaturas elevadas reduzem a atividade enzimática. Após a descongelação, a solução pode ser armazenada por um período de até 2 meses a +2 °C a +8 °C; não armazene à temperatura ambiente. Não pré-aqueça o reagente a 37 °C antes da aplicação – adicione-o diretamente às células lavadas à temperatura ambiente. Para uma vida útil prolongada, recomenda-se a divisão em alíquotas de uso único para evitar ciclos de descongelação repetidos. Trabalhe sempre em condições assépticas.

Qualidade

Fabricado sob rigorosos padrões de qualidade. Cada lote de Accutase é filtrado em estéril e testado quanto à esterilidade, pH, aspeto e atividade de dissociação para garantir um desempenho consistente e reprodutível de lote para lote.

Especificações do produto

Formulação (Composição por litro)

Accutase é uma marca registada da Innovative Cell Technologies, Inc.