Linia komórkowa Neuro-2a

Neuro-2a to mysia linia komórek nerwowych szeroko stosowana w badaniach neurobiologicznych. Komórki te wykorzystywane są głównie do badania rozwoju neuronalnego, różnicowania, neurotoksyczności, szlaków sygnalizacji komórkowej i wzrostu aksonów. Poza tym są one wykorzystywane do opracowywania leków i badań przesiewowych.

Niniejszy artykuł koncentruje się na ważnych aspektach komórek neuroblastoma Neuro-2a, które mogą być pomocne przed rozpoczęciem pracy z nimi. Obejmuje on głównie:

Ogólne atrybuty i pochodzenie komórek Neuro-2a
Informacje na temat hodowli linii komórkowej Neuro-2a
Zalety i wady linii komórkowej Neuro-2a
Zastosowania badawcze linii komórkowej Neuro-2a
Publikacje badawcze dotyczące komórek Neuro-2a
Zasoby dotyczące komórek Neuro-2a: Protokoły, filmy i nie tylko

1. Ogólne cechy i pochodzenie komórek Neuro-2a

Ta część artykułu obejmuje tło i podstawowe cechy linii komórkowej Neuro-2a, które są niezbędne do poznania przed rozpoczęciem pracy z nią. Tutaj dowiesz się: Czym jest linia komórkowa Neuro-2a? Jakie jest pochodzenie linii komórkowej Neuro-2a? Czym jest różnicowanie komórek Neuro-2a? Jaki jest rozmiar komórki Neuro-2a? Jaka jest morfologia komórek Neuro-2a?

Komórki Neuro-2a pochodzą ze spontanicznego guza (neuroblastoma) myszy albinosów (szczep A). Linia komórkowa została stworzona przez R.J. Klebe i F.H. Ruddle.
Komórki neuroblastoma Neuro-2a wykazują morfologię neuronalnych i ameboidalnych komórek macierzystych.
Wielkość komórek Neuro-2a wynosi 12 mikrometrów [1].
Liczba chromosomów w komórkach Neuro-2a może wynosić od 59 do 193, przy czym średnia liczba chromosomów wynosi 95. Kariotyp tych komórek neuroblastoma jest niestabilny w zakresie od 94 do 98 chromosomów.

Zilustrowana sygnalizacja neuronalna: trójwymiarowe przedstawienie uwalniania neuroprzekaźnika w szczelinie synaptycznej przez neuron presynaptyczny, wyzwalane przez napływ Ca2+, prowadzące do aktywacji kanałów jonowych i napływu Na+ w neuronie postsynaptycznym.

2. Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej Neuro-2a

Komórki Neuro-2a są szeroko stosowane w laboratoriach badawczych neurobiologii. Przed rozpoczęciem pracy z tymi komórkami należy zapoznać się z niezbędnymi informacjami na temat hodowli komórek wymienionymi poniżej. Może to ułatwić pracę. Dowiesz się: Co to jest pożywka do hodowli komórek Neuro-2a? Jak hoduje się komórki Neuro-2a? Jaki jest czas podwojenia komórek Neuro-2a? Jaka jest gęstość wysiewu komórek Neuro-2a? Jaki jest protokół hodowli komórek Neuro-2a? Co to jest pożywka dla komórek Neuro-2a?

Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek Neuro-2a

Czas podwojenia:	Czas podwojenia komórek Neuro-2a wynosi około 70 godzin.
Adherentne lub w zawiesinie:	Neuro-2a jest linią komórek przylegających.
Gęstość wysiewu:	Zoptymalizowana gęstość wysiewu komórek dla linii komórkowej Neuro-2a wynosi 1 x¹⁰⁴ ^komórki/cm2. W celu posiewu komórki są przemywane solą fizjologiczną w buforze fosforanowym (1x) bez magnezu i wapnia. Następnie dodawany jest roztwór do pasażowania (Accutase), a komórki są inkubowane przez 8 do 10 minut w temperaturze otoczenia. Po dysocjacji komórek dodawana jest świeża pożywka, a komórki są odwirowywane. Zebrany osad komórkowy jest ostrożnie zawieszany, a komórki są przelewane do naczynia hodowlanego w celu wzrostu.
Podłoże hodowlane:	EMEM jest używany do hodowli komórek Neuro-2a. Zawiera 10% FBS, 2 mM L-glutaminę, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM pirogronian sodu i NEAA dla idealnego wzrostu komórek. Pożywka powinna być wymieniana 1 do 2 razy w tygodniu.
Warunki wzrostu:	Hodowle Neuro-2a są utrzymywane w nawilżanym inkubatorze 37°C podłączonym do 5% CO2.
Przechowywanie:	Komórki powinny być przechowywane w temperaturze poniżej -150°C w zamrażarce elektrycznej o bardzo niskiej temperaturze lub w fazie gazowej ciekłego azotu przez dłuższy czas.
Proces zamrażania i pożywka:	Do zamrażania komórek Neuro-2a stosuje się pożywki CM-1 lub CM-ACF. Komórki są zamrażane w powolnym procesie zamrażania, który pozwala na spadek temperatury tylko o 1°C na minutę. Chroni to komórki przed szokiem i utrzymuje ich żywotność.
Proces rozmrażania:	Aby rozmrozić zamrożone kultury, fiolkę umieszcza się w łaźni wodnej o temperaturze 37 °C na 40-60 sekund, aż pozostanie tylko niewielka bryła lodu. Następnie dodawane jest podłoże hodowlane, a komórki poddawane są wirowaniu. Ten krok pomaga usunąć składniki pożywki zamrażającej. Osad komórek jest następnie ponownie zawieszany, a komórki są przenoszone do nowej kolby wypełnionej pożywką. Następnie komórki są umieszczane w inkubatorze w temperaturze 37 °C na co najmniej 24 godziny.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:	Do obsługi i utrzymywania hodowli Neuro-2a obowiązkowe są ustawienia laboratoryjne na poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.

Obraz mikroskopowy wczesnego pasażu adherentnych komórek neuroblastoma Neuro 2a przedstawiający ich morfologię w powiększeniu 10x i 20x.

3. Zalety i wady linii komórkowej Neuro-2a

Komórki Neuro-2a posiadają pewne zalety i wady, które odróżniają je od innych neuronalnych linii komórkowych. Poniżej wymieniono kilka znaczących zalet i wad tych komórek.

Zalety

Zalety linii komórkowej Neuro-2a mysiego nerwiaka zarodkowego są następujące:

Łatwość utrzymania
Linia komórkowa Neuro-2a nie jest związana ze złożonymi lub skomplikowanymi procedurami hodowli komórek. Są łatwe w hodowli i utrzymaniu w laboratoriach badawczych.
Model komórek neuronalnych in vitro
Neuro-2a to wygodny model komórek neuronalnych szeroko stosowany przez naukowców w badaniach nad rozwojem i różnicowaniem neuronów.

Wady

Wady komórek Neuro-2a są następujące:

Pochodzenie mysie
Neuro-2a pochodzi od myszy, a badacze powinni zachować ostrożność podczas ekstrapolacji wyników badań na myszach na zdrowie i choroby ludzi, ponieważ biologia myszy i ludzi może się znacznie różnić.

4. Zastosowania badawcze linii komórkowej Neuro-2a

Komórki Neuro-2a oferują wiele zastosowań w dziedzinie badań neurobiologicznych. Poniżej omówiono kilka obiecujących zastosowań tej linii komórkowej:

Rozwój neuronów: Neuro-2a to model komórek neuronalnych in vitro, który jest szeroko stosowany do badania rozwoju neuronów i powiązanych procesów, takich jak różnicowanie, wzrost aksonów i tworzenie synaps. W badaniu przeprowadzonym w 2020 r. wykorzystano komórki Neuro-2a do zbadania roli mikroRNA-124 w różnicowaniu komórek neuronalnych indukowanym kwasem retinowym [2]. W innym badaniu zbadano ekspresję receptora kwasu retinowego gamma (RARG) Neuro 2a i miRNA-124 w linii komórkowej neuroblastoma (N2A). W badaniu tym zaproponowano, że RARG jest celem miR-124 i hamuje wzrost neurytów [3].
Neurotoksyczność: Neuro-2a jest również wykorzystywany do oceny toksycznego wpływu leków, chemikaliów lub czynników środowiskowych na komórki nerwowe. Na przykład w badaniu przeprowadzonym przez Zhihong Yin i współpracowników zbadano neurotoksyczność bisfenolu A (BPA), substancji chemicznej środowiskowej, przy użyciu komórek Neuro-2a. Zaobserwowali oni, że BPA hamuje różnicowanie i proliferację komórek neuronalnych poprzez zakłócanie ich integralności komórkowej i synaptycznej [4].
Badanie przesiewowe leków: Komórki Neuro-2a są również wykorzystywane do oceny aktywności terapeutycznej kilku leków, związków i produktów naturalnych. Na przykład w badaniu wykorzystano komórki Neuro-2a i zbadano potencjał antyoksydacyjny ekstraktu roślinnego Gingko biloba. Co więcej, badania wykazały, że powoduje on spadek agregacji Aβ i może być potencjalnym lekiem na chorobę Alzheimera [5].

430,00 €*

Treść: 1.5 milliliter

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 400394

5. Publikacje badawcze dotyczące komórek Neuro-2a

Oto kilka interesujących artykułów naukowych dotyczących linii komórkowej Neuro-2a.

Alkamidy podobne do piperyny z Piper nigrum indukują promotor BDNF i promują wzrost neurytów w komórkach Neuro-2a

W badaniu opublikowanym w Journal of Natural Medicines, 2018 zbadano terapeutyczne działanie alkamidów wyizolowanych z białego pieprzu (P. nigrum) na komórki neuronalne Neuro-2a.

Regulacja w dół Nkx2.1 jest zaangażowana w nieprawidłowości mózgu wywołane nadmiarem kwasu retinowego

W badaniu opublikowanym w Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 zaproponowano, że gen Nkx2.1 odgrywa ważną rolę w rozwoju mózgu myszy poprzez regulację kaskady sygnalizacyjnej Shh.

Ekspozycja na bisfenol A indukuje neurotoksyczność związaną z dysfunkcją synaptyczną i cytoszkieletową w komórkach neuro-2a

Ten artykuł został opublikowany w Toxicology and Industrial Health (2023) i sugeruje, że środowiskowa substancja chemiczna bisfenol A wywołuje neurotoksyczność w komórkach neuro-2a i zaburza ich dysfunkcję synaptyczną i cytoszkieletową.

Heksarelinowa modulacja szlaków MAPK i PI3K/Akt w komórkach Neuro-2A hamuje indukowaną nadtlenkiem wodoru toksyczność apoptotyczną

W artykule opublikowanym w Pharmaceuticals (2021) zaproponowano, że lek, heksarelina, moduluje kaskadę PI3K/AKT i MAPK w komórkach neuroblastoma (Neuro-2a) i hamuje apoptozę komórek neuro-2a indukowaną nadtlenkiem wodoru.

Etanolowy ekstrakt z owoców Emblica officinalis hamuje stan zapalny w mikrogleju i promuje wzrost neurytów w komórkach Neuro2a

W artykule badawczym opublikowanym w Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) zaproponowano, że ekstrakt z owoców Emblica officinalis hamuje neurozapalenie w komórkach Neuro-2a, a zatem może być korzystny w przypadku chorób neurozapalnych.

6. Zasoby dla komórek Neuro-2a: Protokoły, filmy i nie tylko

Poniżej znajdują się dostępne zasoby internetowe dotyczące komórek Neuro-2a. Obejmują one hodowlę komórek Neuro-2a i protokół transfekcji.

Protokół transfekcji komórek Neuro-2a: Neuro-2a jest odpowiednim gospodarzem do transfekcji. Ten link zawiera wskazówki dotyczące protokołu transfekcji tej linii komórkowej. Wydajność transfekcji Neuro-2a różni się w zależności od odczynnika.

Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek Neuro-2a.

Protokół hodowli komórek Neuro-2a: Ten link pomoże zapoznać się z protokołem subkulturowania komórek neuro 2a.
Komórki Neuro-2a: Strona zawiera kompleksową wiedzę na temat pożywek dla komórek Neuro-2a, gęstości wysiewu oraz protokołów subkulturowania i postępowania z kulturami kriokonserwowanymi i proliferacyjnymi.

Odniesienia

Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
You, Q., et al., Rola miR-124 w regulacji różnicowania komórek Neuro-2A indukowanego kwasem retinowym. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Su, X., et al., Receptor gamma kwasu retinowego jest celem mikroRNA-124 i hamuje wzrost neurytów. Neuropharmacology, 2020. 163: p. 107657.
Yin, Z., et al., Ekspozycja na bisfenol-A indukowała neurotoksyczność i była związana z synapsą i cytoszkieletem w komórkach Neuro-2a. Toxicology in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
Chen, L., et al., Ekstrakt z miłorzębu japońskiego (EGb) hamuje stres oksydacyjny w komórkach neuro 2A z nadekspresją APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.