KG-1 cellijn
KG-1 cellen zijn een van mensen afgeleide leukemiecellijn die veel wordt gebruikt in biomedisch onderzoek. Ze bieden diverse toepassingen in immunologisch, kanker- en toxicologisch onderzoek. Onderzoekers gebruiken deze cellen om ziektemechanismen te bestuderen en potentiële therapieën te testen. Dit artikel geeft uitgebreide informatie over de KG-1 cellijn die je kan helpen bij je werk. Met name worden besproken:
- Algemene kenmerken en oorsprong van de KG-1 cellijn
- Kweekinformatie over KG-1 cellijn
- KG-1 cellijn: Voordelen en beperkingen
- Toepassingen van KG-1 cellen in onderzoek
- Publicaties over KG-1 cellen
- Bronnen voor KG-1 cellijn: Protocollen, video's en meer
1. Algemene kenmerken en oorsprong van KG-1 cel lijn
De oorsprong en algemene kenmerken van een cellijn helpen een onderzoeker bij het beslissen over het gebruik ervan in hun werk. Je kunt deze informatie onderzoeken voordat je ermee aan de slag gaat. Dit artikel gaat over de oorsprong en kenmerken van KG-1 macrofagen. Hier leer je het volgende: Wat zijn KG-1 cellen? Wat is de KG-1a cellijn? Wat is de oorsprong van de KG-1 cellijn? Wat is de morfologie van KG-1?
- KG-1 is een lymfoblast-achtige cellijn afkomstig van het beenmergaspiraat van een blanke man (59 jaar) met acute myeloïde leukemie. Ze werd in 1978 opgericht door Koeffler en Golde. Deze cellen bevinden zich voornamelijk in het rijpingsstadium van promyelocyten of myeloblasten [1].
- KG-1 cellen hebben een lymfoblast-achtige morfologie.
- Het karyotype van de KG-1 cellijn vertoont een pseudodiploïd modaal aantal chromosomen.
KG-1 en KG-1a
KG-1a is een sublijn van de ouderlijke KG-1-cellen. Deze werd ontwikkeld na 35 passages van de KG1-cellijn. Ze is minder gedifferentieerd dan de KG-1 cellijn. Bovendien is deze sublijn cytochemisch, morfologisch en functioneel minder volwassen in vergelijking met de oudercellijn (KG-1).
2. Informatie over het kweken van KG-1 cellijnen
Dit deel van het artikel bevat alle belangrijke informatie over het kweken van KG-1 cellen die je werk kunnen vergemakkelijken. Hier leer je het volgende: Wat is de verdubbelingstijd van de KG-1 cellijn? Wat zijn de kweekomstandigheden van KG-1 macrofagen? Hoe kweek je KG-1 cellen?
Belangrijke punten voor het kweken van KG-1 cellen
|
Verdubbelingstijd: |
De KG-1 verdubbelingstijd is ongeveer 45 uur. Deze kan echter variëren afhankelijk van de kweekomstandigheden. |
|
Adherent of in suspensie: |
De KG-1 cellen groeien in suspensie. |
|
Celdichtheid: |
De optimale celdichtheid voor de KG-1 cellijn is 1 tot 3 x105 cellen/ml. Voor subcultuur wordt de celsuspensie overgebracht in een steriele buis en gecentrifugeerd. De geoogste cellen worden dan toegevoegd met verse media en voorzichtig geresuspendeerd. Daarna worden de cellen in nieuwe kolven gedistribueerd en gekweekt bij een optimale celdichtheid. De cellen kunnen worden gesplitst wanneer ze een maximale celdichtheid van 1 - 2 x106 cellen/ml bereiken. |
|
Groeimedium: |
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) met 10% FBS, 4,5 g/L Glucose, 4 mM L-Glutamine, 1,0 mM Natriumpyruvaat en 3,0 g/L NaHCO3 wordt gebruikt om KG-1 cellen te kweken. Het medium moet na drie dagen worden vervangen. |
|
Groeicondities: |
De KG1 AML-cellijn wordt gekweekt in een vochtige incubator bij een temperatuur van 37°C en een toevoer van 5% CO2. |
|
Opslag: |
Bevroren cellen worden bewaard in de dampfase van vloeibare stikstof of bij een temperatuur van minder dan -150 °C in een elektrische vriezer voor ultralage temperaturen om de levensvatbaarheid van de cellen te beschermen. |
|
Invriesproces en medium: |
CM-1 of CM-ACF is geschikt voor het invriezen van KG-1 cellen. De cellen worden langzaam ingevroren om ze tegen schokken te beschermen. Deze methode maakt een geleidelijke temperatuurdaling van 1 °C per minuut mogelijk. |
|
Ontdooiproces: |
De cellen worden ontdooid in een voorverwarmd waterbad bij 37 °C totdat er een klein ijsklontje overblijft. Ontdooide cellen worden toegevoegd met het verse medium en gecentrifugeerd om de bestanddelen van de vriesmedia te verwijderen. De celpellet wordt voorzichtig geresuspendeerd en in nieuwe kolven met groeimedia gegoten. |
|
Bioveiligheidsniveau: |
Het laboratorium met bioveiligheidsniveau 1 is essentieel voor het onderhouden van KG-1 celculturen. |
3. KG-1 cellijn: Voordelen en beperkingen
Net als andere cellijnen heeft ook de KG-1 myeloïde leukemie cellijn veel voordelen en beperkingen. In dit gedeelte zullen we een aantal opvallende voordelen en beperkingen bespreken die van cruciaal belang kunnen zijn bij de beslissing om de KG-1 cellijn in je onderzoek te gebruiken.
Voordelen
De belangrijkste voordelen van KG-1 cellen zijn:
-
Gemakkelijk te kweken
KG-1 cellen zijn gemakkelijk te kweken in onderzoekslaboratoria en hebben ongecompliceerde celkweekvereisten. Hun eenvoudige onderhoud en groeicondities zorgen voor toegankelijkheid voor een breed spectrum van onderzoekers met basale celkweekfaciliteiten.
-
Model voor acute myeloïde leukemie (AML)
De KG-1 AML-cellijn is afgeleid van een mannelijke patiënt met acute myeloïde leukemie (AML) en dient als waardevol instrument voor het onderzoeken van de biologie van AML en het uitvoeren van onderzoek naar potentiële therapeutica, waardoor inzicht wordt verkregen in de onderliggende mechanismen van deze ziekte en behandelingsstrategieën.
beperkingen
De beperkingen van de KG1-cellijn zijn:
-
In vitro model
KG-1 cellen zijn een waardevol in vitro model voor onderzoek naar AML; het is echter belangrijk om op te merken dat ze de complexiteit van de ziekte in vivo mogelijk niet volledig nabootsen, omdat ze dienen als een vereenvoudigd celmodel dat mogelijk niet alle aspecten van de biologie van AML omvat.
4. Toepassingen van KG-1 cellen in onderzoek
KG-1 biedt verschillende veelbelovende toepassingen in biomedisch onderzoek. Enkele belangrijke onderzoekstoepassingen van KG1 macrofagen zijn:
- Kankeronderzoek: KG-1 cellen zijn afkomstig van een acute myeloïde leukemiepatiënt en worden daarom beschouwd als een waardevol onderzoeksinstrument voor het onderzoeken van de biologie van AML. Onderzoekers gebruiken deze cellen om de cellulaire en moleculaire mechanismen te bestuderen die de ontwikkeling, groei en resistentie tegen medicijnen van AML bepalen. Dit omvat ook het identificeren en ontdekken van nieuwe biomarkers, genetische mutaties en signaalroutes die in verband worden gebracht met AML. Zo werd in een onderzoek uit 2019 onderzocht dat het lang niet-coderende RNA linc00239 doxorubicineresistentie en kwaadaardig gedrag bevordert in acute myeloïde leukemiecellen KG-1. Verdere studie onthulde dat het lncRNA PI3K/Akt/mTOR-signalering activeert om deze effecten in AML-cellen uit te oefenen [2].
- Toxicologie: De KG1-cellijn wordt veel gebruikt in toxicologisch onderzoek. Onderzoekers testen de toxiciteit en werkzaamheid van potentiële therapeutische middelen, waaronder chemotherapeutische geneesmiddelen en doelgerichte therapieën op KG1 myeloïde leukemiecellen, om veelbelovende kandidaat-geneesmiddelen te identificeren voor toekomstige preklinische en klinische beoordelingen. Onderzoek uitgevoerd in 2018 analyseerde de toxiciteit van doxorubicine bevattende nano-niosomen op de KG1 AML-cellijn. Het onderzoek stelde voor dat nano-niosoom een geschikte drager is voor medicijnafgifte omdat het de effectiviteit van de behandeling verhoogt [3]. In een ander onderzoek onderzochten onderzoekers de therapeutische effecten van brandnetelthee bereid uit bladeren van de plant Urtica dioica. Uit het onderzoek bleek dat dit waterige bladextract van de plant antitumoreffecten uitoefent in acute myeloïde leukemiecellen KG-1 en U937 [4].
5. Publicaties over KG-1 cellen
Dit deel van het artikel geeft een overzicht van een aantal interessante onderzoekspublicaties over KG-1 cellen.
Quercetine sensibiliseert menselijke myeloïde leukemie KG-1 cellen tegen TRAIL-geïnduceerde apoptose
Dit artikel werd gepubliceerd in het Journal of Cellular Physiology (2019). De studie stelde dat de quercetineverbinding de KG1 AML-cellijn sensibiliseert tegen TNF-gerelateerd apoptose-inducerend ligand (TRAIL) en mogelijk het effect van TRAIL-geïnduceerde cytotoxiciteit in cellen verhoogt.
KLF8 versterkt de groei van acute myeloïde leukemiecellen en de glycolyse via de AKT/mTOR-route
In dit artikel in het Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) wordt voorgesteld dat krüppel-achtige transcriptiefactor 8 downregulatie de AML-celproliferatie en glycolyse onderdrukt en apoptose stimuleert via regulering van de AKT/mTOR-signaleringsroute.
Effecten van Sorafenib en arseentrioxide op U937- en KG-1-cellijnen: Apoptose of Autofagie?
Deze studie in Cell Journal (Yakhteh) (2020) onderzocht de mogelijke effecten van arseentrioxide en sorafenib op U937- en KG-1-cellen.
Dit onderzoek, gepubliceerd in Medical Oncology (2020), evalueerde het OXPHOS en de glycolyse als therapeutische doelwitten in de AML-cellijn KG-1.
In deze Drug Design, Development and Therapy-publicatie uit 2020 wordt voorgesteld dat curcumine en thalidomideverbindingen synergetisch apoptotische effecten uitoefenen in KG-1-cellen via verlaging van de STAT3- en Bcl-xL-expressie.
6. Hulpmiddelen voor KG-1 cellijn: Protocollen, video's en meer
Hieronder volgen enkele online bronnen over KG-1 cellen.
- Subculturen van suspensiecellen: Deze video beschrijft het protocol voor het subkweken van suspensiecelculturen zoals KG-1.
De volgende link bevat het KG-1 celkweekprotocol:
- KG-1 cellijn: Deze website staat vol met basisinformatie over celkweek van de KG-1 cellijn. Het bevat informatie over celkweekmedia en protocollen voor het subkweken en hanteren van gecryopreserveerde en proliferatieve culturen.
Referenties
- Pelliccia, F., V. Ubertini en N. Bosco, Het belang van moleculaire cytogenetische analyse voorafgaand aan het gebruik van cellijnen in onderzoek: Het geval van de KG-1a leukemiecellijn. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., Longnon-codingRNA linc00239 bevordert kwaadaardig gedrag en chemoresistentie tegen doxorubicine gedeeltelijk via activering van het PI3K/Akt/mTOR-pad in acute myeloïde leukemiecellen. Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Bereiding en studie van nano-niosomen die doxorubicine bevatten en evaluatie van de toxiciteit ervan op acute myeloblastische leukemiecellijn KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Brandnetelthee remt de groei van acute myeloïde leukemiecellen in vitro door apoptose te bevorderen. Nutriënten, 2020. 12(9): p. 2629.