U87MG-cellen - Glioblastoomonderzoek met U87MG en de invloed ervan op hersenkankerstudies
U-87 MG, de menselijke primaire glioblastoomcellijn, wordt veel gebruikt in biologisch onderzoek. Deze cellen worden met name gebruikt in neurowetenschappelijk en immuno-oncologisch onderzoek.
Algemene kenmerken en oorsprong van de U-87 MG cellijn
In dit hoofdstuk bespreken we de oorsprong en de algemene kenmerken van de U-87 cellijn. Wat zijn U-87 MG cellen? Waar komen U87 cellen vandaan? Wat is de volledige vorm van U-87 MG? Hoe groot zijn U87 cellen? Wat is de morfologie van de U87 cellijn?
- De U87 cellijn is een glioblastoom, astrocytoom cellijn. Ze werd in 1966 ontwikkeld aan de Universiteit van Uppsala. De cellen werden verkregen van een 44-jarige blanke man die leed aan de ziekte glioblastoom. Deze cellijn heet officieel U 87 MG, wat staat voor Uppsala 87 Malignant Glioma.
- U 87 MG cellen hebben een epitheelcel-achtige morfologie.
- De grootte van U 87 MG cellen varieert van 12 tot 14 µm in diameter.
- Deze menselijke glioblastoomcellijn is hypodiploïd en bezit een modaal chromosoomnummer van 44 in ongeveer 48% van de celpopulatie. Hogere ploïdieën komen echter ook voor in 5,9% van de celpopulatie.
Informatie over het kweken van U-87 MG cellen
Voordat je met U-87 MG cellen gaat werken, moet je de volgende belangrijke punten voor het kweken van deze glioblastoomcellen leren kennen. In het bijzonder moet je het volgende weten Wat is de populatieverdubbelingstijd van U 87 MG cellen? Welke media worden gebruikt voor het kweken van U87 cellen? Wat is de zaaidichtheid van de U87 MG cellijn?
Belangrijke punten voor het kweken van U-87 MG cellen
|
Populatieverdubbelingstijd: |
U 87 MG cellen hebben een populatieverdubbelingstijd variërend van 18-38 uur. |
|
Adherent of in suspensie: |
U 87 MG is een adherente cellijn. De cellen hebben een langwerpige vorm en groeien als monolayers. |
|
Zaaidichtheid: |
De glioblastoomcellijn U 87 MG wordt aanbevolen om te zaaien bij een celdichtheid van 1 x104 cellen/cm2. Adherente U87-cellen worden gewassen met 1 x PBS en geïncubeerd met Accutase-oplossing. Daarna worden de gedissocieerde cellen gecentrifugeerd en teruggewonnen. De cellen worden voorzichtig geresuspendeerd en toegevoegd aan nieuwe kolven met groeimedium. |
|
Groeimedium: |
De U 87 MG cellijn wordt gekweekt in EMEM (Eagle's minimaal essentieel medium), aangevuld met 1,0 g/L L-glucose, 2,0 mM L-glutamine, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM natriumpyruvaat en 10% FBS-oplossing. De media moeten elke 2 tot 3 dagen worden ververst. |
|
Groeicondities: |
U-87 MG cellen vereisen een bevochtigde incubator met 5% CO2 toevoer en een temperatuur van 37°C voor optimale groei. |
|
Opslag: |
De U87-cellen worden bewaard in de dampfase van vloeibare stikstof of bij een temperatuur van minder dan -150°C om de maximale levensvatbaarheid van glioblastomacellen te behouden. |
|
Invriesproces en medium: |
CM-1 of CM-ACF invriesmedia zijn geschikt voor het invriezen van U87 MG cellen. Een langzaam vriesproces wordt aanbevolen omdat dit voorkomt dat de cellen een schok krijgen en de levensvatbaarheid van de cellen beschermt. |
|
Ontdooien Proces: |
Bevroren U-87 MG cellijnflesjes worden ontdooid in een waterbad van 37°C. De cellen worden toegevoegd met groeimedia, geresuspendeerd en in nieuwe kolven gekweekt. In tegenstelling hiermee kunnen U87-cellen worden gecentrifugeerd om de vriesmedia te verwijderen en vervolgens worden gekweekt. |
|
Bioveiligheidsniveau: |
Biosafety level 1 is vereist voor het hanteren van U87 MG celculturen. |
Voordelen & nadelen van U-87 MG cellen
Als we aan een cellijn denken, is het eerste waar we aan denken: Wat zijn de voordelen van het gebruik van U-87 MG cellen? Wat zijn de nadelen van U87 cellen?
Voordelen
U87 MG cellijnen worden veel gebruikt in onderzoek. Enkele voordelen van deze cellijn zijn:
Voordelen
- Gemakkelijk te kweken: U 87 MG cellen zijn gemakkelijk te onderhouden in cultuur. Ze vereisen geen omslachtige of ingewikkelde eisen voor het kweken van cellen
- Homogeniteit: U-87 MG is een homogene cellijn. De meeste cellen in een populatie hebben dezelfde genetische opmaak en delen dus vergelijkbare kenmerken. Deze cellen worden gebruikt voor het bestuderen van celprocessen, het screenen van medicijnen en testen
- Goed gekarakteriseerd: Deze glioblastoomcellijn is goed gekarakteriseerd door groeikarakteristieken, morfologie en genexpressie, waardoor het een waardevol onderzoeksinstrument is
Nadelen
- Beperkte toepasbaarheid: De U 87 MG is een glioblastoomcellijn, dus de toepassingen zijn voornamelijk beperkt tot het bestuderen van glioblastomen en onderliggende moleculaire mechanismen. Ze is mogelijk niet geschikt voor het onderzoeken van andere kankertypes.
Onderzoekstoepassingen met U-87 MG cellen
De U87MG glioblastoomcellijn wordt uitgebreid gebruikt in kankeronderzoek, met name in glioblastoomonderzoek. Enkele van de onderzoekstoepassingen van U 87 MG cellen zijn:
- Kankerbiologisch onderzoek: De U87 cellijn wordt gebruikt om de groei en ontwikkeling van kanker, onderliggende moleculaire mechanismen, signaalwegen en tumormicro-omgeving te bestuderen. Een in 2020 gepubliceerd onderzoek gebruikte een in vitro glioblastoma model, de U-87 MG cellijn, om het BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) gen als therapeutisch doelwit te onderzoeken. De bevindingen toonden aan dat het BMAL1-gen de glioblastoomcelproliferatie, -migratie en -invasie remt door cycline B1, metalloproteïnase-9 en fosfo-AKT-genexpressie te onderdrukken [1]. Een ander onderzoek dat in 2019 werd uitgevoerd, maakte gebruik van de U87-cellijn en onderzocht dat downgereguleerde Lipopolysaccharide-geïnduceerde tumornecrosefactor-alfa-factor (LITAF)-transcriptiefactor expressie de radiogevoeligheid van glioomcellen kan verhogen door FOXO-1-pathway-upregulatie. LITAF staat ook bekend als p53-geïnduceerd gen 7 (PIG7) [2].
- Ontdekking en ontwikkeling van geneesmiddelen: U-87 MG cellen kunnen worden gebruikt voor het screenen en testen van geneesmiddelen, waardoor onderzoekers nieuwe potentiële antikankermedicijnen kunnen identificeren en hun werkzaamheid en toxiciteit kunnen beoordelen. In een onderzoek werd de U 87 MG glioblastoomcellijn gebruikt om het antikanker- en antioxidatiepotentieel van Inula helenium (L.) extract te evalueren [3]. Evenzo vermeldde een andere publicatie het gebruik van de U87-cellijn om het cytotoxische en apoptotische effect van plantenextracten te testen [4]. Verder bestudeerde onderzoek, gepubliceerd in 2018, het cytotoxische effect van sesquiterpeenalkaloïden geëxtraheerd uit Nuphar planten op gevoelige en medicijnresistente U 87 MG cellijnen [5].
Bestel vandaag nog uw U87 MG glioma cellijn
U-87 MG cellijn: Publicaties
Hier volgen enkele prominente onderzoekspublicaties met U-87 MG cellijn.
In dit artikel, gepubliceerd in Neuroreport 2018, werd voorgesteld dat hypoxie de migratie en invasie van humane glioblastomacellen zou kunnen verhogen door de PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signaleringsroute te reguleren.
Dit onderzoek is gepubliceerd in Frontiers in Pharmacology in 2020. De onderzoeksbevindingen stellen dat een flavonoïde, Eriodictyol, antikankereffecten uitoefent op de U87-cellijn en de celproliferatie en metastase onderdrukt. De verbinding medieert zijn antitumor-eigenschappen door het PI3K/Akt/NF-κB-pad te moduleren.
Dit onderzoek in Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) suggereert dat een Chinese kruidenformule genaamd Xihuang pil apoptose kan induceren in U87 cellen door het targeten van ROS-geactiveerde Akt/mTOR/FOXO1 cascade.
LITAF verhoogt de radiosensitiviteit van menselijke glioomcellen via de FoxO1-pathway
Dit onderzoeksartikel werd in 2019 gepubliceerd in het tijdschrift Cellular and Molecular Neurobiology. De studie stelde voor dat een transcriptiefactor, LITAF, de radiosensitiviteit van glioomcellen downreguleert en verbetert door de FOXO-1-signaleringsroute te reguleren.
Dit artikel is gepubliceerd in Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). De onderzoekers gebruikten U-87 MG-cellen om het cytotoxische effect van curcumine-geladen PLGA-nanodeeltjes te onderzoeken.
Hulpmiddelen voor U-87 MG cellen: Protocollen, video's en meer
De U87MG glioblastoma cellijn wordt in veel kankeronderzoekslaboratoria gebruikt. Enkele bronnen met deze cellijn zijn:
- Transfectie van U87-cellijn: Dit document beschrijft een transfectieprotocol voor U87 MG cellen.
- Transfectie van U87 MG cellijn: Deze video is een tutorial die stap voor stap het transfectieprotocol van U87 cellen uitlegt.
De bron voor de celkweek protocol van U87 cellen is hieronder vermeld:
- U87 MG cellen: Deze link bevat basisinformatie over U87 MG cellijn. Het omvat korte celsplitsing, invriezen, en cel ontdooien protocollen.
Inzichten in U87 MG Glioma-onderzoek: Veelgestelde vragen
Referenties
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 onderdrukt proliferatie, migratie en invasie van U87MG-cellen door omlaagregulatie van cycline B1, fosfo-AKT en metalloproteïnase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF verbetert de radiogevoeligheid van humane gliomacellen via de FoxO1-pathway. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., antioxidant- en antikankeractiviteiten van extract van Inula helenium (L.) in menselijke U-87 MG glioblastoomcellijn. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoxicity of sesquiterpene alkaloids from Nuphar plants towards sensitive and drug-resistant cell lines. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.